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基础医学与临床 2021年第10期41卷 1423-1427页

作者：吴娜王东李京敏白咸勇滨州医学院基础医学院组织学与胚胎学教研室山东烟台264003

目的研究羟基红花黄色素A(HSYA)对人肝癌细胞系Huh7迁移及侵袭的影响,并通过体内外实验探究其是否影响肝癌细胞上皮-间质转化(EMT)。方法体外培养Huh7细胞,分为对照组、HSYA 80和160μmol/L实验组,分别处理24 h,用transwell小室法和细... 详细信息

目的研究羟基红花黄色素A(HSYA)对人肝癌细胞系Huh7迁移及侵袭的影响,并通过体内外实验探究其是否影响肝癌细胞上皮-间质转化(EMT)。方法体外培养Huh7细胞,分为对照组、HSYA 80和160μmol/L实验组,分别处理24 h,用transwell小室法和细胞划痕实验检测细胞侵袭和迁移能力;Western blot检测细胞vimentin和E-cadherin蛋白表达;建立Huh7细胞裸鼠皮下移植瘤模型,HE染色观察移植瘤和肝脏组织形态;免疫组化检测移植瘤组织TGF-β1、vimentin和E-cadherin表达情况。结果与对照组相比,HSYA实验组Huh7细胞迁移与侵袭能力明显下降,E-cadherin蛋白表达升高,vimentin蛋白表达下降(P<0.05);与移植组相比,HSYA实验组(2.25 mg/kg)肝内无肿瘤细胞转移,移植瘤组织出现肿瘤细胞坏死,E-cadherin表达升高,vimentin和TGF-β1表达下降(P<0.05)。结论HSYA通过抑制肝癌细胞发生EMT,抑制肝癌细胞的迁移及侵袭能力。

关键词：羟基红花黄色素A 肝癌上皮-间质转化 TGF-β1

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角质细胞生长因子对大鼠肝癌细胞CBRH-7919增殖的影响

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滨州医学院学报 2009年第6期32卷 410-412页

作者：李京敏秦燕霞白咸勇李雅娜滨州医学院组织学与胚胎学教研室烟台市264003 济宁医学院解剖学教研室

目的研究角质细胞生长因子(keratinocyte growth factor,KGF)对大鼠肝癌细胞CBRH-7919增殖的影响。方法MTT法检测不同浓度的重组人角质细胞生长因子(K102)对CBRH-7919细胞增殖的影响;免疫细胞化学技术检测角质细胞生长因子受体(keratino... 详细信息

目的研究角质细胞生长因子(keratinocyte growth factor,KGF)对大鼠肝癌细胞CBRH-7919增殖的影响。方法MTT法检测不同浓度的重组人角质细胞生长因子(K102)对CBRH-7919细胞增殖的影响;免疫细胞化学技术检测角质细胞生长因子受体(keratinocyte growth factor receptor,KGFR)在CBRH-7919细胞中的表达。结果KGFR在CBRH-7919细胞的胞膜和胞质中均有表达,MTT实验显示K102对CBRH-7919细胞增殖作用与对照组相比无统计学差异(P>0.05)。结论KGFR在CBRH-7919细胞的胞膜和胞质中存在表达,但K102对肝癌细胞CBRH-7919的增殖无明显作用。

关键词： CBRH-7919细胞 KGF KGFR 细胞增殖

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羟基红花黄色素A增强LY294002对人肝癌裸鼠移植瘤生长和血管生成的抑制

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中国组织化学与细胞化学杂志 2022年第2期31卷 146-151,167页

作者：宋浩然林续涛王东王占青吴娜白咸勇李京敏山东省滨州医学院组织学与胚胎学教研室烟台264003 滨州医学院烟台附属医院急诊科烟台264003 滨州医学院附属医院肝胆外科滨州256600

目的研究羟基红花黄色素A(hydroxysafflor yellow A,HSYA)与磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(PKB或Akt)信号通路的抑制剂(LY294002)联合用药对人肝癌细胞HepG2裸鼠移植瘤的增殖、凋亡及血管生成的影响。方法体外培养肝癌细胞HepG2并建立裸鼠移植瘤模型,随机分为对照组(Control组)、HSYA组、LY294002组及联合用药组(HSYA+LY294002组)。记录裸鼠的瘤重及移植瘤体积,HE染色观察移植瘤组织形态,免疫组织化学染色检测瘤组织Ki-67、Cleaved Caspase-3、VEGF、p-Akt的表达。结果与对照组比较,HSYA组肿瘤细胞异形性减少并出现点状坏死灶;LY294002组出现核固缩、核碎裂及明显坏死区;HSYA+LY294002组肿瘤组织内出现大片坏死区;HSYA+LY294002组瘤重和体积抑制率均高于HSYA组、LY294002组;HSYA组和LY294002组的Ki-67、血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、p-Akt表达均下降,Cleaved Caspase-3表达均增高;但HSYA+LY294002组Ki-67、VEGF、p-Akt蛋白表达下降、Cleaved Caspase-3表达增高更显著。结论HSYA可能通过增强LY294002抑制PI3K/AKT信号通路的作用,抑制人肝癌细胞的增长和血管生成。

关键词：羟基红花黄色素A PI3K/Akt通路 LY294002 肝癌

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多囊卵巢综合征大鼠卵巢中kisspeptin/kiss1r系统的表达及作用研究

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中国医药导报 2020年第19期17卷 16-19,F0004页

作者：刘冉冉骆倩倩孙晓娟李连芹张洪芹滨州医学院烟台附属医院生殖医学科山东烟台264100 滨州医学院组织胚胎学教研室山东烟台264003

目的建立多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠模型,探讨卵巢组织中kisspeptin/kiss1r系统表达及作用.方法孕10d的Wistar大鼠20只,其雌性后代60只,根据随机数字表法分为PCOS组和正常组,每组30只.PCOS组给予来曲唑和羧甲基纤维素(CMC)连续灌胃21 d... 详细信息

目的建立多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠模型,探讨卵巢组织中kisspeptin/kiss1r系统表达及作用.方法孕10d的Wistar大鼠20只,其雌性后代60只,根据随机数字表法分为PCOS组和正常组,每组30只.PCOS组给予来曲唑和羧甲基纤维素(CMC)连续灌胃21 d,正常组给予等体积的CMC灌胃.造模结束后检测两组大鼠体重参数和血清激素水平;HE染色检测卵巢组织形态学改变;免疫组织化学染色和qRT-PCR检测卵巢组织中kisspeptin和kiss1r的表达.结果与正常组比较,PCOS组大鼠的体重、腹膜后脂肪含量、卵巢重量均增加,血清黄体生成素、卵泡刺激素和睾酮水平均升高(P< 0.05或P<0.01).与正常组比较,PCOS组大鼠卵巢中kiss1-mRNA表达降低(P<0.05);两组大鼠卵巢中kiss1r-mRNA表达比较,差异无统计学意义(P>0.05).PCOS组大鼠卵巢具有典型的多囊样改变.结论 PCOS大鼠卵巢可见kisspeptin/kiss1r系统的低表达,可能在PCOS的发生、发展中起重要作用.

关键词：多囊卵巢综合征 Kisspeptin/kiss1r系统卵巢来曲唑

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血管内皮生长因子及其受体与Cyclin E-CDK2在肝癌发生发展过程中的表达变化

血管内皮生长因子及其受体与Cyclin E-CDK2在肝癌发生发展过程中...

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第十二届全国组织学与胚胎学青年学术会议

作者：王东李笑岩李红星白咸勇滨州医学院组织胚胎学教研室，山东烟台 264000

目的;通过观察血管内皮生长因子(VEGF)及其受体和细胞周期蛋白E(Cyclin E)在肝癌模型大鼠肝脏中表达情况，探讨VEGF与细胞周期相关蛋白在肝癌发生发展过程中的作用。方法：建立诱发性肝癌模型，采用酶联免疫吸附试验检测血清中VEGF量的... 详细信息

目的;通过观察血管内皮生长因子(VEGF)及其受体和细胞周期蛋白E(Cyclin E)在肝癌模型大鼠肝脏中表达情况，探讨VEGF与细胞周期相关蛋白在肝癌发生发展过程中的作用。方法：建立诱发性肝癌模型，采用酶联免疫吸附试验检测血清中VEGF量的变化，免疫组化技术检测VEGFRl、Cyclin E和细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK2)的表达情况。结果：血清中的VEGF含量在对照组中最低，在实验组中逐渐增多，以癌变期含量最高。VEGFRl、Cyclin E和CDK2蛋白表达的平均光密度值均随着肝癌的发生发展有增高的趋势。大鼠血清中的VEGF量与肝脏组织中VEGFRl、Cyclin E和CDK2蛋白表达的平均光密度值随着肝癌的发生发展呈正相关(r=0.834，F=42.1274，P<0.05)。结论：VEGF及其受体VEGFRl在肝癌发生发展中异常表达，促进肝癌的发生发展，可能与CyclinE、CDK2细胞周期蛋白异常表达有关。

关键词：肝肿瘤血管内皮生长因子细胞表达

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羟基红花黄色素A抑制H22小鼠肝癌移植瘤血管生成及减少MMP-3的表达

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基础医学与临床 2017年第1期37卷 71-75页

作者：张静宇杨芳芳李京敏刘春晓白咸勇滨州医学院基础医学院人体解剖与组织胚胎学教研室山东烟台264000

目的研究红花组分羟基红花黄色素A(HSYA)对H22小鼠肝癌移植瘤组织新血管生成的抑制作用及对基质金属蛋白酶-3(MMP-3)的影响。方法建立H22小鼠肝癌移植瘤模型,第2天将小鼠随机分为对照组、索拉非尼组及HSYA组(1.125和2.25 mg/kg),HE观察... 详细信息

目的研究红花组分羟基红花黄色素A(HSYA)对H22小鼠肝癌移植瘤组织新血管生成的抑制作用及对基质金属蛋白酶-3(MMP-3)的影响。方法建立H22小鼠肝癌移植瘤模型,第2天将小鼠随机分为对照组、索拉非尼组及HSYA组(1.125和2.25 mg/kg),HE观察肝癌移植瘤组织病理;用免疫组织化学法检测肿瘤组织中CD34的表达,计数微血管密度(MVD);免疫组化和Western blot分别检测瘤组织中MMP-3的表达。结果与对照组相比,HSYA组(1.125和2.25 mg/kg)的MVD显著降低(P<0.01),MMP-3蛋白在移植瘤组织中的表达明显减少(P<0.01),以HSYA组(2.25 mg/kg)效果最为显著,但不及索拉非尼组。结论 HSYA在一定浓度范围内抑制H22小鼠肝癌移植瘤血管生成,其作用可能与降低基质金属蛋白酶-3的蛋白表达有关。

关键词：羟基红花黄色素A 基质金属蛋白酶-3 肝细胞癌肿瘤血管生成

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pre-hsa-miR-98对卵巢癌细胞增殖活性抑制的影响

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医学研究生学报 2011年第7期24卷 691-695页

作者：王甜甜霍冠华滨州医学院组织学与胚胎学教研室烟台医学硕士研究生264003

目的卵巢癌的死亡率占各类妇科恶性肿瘤的首位,对女性患者的生命造成严重威胁。miR-98可抑制多种癌细胞增殖,但未见关于其应用于卵巢癌治疗的报道。文中为探讨卵巢癌治疗的新方法,用pre-hsa-miR-98转染卵巢癌SKOV3、HO8910和A2780细胞,... 详细信息

目的卵巢癌的死亡率占各类妇科恶性肿瘤的首位,对女性患者的生命造成严重威胁。miR-98可抑制多种癌细胞增殖,但未见关于其应用于卵巢癌治疗的报道。文中为探讨卵巢癌治疗的新方法,用pre-hsa-miR-98转染卵巢癌SKOV3、HO8910和A2780细胞,观察转染率并研究转染后对卵巢癌细胞的增殖抑制作用。方法利用构建的pre-hsa-miR-98质粒HmiR和连接随机序列的质粒CmiR转染人卵巢癌细胞SKOV3、HO8910和A2780细胞,荧光显微镜与流式细胞仪计数计算转染率,MTT法检测细胞增殖抑制率与细胞计数绘制生长曲线研究转染对卵巢癌细胞的增殖抑制作用。结果转染HmiR后,荧光显微镜观察和流式细胞术计数结果显示SKOV3、HO8910、A2780细胞的转染率均在60%左右。转染HmiR后,MTT法检测SKOV3、HO8910、A2780细胞的增殖抑制率随转染时间延长而增加,72 h分别达到49.54%、53.25%、46.09%。生长曲线显示在72 h及96 h抑制率达到高峰,随后随时间延长抑制率不再显著升高。结论 3种卵巢癌细胞的转染率达到实验要求,HmiR转染后可抑制卵巢癌细胞增殖,其抑制作用随转染时间延长而增强。

关键词： miR-98 卵巢癌细胞转染率增殖抑制

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食源性肥胖大鼠弓状核神经肽Y和GnRH的变化及对卵泡发育的影响

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滨州医学院学报 2011年第3期34卷 175-178页

作者：赵方欣张洪芹烟台开发区医院烟台市264003 滨州医学院组织学与胚胎学教研室

目的观察食源性肥胖大鼠弓状核神经肽Y和促性腺激素释放激素(GnRH)的变化及对卵泡发育的影响,为肥胖所致不孕提供实验依据。方法刚断乳SD雌性大鼠,饲以自制高能饲料,喂养14周后,根据Lee’s指数及连续阴道涂片,筛选出肥胖不孕模型;另有... 详细信息

目的观察食源性肥胖大鼠弓状核神经肽Y和促性腺激素释放激素(GnRH)的变化及对卵泡发育的影响,为肥胖所致不孕提供实验依据。方法刚断乳SD雌性大鼠,饲以自制高能饲料,喂养14周后,根据Lee’s指数及连续阴道涂片,筛选出肥胖不孕模型;另有饲普通饲料组为对照组。观察神经肽Y(NPY)、瘦素受体(ob-R)及促性腺激素释放激素(GnRH)在其下丘脑弓状核的表达情况,并测定血清雌二醇(E2)、睾酮(T)、瘦素(leptin)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)的水平。结果肥胖不孕大鼠血清E2、T、leptin水平较对照组明显升高(P(0.05),FSH、LH水平较对照组明显降低(P(0.05);下丘脑弓状核NPY表达较对照组增强(P(0.05);ob-R及GnRH表达较对照组均减弱(P(0.05)。结论食源性肥胖大鼠由于神经内分泌-代谢失调引起NPY表达增强GnRH水平降低,导致下丘脑-垂体-卵巢轴功能失调性无排卵引起不孕。

关键词：神经肽Y 促性腺激素释放激素肥胖不孕大鼠

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针刺对备用背根节神经元CNTF和PDGF表达的影响

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解剖学研究 2008年第2期30卷 122-126页

作者：张连双张洪芹赵伟章为王廷华滨州医学院烟台校区组织与胚胎学教研室山东烟台264003 四川大学华西基础与法医学院组织胚胎与神经生物学教研室四川成都610041

目的探讨部分去背根后针刺对备用背根节神经元睫状神经营养因子(CNTF)及血小板源性生长因子(PDGF)表达的影响。方法制备猫双侧备用背根模型(切除双侧L1～L5、L7～S2背根节,保留L6背根节为备用背根节)。针刺位于右侧备用根支配区的两组... 详细信息

目的探讨部分去背根后针刺对备用背根节神经元睫状神经营养因子(CNTF)及血小板源性生长因子(PDGF)表达的影响。方法制备猫双侧备用背根模型(切除双侧L1～L5、L7～S2背根节,保留L6背根节为备用背根节)。针刺位于右侧备用根支配区的两组穴位。针刺7d及14d后取备用背根节用CNTF抗血清(1∶500)及PDGF抗血清(1∶200)行免疫组织化学ABC法染色。分别记数各组阳性总、大及中小神经元的数量。结果正常组左右L6背根节的细胞数无差异,CNTF、PDGF阳性神经元数在7d、14d时与正常组比较无差异。针刺侧CNTF阳性总、大及中小神经元数在针刺7d时均显著多于非针刺侧(P<0.05),而针刺14d时,只有阳性大神经元数多于非针刺侧(P<0.05)。PDGF阳性总及大神经元数针刺7d时多于非针刺侧(P<0.05),针刺14d时,阳性总及中小神经元多于非针刺侧(P<0.05)。结论针刺可促进去背根后备用背根节CNTF、PDGF的表达,这种促进作用显效的时间因不同因子和不同种类的背根节神经元而异。

关键词：睫状神经营养因子血小板源性生长因子针刺备用背根节猫

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Kisspeptin/Kiss1r系统在多囊卵巢综合症大鼠下丘脑弓状核的表达

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中国计划生育学杂志 2014年第5期22卷 304-308,313页

作者：骆倩倩刘冉冉张冬梅张洪芹山东省滨州医学院组织胚胎学教研室烟台264003 山东省滨州医学院附属医院生殖医学中心

目的:通过构建多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠模型,探讨其下丘脑弓状核Kisspeptin/kiss1r系统和促性腺激素释放激素(GnRH)的表达变化及相互作用。方法:孕10dWistar大鼠雌性后代随机分为对照组和PCOS组。采用来曲唑构建大鼠PCOS模型。造模结束... 详细信息

目的:通过构建多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠模型,探讨其下丘脑弓状核Kisspeptin/kiss1r系统和促性腺激素释放激素(GnRH)的表达变化及相互作用。方法:孕10dWistar大鼠雌性后代随机分为对照组和PCOS组。采用来曲唑构建大鼠PCOS模型。造模结束后,测定体重参数和内分泌激素的改变;观察卵巢组织的病理学改变;同时用免疫组织化学、免疫印迹法和实时荧光定量PCR检测下丘脑弓状核Kisspeptin、Kiss1r和GnRH的蛋白和各自mRNA水平。结果:成功构建PCOS大鼠模型,体重增加(P<0.05),体脂肪含量增加(P<0.05),血清黄体生成激素(LH)和睾酮(T)水平增加显著(P<0.01),具有典型的PCOS内分泌和卵巢的改变;与对照组相比,PCOS组GnRH的蛋白和mRNA表达显著增加(P<0.01),Kisspeptin蛋白和其mRNA表达下调(P<0.05),未见Kiss1r蛋白和其mRNA表达的显著改变(P>0.05)。结论:大鼠下丘脑弓状核Kisspeptin/Kiss1r系统表达下调,GnRH表达异常增加,与PCOS的神经内分泌有关,可能在PCOS疾病的发生发展中有着重要的作用。

关键词： Kisspeptin/Kiss1r系统多囊卵巢综合征弓状核来曲唑动物模型

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