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中国药学会第十三届青年药学科研成果交流会

作者：宫建郑刚李福生于嵩王远鹤王刚周晓枢王亮沈阳药科大学生命科学与生物制药学院临床药学教研室沈阳医学院奉天医院骨外三科辽宁省人民医院骨肿瘤科辽宁中医药大学解剖组胚教研室辽宁省肿瘤医院肿瘤内科沈阳市骨科医院创伤一病房中国医科大学附属一院骨科

目的:对沈阳地区转移性骨肿瘤住院患者抗肿瘤药物发生不良事件进行药物流行病学调查,为合理使用抗肿瘤药物提供参考依据。方法:采集沈阳地区2004-2014年转移性骨肿瘤住院患者的病历信息,分析其不良事件的基本特征、抗肿瘤药物种类、剂... 详细信息

目的:对沈阳地区转移性骨肿瘤住院患者抗肿瘤药物发生不良事件进行药物流行病学调查,为合理使用抗肿瘤药物提供参考依据。方法:采集沈阳地区2004-2014年转移性骨肿瘤住院患者的病历信息,分析其不良事件的基本特征、抗肿瘤药物种类、剂型、器官或系统分布。结果:抗肿瘤药物不良事件发生例数8242例,合计30122例次不良事件,其中男性患者占61.64%,女性患者占38.36%;发生不良事件的患者中,45～64岁患者占47.00%,45岁以上患者占74.99%;发生不良事件的的药物最高的是其他抗肿瘤药物及辅助治疗药,比例为39.91%;发生不良事件的抗肿瘤药物剂型中,注射剂占95.43%;发生不良事件的器官或系统最多的是消化系统,比例为22.63%。结论:沈阳地区转移性骨肿瘤住院患者在使用抗肿瘤药物时应加强45岁以上患者的监护,为明确抗肿瘤药物的监管提供了参考依据。

关键词：骨肿瘤转移不良事件药物流行病抗肿瘤药物

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荧光光谱法研究苏丹Ⅳ与鲱鱼精DNA的相互作用

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化学与生物工程 2015年第4期32卷 44-47页

作者：付银环付彩霞无棣第一中学生物学科山东无棣251900 滨州医学院化学教研室山东烟台264003

在pH值为7.4的Tris-HCl缓冲溶液中,采用荧光光谱法研究了苏丹Ⅳ与鲱鱼精DNA的相互作用。通过单、双链DNA作用的比较实验、KI荧光猝灭实验,分析了苏丹Ⅳ与鲱鱼精DNA的相互作用模式。结果表明:苏丹Ⅳ通过沟槽结合模式与鲱鱼精DNA发生作用... 详细信息

在pH值为7.4的Tris-HCl缓冲溶液中,采用荧光光谱法研究了苏丹Ⅳ与鲱鱼精DNA的相互作用。通过单、双链DNA作用的比较实验、KI荧光猝灭实验,分析了苏丹Ⅳ与鲱鱼精DNA的相互作用模式。结果表明:苏丹Ⅳ通过沟槽结合模式与鲱鱼精DNA发生作用;鲱鱼精DNA能猝灭苏丹Ⅳ的内源性荧光,其机理属于静态猝灭。通过Scatchard方程求得不同温度下的结合常数和结合位点数,热力学参数数据表明,苏丹Ⅳ与鲱鱼精DNA之间的主要作用力为氢键和范德华力。

关键词：苏丹Ⅳ 鲱鱼精DNA 相互作用荧光光谱

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重组质粒pFLAG-CMV2-FcDDR2的构建及应用

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细胞与分子免疫学杂志 2015年第9期31卷 1234-1237页

作者：赵薇张昭黄同列穆楠田菲张伟第四军医大学药学系生物制药学教研室陕西西安710032 宁夏医科大学基础医学院生物化学与分子生物学系宁夏银川750004 第四军医大学基础部教学实验中心陕西西安710032

目的构建人盘状结构域受体2(DDR2)与IgG Fc段嵌合受体的重组质粒(pFLAG-CMV2-Fc DDR2),检测其自主磷酸化水平。方法设计Fc DDR2克隆引物,以质粒pSec Tag2B-Fc DDR2为模板,PCR扩增IgG Fc段与DDR2跨膜区和胞内区的c DNA序列(Fc DDR2),将... 详细信息

目的构建人盘状结构域受体2(DDR2)与IgG Fc段嵌合受体的重组质粒(pFLAG-CMV2-Fc DDR2),检测其自主磷酸化水平。方法设计Fc DDR2克隆引物,以质粒pSec Tag2B-Fc DDR2为模板,PCR扩增IgG Fc段与DDR2跨膜区和胞内区的c DNA序列(Fc DDR2),将其插入pFLAG-CMV2真核表达载体中。PCR扩增鉴定并测序验证重组质粒pFLAG-CMV2-Fc DDR2后,将其转染人胚肾HEK293T细胞,Western blot法验证HEK293T细胞中目标蛋白Fc DDR2的表达效率。将pcDNA3.1-DDR2转染HEK293T细胞,给予2型胶原蛋白刺激后作为阳性对照,用小鼠来源抗DDR2抗体免疫沉淀`pFLAG-CMV2-Fc DDR2阳性的HEK293T细胞及胶原刺激的pcDNA3.1-DDR2阳性的HEK293T细胞,4G10抗体分析DDR2的磷酸化水平,评价Fc DDR2的自主磷酸化能力。结果重组质粒pFLAG-CMV2-Fc DDR2的PCR扩增产物为大小约2800 bp左右的片段,与预期相符,测序验证正确。Western blot结果提示pFLAG-CMV2-Fc DDR2转染后的HEK293T细胞,FLAG-Fc DDR2表达水平显著上调。免疫沉淀结合Western blot分析提示FcDDR2的磷酸化水平与胶原刺激后的DDR2水平相当。结论成功构建了pFLAG-CMV2-FcDDR2真核表达载体,Fc DDR2的自主磷酸化与胶原蛋白刺激后DDR2的活化水平相当,可以用作DDR2经胶原蛋白刺激后的活化替代形式。

关键词：重组质粒 FcDDR2 HEK293T细胞胶原刺激磷酸化

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大数据时代背景下的医学思考——转化医学新趋势前瞻

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医学与哲学（A） 2014年第11期35卷 1-3,9页

作者：焦飞王娟马颖于媛岳真滨州医学院生物化学教研室山东烟台264003 滨州医学院细胞工程教研室山东烟台264003

作为21世纪最具活力的医学发展模式,转化医学为基础和临床构建了交流沟通的高效平台,当前正朝着多学科、多领域、多系统的方向迈进。随着信息技术与生命科学的交叉融合,生物医学已经迈入大数据时代。大数据既保证了医学实践的深度,有深... 详细信息

作为21世纪最具活力的医学发展模式,转化医学为基础和临床构建了交流沟通的高效平台,当前正朝着多学科、多领域、多系统的方向迈进。随着信息技术与生命科学的交叉融合,生物医学已经迈入大数据时代。大数据既保证了医学实践的深度,有深度才能洞悉本质;又保证了医学实践的高度,有高度才能总揽全局。因此,大数据的出现为深陷还原论泥潭的现代医学提供了有效的解决途径。大数据浪潮对医学基础研究和医疗实践的深远影响,必将为转化医学发展带来新的发展机遇。

关键词：大数据转化医学医学整合相关性

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顺铂对LTEP-a-2细胞中miR-34b及下游分子影响的研究

顺铂对LTEP-a-2细胞中miR-34b及下游分子影响的研究

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华东六省一市生物化学与分子生物学会2015年学术交流会

作者：李有杰谢书阳吕晴郑瑛庞敏宋丹丹赵玮滨州医学院山东省高校肿瘤分子生物学重点实验室生物化学与分子生物学教研室山东烟台264003

目的:探讨顺铂对LTEP-a-2细胞内miR-34b、Bcl-2、Smad3表达的影响,明确顺铂的抗癌机制.方法:体外培养LTEP-a-2细胞,实验组加入不同浓度顺铂,阴性对照组为不加顺铂的细胞;给药组细胞在给予相应浓度顺铂作用36小时后,置于倒置显微镜下观... 详细信息

目的:探讨顺铂对LTEP-a-2细胞内miR-34b、Bcl-2、Smad3表达的影响,明确顺铂的抗癌机制.方法:体外培养LTEP-a-2细胞,实验组加入不同浓度顺铂,阴性对照组为不加顺铂的细胞;给药组细胞在给予相应浓度顺铂作用36小时后,置于倒置显微镜下观察药物处理前后LTEP-a-2细胞的形态变化;收集细胞,加入培养液吹打混匀成细胞重悬液,吸取100μl细胞重悬液Trypan Blue stain染色3分钟,倒置显微镜下观察计数,计算各实验组细胞存活率台盼蓝染色法计算细胞存活率;加药36小时后,每孔加入10μl 0.5％MTT溶液,培养4小时后,置酶标仪上测490nm处各孔OD值,并计算各组细胞抑制率;应用miRNA提取试剂盒按说明提取小RNA,为小RNA加poly A尾后进行反转录,得到cDNA后进行实时荧光定量PCR检测细胞内miR-34b的含量;将收集的各加药组细胞进行SDS-PAGE蛋白电泳,电泳结束后,加入Bcl-2及Smad3蛋白一抗4℃摇床过夜后用TBST洗膜,加入HRP标记的二抗置振荡器孵育,于暗室内曝光并拍照.

关键词： miR-34b Bcl-2 Smad3 肺癌顺铂

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幽门螺杆菌临床分离株热休克蛋白60基因序列分析

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中国病原生物学杂志 2014年第3期9卷 230-235页

作者：孙万菊杜东龙孙辉周秀芝张珍李波清滨州医学院病原生物学教研室山东烟台264003

目的分析幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)临床分离株热休克蛋白60基因编码区序列特征。方法对分离自我国不同地区、患有不同胃肠疾病患者的63株Hp提取基因组DNA并设计hsp60特异性引物,采用聚合酶链反应(PCR)扩增hsp60基因,经1%琼脂... 详细信息

目的分析幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)临床分离株热休克蛋白60基因编码区序列特征。方法对分离自我国不同地区、患有不同胃肠疾病患者的63株Hp提取基因组DNA并设计hsp60特异性引物,采用聚合酶链反应(PCR)扩增hsp60基因,经1%琼脂糖凝胶电泳后切胶回收、纯化PCR产物并测序,用DNAstar 5.0软件中的Clustal W程序对hsp60基因序列及由该序列翻译的氨基酸序列进行比较分析。结果成功特异性扩增并纯化到hsp60全基因序列。经序列比对,发现不同胃肠疾病来源的hsp60基因核苷酸序列在877、1 399以及1 579位点处存在单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)。其中来源于非胃癌患者的Hp在以上三位点处分别有8株(8/48,16.67%)G→A置换,9株(9/48,18.75%)C→G置换,7株(7/48,14.58%)A→G置换;胃癌患者来源的Hp在以上三位点处分别有3株(3/18,16.67%)G→A置换,1株(1/18,5.55%)C→G置换,2株(2/18,11.11%)A→G置换。将核苷酸序列翻译为氨基酸序列后,在以上三位点所对应的氨基酸序列,即293、467以及527位点处分别发生了由缬氨酸(V)到异亮氨基酸(I)、谷氨酰胺(Q)到谷氨酸(E)以及苏氨酸(T)到丙氨酸(A)的改变。结论我国Hp临床分离株热休克蛋白60基因序列存在单核苷酸多态性位点。

关键词：幽门螺杆菌热休克蛋白60基因序列分析单核苷酸多态性

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LBL联合PBL应用于生物技术制药教学中的构想

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中华医学教育探索杂志 2014年第8期13卷 793-796页

作者：张静张秀丽姜静徐茂磊滨州医学院药学院生物制药教研室烟台264003

比较并讨论了基于课堂的学习（1ecture-basedlearning，LBL）和以问题为基础的学习（problem-based learning，PBL）的应用现状及存在问题，提出LBL联合PBL应用于生物技术制药教学中的改革构想。拟将LBL主要应用于生物技术药物研发及制... 详细信息

比较并讨论了基于课堂的学习（1ecture-basedlearning，LBL）和以问题为基础的学习（problem-based learning，PBL）的应用现状及存在问题，提出LBL联合PBL应用于生物技术制药教学中的改革构想。拟将LBL主要应用于生物技术药物研发及制造中基本原理的授课,PBL主要应用于典型药物实例生产工艺的授课，并对实施过程中LBL和PBL的学时分配、PBL教学案例的设计与实施以及合理教学评价体系的建立三个关键点进行阐述。二者联合教学有望培养学生的自主学习能力、综合分析能力和团队合作能力，适应当前市场发展对生物制药人才的需求。

关键词：基于课堂的学习以问题为基础的学习联合教学生物技术制药

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葛根素对慢性酒精中毒小鼠结肠组织Cajal间质细胞和C-kit蛋白表达的影响

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吉林大学学报（医学版） 2014年第3期40卷 588-592,I0005页

作者：夏白娟崔淑芹贵阳医学院基础医学院组织学与胚胎学教研室贵州贵阳550004 德州学院生物制药系山东德州253023

目的:通过检测慢性酒精中毒及葛根素预处理后的小鼠结肠Cajal间质细胞(ICC)形态、数量以及C-kit蛋白表达的变化,探讨葛根素对酒精中毒小鼠结肠组织的保护作用。方法:选取健康雄性BALB/C小鼠24只,随机分为盐水对照组、慢性酒精中毒组和... 详细信息

目的:通过检测慢性酒精中毒及葛根素预处理后的小鼠结肠Cajal间质细胞(ICC)形态、数量以及C-kit蛋白表达的变化,探讨葛根素对酒精中毒小鼠结肠组织的保护作用。方法:选取健康雄性BALB/C小鼠24只,随机分为盐水对照组、慢性酒精中毒组和葛根素预处理组,每组8只。慢性酒精中毒组和葛根素预处理组小鼠建立慢性酒精中毒动物模型。通过测量印度墨汁推进长度测定肠道传输速率,应用免疫荧光和透射电镜技术检测ICC分布、数量以及超微结构的改变,采用Western blotting方法分析C-kit蛋白的表达。结果:葛根素预处理组肠道传输速率较慢性酒精中毒组明显增加(P<0.05),但仍低于盐水对照组(P<0.05);葛根素预处理组结肠内ICC的数量较慢性酒精中毒组增多(P<0.05),与盐水对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);与盐水对照组比较,慢性酒精中毒组小鼠结肠ICC的超微结构发生明显改变,线粒体等细胞器明显减少,葛根素预处理组小鼠结肠ICC的超微结构基本恢复正常,线粒体等细胞器明显增加;葛根素预处理组小鼠结肠组织中C-kit蛋白表达水平明显高于慢性酒精中毒组(P<0.05),与盐水对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:葛根素干预对酒精造成的Cajal间质细胞数量、超微结构及C-kit表达的改变有一定的修复或逆转作用。

关键词：葛根素慢性酒精中毒 Cajal间质细胞 C-kit蛋白超微结构结肠

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威海地区幽门螺杆菌cagA基因3′端多态性分析

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中国病原生物学杂志 2014年第9期9卷 783-787页

作者：杜东龙孙万菊孙辉刘岩红李波清滨州医学院病原生物学教研室山东烟台264003 滨州医学院附属医院呼吸内科山东滨州256603

目的研究威海地区幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)临床分离株cagA基因的3′端多态性。方法采用PCR法扩增Hp临床分离株的cagA基因3′端并测序,用DNAStar 5.0软件对其进行编码氨基酸序列的比对分析。结果 63株Hp临床分离株均cagA阳性(... 详细信息

目的研究威海地区幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)临床分离株cagA基因的3′端多态性。方法采用PCR法扩增Hp临床分离株的cagA基因3′端并测序,用DNAStar 5.0软件对其进行编码氨基酸序列的比对分析。结果 63株Hp临床分离株均cagA阳性(cagA+),其中93.7%(59/63)为东亚型(EPIYYA-ABD),6.3%(4/63)为西方型(EPIYYA-ABC)。3.4%(2/59)的东亚型菌株EPIYA-B突变为ESIYA-B,4株西方型型均突变为EPIYT-B。胃癌患者分离株中88.9%(16/18)为东亚型,11.1%(2/18)为西方型;非胃癌分离株中95.6%(43/45)为东亚型,4.4%(2/45)为西方型。2株分离自胃癌患者的西方型Hp EPIYA-A后的第一个氨基酸残基由赖氨酸(K)突变为谷氨酸(E)。结论威海地区Hp cagA基因以东亚型为主,但东、西方亚型Hp的致病性无显著差别,两型都存在cagA基因3′端编码氨基酸序列的改变。

关键词：幽门螺杆菌 cagA 多态性

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转移性骨肿瘤患者临床特征的初步分析

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中国医药指南 2016年第7期14卷 67-68页

作者：王亮宫建郑刚纪忠杰郑雅允李福生王远鹤王刚周晓枢辽宁省人民医院骨肿瘤科辽宁沈阳110016 沈阳药科大学生命科学与生物制药学院临床药学教研室辽宁沈阳110016 沈阳医学院奉天医院骨外三科辽宁沈阳110024 丹东市中医院辽宁丹东118000 辽宁省肿瘤医院肿瘤内科辽宁沈阳110042 沈阳市骨科医院创伤一病房辽宁沈阳110044 中国医科大学附属一院骨科辽宁沈阳110001

目的探讨沈阳地区转移性骨肿瘤患者的临床特征,为转移性骨肿瘤的诊疗与预防提供依据。方法收集2004年~2014年沈阳地区4家医院的转移性骨肿瘤患者的病历资料,进行统计分析。结果共纳入转移性骨肿瘤患者11238例,男性患者占61.91%,女性患者... 详细信息

目的探讨沈阳地区转移性骨肿瘤患者的临床特征,为转移性骨肿瘤的诊疗与预防提供依据。方法收集2004年~2014年沈阳地区4家医院的转移性骨肿瘤患者的病历资料,进行统计分析。结果共纳入转移性骨肿瘤患者11238例,男性患者占61.91%,女性患者占38.09%;原发肿瘤来源最多的是肺癌（33.42%）,转移方式以多发性转移为主（69.96%）,转移部位以脊椎为主（43.12%）。结论沈阳地区转移性骨肿瘤患者构成比男性多于女性,好发于脊椎。

关键词：骨肿瘤转移肺癌脊椎

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