检索结果-内蒙古大学图书馆

中国病原生物学杂志 2013年第4期8卷 I0004-I0004,F0003页

作者：李娜李波清滨州医学院病原生物学教研室山东烟台264003

绪论是教学之始的重点,医学微生物学绪论课的授课效果直接影响到学生的学习积极性及后续课程的学习。本文从提出问题,使学生在思考过程中产生对本课程的兴趣;运用形象生动的语言讲述,增加学习的趣味性;紧密联系临床,提高学生的求知欲;... 详细信息

绪论是教学之始的重点,医学微生物学绪论课的授课效果直接影响到学生的学习积极性及后续课程的学习。本文从提出问题,使学生在思考过程中产生对本课程的兴趣;运用形象生动的语言讲述,增加学习的趣味性;紧密联系临床,提高学生的求知欲;增加学科前沿进展,激起学生的探索精神四个方面介绍了如何讲好医学微生物学绪论课,旨在提高医学微生物学的教学效果。

关键词：医学微生物学绪论教学

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幽门螺杆菌hp0788基因对GES-1细胞功能影响的初步研究

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中国病原生物学杂志 2017年第7期12卷 614-618页

作者：李娇娇荣倩玉季晓飞张莹赵慧琳周秀芝李波清滨州医学院病原生物学教研室山东烟台264003

目的构建幽门螺杆菌ATCC26695hp0788基因敲除突变菌株(ATCC26695△0788km),观察hp0788基因对GES-1细胞功能的影响。方法以基因敲除质粒载体pSJHK构建基因敲除质粒,在hp0788基因的上下游分别扩增800~1100bp的基因片段作为同源臂,经限制... 详细信息

目的构建幽门螺杆菌ATCC26695hp0788基因敲除突变菌株(ATCC26695△0788km),观察hp0788基因对GES-1细胞功能的影响。方法以基因敲除质粒载体pSJHK构建基因敲除质粒,在hp0788基因的上下游分别扩增800~1100bp的基因片段作为同源臂,经限制性内切酶酶切后与质粒载体连接构建基因敲除质粒pSJHK-0788,通过电击转化构建hp0788基因敲除突变菌株,以FITC标记法检测其对GES-1细胞黏附能力的影响;以感染复数(MOI)为200:1构建幽门螺杆菌与GES-1细胞共培养体系,比较ATCC26695和ATCC26695△0788km对GES-1细胞凋亡及活性的影响。结果构建了hp0788基因双交换敲除质粒,电击转化获得hp0788基因敲除突变菌株。FITC标记ATCC26695和幽门螺杆菌ATCC26695△0788km与GES-1细胞混匀后采用流式细胞术检测FITC的荧光强度,ATCC26695组的黏附率记为100%,ATCC26695△0788km组黏附率为90.40%,差异均有统计学意义(t=2.80,P<0.05);ATCC26695与ATCC26695△0788km分别与GES-1细胞共培养8h和16h,流式细胞术检测细胞凋亡率分别为(15.73±7.84)%、(25.26±5.81)%和(12.46±12.30)%、(21.13±10.09)%,细胞增殖-毒性检测试剂盒检测细胞活力分别为53%、40%和66%、50%,差异均有统计学意义(t值分别为3.30,2.80,-2.93,-2.76,P<0.05)。结论hp0788基因敲除幽门螺杆菌ATCC26695对GES-1细胞的黏附率下降,并使GES-1凋亡率下降,而细胞活力增高。表明hp0788基因是影响幽门螺杆菌ATCC26695感染GES-1细胞后引起细胞凋亡和活性变化的重要基因。

关键词：幽门螺杆菌基因敲除黏附细胞凋亡细胞活力

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幽门螺杆菌感染对LAIR-1影响的实验研究

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中国病原生物学杂志 2015年第8期10卷 689-692页

作者：孙辉杜东龙张莹张艳丽陈醒醒李波清滨州医学院病原生物学教研室山东烟台264003

目的通过构建小鼠感染模型,研究幽门螺杆菌(Hp)感染对白细胞相关免疫球蛋白样受体-1(LAIR-1)表达的影响。方法将32只C57BL/6小鼠随机分为对照组和感染组。感染组通过Hp菌液灌胃建立小鼠感染模型,对照组以PBS灌胃。6周后处死小鼠,采用胃... 详细信息

目的通过构建小鼠感染模型,研究幽门螺杆菌(Hp)感染对白细胞相关免疫球蛋白样受体-1(LAIR-1)表达的影响。方法将32只C57BL/6小鼠随机分为对照组和感染组。感染组通过Hp菌液灌胃建立小鼠感染模型,对照组以PBS灌胃。6周后处死小鼠,采用胃黏膜分离培养、革兰染色、PCR及生化反应检查Hp定植情况,采用流式细胞术检测小鼠外周血单个核细胞(PBMC)中单核细胞和淋巴细胞表面LAIR-1的表达。结果感染组小鼠Hp感染率为91.3%(21/23)。感染组和对照组小鼠PBMC中单核细胞比例分别为(22.85±3.56)%和(49.85±0.35)%,淋巴细胞比例分别为(40.93±10.05)%和(30.15±0.35)%,差异均有统计学意义(t=5.845和2.137,P<0.05)。感染组和对照组小鼠PBMC表面LAIR-1表达率分别为(70.16±7.75)%和(83.4±0.1)%,淋巴细胞表面LAIR-1表达率分别为(56.81±11.37)%和(72.3±0.6)%,差异均有统计学意义(t=3.761和2.491,P<0.05)。结论 Hp感染下调了小鼠PBMC中单核细胞及LAIR-1的表达,上调淋巴细胞比例但下调其LAIR-1的表达。

关键词：幽门螺杆菌 C57BL/6小鼠白细胞相关免疫球蛋白样受体-1

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幽门螺杆菌GroEL基因真核表达载体构建及鉴定

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中国公共卫生 2012年第3期28卷 331-332页

作者：李波清张玉梅李娜吴玉龙耿丽滨州医学院病原生物学教研室山东烟台264003

目的构建幽门螺杆菌热休克蛋白GroEL基因的真核表达载体pcDNA3.0-GroEL,为幽门螺杆菌的基因疫苗研制提供参考依据。方法提取幽门螺杆菌基因组DNA,PCR扩增GroEL基因,克隆至pMD19-T载体,通过PCR、酶切及测序鉴定后,将GroEL基因片段用限制... 详细信息

目的构建幽门螺杆菌热休克蛋白GroEL基因的真核表达载体pcDNA3.0-GroEL,为幽门螺杆菌的基因疫苗研制提供参考依据。方法提取幽门螺杆菌基因组DNA,PCR扩增GroEL基因,克隆至pMD19-T载体,通过PCR、酶切及测序鉴定后,将GroEL基因片段用限制性内切酶切下,克隆至真核表达载体pcDNA3.0,构建pcDNA3.0-GroEL重组质粒;采用PCR、酶切对重组质粒pcDNA3.0-GroEL进行鉴定。结果扩增出幽门螺杆菌GroEL基因片段约1 640 bp;pcDNA3.0-GroEL重组质粒经XhoⅠ和EcoRⅠ双酶切,产生1个与GroEL基因PCR产物大小一致的小片段和1个不同于pcDNA3.0-GroEL重组质粒的大片段,表明GroEL基因已成功插入pcDNA3.0质粒中。结论成功构建幽门螺杆菌GroEL基因真核表达载体pcDNA3.0-GroEL。

关键词：幽门螺杆菌热休克蛋白60 GroEL 基因疫苗

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分子伴侣幽门螺杆菌Hsp60与UreB的相互作用分析

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中国病原生物学杂志 2016年第11期11卷 977-981页

作者：赵慧琳季晓飞张艳丽柏雪莲李娇娇陈醒醒张玉梅李波清滨州医学院病原生物学教研室山东烟台264003

目的检测并分析幽门螺杆菌(Hp)尿素酶β亚基(UreB)与Hsp60之间的相互作用。方法克隆Hp 26695的尿素酶β亚基基因(UreB)融合GST标签和Hsp60基因融合His标签,分别在大肠埃希菌中进行异源表达。提取两种蛋白,采用pull-down方法检测两者间... 详细信息

目的检测并分析幽门螺杆菌(Hp)尿素酶β亚基(UreB)与Hsp60之间的相互作用。方法克隆Hp 26695的尿素酶β亚基基因(UreB)融合GST标签和Hsp60基因融合His标签,分别在大肠埃希菌中进行异源表达。提取两种蛋白,采用pull-down方法检测两者间的相互作用。利用Modeller 9v2软件,以***的GroEL为基础模建Hp Hsp60的三维结构,再与已知的UreB结构利用AutoDock 4.2软件进行分子共模拟,分析二者的相互作用面和关键氨基酸。结果构建了Hp Hsp60和尿素酶β亚基(UreB)的大肠埃希菌异源表达体系并获得纯化蛋白;Pull-down试验显示部分未融合GST标签的Hsp60出现在GST-UreB的洗脱液中,表明Hsp60与GST-UreB之间存在相互作用;以***的GroEL为基础模建了Hp Hsp60的三维结构,利用docking技术构建UreB与Hp Hsp60的相互作用模型,发现其主要的相互作用面位于Hsp60的α9与UreB的α2之间,其可能形成氢键的关键位点为UreB的α2上的T147氨基酸与Hsp60的α9上的E237、K238。结论 Hp Hsp60能直接与尿素酶β亚基(UreB)相互作用,Hsp60可能通过这种相互作用在UreB成熟过程中发挥分子伴侣功能。这为阐明Hp尿素酶的组装与成熟机制奠定了基础。

关键词：幽门螺杆菌尿素酶 Hsp60 分子伴侣相互作用

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以提高教育质量为核心的医学微生物学教学改革的研究

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中国病原生物学杂志 2012年第3期7卷 I0002-I0003页

作者：乔媛媛李波清李娜张玉梅张珍滨州医学院病原生物学教研室山东烟台264003

教育改革是高等学校的重要任务,以提高教学质量为核心开展基础教学与临床实践相结合的教育教学方法,能够提高教师对课程的全面调控能力,改变教师教育教学思维。在教学工作中提倡教师先实践,学生再实践的教育模式,有利于开展案例式教学,... 详细信息

教育改革是高等学校的重要任务,以提高教学质量为核心开展基础教学与临床实践相结合的教育教学方法,能够提高教师对课程的全面调控能力,改变教师教育教学思维。在教学工作中提倡教师先实践,学生再实践的教育模式,有利于开展案例式教学,有利于开展实验教学改革,也有利于医学微生物学的教学改革。

关键词：医学微生物学临床实践教学改革

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幽门螺杆菌热休克蛋白60基因的定点突变及其原核表达

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中国病原生物学杂志 2013年第8期8卷 695-697,700页

作者：孙万菊杜东龙蒋宏张珍杜镇镇李波清滨州医学院病原生物学教研室山东烟台264003 滨州医学院附属医院山东滨州256603

目的定点突变幽门螺杆菌标准菌株ATCC26695 hsp60基因的1398、1399位点,并获得基因突变后hsp60基因的原核表达蛋白。方法采用Primer Premier5.0软件设计hsp60基因的2对引物,引入2个突变位点,通过重叠延伸PCR法进行3次扩增,获得突变型hs... 详细信息

目的定点突变幽门螺杆菌标准菌株ATCC26695 hsp60基因的1398、1399位点,并获得基因突变后hsp60基因的原核表达蛋白。方法采用Primer Premier5.0软件设计hsp60基因的2对引物,引入2个突变位点,通过重叠延伸PCR法进行3次扩增,获得突变型hsp60基因,克隆至原核表达载体pEASY-E1,重组质粒转化至E. coli BL21(DE3),对其进行测序验证,经IPTG诱导表达后,SDS-PAGE电泳检测表达产物。结果将幽门螺杆菌hsp60基因1398、1399位点AG突变为GC,构建了突变型hsp60基因的表达载体,转化大肠埃希菌后高效表达可溶性hsp60蛋白。结论构建了突变型hsp60基因表达载体,并能表达可溶性目的蛋白,为对其功能研究奠定了基础。

关键词：幽门螺杆菌热休克蛋白60 定点突变原核表达

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威海地区幽门螺杆菌cagA基因3′端多态性分析

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中国病原生物学杂志 2014年第9期9卷 783-787页

作者：杜东龙孙万菊孙辉刘岩红李波清滨州医学院病原生物学教研室山东烟台264003 滨州医学院附属医院呼吸内科山东滨州256603

目的研究威海地区幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)临床分离株cagA基因的3′端多态性。方法采用PCR法扩增Hp临床分离株的cagA基因3′端并测序,用DNAStar 5.0软件对其进行编码氨基酸序列的比对分析。结果 63株Hp临床分离株均cagA阳性(... 详细信息

目的研究威海地区幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)临床分离株cagA基因的3′端多态性。方法采用PCR法扩增Hp临床分离株的cagA基因3′端并测序,用DNAStar 5.0软件对其进行编码氨基酸序列的比对分析。结果 63株Hp临床分离株均cagA阳性(cagA+),其中93.7%(59/63)为东亚型(EPIYYA-ABD),6.3%(4/63)为西方型(EPIYYA-ABC)。3.4%(2/59)的东亚型菌株EPIYA-B突变为ESIYA-B,4株西方型型均突变为EPIYT-B。胃癌患者分离株中88.9%(16/18)为东亚型,11.1%(2/18)为西方型;非胃癌分离株中95.6%(43/45)为东亚型,4.4%(2/45)为西方型。2株分离自胃癌患者的西方型Hp EPIYA-A后的第一个氨基酸残基由赖氨酸(K)突变为谷氨酸(E)。结论威海地区Hp cagA基因以东亚型为主,但东、西方亚型Hp的致病性无显著差别,两型都存在cagA基因3′端编码氨基酸序列的改变。

关键词：幽门螺杆菌 cagA 多态性

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MRSA的SCCmec分型研究及耐药性分析

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中国病原生物学杂志 2012年第12期7卷 897-900页

作者：王爱玲纪冰宿振国刘永云王健张玉梅滨州医学院附属医院检验科山东滨州256603 滨州医学院病原生物学教研室山东烟台264003

目的采用两种方法研究医院临床分离的耐甲氧西林金黄葡萄球菌(MRSA)盒染色体(SCCmec基因型)分布特点及耐药状况。方法应用两种多重聚合酶链式反应(PCR)技术对临床分离的65株MRSA进行SCCmec基因分型;普通PCR对MRSA进行5种耐药基因扩增;应... 详细信息

目的采用两种方法研究医院临床分离的耐甲氧西林金黄葡萄球菌(MRSA)盒染色体(SCCmec基因型)分布特点及耐药状况。方法应用两种多重聚合酶链式反应(PCR)技术对临床分离的65株MRSA进行SCCmec基因分型;普通PCR对MRSA进行5种耐药基因扩增;应用K-B纸片扩散法进行药敏试验。结果方法1SCCmec分型显示,58株MRSA为SCCmecⅢ型,5株为Ⅱ型,另外2株不能分型;方法2SCCmec分型显示,60株MRSA为SCCmecⅢ型,4株为SCCmecⅣa型,1株未分型。两种方法的分型结果差异无统计学意义(P>0.05),但各有优缺点。65株MR-SA对多种抗生素均耐药,5种耐药基因的阳性率分别为aac(6’)/aph(2’’)93.85%,aph(3’)Ⅲ为52.31%,tetM基因为92.31%,ant(4’)为9.23%,未扩增出TEM基因。结论医院分离株MRSA SCCmec基因型以Ⅲ型为主,且具有多重耐药的特征,氨基糖苷类、四环素类耐药基因携带率较高。多重PCR法可以用于大批量临床分离株MRSA的SCC-mec分型,但应结合实际选择合适的分型方法。

关键词：耐甲氧西林金黄葡萄球菌耐药性葡萄球菌盒染色体聚合酶链式反应

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发根农杆菌诱导苦参毛状根的研究

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安徽农业科学 2007年第34期35卷 11074-11075页

作者：姚庆收倪艳波潘效红徐大财李宪玉滨州医学院烟台校区基础学院生物技术教研室山东烟台264003

[目的]为苦参有用成分的大量生产提供新的途径。[方法]利用发根农杆菌R1601分别对药用植物苦参的根段、茎段、叶片、子叶进行侵染。[结果]在相同条件下,叶片、茎段和根段成功诱导出毛状根,但诱导频率不同,茎段作为外植体诱导率最高,达到... 详细信息

[目的]为苦参有用成分的大量生产提供新的途径。[方法]利用发根农杆菌R1601分别对药用植物苦参的根段、茎段、叶片、子叶进行侵染。[结果]在相同条件下,叶片、茎段和根段成功诱导出毛状根,但诱导频率不同,茎段作为外植体诱导率最高,达到26.7%,更适合作为外植体选用。毛状根除菌后,能在MS培养基上自主生长。[结论]发根农杆菌的RiT-DNA基因已经整合到苦参基因组中。该研究为采用生物技术生产苦参活性成分奠定了基础。

关键词：发根农杆菌苦参毛状根

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