检索结果-内蒙古大学图书馆

肿瘤防治研究 2009年第4期36卷 306-309页

作者：孔丽君胡金霞杨东霞张菡菡于媛滨州医学院生物化学与分子生物学教研室山东烟台264003 滨州医学院病理学教研室山东烟台264003

目的探讨转录因子Elf-1与凋亡抑制因子survivin在非小细胞肺癌中的表达及它们与临床病理因素之间的关系。方法收集72例非小细胞肺癌组织,应用组织芯片仪制备组织芯片,采用免疫组化PowerVisionTM-9000(PV-9000)法检测Elf-1、survivin的... 详细信息

目的探讨转录因子Elf-1与凋亡抑制因子survivin在非小细胞肺癌中的表达及它们与临床病理因素之间的关系。方法收集72例非小细胞肺癌组织,应用组织芯片仪制备组织芯片,采用免疫组化PowerVisionTM-9000(PV-9000)法检测Elf-1、survivin的表达。结果在72例非小细胞肺癌组织中,Elf-1阳性染色定位于肺癌细胞核及胞质,阳性表达53例(73.61%),其表达强度与非小细胞肺癌的分化程度有关(χ2=14.849,P=0.021)。不同临床分期的非小细胞肺癌组织中Elf-1表达强度差异有统计学意义(χ2=24.127,P=0.000),Elf-1表达强度在淋巴结有转移组显著高于淋巴结无转移组(χ2=18.342,P=0.000);survivin阳性染色定位于肺癌细胞核及胞质,阳性表达44例(61.11%),其表达强度与非小细胞肺癌的分化程度有关(χ2=16.251,P=0.012),不同临床分期的非小细胞肺癌组织中sur-vivin表达强度差异有统计学意义(χ2=20.570,P=0.000),survivin表达强度在淋巴结有转移组显著高于淋巴结无转移组(χ2=8.723,P=0.033);非小细胞肺癌组织中Elf-1与survivin的表达强度呈极显著性正相关(τ=0.255,P<0.05)。结论Elf-1的表达强度与survivin的表达程度密切相关,均与肺癌细胞分化程度、临床分期及淋巴结转移有关,提示两者均可成为评估非小细胞肺癌生物学行为的重要指标。

关键词：非小细胞肺癌膜附着型本体A2 蛋白质阵列分析免疫组织化学

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LBL联合PBL应用于生物技术制药教学中的构想

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中华医学教育探索杂志 2014年第8期13卷 793-796页

作者：张静张秀丽姜静徐茂磊滨州医学院药学院生物制药教研室烟台264003

比较并讨论了基于课堂的学习（1ecture-basedlearning，LBL）和以问题为基础的学习（problem-based learning，PBL）的应用现状及存在问题，提出LBL联合PBL应用于生物技术制药教学中的改革构想。拟将LBL主要应用于生物技术药物研发及制... 详细信息

比较并讨论了基于课堂的学习（1ecture-basedlearning，LBL）和以问题为基础的学习（problem-based learning，PBL）的应用现状及存在问题，提出LBL联合PBL应用于生物技术制药教学中的改革构想。拟将LBL主要应用于生物技术药物研发及制造中基本原理的授课,PBL主要应用于典型药物实例生产工艺的授课，并对实施过程中LBL和PBL的学时分配、PBL教学案例的设计与实施以及合理教学评价体系的建立三个关键点进行阐述。二者联合教学有望培养学生的自主学习能力、综合分析能力和团队合作能力，适应当前市场发展对生物制药人才的需求。

关键词：基于课堂的学习以问题为基础的学习联合教学生物技术制药

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细菌性含气型肝脓肿两例声像图分析

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中华超声影像学杂志 1993年第1期2卷 49-49页

作者：王新明曲云英滨州医学院微生物学教研室滨州市 256603 滨州医学院附属医院B超室

细菌性含气型肝脓肿声像图表现,国内未见报道,其脓肿内气体回声对诊断细菌性肝脓肿以及与阿米巴肝脓肿或癌肿等非炎症性疾病的鉴别有较大参考价值,现报告二例如下: 例1:男,56岁,以胆石症术后1年,右上腹痛疼伴发热半月入院。X线胸片示右... 详细信息

细菌性含气型肝脓肿声像图表现,国内未见报道,其脓肿内气体回声对诊断细菌性肝脓肿以及与阿米巴肝脓肿或癌肿等非炎症性疾病的鉴别有较大参考价值,现报告二例如下: 例1:男,56岁,以胆石症术后1年,右上腹痛疼伴发热半月入院。X线胸片示右侧膈肌明显升高,膈下见较大气液平面。诊断:右侧膈下脓肿,间位结肠不能除外。声像图(见图1)示肝右叶增大,右后叶见约10cm×11cm×13cm光团回声,壁厚不规则,边

关键词：声像图表现细菌性肝脓肿气体回声回声光团含气

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幽门螺杆菌定植因子HpPrtC胶原蛋白酶的异源表达及其功能活性研究

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中国病原生物学杂志 2018年第9期13卷 958-962页

作者：赵慧琳吴玉龙荣倩玉徐正丁雲飞张玉梅乔媛媛李波清季晓飞滨州医学院病原生物学教研室山东烟台264003

目的异源表达幽门螺杆菌HpPrtC胶原蛋白酶,并检测其对胶原蛋白的降解活性。方法根据幽门螺杆菌基因组信息中编号hp0169基因的序列设计引物,PCR扩增HpPrtC基因的核苷酸序列,经NdeI和XhoI酶切后构建原核表达载体pET-22b(+)-HpPrtC,转化至*... 详细信息

目的异源表达幽门螺杆菌HpPrtC胶原蛋白酶,并检测其对胶原蛋白的降解活性。方法根据幽门螺杆菌基因组信息中编号hp0169基因的序列设计引物,PCR扩增HpPrtC基因的核苷酸序列,经NdeI和XhoI酶切后构建原核表达载体pET-22b(+)-HpPrtC,转化至*** BL21(DE3),经IPTG诱导表达后采用亲和层析法纯化重组蛋白,通过检测重组酶处理胶原蛋白后L-亮氨酸的产生量表征其胶原蛋白降解活性。结果 HpPrtC基因编码422个氨基酸,与已知PrtC家族蛋白酶氨基酸序列比对最高相似性<40%。克隆HpPrtC基因连接入表达质粒pET-22b(+),将测序正确的表达质粒pET-22b(+)-HpPrtC转化至感受态细胞BL21(DE3),经IPTG诱导表达相对分子质量约为47×103的可溶性蛋白,与预期相符。经亲和层析纯化后的重组蛋白酶降解热变性I型胶原蛋白(可溶、不可溶)和天然I型胶原蛋白的活性分别为922.2±36.2、1168.8±65.6和674.0±13.4,与幽门螺杆菌培养液中胶原蛋白酶对可溶热变性I型胶原蛋白、不可溶热变性I型胶原蛋白和天然I型胶原蛋白活性分别为205.6±21.5、228.4±19.3和123.2±14.5一致。结论幽门螺杆菌定植因子HpPrtC为胶原蛋白酶。通过大肠埃希菌异源表达的重组HpPrtC蛋白具有胶原蛋白酶解活性,为探索该酶在幽门螺杆菌感染定植中的作用机制奠定了基础。

关键词：幽门螺杆菌胶原蛋白酶异源表达胶原蛋白

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幽门螺杆菌在两种液体培养基中生长规律的探讨

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中国病原生物学杂志 2017年第8期12卷 738-740页

作者：荣倩玉李娇娇季晓飞张莹耿丽李波清滨州医学院病原生物学教研室山东烟台264003

目的分别用血清脑心浸液和β-环糊精脑心浸液两种培养基培养幽门螺杆菌,观察幽门螺杆菌在两种培养基中的生长规律。方法将幽门螺杆菌分别接种于血清脑心浸液和β-环糊精脑心浸液中,置37℃微需氧环境以120r/min震摇培养,于不同时间点以... 详细信息

目的分别用血清脑心浸液和β-环糊精脑心浸液两种培养基培养幽门螺杆菌,观察幽门螺杆菌在两种培养基中的生长规律。方法将幽门螺杆菌分别接种于血清脑心浸液和β-环糊精脑心浸液中,置37℃微需氧环境以120r/min震摇培养,于不同时间点以稀释平板计数法计数活菌数量,制作生长曲线。结果幽门螺杆菌在血清脑心浸液和β-环糊精脑心浸液中的迟缓期均为10h,对数期分别为45h和40h,对数中期时比生长速率分别为0.058/h和0.043/h,稳定期分别为15h和20h,最高浓度分别为2.067×10~8 CFU/ml和1.378×10~8 CFU/ml。结论幽门螺杆菌在血清脑心浸液和β-环糊精脑心浸液中均生长良好,其中在血清脑心浸液中最高生长密度更大,对数期维持时间较长。

关键词：幽门螺杆菌 β-环糊精血清脑心浸液

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基因敲除质粒载体的构建及其在幽门螺杆菌基因敲除中的应用

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中国病原生物学杂志 2016年第12期11卷 1066-1069,1073页

作者：季晓飞赵慧琳张莹柏雪莲张艳丽荣倩玉李波清滨州医学院病原生物学教研室山东烟台264003

目的构建用于幽门螺杆菌(helicobacter pylori,Hp)同源重组双交换基因敲除的质粒载体,实现Hp内基因的快速敲除。方法以质粒pLYL03为骨架,重新排列质粒上的基因元件以减少冗余序列,用卡那霉素抗性基因(aphA)替换原质粒上的红霉素抗性基... 详细信息

目的构建用于幽门螺杆菌(helicobacter pylori,Hp)同源重组双交换基因敲除的质粒载体,实现Hp内基因的快速敲除。方法以质粒pLYL03为骨架,重新排列质粒上的基因元件以减少冗余序列,用卡那霉素抗性基因(aphA)替换原质粒上的红霉素抗性基因作为抗性筛选标记,在抗性筛选标记两端构建多克隆位点用于同源重组同源臂的插入,由此构建用于Hp同源重组双交换基因敲除的质粒载体pSJHK。以质粒pSJHK为载体构建hp0169基因的同源重组双交换敲除质粒pSJHK-0169,通过电击转化方法将敲除质粒pSJHK-0169转入Hp中,用卡那霉素筛选转化子。结果以质粒pLYL03为基础构建用于Hp同源重组双交换基因敲除的质粒载体pSJHK,大小4 371bp。以基因hp0169作为目标基因构建同源重组双交换敲除质粒pSJHK-0169,经电击转化Hp中,获得卡那霉素抗性阳性转化子,测序确证基因敲除成功。结论构建的基因敲除质粒载体pSJHK实现了对Hp中目标基因的敲除,为Hp新基因功能研究和致病因子的发掘提供了有效的基因操作工具。

关键词：幽门螺杆菌基因敲除质粒同源重组

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幽门螺杆菌hp0788基因对GES-1细胞功能影响的初步研究

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中国病原生物学杂志 2017年第7期12卷 614-618页

作者：李娇娇荣倩玉季晓飞张莹赵慧琳周秀芝李波清滨州医学院病原生物学教研室山东烟台264003

目的构建幽门螺杆菌ATCC26695hp0788基因敲除突变菌株(ATCC26695△0788km),观察hp0788基因对GES-1细胞功能的影响。方法以基因敲除质粒载体pSJHK构建基因敲除质粒,在hp0788基因的上下游分别扩增800~1100bp的基因片段作为同源臂,经限制... 详细信息

目的构建幽门螺杆菌ATCC26695hp0788基因敲除突变菌株(ATCC26695△0788km),观察hp0788基因对GES-1细胞功能的影响。方法以基因敲除质粒载体pSJHK构建基因敲除质粒,在hp0788基因的上下游分别扩增800~1100bp的基因片段作为同源臂,经限制性内切酶酶切后与质粒载体连接构建基因敲除质粒pSJHK-0788,通过电击转化构建hp0788基因敲除突变菌株,以FITC标记法检测其对GES-1细胞黏附能力的影响;以感染复数(MOI)为200:1构建幽门螺杆菌与GES-1细胞共培养体系,比较ATCC26695和ATCC26695△0788km对GES-1细胞凋亡及活性的影响。结果构建了hp0788基因双交换敲除质粒,电击转化获得hp0788基因敲除突变菌株。FITC标记ATCC26695和幽门螺杆菌ATCC26695△0788km与GES-1细胞混匀后采用流式细胞术检测FITC的荧光强度,ATCC26695组的黏附率记为100%,ATCC26695△0788km组黏附率为90.40%,差异均有统计学意义(t=2.80,P<0.05);ATCC26695与ATCC26695△0788km分别与GES-1细胞共培养8h和16h,流式细胞术检测细胞凋亡率分别为(15.73±7.84)%、(25.26±5.81)%和(12.46±12.30)%、(21.13±10.09)%,细胞增殖-毒性检测试剂盒检测细胞活力分别为53%、40%和66%、50%,差异均有统计学意义(t值分别为3.30,2.80,-2.93,-2.76,P<0.05)。结论hp0788基因敲除幽门螺杆菌ATCC26695对GES-1细胞的黏附率下降,并使GES-1凋亡率下降,而细胞活力增高。表明hp0788基因是影响幽门螺杆菌ATCC26695感染GES-1细胞后引起细胞凋亡和活性变化的重要基因。

关键词：幽门螺杆菌基因敲除黏附细胞凋亡细胞活力

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分子伴侣幽门螺杆菌Hsp60与UreB的相互作用分析

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中国病原生物学杂志 2016年第11期11卷 977-981页

作者：赵慧琳季晓飞张艳丽柏雪莲李娇娇陈醒醒张玉梅李波清滨州医学院病原生物学教研室山东烟台264003

目的检测并分析幽门螺杆菌(Hp)尿素酶β亚基(UreB)与Hsp60之间的相互作用。方法克隆Hp 26695的尿素酶β亚基基因(UreB)融合GST标签和Hsp60基因融合His标签,分别在大肠埃希菌中进行异源表达。提取两种蛋白,采用pull-down方法检测两者间... 详细信息

目的检测并分析幽门螺杆菌(Hp)尿素酶β亚基(UreB)与Hsp60之间的相互作用。方法克隆Hp 26695的尿素酶β亚基基因(UreB)融合GST标签和Hsp60基因融合His标签,分别在大肠埃希菌中进行异源表达。提取两种蛋白,采用pull-down方法检测两者间的相互作用。利用Modeller 9v2软件,以***的GroEL为基础模建Hp Hsp60的三维结构,再与已知的UreB结构利用AutoDock 4.2软件进行分子共模拟,分析二者的相互作用面和关键氨基酸。结果构建了Hp Hsp60和尿素酶β亚基(UreB)的大肠埃希菌异源表达体系并获得纯化蛋白;Pull-down试验显示部分未融合GST标签的Hsp60出现在GST-UreB的洗脱液中,表明Hsp60与GST-UreB之间存在相互作用;以***的GroEL为基础模建了Hp Hsp60的三维结构,利用docking技术构建UreB与Hp Hsp60的相互作用模型,发现其主要的相互作用面位于Hsp60的α9与UreB的α2之间,其可能形成氢键的关键位点为UreB的α2上的T147氨基酸与Hsp60的α9上的E237、K238。结论 Hp Hsp60能直接与尿素酶β亚基(UreB)相互作用,Hsp60可能通过这种相互作用在UreB成熟过程中发挥分子伴侣功能。这为阐明Hp尿素酶的组装与成熟机制奠定了基础。

关键词：幽门螺杆菌尿素酶 Hsp60 分子伴侣相互作用

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ILK对幽门螺杆菌诱导胃上皮细胞GES-1凋亡的影响

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中国病原生物学杂志 2018年第8期13卷 819-822,826页

作者：徐正丁雲飞荣倩玉吴玉龙赵慧琳季晓飞张莹李波清滨州医学院病原生物学教研室山东烟台264003

目的探讨ILK在幽门螺杆菌诱导胃上皮细胞GES-1凋亡中的作用。方法体外培养GES-1细胞,随机分为空白对照组、Cpd22组和Hp组。采用罗丹明-鬼笔环肽检测不同浓度ILK抑制剂Cpd22对胃上皮细胞形态及细胞骨架改变的影响;Cpd22作用于GES-1细胞1h... 详细信息

目的探讨ILK在幽门螺杆菌诱导胃上皮细胞GES-1凋亡中的作用。方法体外培养GES-1细胞,随机分为空白对照组、Cpd22组和Hp组。采用罗丹明-鬼笔环肽检测不同浓度ILK抑制剂Cpd22对胃上皮细胞形态及细胞骨架改变的影响;Cpd22作用于GES-1细胞1h后,Western blot检测细胞内ILK表达情况;Hp与Cpd22作用1h的GES-1细胞共培养(MOI=100∶1)24h后,采用流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot检测凋亡相关蛋白Caspase-3、PARP表达情况。结果与空白对照组相比,Cpd22浓度为2μmol/L时细胞形态变圆,间隙变大,细胞外缘伪足减少,细胞无法正常伸展。空白对照组与Cpd22组ILK相对表达量分别为0.83±0.01、0.74±0.01,比较差异有统计学意义(t=5.65,P<0.05)。空白对照组、Cpd22组、Hp组细胞凋亡率分别为(6.53±2.78)%、(21.13±5.60)%、(14.07±3.97)%,比较差异有统计学意义(t值分别为-5.52和-6.83,P<0.05);Caspase-3相对表达量分别为0.63±0.07、0.95±0.14、0.88±0.11,差异均有统计学意义(t值分别为-5.44和-5.88,P<0.05);PARP的相对表达量分别为1.17±0.07、0.93±0.16、1.09±0.12,差异有统计学意义(t值分别为3.32和3.46,P<0.05)。Cpd22与Hp共作用组细胞凋亡率为(30.37±5.17)%,Caspase-3的相对表达量为1.07±0.10,PARP的相对表达量为0.86±0.07,与Cpd22组比较差异均有统计学意义(t值分别为4.90、2.85和6.70,P<0.05)。结论抑制ILK表达可增强Hp诱导GES-1细胞凋亡的作用,其机制可能与细胞骨架重排和Caspase-3的表达有关。

关键词：幽门螺杆菌细胞凋亡 GES-1细胞 ILK Cpd22

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葛根素对慢性酒精中毒小鼠结肠组织Cajal间质细胞和C-kit蛋白表达的影响

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吉林大学学报（医学版） 2014年第3期40卷 588-592,I0005页

作者：夏白娟崔淑芹贵阳医学院基础医学院组织学与胚胎学教研室贵州贵阳550004 德州学院生物制药系山东德州253023

目的:通过检测慢性酒精中毒及葛根素预处理后的小鼠结肠Cajal间质细胞(ICC)形态、数量以及C-kit蛋白表达的变化,探讨葛根素对酒精中毒小鼠结肠组织的保护作用。方法:选取健康雄性BALB/C小鼠24只,随机分为盐水对照组、慢性酒精中毒组和... 详细信息

目的:通过检测慢性酒精中毒及葛根素预处理后的小鼠结肠Cajal间质细胞(ICC)形态、数量以及C-kit蛋白表达的变化,探讨葛根素对酒精中毒小鼠结肠组织的保护作用。方法:选取健康雄性BALB/C小鼠24只,随机分为盐水对照组、慢性酒精中毒组和葛根素预处理组,每组8只。慢性酒精中毒组和葛根素预处理组小鼠建立慢性酒精中毒动物模型。通过测量印度墨汁推进长度测定肠道传输速率,应用免疫荧光和透射电镜技术检测ICC分布、数量以及超微结构的改变,采用Western blotting方法分析C-kit蛋白的表达。结果:葛根素预处理组肠道传输速率较慢性酒精中毒组明显增加(P<0.05),但仍低于盐水对照组(P<0.05);葛根素预处理组结肠内ICC的数量较慢性酒精中毒组增多(P<0.05),与盐水对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);与盐水对照组比较,慢性酒精中毒组小鼠结肠ICC的超微结构发生明显改变,线粒体等细胞器明显减少,葛根素预处理组小鼠结肠ICC的超微结构基本恢复正常,线粒体等细胞器明显增加;葛根素预处理组小鼠结肠组织中C-kit蛋白表达水平明显高于慢性酒精中毒组(P<0.05),与盐水对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:葛根素干预对酒精造成的Cajal间质细胞数量、超微结构及C-kit表达的改变有一定的修复或逆转作用。

关键词：葛根素慢性酒精中毒 Cajal间质细胞 C-kit蛋白超微结构结肠

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