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第四届世界中西医结合大会

作者：孙喜灵李靖张启明陈利国王云慧滨州医学院(烟台校区)中医证候研究中心 264005 北京中医药大学附属东直门医院肾内科 100700 中国中医科学院中医临床基础医学研究所 100700 暨南大学医学院中西医结合研究所 510632 烟台大学数学与信息工程学院 264005

中医学证候内蕴拓扑结构的理论和方法，可以破解证候高阶多维的非线性结构，展现证候复杂多变的全貌，阐明证候动态演化过程中子集合的衍生规律，以及证候动态演化子集合主症与次症的变化规律，实现证候动态演化子集合与治则治法和方药...

中医学证候内蕴拓扑结构的理论和方法，可以破解证候高阶多维的非线性结构，展现证候复杂多变的全貌，阐明证候动态演化过程中子集合的衍生规律，以及证候动态演化子集合主症与次症的变化规律，实现证候动态演化子集合与治则治法和方药的精准对应，揭示出证候动态演化规律的科学内涵;通过计算机仿真技术，建立基于拓扑结构的证候群治则治法与方剂的仿真数据平台;运用临证数据，通过文献梳理对比，来实现复合证候及其证候群的治则治法和方药的创新，阐释证候的判定诊断标准的科学内涵，从证候群中揭示临床疾病的证候分布规律，为科学的符合证候动态演化规律的临床疾病中医证候判定诊断标准的制定提供理论依据，促进辨证论治水平的大幅度提高，为中医学理论的现代语言诠释提供新的概念。

关键词：

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顺铂致A549细胞miR-16与bcl-2表达的变化

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肿瘤防治研究 2011年第11期38卷 1224-1227页

作者：李有杰孙强岳真郝青高宗华张丽霞谢书阳滨州医学院医学分子遗传研究所山东烟台264003 滨州市中心医院病理科滨州医学院实验医学研究中心

目的研究顺铂作用于A549细胞后,miR-16和bcl-2的表达变化,并探讨两者的相关性。方法采用MTT法测定顺铂对A549细胞的抑制率、锥虫蓝拒染法检测细胞凋亡率,倒置显微镜观察细胞形态,确定合适的药物浓度;然后提取细胞中的miRNA,用实时定量PC... 详细信息

目的研究顺铂作用于A549细胞后,miR-16和bcl-2的表达变化,并探讨两者的相关性。方法采用MTT法测定顺铂对A549细胞的抑制率、锥虫蓝拒染法检测细胞凋亡率,倒置显微镜观察细胞形态,确定合适的药物浓度;然后提取细胞中的miRNA,用实时定量PCR技术定量分析miR-16在对照组细胞和加药组细胞中的表达变化;通过microRNA_org等分析软件预测miR-16的下游调控基因;采用Western blot方法分析细胞中bcl-2蛋白的表达变化。结果在顺铂诱导作用下,A549细胞凋亡率明显增加;miR-16在顺铂作用后的细胞中表达显著升高,而bcl-2蛋白显著低表达。结论顺铂可以促使肺癌A549细胞凋亡;miR-16具有抑癌基因活性,能负调控bcl-2蛋白的表达,参与顺铂致A549细胞死亡的作用。

关键词： miR-16 bcl-2 顺铂肺癌

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培养胚胎神经干细胞向少突胶质细胞诱导分化的实验研究

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滨州医学院学报 2011年第1期34卷 26-28,32页

作者：王嵩张丽霞柴勇杨成滨州医学院教务处烟台市264003 滨州医学院实验医学研究中心烟台市264003 滨州医学院基础学院滨州医学院中西医结合学院

目的培养大鼠胚胎神经干细胞,诱导分化获得较高纯度的少突胶质细胞。方法取孕11.5 d的胚胎大鼠神经管尾段制备单细胞悬液,无血清条件培养基培养,获得神经干细胞;加入胎牛血清诱导分化,利用神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞不同的生... 详细信息

目的培养大鼠胚胎神经干细胞,诱导分化获得较高纯度的少突胶质细胞。方法取孕11.5 d的胚胎大鼠神经管尾段制备单细胞悬液,无血清条件培养基培养,获得神经干细胞;加入胎牛血清诱导分化,利用神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞不同的生长特性进行分离,获取较高纯度的少突胶质细胞。结果本实验得到纯度达90%以上的少突胶质细胞。结论利用培养大鼠胚胎神经干细胞诱导分化可以获取较多较高纯度的少突胶质细胞,以进行进一步研究。

关键词：神经干细胞少突胶质细胞培养分化纯化

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卡介苗多糖核酸对哮喘大鼠淋巴液和血液CD4^+CD25^+Foxp3^+调节性T细胞的影响

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中国免疫学杂志 2010年第10期26卷 932-936页

作者：石涛冯学斌赵志旭张瑾锦滨州医学院儿科学教研室滨州256603 滨州医学院实验医学研究中心烟台264003

目的:探讨卡介苗多糖核酸(BCG-PSN)对哮喘大鼠淋巴液和血液调节性T细胞数量及功能的影响。方法:将SD大鼠随机分为对照组、哮喘组和BCG-PSN组,分别收集不同时间点大鼠淋巴液和血液,采用流式细胞仪(FCM)检测CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(CD... 详细信息

目的:探讨卡介苗多糖核酸(BCG-PSN)对哮喘大鼠淋巴液和血液调节性T细胞数量及功能的影响。方法:将SD大鼠随机分为对照组、哮喘组和BCG-PSN组,分别收集不同时间点大鼠淋巴液和血液,采用流式细胞仪(FCM)检测CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(CD4+CD25+Foxp3+Treg)百分率,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测淋巴液和血浆白介素10(IL-10)和转录生长因子β1(TGF-β1)浓度。结果:各组在各时间点其淋巴液中CD4+CD25+Foxp3+Treg百分率、IL-10水平均较血液明显升高。哮喘组大鼠淋巴液和血液中CD4+CD25+Foxp3+Treg百分率、IL-10、TGF-β1浓度均较对照组显著降低(P<0.05)。BCG-PSN组淋巴液和血液中CD4+CD25+Foxp3+Treg百分率和IL-10水平较哮喘组明显升高(P<0.05),与对照组比较无显著性差异;而TGF-β水平在48小时较对照组和哮喘组明显升高(P<0.05)。结论:哮喘大鼠淋巴液和血液存在明显CD4+CD25+Foxp3+Treg数量及功能不足。BCG-PSN可能通过增加哮喘大鼠外周血和淋巴液中CD4+CD25+Foxp3+Treg的数量及其产生IL-10和TGF-β水平,增强免疫抑制效应,从而发挥抑制哮喘炎症的作用。

关键词：哮喘卡介苗多糖核酸 CD4+CD25+Foxp3+Treg IL-10 TGF-β

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去甲斑蝥素致凋亡白血病细胞基因表达的变化

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实用儿科临床杂志 2010年第21期25卷 1662-1664页

作者：李有杰张帅王萍玉高宗华王秀文谢书阳滨州医学院医学分子遗传研究所山东烟台264003 滨州医学院化学教研室山东烟台264003 滨州医学院实验医学研究中心山东烟台264003

目的研究去甲斑蝥素(DMC)对慢性粒细胞白血病细胞株K562细胞凋亡的影响,探讨DMC致细胞凋亡后基因表达的变化。方法 20 mg.L-1DMC作用细胞36 h后,倒置显微镜观察细胞形态变化;提取细胞DNA,琼脂糖凝胶电泳检测凋亡细胞DNA改变;提取细胞总R... 详细信息

目的研究去甲斑蝥素(DMC)对慢性粒细胞白血病细胞株K562细胞凋亡的影响,探讨DMC致细胞凋亡后基因表达的变化。方法 20 mg.L-1DMC作用细胞36 h后,倒置显微镜观察细胞形态变化;提取细胞DNA,琼脂糖凝胶电泳检测凋亡细胞DNA改变;提取细胞总RNA,基因芯片技术检测基因表达谱变化;通过反转录(RT)-PCR、ELISA验证芯片部分基因表达变化。采用SPSS13.0软件进行统计学分析。结果 DMC处理K562细胞后,倒置显微镜下可见细胞状态变差,活细胞数目明显减少;DNA电泳后可见明显的阶梯状变化;在利用基因芯片技术检测的21 522个基因转录本中,共筛选出差异表达基因约2 300个,其中超过500个基因的表达明显升高,有350个基因表达显著降低;RT-PCR和ELISA结果显示,Bcl-2、E2F1和E2F3基因表达显著降低,RB1和P53表达显著增高,均与芯片结果一致。结论 DMC可致K562细胞凋亡,并可引起凋亡细胞相关基因表达变化。

关键词：去甲斑蝥素白血病细胞凋亡基因表达

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灰树花多糖对甲醛中毒小鼠淋巴细胞的干预作用

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安徽农业科学 2010年第3期38卷 1254-1255页

作者：张立霞邵一叶高永崔大鹏杨静倪艳波滨州医学院实验医学研究中心山东烟台264003 滨州医学院基础学院山东烟台264003 滨州医学院学报编辑部山东烟台264003

[目的]观察灰树花多糖对甲醛中毒小鼠淋巴细胞的干预作用。[方法]取3周龄小鼠,腹腔注射生理盐水和不同浓度的灰树花多糖,10 d后制作甲醛中毒模型,正常对照组不作任何处理。利用淋巴细胞计数测定淋巴细胞的数目,利用流式细胞仪检测淋巴... 详细信息

[目的]观察灰树花多糖对甲醛中毒小鼠淋巴细胞的干预作用。[方法]取3周龄小鼠,腹腔注射生理盐水和不同浓度的灰树花多糖,10 d后制作甲醛中毒模型,正常对照组不作任何处理。利用淋巴细胞计数测定淋巴细胞的数目,利用流式细胞仪检测淋巴细胞的凋亡。[结果]生理盐水组小鼠淋巴细胞数目降低,淋巴细胞凋亡率升高,中、高剂量灰树花多糖组淋巴细胞的损伤明显减轻,与生理盐水组的差异有统计学意义(P<0.01)。[结论]灰树花多糖对甲醛中毒小鼠淋巴细胞有保护作用。

关键词：灰树花多糖甲醛淋巴细胞凋亡

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电针对体外培养星形胶质细胞机械性损伤后反应性胶质化的影响

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滨州医学院学报 2010年第4期33卷 244-246页

作者：王秀文张立霞杨成潘晶晶王红滨州医学院实验医学研究中心烟台市264003 滨州医学院口腔学院

目的观察电针对体外培养星形胶质细胞(Astrocyte,Ast)机械性损伤后反应性胶质化的影响。方法取新生3d龄SD大鼠的大脑皮层进行Ast原代培养,取第三、四代细胞制作细胞机械性损伤模型,电针刺激,用倒置相差显微镜及免疫细胞化学荧光染色观... 详细信息

目的观察电针对体外培养星形胶质细胞(Astrocyte,Ast)机械性损伤后反应性胶质化的影响。方法取新生3d龄SD大鼠的大脑皮层进行Ast原代培养,取第三、四代细胞制作细胞机械性损伤模型,电针刺激,用倒置相差显微镜及免疫细胞化学荧光染色观察细胞生长增殖,细胞形态及胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)表达的变化。结果模型组Ast机械性损伤后,细胞增生,体积变大,GFAP表达增强。电针组较模型组细胞增生减少,细胞体积变化不大,GFAP表达较弱。结论电针刺激可以抑制体外培养Ast机械性损伤后的增生,降低细胞内GFAP的表达,即电针可以抑制Ast的反应性胶质化。

关键词：电针星形胶质细胞机械性损伤反应性胶质化胶质纤维酸性蛋白

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PDCD4基因在过氧化氢诱导喉癌细胞凋亡中的作用

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中国组织化学与细胞化学杂志 2010年第1期19卷 72-76页

作者：李林陈晓锐宋莎莎逯素梅张国栋李建峰山东大学附属省立医院中心实验室济南250021 山东省临床医学研究院眼耳鼻喉科学研究所济南250022 滨州医学院医学人文学院烟台264003

目的探讨过氧化氢诱导喉癌细胞Hep-2凋亡过程中PDCD4基因表达的变化。方法以体外培养的喉癌细胞Hep-2为实验材料,不同浓度的过氧化氢作用于Hep-2细胞,噻唑蓝(MTT)比色法测定细胞生存率,采用吖啶橙染色、Ho33342/PI荧光双染进行形态学观... 详细信息

目的探讨过氧化氢诱导喉癌细胞Hep-2凋亡过程中PDCD4基因表达的变化。方法以体外培养的喉癌细胞Hep-2为实验材料,不同浓度的过氧化氢作用于Hep-2细胞,噻唑蓝(MTT)比色法测定细胞生存率,采用吖啶橙染色、Ho33342/PI荧光双染进行形态学观察,RT-PCR及Western blot检测PDCD4 mRNA水平及蛋白表达的变化,评价在过氧化氢诱导喉癌细胞Hep-2凋亡过程中PDCD4基因的作用。结果过氧化氢(200μmol/L)作用Hep-2细胞24h,能够显著抑制细胞增殖,并诱导细胞凋亡,同时引起pdcd4 mRNA水平显著上调,PDCD4蛋白表达显著增加。结论本研究首次报道PDCD4基因可能在氧化胁迫诱导喉癌细胞凋亡中起关键作用。

关键词： PDCD4 Hep-2 细胞凋亡氧化应激喉癌

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牛磺酸锌对铅暴露雄性大鼠血脑屏障通透性的影响

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环境与健康杂志 2009年第11期26卷 972-974,F0003页

作者：刘文波张瑾锦张丽霞王秀文宋晓冬杨成滨州医学院烟台校区实验医学研究中心山东烟台264003

目的探讨牛磺酸锌(taurine-zinc,TZC)对生长发育期铅暴露雄性大鼠血铅含量和血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)通透性的影响。方法选取3周龄雄性SD大鼠,随机分为对照组、乙酸铅组、二巯丁二酸(dimercaptosuccinic acid,DMSA)组和TZC组... 详细信息

目的探讨牛磺酸锌(taurine-zinc,TZC)对生长发育期铅暴露雄性大鼠血铅含量和血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)通透性的影响。方法选取3周龄雄性SD大鼠,随机分为对照组、乙酸铅组、二巯丁二酸(dimercaptosuccinic acid,DMSA)组和TZC组,每组8只。TZC组大鼠饮用0.46g/L的TZC,其余各组大鼠均饮用自来水。乙酸铅组、DMSA组和TZC组大鼠腹腔注射0.12%乙酸铅生理盐水溶液(每100g体重0.2ml),DMSA组大鼠灌胃5mg/ml的DMSA(每100g体重0.2ml)。染毒3周后,以原子吸收法测血铅含量,以硝酸镧示踪法观察血脑屏障通透性变化。结果与乙酸铅组相比,TZC组和DMSA组血铅含量显著降低(P<0.01);透射电镜观察显示,对照组未见镧盐颗粒渗透出血脑屏障,乙酸铅组大鼠普遍出现镧盐颗粒穿过血脑屏障进入神经网络,TZC组和DMSA组均有部分毛细血管存在镧盐颗粒透过内皮细胞到达基膜,但未穿过基膜进入神经网络。结论TZC能显著降低铅暴露大鼠血铅含量,对血脑屏障有良好的保护作用。

关键词：金属重铅牛磺酸锌二巯丁二酸血脑屏障

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灰树花多糖对高血压模型大鼠心脏血流动力学的影响

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安徽农业科学 2009年第25期37卷 12037-12038页

作者：倪艳波张丽霞杨静崔大鹏邵一叶高荣荣滨州医学院基础学院山东烟台264003 滨州医学院实验医学研究中心山东烟台264003

[目的]观察灰树花多糖对高血压大鼠血流动力学的影响。[方法]采用高盐饮食复制高血压大鼠模型。共设6组,对照组、模型组、卡托普利组和灰树花多糖高、中、低3个剂量组。每组10只,每天腹腔注射给药1次,对照组和模型组注射等量蒸馏水。麻... 详细信息

[目的]观察灰树花多糖对高血压大鼠血流动力学的影响。[方法]采用高盐饮食复制高血压大鼠模型。共设6组,对照组、模型组、卡托普利组和灰树花多糖高、中、低3个剂量组。每组10只,每天腹腔注射给药1次,对照组和模型组注射等量蒸馏水。麻醉状态下分离大鼠颈总动脉,利用左心室插管测血流动力学指标。[结果]灰树花多糖不同剂量均能使麻醉大鼠的左室压(LVSP)、左室舒张期末压(LVEDP)和左室最大变化速率(±dp/dtmax)不同程度地降低。[结论]灰树花多糖能够对血流动力学产生一定影响,说明灰树花多糖可能具有一定的降压和心脏保护作用。

关键词：灰树花多糖高血压血流动力学

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