检索结果-内蒙古大学图书馆

整合素β1通过ILK/FAK/F-actin通路影响幽门螺杆菌诱导的GES-1细胞自噬的研究

中国病原生物学杂志 2020年第9期15卷 1028-1032,1037页

作者：杜运秋张锐清曲磊程雪吴玉龙赵慧琳张莹李波清滨州医学院病原生物学教研室山东烟台264003

目的观察整合素β1对ILK/FAK/F-actin通路的调节作用,分析其对幽门螺杆菌(Hp)诱导GES-1细胞自噬的影响。方法利用siRNA沉默GES-1细胞整合素β1的表达后与幽门螺杆菌共培养6 h,Western blot检测ILK的表达。以ILK特异性抑制剂Cpd22抑制细... 详细信息

目的观察整合素β1对ILK/FAK/F-actin通路的调节作用,分析其对幽门螺杆菌(Hp)诱导GES-1细胞自噬的影响。方法利用siRNA沉默GES-1细胞整合素β1的表达后与幽门螺杆菌共培养6 h,Western blot检测ILK的表达。以ILK特异性抑制剂Cpd22抑制细胞ILK的表达后与幽门螺杆菌共培养6 h,Western blot检测LC3B、p62、FAK、Paxillin的表达;制备细胞爬片,以iFluor-594标记的鬼笔环肽对F-actin进行染色,观察细胞形态。结果沉默整合素β1后,空白组、Hp组、沉默组、阴性对照组、沉默+Hp组、阴性对照+Hp组ILK相对表达量分别为1.012±0.073、0.637±0.216、0.727±0.173、1.173±0.177、0.712±0.160、0.983±0.119,与空白组相比,Hp组ILK的相对表达量降低(t=3.288,P<0.05),沉默组较阴性对照组,沉默+Hp组较阴性对照+Hp组ILK相对表达量均显著降低(t值分别为-4.420和-3.238,均P<0.01)。抑制ILK表达后,空白组、Cpd22组、Hp组、Cpd22+Hp组LC3B的相对表达量分别为0.437±0.064、0.808±0.116、0.812±0.130、1.247±0.201,p62相对表达量分别为0.904±0.141、1.121±0.105、1.392±0.110、0.960±0.103,与空白组相比,Cpd22和Hp组细胞内LC3B及p62相对表达量均显著增加(t值分别为-4.838、-4.479、-3.269、3.313,均P<0.01),Cpd22+Hp组较Hp组细胞LC3B的相对表达量增高(t=-3.147,P<0.05),p62相对表达量降低(t=2.907,P<0.05)。Cpd22组FAK、Paxillin相对表达量较空白组均增加(t值分别为-2.303、-3.460,均P<0.05),Cpd22+Hp组FAK、Paxillin相对表达量较Hp组均降低(t值分别为2.446、-2.648,P<0.05),Cpd22抑制ILK后感染Hp,细胞F-actin染色呈现明显杂乱碎丝状。结论整合素β1通过上调ILK的表达抑制幽门螺杆菌诱导的GES-1细胞自噬,其机制可能与FAK/Paxillin/F-actin通路有关。

关键词：幽门螺杆菌整合素β1 GES-1细胞整合素连接激酶细胞自噬

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幽门螺杆菌对GES-1细胞自噬及凋亡的影响

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中国病原生物学杂志 2020年第11期15卷 1262-1267,1276页

作者：张锐清杜运秋李菁佟小涵曲磊吴玉龙季晓飞张莹李波清滨州医学院病原生物学教研室山东烟台264003

目的研究幽门螺杆菌(Hp)对胃上皮细胞GES-1自噬与凋亡的影响。方法Hp与自噬抑制剂3-MA、广谱凋亡抑制剂Z-VAD-FMK处理后的GES-1细胞共培养,流式细胞术检测细胞凋亡情况,Western blot检测LC3B-Ⅱ、Caspase-3及PARP蛋白的表达。结果3-MA... 详细信息

目的研究幽门螺杆菌(Hp)对胃上皮细胞GES-1自噬与凋亡的影响。方法Hp与自噬抑制剂3-MA、广谱凋亡抑制剂Z-VAD-FMK处理后的GES-1细胞共培养,流式细胞术检测细胞凋亡情况,Western blot检测LC3B-Ⅱ、Caspase-3及PARP蛋白的表达。结果3-MA处理后,与空白对照组相比,Hp组LC3B-Ⅱ蛋白相对表达量显著增高(t=7.54,P<0.01);3-MA+Hp组与Hp组相比,LC3B-Ⅱ蛋白相对表达量显著降低(t=-3.24,P<0.05);与空白对照组相比,Hp组、3-MA组GES-1细胞凋亡率均显著增加(t值分别为-9.71和-3.25,P<0.01或P<0.05)。Z-VAD-FMK处理后,与空白对照组相比,Hp组GES-1细胞凋亡率显著增加,(t=-9.29,P<0.01);Hp+Z-VAD-FMK组较Hp组GES-1细胞凋亡率显著下降(t=-8.47,P<0.01);与空白对照组相比,Hp组、Z-VAD-FMK组的LC3B-Ⅱ蛋白相对表达量均显著增加(t值分别为-12.98和-11.28,均P<0.01)。3-MA与Z-VAD-FMK共处理后,3-MA+Hp+Z-VAD-FMK组较3-MA+Z-VAD-FMK组和Hp+Z-VAD-FMK组的GES-1细胞凋亡率显著增加(t值分别为-4.91和-9.64,P<0.05或P<0.01);3-MA+Hp+Z-VAD-FMK组与3-MA+Z-VAD-FMK组相比,Caspase-3蛋白相对表达量显著增加,PARP蛋白相对表达量显著下降(t值分别为-5.16和3.02,均P<0.05);3-MA+Hp+Z-VAD-FMK组较Hp+Z-VAD-FMK组LC3B-Ⅱ蛋白相对表达量显著下降(t=4.63,P<0.05)。结论幽门螺杆菌既能上调GES-1细胞自噬也能诱导其凋亡,并通过增加Caspase-3表达的同时降低PARP的表达以增强自噬抑制引起的细胞凋亡。而在抑制凋亡后,幽门螺杆菌可能诱导GES-1细胞发生自噬性死亡。

关键词：幽门螺杆菌自噬凋亡 GES-1细胞

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Pdcd1基因敲除鼠的构建及其对肿瘤生长的影响

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滨州医学院学报 2024年第6期47卷 452-458页

作者：刘润楷贾玉萱赵鑫钰李尊岭烟台毓璜顶医院检验科山东烟台264003 滨州医学院附属烟台山医院手术室山东烟台264003 滨州医学院基础医学院生物化学与分子生物学教研室山东烟台264003 山东省肿瘤免疫治疗研究创新团队山东烟台264003 山东省医药卫生呼吸系统感染与肿瘤免疫重点实验室山东烟台264003

目的获得程序性死亡受体-1基因(Pdcd1)敲除鼠,即C57BL/6J-Pdcd1^(-/-)鼠;构建小鼠荷瘤模型,初步探究Pdcd1基因敲除对肿瘤生长的影响。方法应用CRISPR/Cas9技术,将Cas9 mRNA和靶向Pdcd 1的gRNA显微注射到C57BL/6J小鼠的受精卵中,利用非... 详细信息

目的获得程序性死亡受体-1基因(Pdcd1)敲除鼠,即C57BL/6J-Pdcd1^(-/-)鼠;构建小鼠荷瘤模型,初步探究Pdcd1基因敲除对肿瘤生长的影响。方法应用CRISPR/Cas9技术,将Cas9 mRNA和靶向Pdcd 1的gRNA显微注射到C57BL/6J小鼠的受精卵中,利用非同源重组修复引入突变的方式,造成Pdcd1基因蛋白读码框移码和功能缺失,获得C57BL/6J-Pdcd1^(+/-)杂合子小鼠;杂合子小鼠自交,获得Pdcd1基因敲除的纯合子小鼠(C57BL/6J-Pdcd1^(-/-));接下来,应用PCR和基因测序确定小鼠基因型。提取C57BL/6J-Pdcd 1^(+/+)和C57BL/6J-Pdcd1^(-/-)小鼠外周血,流式细胞仪检测各免疫细胞水平;取小鼠脾脏CD3^(+)T细胞,anti-CD3/CD28 beads激活4天后,流式细胞仪检测活化CD3^(+)T细胞表面PD-1的表达。将3×10^(6)个小鼠结肠癌细胞MC38接种于C57BL/6J-Pdcd1^(+/+)和C57BL/6J-Pdcd 1^(-/-)小鼠皮下,每隔2天测量一次肿瘤体积,绘制肿瘤生长曲线;取小鼠肿瘤组织,拍照并称重,分析Pdcd1基因敲除对肿瘤生长大小的影响。结果测序结果序列对比表明,Pdcd1基因2-4号外显子之间缺失1691 bp,即Pdcd1基因产生了读码框移码突变;小鼠基因型的检测结果显示,引物P1/P2 PCR获得单一的341 bp片段,P3/P4 PCR不能获得条带,成功构建C57BL/6J-Pdcd1^(-/-)小鼠。流式检测结果显示,与C57BL/6J-Pdcd 1^(+/+)小鼠相比较,C57BL/6J-Pdcd 1^(-/-)小鼠外周血各免疫细胞水平无明显变化,活化的CD3^(+)T细胞表面几乎检测不到PD-1的表达。MC38小鼠皮下荷瘤模型表明,与WT小鼠相比较,C57BL/6J-Pdcd 1^(-/-)小鼠荷瘤后肿瘤生长显著被抑制。结论成功构建Pdcd1基因敲除鼠,小鼠Pdcd1基因敲除能够显著抑制肿瘤生长。

关键词：免疫检查点 PD-1 CD3^(+)T细胞肿瘤免疫

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CNV-seq技术在流产组织遗传病因学中的临床应用价值

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中国妇幼保健 2023年第9期38卷 1700-1705页

作者：孙雪晶张俊梅舒静周林魏娜席作明李有杰滨州医学院生物化学与分子生物学教研室山东烟台264003 聊城市东昌府区妇幼保健院检验科山东聊城252000

目的利用CNV-seq技术对流产组织或绒毛进行染色体异常分析,探讨早期流产和晚期流产患者的遗传学病因,为再生育提供指导。方法收集2015年7月—2021年8月在聊城市东昌府区妇幼保健院进行流产手术患者的流产物绒毛或肌肉组织,采用CNV-seq... 详细信息

目的利用CNV-seq技术对流产组织或绒毛进行染色体异常分析,探讨早期流产和晚期流产患者的遗传学病因,为再生育提供指导。方法收集2015年7月—2021年8月在聊城市东昌府区妇幼保健院进行流产手术患者的流产物绒毛或肌肉组织,采用CNV-seq技术进行染色体异常检测。结果检测样本622例,共检出染色体异常369例(59.3%),包括常染色体非整倍体210例(33.8%),性染色体非整倍体60例(9.6%),染色体微缺失/微重复83例(13.3%),非整倍体合并微缺失/微重复16例(2.6%)。早期流产和晚期流产患者染色体异常比例分别为62.5%(324/518)和43.3%(45/104)。早期流产患者常染色体非整倍体发生率(37.3%)高于晚期流产患者(16.3%),差异有统计学意义(χ^(2)=19.50,P<0.05),早期流产患者性染色体非整备体、染色体微缺失/微重复发生率(9.8%、12.4%)与晚期流产患者(8.6%、18.3%)比较,差异均无统计学意义(χ^(2)=0.47、2.62,均P>0.05)。所有流产胚胎中共检测出83例CNVs,其中“致病性”35例(42.2%)、“可能致病性”4例(4.8%)、“临床意义不明”41例(49.4%)、“可能良性”和“良性”3例(3.6%),35例“致病性”CNVs中发现22例微缺失/微重复综合征。结论利用CNV-seq技术进行流产组织的遗传学病因分析可以明确流产原因,为遗传咨询提供依据,为再生育提供指导。

关键词：流产染色体异常病因学 CNV-seq 再生育指导

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miRNA与伊马替尼耐药相关性的研究进展

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生命科学 2020年第6期32卷 581-589页

作者：曹慧贞孙航孙允霄滨州医学院烟台附属医院儿科烟台264100 滨州医学院生物化学与分子生物学教研室烟台264003

伊马替尼(imatinib,IM)是BCR-ABL1、KIT和PDGFR等多种酪氨酸激酶的抑制剂。90%~95%的慢性粒细胞白血病(CML)含有BCR-ABL融合基因,85%~90%的胃肠道间质瘤(GIST)存在KIT或PDGFRA突变,目前IM主要作为靶向药应用于CML和GIST,它的问世是CML和GIST治疗的重大突破。然而,约30%的CML由于耐药或不耐受而停止使用,约50%的GIST在治疗后的两年内出现了耐药,因此,了解IM耐药机制对于解决IM耐药问题至关重要。miRNA(microRNA,small RNA)是一类长约22 nt的非编码RNA,可通过与特定mRNA结合或调节特定mRNA的翻译过程来调控基因的表达。许多药物耐药与miRNA的异常表达有关,miRNA与IM耐药是近年来的研究热点,改变miRNA的表达模式可以有效抑制耐药和应对治疗。该文综述了miRNA表达与IM耐药的关系及其作用机制,为解决IM耐药问题提供了新的思路。

关键词：伊马替尼 miRNA 白血病胃肠道间质瘤

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齐墩果酸聚乙二醇修饰自组装及其对白血病细胞K562的增殖抑制作用

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山西医科大学学报 2022年第10期53卷 1227-1234页

作者：赵彬男毛晶葛堂栋张鹏霞王迪迪朴金花佳木斯大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室佳木斯154007 滨州医学院烟台附属医院医学美容科

目的用聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)对齐墩果酸(oleanolic acid,OA)进行修饰,并探讨其衍生物对人慢性粒细胞白血病细胞K562的抑制作用。方法以OA和PEG为原料,酯化法、纳米沉淀法合成齐墩果酸聚乙二醇衍生物,核磁共振、电子显微镜... 详细信息

目的用聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)对齐墩果酸(oleanolic acid,OA)进行修饰,并探讨其衍生物对人慢性粒细胞白血病细胞K562的抑制作用。方法以OA和PEG为原料,酯化法、纳米沉淀法合成齐墩果酸聚乙二醇衍生物,核磁共振、电子显微镜、动态光散射检测衍生物表征。CCK-8法检测齐墩果酸聚乙二醇衍生物对K562细胞增殖抑制的影响,倒置显微镜检测齐墩果酸聚乙二醇衍生物对K562细胞形态的影响,流式细胞术检测齐墩果酸聚乙二醇衍生物对K562细胞凋亡的影响,Western blot检测K562细胞凋亡蛋白(Caspase-3、Caspase-9、PARP-1)及其剪切后蛋白表达。结果成功合成了齐墩果酸聚乙二醇自组装颗粒OAP5,粒径为(584.49±76.2)nm,结构为核-壳结构,电位趋近于0 mV。OAP5对白血病细胞K562具有增殖抑制作用,处理48 h后的IC_(50)为(16.10±0.64)μg/ml。OAP5处理K562细胞后,细胞密度降低,萎缩变形,折光性变差。OAP5能够促进K562细胞凋亡,剪切Caspase-3、剪切Caspase-9、剪切PARP-1表达增多(P<0.05)。结论OAP5能够通过诱导白血病细胞K562凋亡作用而抑制K562细胞增殖,为齐墩果酸抗肿瘤临床应用提供了依据。

关键词：齐墩果酸聚乙二醇自组装 K562 凋亡

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临床耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌对头孢他啶/阿维巴坦的药物敏感性分析

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现代检验医学杂志 2022年第1期37卷 164-167页

作者：徐卫皓杨凤真伊茂礼薛兆平王鑫张玉梅滨州医学院基础医学院病原生物学教研室山东烟台264000 烟台毓璜顶医院检验中心山东烟台264000

目的分析携带不同碳青霉烯酶的耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌(carbapenem-resistant Enterobacteriaceae,CRE)对头孢他啶/阿维巴坦(cerftazidime-avibactam,CZA)的药物敏感性,为临床合理精准用药提供依据。方法采用药敏纸片扩散法(K-B法)对... 详细信息

目的分析携带不同碳青霉烯酶的耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌(carbapenem-resistant Enterobacteriaceae,CRE)对头孢他啶/阿维巴坦(cerftazidime-avibactam,CZA)的药物敏感性,为临床合理精准用药提供依据。方法采用药敏纸片扩散法(K-B法)对烟台毓璜顶医院2018~2020年临床分离并保存的98株非重复CRE菌株进行CZA的药敏试验,并对CZA抑菌圈在20~22mm的菌株用微量肉汤稀释法(broth microdilution method,BMD)进行验证,聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)方法检测其碳青霉烯酶型,分析产不同碳青霉烯酶的CRE菌株对CZA的药物敏感性。结果烟台毓璜顶医院CRE菌株以产金属β-内酰胺酶为主,占72.45%,总体对CZA敏感率为23.47%。CZA对单产丝氨酸酶(bla_(KPC),bla_(OXA-48))的CRE敏感率为100%,对单产金属酶(bla_(NDM),bla_(VIM),bla_(IMP))的CRE耐药率为100%,对同时产丝氨酸酶和金属酶的CRE菌株和对不产酶的CRE菌株敏感率分别为25.0%和83.3%。结论携带不同碳青霉烯酶的CRE菌株对CZA的药物敏感性不同,CZA体外药敏试验有必要在临床开展,同时需增加酶型检测方法指导临床精准用药。

关键词：耐碳青霉烯肠杆菌科细菌头孢他啶/阿维巴坦药物敏感性试验碳青霉烯酶型检测

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番茄红素对Fscn2基因敲除小鼠听力的保护作用

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滨州医学院学报 2023年第6期46卷 406-410页

作者：刘荣荣李玲金安潼王艳婷商文静陈良韩锋产滨州医学院基础医学院生物化学与分子生物学教研室山东烟台264003 青岛大学附属烟台毓璜顶医院耳鼻咽喉头颈外科山东烟台264000

目的探讨番茄红素对Fscn2^(-/-)小鼠听力减退的保护作用。方法通过PCR技术鉴定小鼠的基因型。取1周龄的Fscn2^(-/-)小鼠20只,随机分为2组,每组10只。实验组腹腔注射(20μg/g)番茄红素(用玉米油稀释),对照组给予等量的玉米油(1.0μL/g),... 详细信息

目的探讨番茄红素对Fscn2^(-/-)小鼠听力减退的保护作用。方法通过PCR技术鉴定小鼠的基因型。取1周龄的Fscn2^(-/-)小鼠20只,随机分为2组,每组10只。实验组腹腔注射(20μg/g)番茄红素(用玉米油稀释),对照组给予等量的玉米油(1.0μL/g),隔天1次,持续5周。末次注射药物48 h后,检测小鼠的听性脑干反应(ABR)阈值;耳蜗基底膜铺片,鬼笔环肽对毛细胞进行染色,观察毛细胞的变化;提取内耳蛋白,Western blot检测Bax、Bcl-2和Cleaved caspase 12在小鼠内耳中的水平。结果在不同音频(8、16、32 kHz和click)刺激下,番茄红素治疗组小鼠的ABR阈值均低于对照组,在8、16 kHz和click音频刺激下的ABR阈值差异有统计学意义(P<0.05)。毛细胞铺片发现,番茄红素治疗组小鼠耳蜗各回外毛细胞缺失率均减少,在底回的丢失率减少(P<0.05)。Western blot结果显示,番茄红素治疗组小鼠内耳凋亡相关分子(Bax和Cleaved caspase 12)水平降低,而Bcl-2表达升高。结论番茄红素治疗可以改善Fscn2^(-/-)小鼠的听力,减轻Fscn2^(-/-)小鼠外毛细胞的损害,其听力保护作用可能与抗凋亡机制有关。

关键词： fascin2 听力减退小鼠模型毛细胞番茄红素

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BOPPPS+雨课堂教学模式在麻醉生理学教学中的应用

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基础医学教育 2024年第10期26卷 881-885页

作者：贾强储晓曦刘小粉高琴马善峰凌云志杨锐蚌埠医科大学基础医学院生理学教研室蚌埠233030 蚌埠医科大学第一附属医院麻醉科合肥师范学院生物与食品工程学院生物制药系

麻醉生理学是麻醉学专业重要的专业基础课程,其教学质量直接影响学生的医学素养和临床实践能力的培养。BOPPPS+雨课堂是师生全方位参与式的互动教学模式。文章以麻醉生理学中麻醉与呼吸章节的教学实践为例,结合课程自身特点,通过整合教... 详细信息

麻醉生理学是麻醉学专业重要的专业基础课程,其教学质量直接影响学生的医学素养和临床实践能力的培养。BOPPPS+雨课堂是师生全方位参与式的互动教学模式。文章以麻醉生理学中麻醉与呼吸章节的教学实践为例,结合课程自身特点,通过整合教学环节、重构教学设计、优化课程考核方式,探讨新医科背景下如何充分利用BOPPPS和雨课堂的优势,在教学实践中将两者有机融合,实现以学生为中心及全过程评价的教学目标,有效提升学生的学习主动性及课程教学效果,为医学教育领域的教学改革提供有益参考。

关键词：麻醉生理学教学改革雨课堂 BOPPPS 麻醉与呼吸

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基因组拷贝数变异测序技术联合染色体核型分析在产前诊断中的应用价值

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中国妇幼保健 2023年第23期38卷 4701-4705页

作者：刘新周林孙雪晶于秀杰郭云霄李有杰滨州医学院生物化学与分子生物学教研室山东烟台264003 聊城市东昌府区妇幼保健院检验科山东聊城252000

目的探讨基因组拷贝数变异测序技术(CNV-seq)联合染色体核型分析在产前诊断中的应用价值。方法选取2017年4月—2022年3月在聊城市东昌府区妇幼保健院进行产前诊断的1 826例孕妇为研究对象,抽取羊水进行染色体核型分析及CNV-Seq,比较... 详细信息

目的探讨基因组拷贝数变异测序技术(CNV-seq)联合染色体核型分析在产前诊断中的应用价值。方法选取2017年4月—2022年3月在聊城市东昌府区妇幼保健院进行产前诊断的1 826例孕妇为研究对象,抽取羊水进行染色体核型分析及CNV-Seq,比较分析两种方法的检测结果。结果 1 826例羊水标本中,染色体核型分析异常检出率为8.21%(150/1 826),CNV-seq异常检出率为16.59%(303/1 826),两种方法联合应用的异常检出率为17.80%(325/1 826)。染色体核型分析与CNV-seq均检出数目异常93例;染色体核型分析检出结构异常34例,其中平衡性结构异常16例(CNV-seq未检出),非平衡性结构异常18例(CNV-seq也检出);CNV-seq额外检出168例染色体拷贝数变异(CNVs)。结论 CNV-seq与染色体核型分析联合检测可以提高染色体异常的检出率,降低出生缺陷发生率,还可以对结构异常片段进行精确定位,为临床遗传咨询提供更精准的信息。

关键词：基因组拷贝数变异测序技术染色体核型分析产前诊断

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