检索结果-内蒙古大学图书馆

山东医药 2017年第39期57卷 1-5页

作者：郑志明邹海鹏林碧华龙冰清中山市小榄人民医院广东中山528415 滨州医学院烟台附属医院广东医科大学生物化学与分子生物学教研室广东省医学分子诊断重点实验室

目的观察顺铂耐药的肝癌细胞中p62的表达情况,及p62基因沉默后耐药肝癌细胞对顺铂敏感性的变化。方法培养肝癌亲本细胞Hep G2、Huh7,通过浓度梯度法建立顺铂耐药细胞模型,采用Western blotting法检测亲本Hep G2、Huh7细胞和耐药Hep G2、... 详细信息

目的观察顺铂耐药的肝癌细胞中p62的表达情况,及p62基因沉默后耐药肝癌细胞对顺铂敏感性的变化。方法培养肝癌亲本细胞Hep G2、Huh7,通过浓度梯度法建立顺铂耐药细胞模型,采用Western blotting法检测亲本Hep G2、Huh7细胞和耐药Hep G2、Huh7细胞中的p62蛋白。将耐药Hep G2、Huh7细胞分为沉默组和耐药组,分别转染p62 siRNA和siRNA Negative Control。在转染48 h后的0、1、2、3、4、5 d测算沉默组和耐药组细胞存活率。转染后48 h进行Hochest 33258染色观察沉默组和耐药组细胞凋亡核形态、计数凋亡细胞,采用Annexin VFITC/PI流式细胞术测算细胞凋亡率。转染后48 h采用Western blotting法检测沉默组与耐药组细胞中的核因子红细胞前体2相关因子2(Nrf2),RT-PCR法检测Nrf2蛋白下游的谷氨酸半胱氨酸合成酶(GCL)、谷胱甘肽S转移酶(GST)、NADP(H)醌氧化还原酶(NQO1)、血红素氧化酶1(HO-1)、多药耐药蛋白(Mrp)基因。结果耐药的Hep G2、Huh7细胞中p62蛋白相对表达量分别高于亲本Hep G2、Huh7细胞(P均<0.05)。转染48 h后的0、1、2、3、4、5 d沉默组Hep G2、Huh7细胞存活率低于耐药组(P均<0.05)。沉默组凋亡细胞数及凋亡率均高于耐药组(P均<0.05)。沉默组细胞中Nrf2蛋白及NQO1、GCL、GST、HO-1、Mrp mRNA相对表达量均低于耐药组(P均<0.05)。结论顺铂耐药的肝癌细胞中p62蛋白表达上调;p62基因沉默后耐药肝癌细胞对顺铂的敏感性增强,其机制可能与Nrf2及其下游基因表达下调有关。

关键词：肝癌肝癌细胞耐药顺铂 p62 基因沉默核因子红细胞前体2相关因子2

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

LAIR-1 siRNA对幽门螺杆菌诱导单核细胞THP-1凋亡的影响

引用

中国病原生物学杂志 2016年第8期11卷 690-695页

作者：孙辉张莹季晓飞陈醒醒李娇娇李波清滨州医学院病原生物学教研室山东烟台264003

目的研究LAIR-1基因沉默对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori)诱导单核细胞THP-1凋亡的影响。方法以Hp ATCC26695分别感染THP-1细胞6、12、24和48h,采用流式细胞术检测细胞凋亡及LAIR-1蛋白的表达。应用Lipofectamine RNAiMAX转染3对LAIR-1siRNAs入单核细胞THP-1中,采用半定量RT-PCR及流式细胞术检测沉默效应,筛选出的较有效的一对siRNA再转染入单核细胞THP-1,48h后加入Hp培养24h,采用流式细胞术检测细胞凋亡率。结果 Hp感染THP-1细胞6、12、24和48h后的细胞凋亡率分别为(84±1.77)%、(69.13±4.29)%、(48.3±3.37)%和(21.1±4.67)%,LAIR-1蛋白表达相对荧光强度分别为14 934±178、14 369±244、12 259±523和7438±539;转染后48h较有效的siRNA对LAIR-1mRNA及蛋白沉默效率分别为(39.1±4.67)%和(38.4±3.18)%;将筛选出的siRNA转染细胞48h后,用Hp感染24h,流式细胞仪检测显示转染组与阴性对照组细胞凋亡率分别为(56.1±9.8)%和(36.9±3.2)%,转染后感染组与空白组LAIR-1蛋白表达相对荧光强度分别为12 181±219和10 228±136。结论在Hp感染细胞THP-1 48h内,随着感染时间延长LAIR-1的表达及THP-1细胞凋亡率显著降低即LAIR-1siRNA能抑制LAIR-1的表达及THP-1细胞的凋亡。

关键词：幽门螺杆菌单核细胞凋亡白细胞相关免疫球蛋白样受体-1 小分子干扰RNA

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

华支睾吸虫parkin蛋白的分子生物学特征研究

引用

中国病原生物学杂志 2016年第7期11卷 643-648页

作者：柏雪莲李波清张玉梅张艳丽耿丽杜镇镇赵慧琳滨州医学院病原生物学教研室山东烟台256603

目的了解华支睾吸虫Parkin蛋白(Clonorchis sinensis Parkin)的生物学特性。方法从华支睾吸虫cDNA文库获得Parkin的cDNA全长,NCBI搜索与之相似度高的基因序列,预测其所含结构域和功能;应用MEGA5程序对来自GenBank中与之有较高相似度的... 详细信息

目的了解华支睾吸虫Parkin蛋白(Clonorchis sinensis Parkin)的生物学特性。方法从华支睾吸虫cDNA文库获得Parkin的cDNA全长,NCBI搜索与之相似度高的基因序列,预测其所含结构域和功能;应用MEGA5程序对来自GenBank中与之有较高相似度的基因序列进行分析,构建基因进化树;原核表达重组融合蛋白CsParkin,纯化后免疫Blab/c小鼠,获得多克隆抗体,采用Western blot鉴定天然CsParkin;采用qRT-PCR测定CsParkin基因在不同发育阶段的表达水平。结果 CsParkin蛋白含有5个结构域,分别是Ubl、RING0、RING1、IBR和RING2,具有典型的Parkin蛋白结构;该蛋白与人及各种动物的Parkin有很高的相似度,与其他吸虫有更近的进化关系;Western blot显示原核表达的重组CsParkin,与天然CsParkin分子质量相同,均为45.7ku;CsParkin在囊蚴中的表达量高于成虫;免疫组化显示CsParkin主要分布于成虫受精囊中的精子及口吸盘和睾丸,在囊蚴中广泛分布。结论肝吸虫CsParkin属蛋白于保守蛋白,具有典型的泛素连接酶3的功能结构,推测其在蛋白的泛素化中起到作用,可能在华支睾吸虫的生长过程中发挥作用。

关键词：华支睾吸虫 Parkin 泛素连接酶

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

整合素β1亚基对幽门螺杆菌感染胃上皮细胞GES-1凋亡及增殖的影响

引用

中国病原生物学杂志 2016年第10期11卷 888-892,896页

作者：陈醒醒张莹孙辉李娇娇张艳丽李波清滨州医学院病原生物学教研室山东烟台264003

目的分析幽门螺杆菌感染胃上皮细胞过程中整合素β1亚基表达的变化,观察整合素β1对幽门螺杆菌感染胃上皮细胞GES-1凋亡及增殖的影响。方法将幽门螺杆菌与胃上皮细胞GES-1共培养,采用流式细胞术检测整合素β1的表达量变化;应用iRNA技术... 详细信息

目的分析幽门螺杆菌感染胃上皮细胞过程中整合素β1亚基表达的变化,观察整合素β1对幽门螺杆菌感染胃上皮细胞GES-1凋亡及增殖的影响。方法将幽门螺杆菌与胃上皮细胞GES-1共培养,采用流式细胞术检测整合素β1的表达量变化;应用iRNA技术降低胃上皮细胞GES-1中β1亚基的表达;幽门螺杆菌感染胃上皮细胞及iRNA降低β1的表达后,采用流式细胞术检测细胞的凋亡,采用CCK-8法检测细胞增殖情况。结果幽门螺杆菌感染胃上皮细胞12、24、48h后空白对照组凋亡率分别为(10.80±0.71)%、(12.23±0.06)%和(12.30±2.12)%,Hp感染组凋亡率分别为(24.20±0.14)%、(30.05±2.47)%和(26.40±1.91)%,差异均有统计学意义(t值分别为-26.28、-7.701和-12.855,P<0.05);与幽门螺杆菌共培养6、24、48h胃上皮细胞增殖受到抑制,抑制率分别为(35.00±3.22)%、(40.96±2.45)%和(8.00±3.33)%;幽门螺杆菌与胃上皮细胞GES-1共培养24、48h流式细胞术检测整合素β1表达,空白对照组平均荧光强度(MFI)分别为(1616.33±24.70)和(1834.67±17.01),Hp感染组为(1484.00±60.89)和(1376.00±14.11),差异有统计学意义(t值分别为3.488和35.95,P<0.05);应用iRNA技术降低胃上皮细胞GES-1整合素β1亚基表达24、48h,对照组凋亡率分别为(18.75±3.59)%和(39.75±3.68)%,iRNA组凋亡率分别为(26.25±4.11)%和(55.30±5.57)%,差异有统计学意义(t值为-2.746和-4.656,P<0.05);胃上皮细胞中β1亚基的表达降低后细胞增殖受到抑制,24、36、48、72h抑制率分别为(6.16±1.07)%、(17.15±2.76)%、(10.84±1.34)%和(21.87±1.72)%。结论幽门螺杆菌能降低胃上皮细胞GES-1整合素β1亚基的表达,而且可能通过降低整合素β1亚基的表达促进上皮细胞GES-1的凋亡并抑制其增殖。

关键词：整合素β1 胃上皮细胞幽门螺杆菌 iRNA

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

精准医学与不确定性

引用

医学与哲学（A） 2016年第1期37卷 27-29页

作者：焦飞谢书阳李有杰李尊岭阎云飞滨州医学院生物化学教研室山东烟台264003

精准医学有其深刻的思想基础和完备的技术支撑,对医学发展现状的深刻反思是其思想基础,生物技术及信息技术的迅猛发展是其技术支撑。精准医学为人类健康水平的提升勾勒出了美好蓝图,为未来医学的发展指明了方向。不确定性具有一定的客观... 详细信息

精准医学有其深刻的思想基础和完备的技术支撑,对医学发展现状的深刻反思是其思想基础,生物技术及信息技术的迅猛发展是其技术支撑。精准医学为人类健康水平的提升勾勒出了美好蓝图,为未来医学的发展指明了方向。不确定性具有一定的客观性,根植于事物本身,人类实践的具体过程实质是通过消除不确定性而达到相对的确定性。作为一种新型的医学实践模式,精准医学同样体现了确定性与不确定性的辩证统一,是一个有着丰富内涵的复杂概念,需要对其进行认真地思考和谨慎地解读。

关键词：精准医学确定性不确定性复杂性

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

基因敲除质粒载体的构建及其在幽门螺杆菌基因敲除中的应用

引用

中国病原生物学杂志 2016年第12期11卷 1066-1069,1073页

作者：季晓飞赵慧琳张莹柏雪莲张艳丽荣倩玉李波清滨州医学院病原生物学教研室山东烟台264003

目的构建用于幽门螺杆菌(helicobacter pylori,Hp)同源重组双交换基因敲除的质粒载体,实现Hp内基因的快速敲除。方法以质粒pLYL03为骨架,重新排列质粒上的基因元件以减少冗余序列,用卡那霉素抗性基因(aphA)替换原质粒上的红霉素抗性基... 详细信息

目的构建用于幽门螺杆菌(helicobacter pylori,Hp)同源重组双交换基因敲除的质粒载体,实现Hp内基因的快速敲除。方法以质粒pLYL03为骨架,重新排列质粒上的基因元件以减少冗余序列,用卡那霉素抗性基因(aphA)替换原质粒上的红霉素抗性基因作为抗性筛选标记,在抗性筛选标记两端构建多克隆位点用于同源重组同源臂的插入,由此构建用于Hp同源重组双交换基因敲除的质粒载体pSJHK。以质粒pSJHK为载体构建hp0169基因的同源重组双交换敲除质粒pSJHK-0169,通过电击转化方法将敲除质粒pSJHK-0169转入Hp中,用卡那霉素筛选转化子。结果以质粒pLYL03为基础构建用于Hp同源重组双交换基因敲除的质粒载体pSJHK,大小4 371bp。以基因hp0169作为目标基因构建同源重组双交换敲除质粒pSJHK-0169,经电击转化Hp中,获得卡那霉素抗性阳性转化子,测序确证基因敲除成功。结论构建的基因敲除质粒载体pSJHK实现了对Hp中目标基因的敲除,为Hp新基因功能研究和致病因子的发掘提供了有效的基因操作工具。

关键词：幽门螺杆菌基因敲除质粒同源重组

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

分子伴侣幽门螺杆菌Hsp60与UreB的相互作用分析

引用

中国病原生物学杂志 2016年第11期11卷 977-981页

作者：赵慧琳季晓飞张艳丽柏雪莲李娇娇陈醒醒张玉梅李波清滨州医学院病原生物学教研室山东烟台264003

目的检测并分析幽门螺杆菌(Hp)尿素酶β亚基(UreB)与Hsp60之间的相互作用。方法克隆Hp 26695的尿素酶β亚基基因(UreB)融合GST标签和Hsp60基因融合His标签,分别在大肠埃希菌中进行异源表达。提取两种蛋白,采用pull-down方法检测两者间... 详细信息

目的检测并分析幽门螺杆菌(Hp)尿素酶β亚基(UreB)与Hsp60之间的相互作用。方法克隆Hp 26695的尿素酶β亚基基因(UreB)融合GST标签和Hsp60基因融合His标签,分别在大肠埃希菌中进行异源表达。提取两种蛋白,采用pull-down方法检测两者间的相互作用。利用Modeller 9v2软件,以***的GroEL为基础模建Hp Hsp60的三维结构,再与已知的UreB结构利用AutoDock 4.2软件进行分子共模拟,分析二者的相互作用面和关键氨基酸。结果构建了Hp Hsp60和尿素酶β亚基(UreB)的大肠埃希菌异源表达体系并获得纯化蛋白;Pull-down试验显示部分未融合GST标签的Hsp60出现在GST-UreB的洗脱液中,表明Hsp60与GST-UreB之间存在相互作用;以***的GroEL为基础模建了Hp Hsp60的三维结构,利用docking技术构建UreB与Hp Hsp60的相互作用模型,发现其主要的相互作用面位于Hsp60的α9与UreB的α2之间,其可能形成氢键的关键位点为UreB的α2上的T147氨基酸与Hsp60的α9上的E237、K238。结论 Hp Hsp60能直接与尿素酶β亚基(UreB)相互作用,Hsp60可能通过这种相互作用在UreB成熟过程中发挥分子伴侣功能。这为阐明Hp尿素酶的组装与成熟机制奠定了基础。

关键词：幽门螺杆菌尿素酶 Hsp60 分子伴侣相互作用

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

WtCosmc质粒转染对Tn^+肿瘤细胞恶性行为的影响

引用

解剖学杂志 2016年第3期39卷 262-267页

作者：杜镇镇刘栋孙旭红于晓锋石传芹徐雪胡涛滨州医学院病原生物学实验室烟台264003 滨州医学院基础医学概论教研室烟台264003 滨州医学院免疫学教研室烟台264003 附属医院创伤骨科滨州256600 淄博市临淄区人民医院临床微生物科淄博255400

目的：以Tn＋肿瘤细胞为靶标,研究野生型Cosmc（WtCosmc）质粒转染对其恶性行为的影响,以期为肿瘤的诊断及治疗提供新思路.方法：流式细胞术检测肿瘤细胞表面Tn抗原阳性率,免疫磁珠分选Tn＋与Tn-肿瘤细胞;分选后的Tn＋肿瘤细胞经Fugene ... 详细信息

目的：以Tn＋肿瘤细胞为靶标,研究野生型Cosmc（WtCosmc）质粒转染对其恶性行为的影响,以期为肿瘤的诊断及治疗提供新思路.方法：流式细胞术检测肿瘤细胞表面Tn抗原阳性率,免疫磁珠分选Tn＋与Tn-肿瘤细胞;分选后的Tn＋肿瘤细胞经Fugene 6转染WtCosmc质粒,并用免疫荧光检测细胞表面Tn抗原表达状况.分别采用荧光法、CCK-8和Transwell检测转染前后Tn＋肿瘤细胞的T-synthase活性、细胞增殖、迁移能力及对Apo2L/TRAIL的敏感性.结果：与Tn-细胞相比,Tn＋肿瘤细胞T-synthase活性及对Apo2L/TRAIL诱导凋亡的敏感性较低;细胞增殖、迁移能力较强.经WtCosmc质粒转染后,Tn＋细胞T-synthase活性及其对Apo2L/TRAIL诱导凋亡的敏感性明显增高;Tn抗原表达受抑;细胞增殖及迁移能力明显下降.结论：转染WtCosmc可恢复Tn＋细胞T-synthse活性,抑制Tn抗原的表达,进而增强其对Apo2L/TRAIL诱导凋亡的敏感性,降低细胞增殖、迁移能力,有效抑制Tn＋肿瘤细胞的恶性行为.

关键词： WtCosmc Tn抗原细胞增殖细胞凋亡 ApO2L/TRAIL

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

血清CA125、CA19-9、HE4联合检测在卵巢癌诊断中的应用价值研究

引用

科技视界 2017年第3期 237-238页

作者：田红艳张茜郝瑞敏李有杰滨州医学院生物化学与分子生物学教研室山东烟台264003 东营市人民医院创伤骨科山东东营257091

目的 :探讨联合检测血清CA125、CA19-9、HE4在卵巢癌诊断中的应用价值。方法:收集卵巢癌标本70例(卵巢癌组)、卵巢良性病变标本36例(良性病变组)、健康妇女卵巢标本42例(正常对照)。对研究对象进行血清CA125、CA19-9及HE4的检测,比较三... 详细信息

目的 :探讨联合检测血清CA125、CA19-9、HE4在卵巢癌诊断中的应用价值。方法:收集卵巢癌标本70例(卵巢癌组)、卵巢良性病变标本36例(良性病变组)、健康妇女卵巢标本42例(正常对照)。对研究对象进行血清CA125、CA19-9及HE4的检测,比较三组的血清CA125、CA19-9及HE4的水平及阳性检出情况,对比三种肿瘤标记物在卵巢癌诊断的敏感性、特异性。结果 :卵巢癌组、良性病变组CA125、CA19-9、HE4水平明显高于对照组(P<0.05),卵巢癌组明显高于良性病变组(P<0.05)。卵巢癌组、良性病变组CA125、CA19-9阳性率明显高于对照组(P<0.05);卵巢癌组CA125、CA19-9、HE4阳性率均明显高于良性病变组(P<0.05)。单项检测中,CA125敏感性最高,其次为HE4;HE4特异性最高,其次为CA19-9。两项联合检测中,CA125+HE4敏感性最高,为94.2%,CA19-9+HE4特异性最高为87.9%,三项联合检测的敏感性和特异性分别为97.1%、79.5%。三项联合检测敏感性明显高于单项检测和两项联合检测(P<0.05)。结论:CAl25、CAl9-9、HE4联合检测可明显提高对卵巢癌诊断的敏感性。

关键词： CA125 CA19-9 HE4 卵巢癌

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

FRMD8抑制肺癌细胞的增殖与迁移

引用

解剖学报 2016年第5期47卷 638-644页

作者：胡金霞赵玮李有杰战军谢书阳滨州医学院生物化学与分子生物学教研室山东烟台264002 北京大学医学部解剖学与组织学胚胎学系北京100191

目的探讨FERM domain-containing protein 8(FRMD8)在肺癌发生发展中的作用。方法用Western blotting检测肺癌组织及相应癌旁正常组织中FRMD8的表达情况;敲低FRMD8后平板克隆形成实验检测细胞克隆形成能力,MTT法检测细胞增殖情况;过表达... 详细信息

目的探讨FERM domain-containing protein 8(FRMD8)在肺癌发生发展中的作用。方法用Western blotting检测肺癌组织及相应癌旁正常组织中FRMD8的表达情况;敲低FRMD8后平板克隆形成实验检测细胞克隆形成能力,MTT法检测细胞增殖情况;过表达FRMD8后流式细胞术检测细胞凋亡情况,Western blotting检测过表达FRMD8后某些细凋亡相关蛋白表达变化;过表达及敲低FRMD8后Transwell细胞迁移实验检测对A549细胞迁移能力的影响。结果 1.与正常组织相比,肺癌组织中FRMD8表达下调(P<0.05);***8敲低,细胞克隆形成能力及增殖速度提高;***8可诱导细胞凋亡,并影响细胞凋亡相关基因的表达或活化:FRMD8过表达可下调Caspase-3、8和bax表达,而p53、激活型Caspase-3、8以及bcl-2的表达上调;***8过表达抑制细胞迁移能力(P<0.01),而敲低FRMD8则促进细胞迁移(P<0.001)。结论 FRMD8可抑制肺癌的发生发展,并具有肿瘤抑制子的功能。

关键词： FRMD8 肺癌细胞迁移免疫印迹法人

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：