检索结果-内蒙古大学图书馆

中国医学科学院学报 2008年第5期30卷 554-558,I0001页

作者：文明李必波欧阳羽蒋明东罗弋李少林重庆医科大学附属第一医院放射科重庆400016 重庆医科大学药学院生物制药教研室重庆400016 重庆市第九人民医院肿瘤科重庆400700 重庆医科大学基础医学院放射肿瘤学教研室重庆400016

目的制备超顺磁性氧化铁(SPIO)标记的反义寡脱氧核苷酸(ASODN)探针,探讨其应用于转染细胞磁共振(MR)成像的可行性。方法采用化学交联法将SPIO标记于c-erbB2癌基因的ASODN制成ASODN探针,原子力显微镜检测探针形态,高效液相凝胶色谱法检... 详细信息

目的制备超顺磁性氧化铁(SPIO)标记的反义寡脱氧核苷酸(ASODN)探针,探讨其应用于转染细胞磁共振(MR)成像的可行性。方法采用化学交联法将SPIO标记于c-erbB2癌基因的ASODN制成ASODN探针,原子力显微镜检测探针形态,高效液相凝胶色谱法检测联接率和生物活性,聚丙烯酰胺凝胶电泳法检测稳定性。将ASODN探针转染高表达c-erbB2癌基因的SK-Br3肿瘤细胞株,普鲁士蓝染色后于光学显微镜下观察细胞内铁分布,原子吸收光谱法测定细胞内铁含量,MR扫描观察细胞信号强度变化情况。结果制备的ASODN探针近似球形,粒径在25～40nm间,分散均匀,联接率为100%,仍保持原有生物活性,稳定性好。转染ASODN探针后的SK-Br3细胞胞浆内可见多少不等的蓝色铁颗粒,细胞内铁含量明显高于未转染ASODN探针的其他各组细胞(P均<0.01);MR扫描显示其信号强度最弱,信噪比值明显低于其他各组细胞(P均<0.05)。结论成功制备SPIO标记ASODN探针,该探针能有效进入SK-Br3细胞内,明显降低MR扫描下的转染细胞信号强度。

关键词：磁共振成像超顺磁氧化铁反义寡脱氧核苷酸靶向对比剂

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离体动物细胞对病原菌的免疫防御作用

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滨州医学院学报 2008年第4期31卷 241-243页

作者：乔媛媛曹卫友宓伟孟玮张玉梅彭建新滨州医学院病原生物学教研室滨州市256603 滨州医学院中西医结合临床教研室华中师范大学农药与化学生物学教育部重点实验室

目的利用诱导的离体动物细胞系兔肾细胞RK13和昆虫细胞Tn-5B1产生抗菌活性肽类物质,筛选具有抑菌作用的抗菌药物。方法利用热灭活的大肠杆菌DH5α或柠檬色葡萄球菌分别诱导RK13和Tn-5B1,对16 h后的细胞诱导产物应用滤纸片法和双层平板... 详细信息

目的利用诱导的离体动物细胞系兔肾细胞RK13和昆虫细胞Tn-5B1产生抗菌活性肽类物质,筛选具有抑菌作用的抗菌药物。方法利用热灭活的大肠杆菌DH5α或柠檬色葡萄球菌分别诱导RK13和Tn-5B1,对16 h后的细胞诱导产物应用滤纸片法和双层平板法做抑菌活性检测。结果诱导的细胞系随着诱导时间延长出现了一系列形态变化。诱导产物均对受测细菌金黄色葡萄球菌形成了较明显的抑菌圈,且热灭活的大肠杆菌DH5α诱导RK13的诱导产物较之后者的抑菌圈更明显。结论RK13和Tn-5B1经热灭活的大肠杆菌和柠檬色葡萄球菌分别诱导后分泌了具有抗菌活性的物质。

关键词：离体细胞诱导抗菌肽免疫防御

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肠出血性大肠杆菌O157：H7基因工程疫苗免疫小鼠的实验研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2008年第9期28卷 828-832页

作者：程建平邹全明毛旭虎易勇王庆旭马颖徐州医学院附属淮安医院检验科 233002 第三军医大学临床微生物及免疫学教研室暨重庆市生物制药工程技术研究中心重庆400038

目的研究肠出血性大肠杆菌O157：H7基因工程疫苗免疫小鼠后对该菌感染的保护能力。方法将60只BALB／c小鼠平均分为5组，分别为3种抗原单独免疫、三抗原联合免疫和PBS对照组，用注射方式免疫3次，抗原和佐剂均为每次100μg／只。采集免... 详细信息

目的研究肠出血性大肠杆菌O157：H7基因工程疫苗免疫小鼠后对该菌感染的保护能力。方法将60只BALB／c小鼠平均分为5组，分别为3种抗原单独免疫、三抗原联合免疫和PBS对照组，用注射方式免疫3次，抗原和佐剂均为每次100μg／只。采集免疫前和各次免疫后7d的小鼠血清检测抗体，末次免疫10d后以10^9CFU的O157全菌液经口感染小鼠。观察小鼠临床症状及死亡情况，检测粪便与肠道带菌情况，并作病理组织学检测。结果各抗原免疫组小鼠特异抗体明显增加，感染后各组小鼠均有死亡，IntiminC300、Stx2B、HlyAN436和联合免疫组保护率分别为73％、64％、36％和91％。未病死小鼠粪便排菌情况：对照组22d，实验组为5—14d。肠道带菌情况：对照组阳性率为100％，实验组为25％-83％。病死小鼠肺脏、肝脏均有明显组织病理学改变。结论IntiminC300、Stx2B和HlyAN436疫苗对于O157感染具有一定的预防作用，而联合免疫效果又大于单独免疫。

关键词：肠出血性大肠杆菌O157:H7 紧密黏附素志贺毒素ⅡB亚单位 EHEC溶血素基因工程疫苗

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甘蓝型油菜乙酰辅酶A羧化酶3个亚基基因的克隆及其表达

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安徽农业科学 2008年第10期36卷 4002-4006页

作者：武玉永谭秀华马立新滨州医学院遗传学教研室山东烟台264003 湖北大学生命科学学院分子微生物学与基因工程实验室湖北武汉430062

[目的]为构建乙酰辅酶A羧化酶的叶绿体表达载体奠定基础：[方法]以从甘蓝型油菜叶片中提取的叶绿体基因组DNA为模板进行PCR扩增，克隆羧基转移酶β亚基基因.以从开花20～29d后油菜幼胚中提取的总RNA为模板进行RT-PCR扩增，克隆生物素羧... 详细信息

[目的]为构建乙酰辅酶A羧化酶的叶绿体表达载体奠定基础：[方法]以从甘蓝型油菜叶片中提取的叶绿体基因组DNA为模板进行PCR扩增，克隆羧基转移酶β亚基基因.以从开花20～29d后油菜幼胚中提取的总RNA为模板进行RT-PCR扩增，克隆生物素羧化酶和生物素羧基载体蛋白的。cDNA序列。最后，乙酰辅酶A羧化酶的3个亚基基因被克隆到大肠杆菌表达载体中：[结果]SDS-PAGE分析结果表明乙酰辅酶A羧化酶的3个亚基基因分别被克隆到大肠杆菌表达载体中。乙酰辅酶A羧化酶的3个亚基基因在大肠杆菌中的表达产物分别为76．6、44．0和81．5kD，其融合蛋白分别占总菌体蛋白的12％、10％和6％。

关键词：甘蓝型油莱乙酰辅酶A羧化酶基因克隆基因表达

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甘蓝型油菜叶绿体多顺反子单交换表达载体构建

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安徽农业科学 2008年第11期36卷 4431-4434页

作者：武玉永姚庆收马立新滨州医学院遗传学教研室山东烟台264003 湖北大学生命科学学院分子微生物学与基因工程实验室湖北武汉430062

[目的]为研究质体定位的乙酰辅酶A羧化酶转化叶绿体奠定基础。[方法]根据GeneBank上的甘蓝型油菜的叶绿体DNA序列设计1对引物,通过PCR扩增获得与甘蓝型油菜叶绿体基因组可发生同源重组的DNA片段,构建甘蓝型油菜叶绿体多顺反子单交换表... 详细信息

[目的]为研究质体定位的乙酰辅酶A羧化酶转化叶绿体奠定基础。[方法]根据GeneBank上的甘蓝型油菜的叶绿体DNA序列设计1对引物,通过PCR扩增获得与甘蓝型油菜叶绿体基因组可发生同源重组的DNA片段,构建甘蓝型油菜叶绿体多顺反子单交换表达载体,并在大肠杆菌中通过平板定性分析和Western印迹对所构建载体上的表达盒进行功能鉴定。[结果]以甘蓝型油菜的叶片叶绿体基因组DNA为模板进行PCR扩增,获得4 357 bp的DNA片段,包含2个开放阅读框RbcL和β-CT。成功构建了甘蓝型油菜叶绿体多顺反子单交换表达载体pHBM720,而且同一多顺反子的3个基因均在大肠杆菌中得到表达。[结论]该叶绿体多顺反子单交换表达载体具有较强的通用性与安全性,比双交换表达载体更具优越性。

关键词：甘蓝型油菜叶绿体DNA 多顺反子单交换表达载体

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乳腺癌中线粒体基因组D环区基因突变的研究

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滨州医学院学报 2008年第4期31卷 246-248页

作者：焦飞常峰马颖刘长福谢书阳滨州医学院生物化学与分子生物学教研室滨州市256603 胜利油田中心医院病理科

目的通过检测乳腺癌基因组D环区体细胞突变和种系性变异,探讨其与乳腺癌发生的关系。方法提取24例乳腺癌患者癌、癌旁组织及外周血细胞总DNA,PCR扩增各组织线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)基因组D环(D-loop),基因测序后与线粒体文... 详细信息

目的通过检测乳腺癌基因组D环区体细胞突变和种系性变异,探讨其与乳腺癌发生的关系。方法提取24例乳腺癌患者癌、癌旁组织及外周血细胞总DNA,PCR扩增各组织线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)基因组D环(D-loop),基因测序后与线粒体文库中的剑桥序列比对,分析突变类型。结果在24例乳腺癌组织中,共发现91个种系性变异,11例(45.8%)肿瘤发现体细胞突变共19例次,36.8%位于第一高变区,52.6%位于第二高变区。结论乳腺癌mtDNA D环区具有高度多态性和高度突变率,该区的碱基改变在乳腺癌的形成中可能起重要作用。

关键词：乳腺肿瘤线粒体DNA 突变多态性

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几株野生鸟类来源的Ⅰ型禽副粘病毒分子生物学特征的研究

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中国兽药杂志 2008年第6期42卷 12-15页

作者：刘海霞敖艳华广东永顺生物制药有限公司广州511356 华南农业大学兽医学院禽病学教研室

参考GenBank中Ⅰ型禽副粘病毒（Avian paramyxovirus,APMV-1）序列,在F基因的3’端相对保守区设计1对引物,利用RT-PCR方法对华南农业大学兽医学院禽病学教研室近两年来从广州和深圳两个地区分离的4种动物来源共10株Ⅰ型禽副粘病毒毒株的... 详细信息

参考GenBank中Ⅰ型禽副粘病毒（Avian paramyxovirus,APMV-1）序列,在F基因的3’端相对保守区设计1对引物,利用RT-PCR方法对华南农业大学兽医学院禽病学教研室近两年来从广州和深圳两个地区分离的4种动物来源共10株Ⅰ型禽副粘病毒毒株的F基因进行扩增,其扩增长度约为450bp。测序结果表明：广州株与NDV的基因Ⅵ型有高度的同源性,1个深圳株与Ⅶ型有较高的同源性,其氨基酸序列均符合F蛋白裂解位点区（112-117）强毒株的氨基酸序列特征;其他4个深圳株均与基因Ⅰ型有很高的同源性,其氨基酸序列均符合F蛋白裂解位点区（112-117）弱毒株的氨基酸序列特征。

关键词： Ⅰ型禽副粘病毒 F基因序列分析基因型

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大鼠脊髓半横断损伤后硫酸软骨素蛋白多糖Versican的变化

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解剖学研究 2008年第2期30卷 105-107,111页

作者：赵伟张连双章为彭谨滨州医学院组织学与胚胎学教研室山东烟台264003 四川大学华西基础医学与法医学院组织胚胎与神经生物学教研室四川成都610041

目的观察大鼠脊髓半横断损伤(hSCI)位点头尾段硫酸软骨素蛋白多糖Versican的表达变化,探讨其与脊髓损伤修复的关系。方法20只成年健康SD大鼠随机分为假手术对照组和脊髓半横断损伤3d、7d和14d组。建立成年SD大鼠脊髓半横断(T9～T10)模... 详细信息

目的观察大鼠脊髓半横断损伤(hSCI)位点头尾段硫酸软骨素蛋白多糖Versican的表达变化,探讨其与脊髓损伤修复的关系。方法20只成年健康SD大鼠随机分为假手术对照组和脊髓半横断损伤3d、7d和14d组。建立成年SD大鼠脊髓半横断(T9～T10)模型。取损伤位点头尾段T9、T10节段制作冰冻切片,运用Versican抗血清进行免疫组化ABC法染色。分别观察并计数各组前角中Versican阳性细胞数,采用计算机图像分析技术测量免疫阳性产物的平均光密度(A)值。结果Versican阳性产物主要分布于细胞外基质中,前角神经元和胶质细胞的胞浆中也有分布;损伤后前角中Versican阳性神经元和胶质细胞数较对照组明显减少(P<0.05),免疫阳性产物平均A值较对照组明显增加(P<0.05)。结论脊髓半横断损伤后,表达增加的Versican很可能参与损伤后轴突生长被抑制的过程。

关键词：脊髓半横断损伤 Versican 硫酸软骨素蛋白多糖大鼠

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多重等位基因PCR技术对中国人5种常见β-地中海贫血突变的快速产前诊断

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青岛大学医学院学报 2008年第6期44卷 498-500页

作者：焦飞赵新东马颖刘长福滨州医学院烟台校区生物化学与分子生物学教研室山东烟台264003 青岛大学医学院附属医院血液科

目的对中国人常见的CD71-72、CD41-42、CD17→0、IVS-Ⅱ-654C→T和-28A→G等5种β-地中海贫血突变类型进行多重等位基因特异性PCR(MASPCR)技术检测,以证实该方法的可靠性和准确性。方法利用针对野生型及突变性β-珠蛋白等位基因的特异引... 详细信息

目的对中国人常见的CD71-72、CD41-42、CD17→0、IVS-Ⅱ-654C→T和-28A→G等5种β-地中海贫血突变类型进行多重等位基因特异性PCR(MASPCR)技术检测,以证实该方法的可靠性和准确性。方法利用针对野生型及突变性β-珠蛋白等位基因的特异引物,应用单管MASPCR技术对我国常见的5种β-地中海贫血点突变类型进行产前分子检测。结果在被检测的8个家庭共24例受试者中,有17例表现为携带至少一种突变类型的杂合子。其中胎儿有1例为β-地中海贫血双重杂合子,5例为杂合子,2例正常。经分娩或流产后基因分析验证,所有结果均与产前诊断一致。结论MASPCR技术适合于检测β-地中海贫血已知点突变类型,是一种简便、可靠、经济的产前基因诊断方法,具有广阔的优生科学应用前景。

关键词：地中海贫血产前诊断聚合酶链式反应

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针刺对备用背根节神经元CNTF和PDGF表达的影响

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解剖学研究 2008年第2期30卷 122-126页

作者：张连双张洪芹赵伟章为王廷华滨州医学院烟台校区组织与胚胎学教研室山东烟台264003 四川大学华西基础与法医学院组织胚胎与神经生物学教研室四川成都610041

目的探讨部分去背根后针刺对备用背根节神经元睫状神经营养因子(CNTF)及血小板源性生长因子(PDGF)表达的影响。方法制备猫双侧备用背根模型(切除双侧L1～L5、L7～S2背根节,保留L6背根节为备用背根节)。针刺位于右侧备用根支配区的两组... 详细信息

目的探讨部分去背根后针刺对备用背根节神经元睫状神经营养因子(CNTF)及血小板源性生长因子(PDGF)表达的影响。方法制备猫双侧备用背根模型(切除双侧L1～L5、L7～S2背根节,保留L6背根节为备用背根节)。针刺位于右侧备用根支配区的两组穴位。针刺7d及14d后取备用背根节用CNTF抗血清(1∶500)及PDGF抗血清(1∶200)行免疫组织化学ABC法染色。分别记数各组阳性总、大及中小神经元的数量。结果正常组左右L6背根节的细胞数无差异,CNTF、PDGF阳性神经元数在7d、14d时与正常组比较无差异。针刺侧CNTF阳性总、大及中小神经元数在针刺7d时均显著多于非针刺侧(P<0.05),而针刺14d时,只有阳性大神经元数多于非针刺侧(P<0.05)。PDGF阳性总及大神经元数针刺7d时多于非针刺侧(P<0.05),针刺14d时,阳性总及中小神经元多于非针刺侧(P<0.05)。结论针刺可促进去背根后备用背根节CNTF、PDGF的表达,这种促进作用显效的时间因不同因子和不同种类的背根节神经元而异。

关键词：睫状神经营养因子血小板源性生长因子针刺备用背根节猫

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