该文探讨人参皂苷Rg_(1)通过微小RNA155(miR-155)/神经源性基因Notch同源蛋白1(neurogenic gene Notch homologous protein 1,Notch1)/发状分裂相关增强子1(hairy and enhancer of split 1,Hes1)通路调控细胞自噬减轻HL-1心肌细胞缺氧复...
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该文探讨人参皂苷Rg_(1)通过微小RNA155(miR-155)/神经源性基因Notch同源蛋白1(neurogenic gene Notch homologous protein 1,Notch1)/发状分裂相关增强子1(hairy and enhancer of split 1,Hes1)通路调控细胞自噬减轻HL-1心肌细胞缺氧复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)损伤的具体机制。构建H/R损伤HL-1细胞模型,使用人参皂苷Rg_(1)和(或)Notch1抑制剂(DAPT)、miR-155 mimics处理细胞。cell counting kit(CCK)-8检测H/R损伤HL-1细胞的相对活力;乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)试剂盒检测细胞培养基上清液中LDH的含量;透射电镜观察细胞自噬小体;MDC法检测细胞自噬水平;荧光定量聚合酶链式反应检测miR-155、Notch1、Hes1、微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein1 light chain 3,LC3)的mRNA水平;蛋白免疫印迹法检测Notch1、Hes1、LC3Ⅰ、LC3Ⅱ的蛋白表达水平。结果显示,H/R损伤后HL-1细胞活性降低、LDH漏出量增加,细胞内自噬小体增多,LC3的mRNA水平和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值升高;人参皂苷Rg_(1)能提高细胞活性,减少LDH漏出量,减少细胞内自噬小体数量,降低细胞内LC3的mRNA水平,降低LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值,通过抑制细胞自噬发挥心肌细胞保护作用,Notch1抑制剂或miR-155过表达则抑制人参皂苷Rg_(1)的作用,促进细胞自噬,加重HL-1细胞H/R损伤;人参皂苷Rg_(1)抑制H/R损伤造成的Notch1、Hes1 mRNA水平和蛋白表达降低、miR-155 mRNA水平升高,Notch1抑制剂或miR-155过表达则呈现相反作用。综上所述,人参皂苷Rg_(1)通过miR-155/Notch1/Hes1通路调控自噬减轻HL-1心肌细胞H/R损伤。
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