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生物技术通报 2012年第4期28卷 118-121页

作者：王娟焦飞于媛潘效红马云滨州医学院药学院细胞工程教研室烟台264003 滨州医学院基础学院生物化学教研室烟台264003 滨州医学院基础学院病理教研室烟台264003

旨在在体外通过胚胎生殖细胞(EGC)和细胞外基质共同构建一个EGC的小生境(niche)模型,通过比较Oct4DNA甲基化的变化,研究niche中特有的表观遗传效应对胚胎生殖细胞自我更新的影响。构建EGC细胞标准培养方案(对照组)和改良培养方案(试验... 详细信息

旨在在体外通过胚胎生殖细胞(EGC)和细胞外基质共同构建一个EGC的小生境(niche)模型,通过比较Oct4DNA甲基化的变化,研究niche中特有的表观遗传效应对胚胎生殖细胞自我更新的影响。构建EGC细胞标准培养方案(对照组)和改良培养方案(试验组),采用甲基化特异性PCR(MS-PCR)技术、RT-PCR技术,对比分析两种培养方案中Oct4启动子的甲基化状态,判断基因表达与其CpG岛甲基化的关系,分析DNA甲基化模式与EGC细胞自我更新的关系。结果显示,试验组可扩增出Oct4的非甲基化扩增产物,而对照组为其甲基化扩增产物,试验组Oct4表达水平明显高于对照组。试验组EGC生长状态明显好于对照组。试验表明,在改良培养条件下,Oct4基因启动子DNA甲基化程度较低,且与基因表达水平呈负相关,更有利于维持胚胎生殖细胞的自我更新状态。

关键词：胚胎生殖细胞 Oct4基因 DNA甲基化全能性

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流产模型大鼠卵巢黄体γ-干扰素、白介素-4的表达及与流产相关性

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解剖学杂志 2010年第5期33卷 617-620页

作者：时彦王东张连双王跃嗣滨州医学院组织学与胚胎学教研室烟台264003 滨州医学院生物技术教研室烟台264003

目的：研究γ-干扰素（IFN-γ）及白介素-4（IL-4）等细胞因子在流产过程中发挥的作用及其机制.方法：实验孕鼠随机分为正常孕组、流产模型组、流产模型＋IFN-γ抗体组.均于孕12d剖腹观察妊娠结局并取材,酶联免疫吸附法测定各组大鼠血清... 详细信息

目的：研究γ-干扰素（IFN-γ）及白介素-4（IL-4）等细胞因子在流产过程中发挥的作用及其机制.方法：实验孕鼠随机分为正常孕组、流产模型组、流产模型＋IFN-γ抗体组.均于孕12d剖腹观察妊娠结局并取材,酶联免疫吸附法测定各组大鼠血清IFN-γ、 IL-4水平,免疫组织化学技术检测卵巢黄体IFN-γ、 IL-4蛋白表达情况.结果：血清测定数据显示,流产模型组IFN-γ水平高于正常孕组,IL-4水平低于正常孕组;流产模型＋IFN-γ抗体组IFN-γ水平低于流产模型组,IL-4水平高于流产模型硎组.免疫组织化学阳性细胞光密度值变化趋势与血清测定结果基本一致.结论：IFN-γ、 IL-4与流产具有相关性,大鼠血清与卵巢黄体中两种细胞因子表达的改变可能是流产发生的重要因素之一.

关键词：流产 γ-干扰素白介素-4 卵巢

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白介素-2、白介素-4在溴隐亭致流产大鼠黄体的表达及与流产的关系

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解剖学杂志 2010年第2期33卷 182-184页

作者：张连双王东时彦王跃嗣马惠廷王美蓉滨州医学院组织学与胚胎学教研室烟台264003 滨州医学院生物技术教研室烟台264003

目的：研究白介素-2（IL-2）、白介素-4（IL-4）在溴隐亭致流产大鼠卵巢黄体的表达及血清学水平,探讨流产的发生机制.方法：将孕雌性Wistar大鼠随机分为正常孕组、注射溴隐亭组、注射溴隐亭＋γ-干扰素抗体组,孕12d时,腹主动脉采血后... 详细信息

目的：研究白介素-2（IL-2）、白介素-4（IL-4）在溴隐亭致流产大鼠卵巢黄体的表达及血清学水平,探讨流产的发生机制.方法：将孕雌性Wistar大鼠随机分为正常孕组、注射溴隐亭组、注射溴隐亭＋γ-干扰素抗体组,孕12d时,腹主动脉采血后心内灌注固定,ELISA测定各组血清IL-2、IL-4水平,免疫组织化学 SP 法检测IL-2、IL-4在各组大鼠卵巢黄体的表达并进行图像分析.结果：血清与卵巢黄体阳性细胞灰度值的变化趋势基本一致,注射溴隐亭后,IL-2水平较正常孕组升高、IL-4水平较正常孕组降低,而注射γ-干扰素抗体后,血清IL-2水平较注射溴隐亭组有所降低,但仍高于正常孕组,而IL-4水平有所升高,基本达正常水平.结论：给孕鼠注射溴隐亭及γ-干扰素抗体后,IL-2、IL-4在血清及卵巢黄体的表达有一定改变,此改变可能与流产的发生有一定的关系.

关键词：白介素-2 白介素-4 黄体流产大鼠

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CyclinD1反义核酸诱导肺腺癌细胞A549的凋亡

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生理学报 2011年第3期63卷 261-266页

作者：李尊岭邵淑红谢书阳岳真马颖滨州医学院生物化学与分子生物学教研室分子遗传学研究所烟台264003 滨州医学院应用心理学教研室烟台264003

为了探讨CyclinD1反义核酸在肺癌基因治疗中的作用,本研究构建了含有CyclinD1反义核酸的表达载体(命名为:pcDNA3.1-CyclinD1),并将该载体转染肺腺癌细胞A549,进行G418筛选后,获得稳定表达CyclinD1反义核酸的A549细胞(命名为:anti-Cyclin... 详细信息

为了探讨CyclinD1反义核酸在肺癌基因治疗中的作用,本研究构建了含有CyclinD1反义核酸的表达载体(命名为:pcDNA3.1-CyclinD1),并将该载体转染肺腺癌细胞A549,进行G418筛选后,获得稳定表达CyclinD1反义核酸的A549细胞(命名为:anti-CyclinD1-A549)。通过MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞的凋亡情况,结果显示稳定转染CyclinD1反义核酸后,A549细胞增殖显著被抑制,细胞凋亡增加。为探讨CyclinD1反义核酸诱导细胞凋亡的机理,应用Westernblot的方法检测了细胞内视网膜母细胞瘤蛋白质(retinoblastoma protein,pRb)、adenovirus E2 factor-1(E2F-1)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-2和MMP-9的表达,其结果显示,稳定转染CyclinD1反义核酸后,A549细胞内pRb、E2F-1、VEGF、MMP-2和MMP-9蛋白表达均显著降低。以上结果表明,Cy-clinD1反义核酸可引起肺癌细胞的凋亡,其机制可能与细胞内pRb、E2F-1、VEGF、MMP-2和MMP-9的表达降低相关。

关键词：肺癌凋亡 CyclinD1 基因治疗

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叶酸与鲱鱼精DNA作用机制的光谱研究

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化学研究与应用 2017年第1期29卷 8-12页

作者：黄玉玲付彩霞刘茂钘滨州医学院化学教研室山东烟台264003

采用荧光光谱和吸收光谱法研究了叶酸(FA)与鲱鱼精DNA(DNA)的相互作用。研究了DNA热变性、离子强度、阴离子猝灭剂KI及金属离子对FA-DNA体系的影响,分析了FA与DNA的相互作用模式,获得了不同温度下的结合常数、结合位点数及热力学参数。... 详细信息

采用荧光光谱和吸收光谱法研究了叶酸(FA)与鲱鱼精DNA(DNA)的相互作用。研究了DNA热变性、离子强度、阴离子猝灭剂KI及金属离子对FA-DNA体系的影响,分析了FA与DNA的相互作用模式,获得了不同温度下的结合常数、结合位点数及热力学参数。结果表明,DNA对FA的荧光有明显的猝灭作用,作用过程为静态猝灭,FA通过沟槽模式和静电作用力与DNA结合。

关键词：叶酸鲱鱼精DNA 相互作用荧光光谱

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汉黄芩苷对大鼠脊髓损伤的修复效果

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解剖学报 2022年第2期53卷 173-182页

作者：王笑刘卿谷成旭李希凯张璐萍滨州医学院基础医学院人体解剖学教研室山东烟台264003

目的通过观察不同剂量汉黄芩苷对大鼠脊髓损伤后介导的炎症反应的干预情况,探讨汉黄芩苷对脊髓损伤的影响。方法建立大鼠脊髓横断损伤模型(n=95),随机分成5组:正常组(N)、生理盐水组(NS)、汉黄芩苷低剂量组(WG12.5)、汉黄芩苷中剂量组... 详细信息

目的通过观察不同剂量汉黄芩苷对大鼠脊髓损伤后介导的炎症反应的干预情况,探讨汉黄芩苷对脊髓损伤的影响。方法建立大鼠脊髓横断损伤模型(n=95),随机分成5组:正常组(N)、生理盐水组(NS)、汉黄芩苷低剂量组(WG12.5)、汉黄芩苷中剂量组(WG25)及汉黄芩苷高剂量组(WG50)。采用ELISA检测炎性因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)及白细胞介素1(IL-1)的表达水平;静态脚印分析脚趾扩张(TS)和中间脚趾扩张(ITS)的变化;HE染色观察脊髓损伤大鼠组织学情况;尼氏染色观察脊髓损伤大鼠神经元数目变化;透射电子显微镜观察轴突形态及再生现象;劳克坚牢蓝(LFB)髓鞘染色观察脱髓鞘现象;免疫组织化学观察胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和神经生长相关蛋白43(GAP43)的表达变化。结果 NS组与N组相比,TNF-α及IL-1表达明显升高(P<0.01),TS和ITS明显减少(P<0.01),脊髓形态显著异常,神经元严重丢失,髓鞘形态异常,髓鞘严重脱色(P<0.01),GFAP表达明显增多,GAP43表达稍有增加;WG组与NS组相比,TNF-α和IL-1表达明显降低(P<0.01),TS和ITS增加(P<0.01),脊髓形态有所恢复,神经元丢失减少,髓鞘形态趋于正常且有新生轴突出现,髓鞘脱色减少(P<0.01),GFAP表达明显减少,GAP43表达明显增多,且呈现剂量依赖性。结论汉黄芩苷能改善脊髓损伤局部微环境,减少胶质瘢痕形成,促进轴突再生,减少局部神经元丢失、空洞形成等,进而促进脊髓损伤的修复。

关键词：汉黄芩苷脊髓损伤炎性反应胶质纤维酸性蛋白神经生长相关蛋白43 透射电子显微术免疫组织化学大鼠

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γ-干扰素抗体对早期流产大鼠γ-干扰素、白细胞介素-2、白细胞介素-4的表达及滋养层细胞凋亡的影响

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解剖学杂志 2013年第2期36卷 148-151页

作者：赵伟刘冉冉王东李雅娜张连双王跃嗣滨州医学院组织学与胚胎学教研室滨州医学院生物技术教研室烟台264003

目的：探讨γ干扰素（IFN-γ）抗体对孕鼠早期流产的影响及其机制。方法：实验孕鼠随机分成流产模型组、IFN-γ抗体组、流产模型＋IFN-γ抗体组及正常对照组。酶联免疫吸附法测定各组大鼠血清IFN-γ、白细胞介素-2（IL-2）、白细胞介素-... 详细信息

目的：探讨γ干扰素（IFN-γ）抗体对孕鼠早期流产的影响及其机制。方法：实验孕鼠随机分成流产模型组、IFN-γ抗体组、流产模型＋IFN-γ抗体组及正常对照组。酶联免疫吸附法测定各组大鼠血清IFN-γ、白细胞介素-2（IL-2）、白细胞介素-4（IL-4）水平，免疫组织化学检测子宫蜕膜组织中Bcl-2和Bax蛋白的表达，Hoechst33342荧光染色检测滋养层细胞凋亡情况。结果：血清测定数据显示，流产模型组IFN-7、IL-2水平高于正常对照组，IL-4水平低于正常对照组；流产模型＋IFN-7抗体组IFN-γ、IL-2水平低于流产模型组，高于IFN-γ抗体组；IL-4水平高于流产模型组，低于IFN-γ抗体组。免疫组织化学Bcl-2和Bax蛋白阳性产物光密度值比值（Bax／Bcl-2）流产模型＋IFN-γ抗体组低于流产模型组。结论：大鼠血清中3种细胞因子IFN-γ、IL-2、IL-4表达的改变及滋养层细胞凋亡可能是流产发生的重要因素。应用IFN-γ抗体可降低孕鼠IFN-γ、IL-2水平，升高IL-4水平，抑制滋养层细胞的凋亡，从而使流产率降低。

关键词： γ干扰素白细胞介素-2 白细胞介素-4 细胞凋亡流产

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培养基种类对花生毛状根株系生物量和白藜芦醇含量的影响

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生物技术通报 2014年第5期30卷 174-178页

作者：姚庆收姜吉刚武玉永梁乘榜滨州医学院药学院基因工程教研室烟台264003 滨州医学院药学院化学教研室烟台264003

旨在研究不同培养基对花生毛状根株系生物量和白藜芦醇含量的影响。利用发根农杆菌R1601侵染花生的叶片,诱导毛状根,利用PCR技术检测毛状根。使用5种培养基(1/2MS、MS、MS+500 mg/L羧苄西林钠、B5和N6)分别培养同一个株系的花生毛状根,... 详细信息

旨在研究不同培养基对花生毛状根株系生物量和白藜芦醇含量的影响。利用发根农杆菌R1601侵染花生的叶片,诱导毛状根,利用PCR技术检测毛状根。使用5种培养基(1/2MS、MS、MS+500 mg/L羧苄西林钠、B5和N6)分别培养同一个株系的花生毛状根,4周后利用高效液相色谱法(HPLC)测量毛状根生物量和白藜芦醇含量。结果显示,不同培养基对花生毛状根株系生物量的积累有显著差异,1/2MS培养基和MS培养基有利于花生毛状根株系生物量的积累。不同培养基对花生毛状根株系中白藜芦醇的含量有显著差异,B5培养基和N6培养基有利于花生毛状根株系中白藜芦醇的积累。

关键词：发根农杆菌花生毛状根白藜芦醇生物量

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核因子-κB激活与一氧化氮合酶mRNA表达在重症急性胰腺炎肺损伤中的作用

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解剖学杂志 2008年第6期31卷 771-774页

作者：阚氏海余崇林黄飞滨州医学院解剖学教研室烟台264003

目的:探讨重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肺组织核因子-κB(NF-κB)活化及诱导型一氧化氮合酶mRNA表达与肺损伤的关系。方法:SD大鼠随机分为对照组、SAP组、二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)预处理组。建立各组模型后取肺组织行病理学观察,免疫组... 详细信息

目的:探讨重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肺组织核因子-κB(NF-κB)活化及诱导型一氧化氮合酶mRNA表达与肺损伤的关系。方法:SD大鼠随机分为对照组、SAP组、二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)预处理组。建立各组模型后取肺组织行病理学观察,免疫组织化学法观察NF-κB的表达,实时荧光定量PCR法检测iNOS mRNA表达。结果:对照组仅极少量NF-κB活化,iNOS mRNA呈低水平表达。SAP组NF-κB表达明显增加,并呈动态变化,6h达高峰,主要表达于中性粒细胞、单核/巨噬细胞、支气管黏膜上皮细胞、肺泡上皮细胞的胞质和胞核内,iNOSmRNA表达明显上调。PDTC预处理组NF-κB表达明显减少,iNOS mRNA表达亦下调,但仍高于对照组。结论:SAP时肺组织NF-κB活化并通过调控iNOS mR-NA的表达参与肺损伤。PDTC可能通过抑制NF-κB活性进而下调iNOS mRNA的表达,减轻肺损伤。

关键词：核因子-KB 诱导型一氧化氮合酶重症急性胰腺炎肺损伤大鼠

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谷氨酸钠诱导肥胖性不孕大鼠弓状核NPY及GnRH的表达

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现代妇产科进展 2008年第12期17卷 901-903,908页

作者：张洪芹张连双李雅娜时彦赵伟滨州医学院烟台校区组织学与胚胎学教研室烟台264003 滨州医学院妇产科

目的:探讨谷氨酸钠诱导肥胖性不孕大鼠弓状核神经肽Y(NPY)及促性腺激素释放激素(GnRH)的表达。方法:给新出生雌性Wistar大鼠皮下注射谷氨酸钠,连续5天,建立肥胖模型。观察NPY及GnRH在其下丘脑弓状核表达的变化;并测定血清雌二醇(E2)、睾... 详细信息

目的:探讨谷氨酸钠诱导肥胖性不孕大鼠弓状核神经肽Y(NPY)及促性腺激素释放激素(GnRH)的表达。方法:给新出生雌性Wistar大鼠皮下注射谷氨酸钠,连续5天,建立肥胖模型。观察NPY及GnRH在其下丘脑弓状核表达的变化;并测定血清雌二醇(E2)、睾酮(T)、瘦素(leptin)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)的变化。结果:80%注射谷氨酸钠的大鼠呈能量失衡致肥胖状态;血清E2、T、leptin水平较对照组明显升高(P<0.05),FSH、LH水平较对照组明显降低(P<0.05);下丘脑弓状核NPY表达较对照组增强(P<0.05),GnRH表达较对照组减弱(P<0.05)。结论:谷氨酸钠诱导肥胖大鼠由于神经内分泌-代谢失调而引起GnRH水平降低,导致下丘脑-垂体-卵巢轴功能失调性无排卵而致不孕。

关键词：神经肽Y 促性腺激素释放激素肥胖症不孕雌性大鼠 Wistar

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