检索结果-内蒙古大学图书馆

中国病原生物学杂志 2013年第5期8卷 I0001-I0002页

作者：张玉梅李波清李娜乔媛媛滨州医学院病原生物教研室山东烟台264003

医学院校主要开设面向医学生的以病原微生物为中心的医学微生物教学,生物技术专业的微生物课程体系不同于医学微生物,如何利用原有的医学微生物教学资源,探索合适的微生物学实验课程方案,作者在教学观念、实验内容、教学手段等方面进行... 详细信息

医学院校主要开设面向医学生的以病原微生物为中心的医学微生物教学,生物技术专业的微生物课程体系不同于医学微生物,如何利用原有的医学微生物教学资源,探索合适的微生物学实验课程方案,作者在教学观念、实验内容、教学手段等方面进行教学改革,教学效果得到了明显的提高。

关键词：微生物生物技术实验课程

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幽门螺杆菌热休克蛋白60基因的定点突变及其原核表达

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中国病原生物学杂志 2013年第8期8卷 695-697,700页

作者：孙万菊杜东龙蒋宏张珍杜镇镇李波清滨州医学院病原生物学教研室山东烟台264003 滨州医学院附属医院山东滨州256603

目的定点突变幽门螺杆菌标准菌株ATCC26695 hsp60基因的1398、1399位点,并获得基因突变后hsp60基因的原核表达蛋白。方法采用Primer Premier5.0软件设计hsp60基因的2对引物,引入2个突变位点,通过重叠延伸PCR法进行3次扩增,获得突变型hs... 详细信息

目的定点突变幽门螺杆菌标准菌株ATCC26695 hsp60基因的1398、1399位点,并获得基因突变后hsp60基因的原核表达蛋白。方法采用Primer Premier5.0软件设计hsp60基因的2对引物,引入2个突变位点,通过重叠延伸PCR法进行3次扩增,获得突变型hsp60基因,克隆至原核表达载体pEASY-E1,重组质粒转化至E. coli BL21(DE3),对其进行测序验证,经IPTG诱导表达后,SDS-PAGE电泳检测表达产物。结果将幽门螺杆菌hsp60基因1398、1399位点AG突变为GC,构建了突变型hsp60基因的表达载体,转化大肠埃希菌后高效表达可溶性hsp60蛋白。结论构建了突变型hsp60基因表达载体,并能表达可溶性目的蛋白,为对其功能研究奠定了基础。

关键词：幽门螺杆菌热休克蛋白60 定点突变原核表达

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关于医学微生物学绪论课教学的几点体会

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中国病原生物学杂志 2013年第4期8卷 I0004-I0004,F0003页

作者：李娜李波清滨州医学院病原生物学教研室山东烟台264003

绪论是教学之始的重点,医学微生物学绪论课的授课效果直接影响到学生的学习积极性及后续课程的学习。本文从提出问题,使学生在思考过程中产生对本课程的兴趣;运用形象生动的语言讲述,增加学习的趣味性;紧密联系临床,提高学生的求知欲;... 详细信息

绪论是教学之始的重点,医学微生物学绪论课的授课效果直接影响到学生的学习积极性及后续课程的学习。本文从提出问题,使学生在思考过程中产生对本课程的兴趣;运用形象生动的语言讲述,增加学习的趣味性;紧密联系临床,提高学生的求知欲;增加学科前沿进展,激起学生的探索精神四个方面介绍了如何讲好医学微生物学绪论课,旨在提高医学微生物学的教学效果。

关键词：医学微生物学绪论教学

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米非司酮调控乳腺癌细胞凋亡的研究

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中国计划生育学杂志 2014年第5期22卷 300-303页

作者：郭永何森苏晨王乾兴邹检平国家人口计生委科学技术研究所北京100081 沈阳药科大学生命科学与生物制药学院遵义医学院细胞生物学与遗传学教研室

目的:研究米非司酮促进乳腺癌T47D细胞凋亡的作用。方法:根据米非司酮的处理浓度分为0.25μmol/L组、2.5μmol/L组、25μmol/L组和50μmol/L组,各组分别加入相应浓度米非司酮处理人乳腺癌T47D细胞2d后,采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的d... 详细信息

目的:研究米非司酮促进乳腺癌T47D细胞凋亡的作用。方法:根据米非司酮的处理浓度分为0.25μmol/L组、2.5μmol/L组、25μmol/L组和50μmol/L组,各组分别加入相应浓度米非司酮处理人乳腺癌T47D细胞2d后,采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记测定法检测细胞凋亡,在荧光显微镜下观察绿色荧光细胞数量和荧光强度,采用膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化吡啶法在流式细胞仪上检测凋亡细胞百分率。结果:25μmol/L组和50μmol/L组与对照组比较,阳性绿色荧光细胞的数量更多,荧光强度更强;25μmol/L组和50μmol/L组的凋亡细胞百分比(分别为16.1±3.5%和17.2±3.8%)高于对照组(5.1±2.3%),差异有统计学意义(分别为P=0.010和P=0.009);0.25μmol/L组和2.5μmol/L组的凋亡细胞百分比与对照组比较差异无统计学意义(分别为P=0.818和P=0.884)。结论:米非司酮能够促进乳腺癌T47D细胞的凋亡,且随着米非司酮剂量的升高,凋亡细胞数量增加。

关键词：米非司酮乳腺癌 T47D 细胞凋亡流式检测

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米非司酮调控乳腺癌细胞增殖的研究

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生殖医学杂志 2014年第4期23卷 306-311页

作者：郭永何森苏晨张瑶楠王乾兴邹检平国家人口计生委科学技术研究所北京100081 沈阳药科大学生命科学与生物制药学院沈阳110016 遵义医学院细胞生物学与遗传学教研室遵义563000

目的研究米非司酮对乳腺癌细胞系MCF-7和T47D的增殖抑制作用。方法采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测米非司酮对乳腺癌细胞系MCF-7和T47D的半数抑制浓度(IC50)。不同浓度米非司酮(0.25、2.5、25和50μmol/L)分别处理人乳腺癌细胞系MCF-7和T... 详细信息

目的研究米非司酮对乳腺癌细胞系MCF-7和T47D的增殖抑制作用。方法采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测米非司酮对乳腺癌细胞系MCF-7和T47D的半数抑制浓度(IC50)。不同浓度米非司酮(0.25、2.5、25和50μmol/L)分别处理人乳腺癌细胞系MCF-7和T47D1、2、3d后,观察细胞形态变化,以及检测各组细胞生长曲线。结果米非司酮对乳腺癌MCF-7和T47D细胞均有抑制作用,其抑制率均随着米非司酮浓度的增加而变化,存在明显的量效关系。通过对两种细胞抑制率(IR)值直线回归分析,米非司酮对MCF-7细胞的IC50为51.21μmol/L,对T47D细胞的IC50为54.29μmol/L。形态学观察发现,各组细胞体积变小,细胞间的链接消失,细胞内明显有黑色小颗粒聚集。25和50μmol/L浓度米非司酮对MCF-7乳腺癌细胞株生长抑制作用明显,特别是50μmol/L干预24h后在高倍镜下可见明显的核质浓缩。结论米非司酮对病理分型、激素受体型不同的乳腺癌MCF-7和T47D细胞均具有抑制增殖的作用,并呈时间和剂量依赖效应。

关键词：米非司酮乳腺癌细胞增殖半数抑制浓度

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丙戊酸钠对癫痫大鼠海马组织中Homer1a、mGluR5表达的影响

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中国儿童保健杂志 2013年第9期21卷 942-944,949页

作者：孙允霄冉焕英贾秀红王建明李有杰滨州医学院儿科学教研室山东滨州256603 肥城市中医院儿科山东肥城271600 滨州医学院生物化学与分子生物学教研室山东烟台264003

【目的】探讨在戊四氮(pentetrazole,PTZ)致癫痫大鼠海马组织中Homer1a、mGluR5的表达以及丙戊酸钠(sodium valproate,VPA)对其表达的影响。【方法】将SD大鼠分为正常对照组(NC)、PTZ组和VPA干预组。PTZ腹腔注射达到点燃标准,腹腔注入VP... 详细信息

【目的】探讨在戊四氮(pentetrazole,PTZ)致癫痫大鼠海马组织中Homer1a、mGluR5的表达以及丙戊酸钠(sodium valproate,VPA)对其表达的影响。【方法】将SD大鼠分为正常对照组(NC)、PTZ组和VPA干预组。PTZ腹腔注射达到点燃标准,腹腔注入VPA 15mg/(kg·d),对致痫大鼠进行治疗;30min后,腹腔注射PTZ诱发癫痫发作;两周后分别于致痫大鼠发作后8h、24h处死大鼠;应用实时定量PCR(realtime-PCR)、Western blot技术检测海马组织Homer1a、mGluR5的表达。【结果】1)NC组无癫痫发作,VPA干预组癫痫发作较PTZ组减轻;2)PTZ组Hmoer1a于癫痫发作后8h明显升高,24h后则明显降低;VPA干预组Homer1a表达于癫痫发作后8h及24h均升高;3)PTZ组mGluR5表达于癫痫发作后8h无显著变化,而24h后明显升高;VPA干预组mGluR5表达于癫痫发作后8h无显著变化,24h后明显降低。【结论】1)丙戊酸钠可明显改善致痫大鼠发作表现;2)Homer1a在癫痫发作后早期短暂性升高;mGluR5在癫痫发作后早期无明显变化,而发作后24h升高;3)丙戊酸钠可能通过调节Homer1a表达进一步影响mGluR5而发挥抗痫作用。

关键词：癫痫丙戊酸钠 Homerla mGluR5

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血管生成素4对脂多糖诱导的人脐静脉内皮细胞损伤的影响

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中国病理生理杂志 2013年第11期29卷 2088-2091页

作者：李岩马明明张小强潘雯菲刘向勇王晓芝滨州医学院附属医院重症医学科山东滨州256603 德州市人民医院重症医学科山东德州253014 滨州医学院细胞生物学教研室山东烟台264003

目的:观察血管生成素4(Ang-4)对脂多糖(LPS)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:EnVision法免疫组化鉴定HUVECs。LPS诱导细胞损伤,不同剂量的Ang-4干预。显微镜下观察细胞形态,MTT法检测细胞活力,E... 详细信息

目的:观察血管生成素4(Ang-4)对脂多糖(LPS)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:EnVision法免疫组化鉴定HUVECs。LPS诱导细胞损伤,不同剂量的Ang-4干预。显微镜下观察细胞形态,MTT法检测细胞活力,ELISA法检测von Willebrand因子(vWF)和肿瘤坏死因子(TNF-α)含量,real-time PCR检测Toll样受体4(TLR4)、核因子κB(NF-κB)p65和TNF-αmRNA含量变化。结果:免疫组化示胞浆内人Ⅷ因子相关抗原呈阳性;与正常组比,LPS组细胞增殖活力降低(P<0.01),vWF及TNF-α分泌增多(P<0.01),且TLR4、NF-κB p65和TNF-αmRNA表达升高(P<0.01);Ang-4(100μg/L)组可恢复细胞活力,降低vWF及TNF-α含量(P<0.01),抑制LPS所致TLR4、NF-κB p65和TNF-αmRNA的表达(P<0.01)。结论:Ang-4可拮抗LPS诱导的HUVECs损伤,这可能与抑制TLR4-NF-κB p65-TNF-α信号通路的活化有关。

关键词：血管生成素4 脂多糖类人脐静脉内皮细胞 von Willebrand因子

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肺炎支原体感染鼠P1特异抗原的动态检测

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微生物学杂志 2014年第6期34卷 84-88页

作者：赵芝娜张晗何梦博陈博杨颖司文王桂珍中国医科大学基础医学院病原生物学教研室辽宁沈阳110001 沈阳药科大学生命科学与生物制药学院辽宁沈阳110016 中国医科大学附属二院儿科辽宁沈阳110004

通过实验动物模型探讨肺炎支原体感染动物肺泡灌洗液中特异抗原检出率的动态变化,为肺炎支原体感染的临床诊断提供理论依据。小鼠经鼻自然感染肺炎支原体,分别采集感染后不同时间点小鼠的支气管灌洗液,应用量子点标记肺炎支原体P1蛋白抗... 详细信息

通过实验动物模型探讨肺炎支原体感染动物肺泡灌洗液中特异抗原检出率的动态变化,为肺炎支原体感染的临床诊断提供理论依据。小鼠经鼻自然感染肺炎支原体,分别采集感染后不同时间点小鼠的支气管灌洗液,应用量子点标记肺炎支原体P1蛋白抗体,直接免疫荧光法检测感染鼠肺泡灌洗液中肺炎支原体P1特异抗原,同时通过PCR检测肺组织肺炎支原体DNA及肺组织病理切片观察肺部炎性变化确定小鼠感染。结果显示,感染鼠肺炎支原体特异抗原在感染后第3天检出阳性率为75%,第7天达高峰为83%,之后随病程延长,抗原检测的阳性率逐渐下降,在感染后第14、21天检出阳性率分别为58%和25%。肺炎支原体特异抗原在感染早期检出率高。应用量子点标记肺炎支原体P1蛋白抗体,直接免疫荧光法检测肺炎支原体特异抗原可应用于肺炎支原体感染的早期诊断。

关键词：肺炎支原体特异抗原动态检测

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转录因子Dlx1和Dlx2在成釉细胞中调控MMP20启动子转录活性的研究

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牙体牙髓牙周病学杂志 2013年第6期23卷 355-361页

作者：袁杰刘晓影曲政孙岩张娟娟高玉光潍坊医学院口腔医学研究所潍坊医学院细胞生物学教研室山东潍坊261042 滨州医学院附属医院口腔科山东滨州256603

目的:观察Dlx家族转录因子Dlx1和Dlx2对小鼠成釉细胞基质金属蛋白酶20(matrix metallo proteinase20,MMP20)基因的调控作用,初步确定Dlx家族在釉质发育中的作用。方法:构建Dlx1和Dlx2真核表达载体重组质粒,用双荧光素酶报告基因检测系... 详细信息

目的:观察Dlx家族转录因子Dlx1和Dlx2对小鼠成釉细胞基质金属蛋白酶20(matrix metallo proteinase20,MMP20)基因的调控作用,初步确定Dlx家族在釉质发育中的作用。方法:构建Dlx1和Dlx2真核表达载体重组质粒,用双荧光素酶报告基因检测系统分析不同剂量的Dlx1和Dlx2对MMP20基因启动子转录活性的影响;确定Dlx1和Dlx2有明显作用的启动子区段,用基因定点突变和双荧光素酶报告基因检测系统分析Dlx1、Dlx2对MMP20基因启动子转录活性的影响,以及Dlx1、Dlx2在调控MMP20基因时的相互作用;最后观察Dlx1与Dlx2共转染时MMP20基因活性表达的变化。结果:Dlx1转染小鼠成釉细胞后MMP20启动子活性表达上调,Dlx2转染小鼠成釉细胞后MMP20启动子活性表达抑制;突变MMP20启动子的Dlx结合位点后,MMP20启动子的转录活性下降,而且Dlx1失去上调MMP20启动子转录活性的作用;当Dlx1与Dlx2共转染后,在Dlx1转染剂量不变的前提下,随着Dlx2转染量的增加,小鼠成釉细胞MMP20启动子转录活性显著增加。结论:Dlx1和Dlx2在釉质发育过程中有重要的生物学意义,对MMP20基因表达具有重要的调节作用。

关键词： Dlx 基质金属蛋白酶20 基因定点突变双荧光素酶基因检测

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Sonic Hedgehog信号通路对内皮细胞凋亡影响的初步研究

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中华风湿病学杂志 2013年第5期17卷 298-302,F0003页

作者：朱尚玲黄建林王明霞彭蔚湘林灼锋古洁若中山大学附属第三医院风湿免疫科广州510630 温州医学院药学院生物制药教研室

目的初步探讨类风湿关节炎（RA）滑膜组织血管内皮细胞Smo蛋白的表达，并观察肿瘤坏死因子（TNF）-α作用于人脐静脉内皮细胞系***926细胞后SonicHedgehog（Shh）信号通路相关分子的表达，及特异性抑制Smo对细胞凋亡的影响。方法收集4... 详细信息

目的初步探讨类风湿关节炎（RA）滑膜组织血管内皮细胞Smo蛋白的表达，并观察肿瘤坏死因子（TNF）-α作用于人脐静脉内皮细胞系***926细胞后SonicHedgehog（Shh）信号通路相关分子的表达，及特异性抑制Smo对细胞凋亡的影响。方法收集4例病情中度活动的RA患者的滑膜组织，同时收集4例外伤或半月板损伤（无关节炎）者滑膜组织作为对照组，免疫组织化学法检测滑膜组织血管内皮细胞Smo蛋白表达情况。予不同浓度TNF-α或联合不同浓度环巴胺处理***926细胞，实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测Shh、Ptchl、Smo、GlilmRNA表达。予不同浓度环巴胺处理***926细胞，加入TNF-α＋放线菌素D（ActD）诱导细胞凋亡，采用细胞增殖与毒性试剂盒（CCK-8）检测细胞存活率，流式细胞术检测细胞凋亡情况。两样本均数比较采用t检验，多个样本均数比较采用单因素方差分析。结果RA患者滑膜血管内皮细胞Smo阳性表达率为（81±23）％，高于对照组阳性表达率（20±17）％（P〈0．05）。***926细胞经TNF-α刺激后，Shh、SmomRNA表达上调（P〈0．05），PtchlmRNA表达无明显变化（P〉0．05），GlilmRNA表达下调（P（0．05）。TNF．n与环巴胺共同作用后，Shh、Smo和GlilmRNA表达下调（P〈O．05）。不同浓度环巴胺（分别为2,4、8μmol／L）作用后的细胞存活率分别为（57±6）％、（44±8）％、（32±5）％，低于TNF-α ActD组细胞存活率（64±6）％（P〈0．05），细胞凋亡率分别为（12．4±3．3）％、（14．5±2．7）％、（15．7±2．4）％，高于TNF-αActD组细胞凋亡率（7．1±1．3）％（P〈0．05）。结论Shh信号通路在RA患者滑膜组织血管内皮细胞中存在激活。特异性抑制Shh信号通路，可以促进内皮细胞凋亡。Shh信号通路可能参与TNF-α作用于内皮细胞后的抗凋亡调控机制。

关键词：关节炎,类风湿内皮细胞细胞凋亡 Sonic Hedgehog通路

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