检索结果-内蒙古大学图书馆

中国病原生物学杂志 2016年第7期11卷 643-648页

作者：柏雪莲李波清张玉梅张艳丽耿丽杜镇镇赵慧琳滨州医学院病原生物学教研室山东烟台256603

目的了解华支睾吸虫Parkin蛋白(Clonorchis sinensis Parkin)的生物学特性。方法从华支睾吸虫cDNA文库获得Parkin的cDNA全长,NCBI搜索与之相似度高的基因序列,预测其所含结构域和功能;应用MEGA5程序对来自GenBank中与之有较高相似度的... 详细信息

目的了解华支睾吸虫Parkin蛋白(Clonorchis sinensis Parkin)的生物学特性。方法从华支睾吸虫cDNA文库获得Parkin的cDNA全长,NCBI搜索与之相似度高的基因序列,预测其所含结构域和功能;应用MEGA5程序对来自GenBank中与之有较高相似度的基因序列进行分析,构建基因进化树;原核表达重组融合蛋白CsParkin,纯化后免疫Blab/c小鼠,获得多克隆抗体,采用Western blot鉴定天然CsParkin;采用qRT-PCR测定CsParkin基因在不同发育阶段的表达水平。结果 CsParkin蛋白含有5个结构域,分别是Ubl、RING0、RING1、IBR和RING2,具有典型的Parkin蛋白结构;该蛋白与人及各种动物的Parkin有很高的相似度,与其他吸虫有更近的进化关系;Western blot显示原核表达的重组CsParkin,与天然CsParkin分子质量相同,均为45.7ku;CsParkin在囊蚴中的表达量高于成虫;免疫组化显示CsParkin主要分布于成虫受精囊中的精子及口吸盘和睾丸,在囊蚴中广泛分布。结论肝吸虫CsParkin属蛋白于保守蛋白,具有典型的泛素连接酶3的功能结构,推测其在蛋白的泛素化中起到作用,可能在华支睾吸虫的生长过程中发挥作用。

关键词：华支睾吸虫 Parkin 泛素连接酶

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基于灰色系统GM(1,1)模型的山东省卫生总费用预测研究

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中国卫生统计 2016年第4期33卷 653-656页

作者：相静孔杨徐天和滨州医学院卫生统计学教研室 264003 滨州医学院数学教研室滨州医学院期刊部

目的分析山东省卫生总费用核算和卫生筹资结构情况,对山东省卫生总费用及构成部分总体规模及变化趋势进行预测分析,为山东省政府部门和卫生部门卫生筹资策略和机制的建立提供科学依据,为有效减轻人民群众的疾病负担和社会负担提出建议... 详细信息

目的分析山东省卫生总费用核算和卫生筹资结构情况,对山东省卫生总费用及构成部分总体规模及变化趋势进行预测分析,为山东省政府部门和卫生部门卫生筹资策略和机制的建立提供科学依据,为有效减轻人民群众的疾病负担和社会负担提出建议和对策。方法采用《山东省统计年鉴》1998-2012年间卫生总费用相关资料,建立灰色系统GM(1,1)模型,利用R软件分析山东省卫生总费用及构成的变化趋势,并对卫生费用结构的分布情况及趋势进行预测分析。结果 1998-2012年,山东省卫生总费用由195.71亿元增加到1928.88亿元,人均卫生总费用从221.4元增加到1992元,卫生总费用占GDP的比例从2.79%增加到3.86%;政府和社会卫生支出占卫生总费用的比重分别从15.67%28.93%增加到25.84%和37.66%,个人卫生支出比重从62.45%降低到36.50%。针对山东省卫生总费用GM(1,1)灰色预测模型,X^((1))(k+1)=1029.65882e^((0.173716k))-833.948821,以预测未来十年山东省卫生总费用利用情况。结论基于GM(1,1)模型预测山东省卫生总费用及占GDP的比值呈上升趋势,个人卫生支出占比逐年下降。山东省还需进一步提高卫生筹资水平,合理化卫生筹资构成,加大政府卫生投入,降低个人筹资比例,进一步减轻人民群众的疾病负担和社会负担。

关键词：卫生总费用筹资结构灰色模型

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LAIR-1 siRNA对幽门螺杆菌诱导单核细胞THP-1凋亡的影响

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中国病原生物学杂志 2016年第8期11卷 690-695页

作者：孙辉张莹季晓飞陈醒醒李娇娇李波清滨州医学院病原生物学教研室山东烟台264003

目的研究LAIR-1基因沉默对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori)诱导单核细胞THP-1凋亡的影响。方法以Hp ATCC26695分别感染THP-1细胞6、12、24和48h,采用流式细胞术检测细胞凋亡及LAIR-1蛋白的表达。应用Lipofectamine RNAiMAX转染3对LAIR-1siRNAs入单核细胞THP-1中,采用半定量RT-PCR及流式细胞术检测沉默效应,筛选出的较有效的一对siRNA再转染入单核细胞THP-1,48h后加入Hp培养24h,采用流式细胞术检测细胞凋亡率。结果 Hp感染THP-1细胞6、12、24和48h后的细胞凋亡率分别为(84±1.77)%、(69.13±4.29)%、(48.3±3.37)%和(21.1±4.67)%,LAIR-1蛋白表达相对荧光强度分别为14 934±178、14 369±244、12 259±523和7438±539;转染后48h较有效的siRNA对LAIR-1mRNA及蛋白沉默效率分别为(39.1±4.67)%和(38.4±3.18)%;将筛选出的siRNA转染细胞48h后,用Hp感染24h,流式细胞仪检测显示转染组与阴性对照组细胞凋亡率分别为(56.1±9.8)%和(36.9±3.2)%,转染后感染组与空白组LAIR-1蛋白表达相对荧光强度分别为12 181±219和10 228±136。结论在Hp感染细胞THP-1 48h内,随着感染时间延长LAIR-1的表达及THP-1细胞凋亡率显著降低即LAIR-1siRNA能抑制LAIR-1的表达及THP-1细胞的凋亡。

关键词：幽门螺杆菌单核细胞凋亡白细胞相关免疫球蛋白样受体-1 小分子干扰RNA

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整合素β1亚基对幽门螺杆菌感染胃上皮细胞GES-1凋亡及增殖的影响

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中国病原生物学杂志 2016年第10期11卷 888-892,896页

作者：陈醒醒张莹孙辉李娇娇张艳丽李波清滨州医学院病原生物学教研室山东烟台264003

目的分析幽门螺杆菌感染胃上皮细胞过程中整合素β1亚基表达的变化,观察整合素β1对幽门螺杆菌感染胃上皮细胞GES-1凋亡及增殖的影响。方法将幽门螺杆菌与胃上皮细胞GES-1共培养,采用流式细胞术检测整合素β1的表达量变化;应用iRNA技术... 详细信息

目的分析幽门螺杆菌感染胃上皮细胞过程中整合素β1亚基表达的变化,观察整合素β1对幽门螺杆菌感染胃上皮细胞GES-1凋亡及增殖的影响。方法将幽门螺杆菌与胃上皮细胞GES-1共培养,采用流式细胞术检测整合素β1的表达量变化;应用iRNA技术降低胃上皮细胞GES-1中β1亚基的表达;幽门螺杆菌感染胃上皮细胞及iRNA降低β1的表达后,采用流式细胞术检测细胞的凋亡,采用CCK-8法检测细胞增殖情况。结果幽门螺杆菌感染胃上皮细胞12、24、48h后空白对照组凋亡率分别为(10.80±0.71)%、(12.23±0.06)%和(12.30±2.12)%,Hp感染组凋亡率分别为(24.20±0.14)%、(30.05±2.47)%和(26.40±1.91)%,差异均有统计学意义(t值分别为-26.28、-7.701和-12.855,P<0.05);与幽门螺杆菌共培养6、24、48h胃上皮细胞增殖受到抑制,抑制率分别为(35.00±3.22)%、(40.96±2.45)%和(8.00±3.33)%;幽门螺杆菌与胃上皮细胞GES-1共培养24、48h流式细胞术检测整合素β1表达,空白对照组平均荧光强度(MFI)分别为(1616.33±24.70)和(1834.67±17.01),Hp感染组为(1484.00±60.89)和(1376.00±14.11),差异有统计学意义(t值分别为3.488和35.95,P<0.05);应用iRNA技术降低胃上皮细胞GES-1整合素β1亚基表达24、48h,对照组凋亡率分别为(18.75±3.59)%和(39.75±3.68)%,iRNA组凋亡率分别为(26.25±4.11)%和(55.30±5.57)%,差异有统计学意义(t值为-2.746和-4.656,P<0.05);胃上皮细胞中β1亚基的表达降低后细胞增殖受到抑制,24、36、48、72h抑制率分别为(6.16±1.07)%、(17.15±2.76)%、(10.84±1.34)%和(21.87±1.72)%。结论幽门螺杆菌能降低胃上皮细胞GES-1整合素β1亚基的表达,而且可能通过降低整合素β1亚基的表达促进上皮细胞GES-1的凋亡并抑制其增殖。

关键词：整合素β1 胃上皮细胞幽门螺杆菌 iRNA

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形成性评价在以培养应用型人才为导向的统计学专业本科课程改革中的作用

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滨州医学院学报 2017年第6期40卷 457-459页

作者：韩春蕾秦国民王玖刘海霞张中文滨州医学院公共卫生与管理学院卫生统计学教研室烟台264003 滨州医学院教学质量监控处

目的 2016版统计学专业培养方案以应用型人才的培养为目标,然而统计学专业学生在学习专业课程时感到枯燥,传统的终结性评价影响了学习积极性的提高,本文拟建立部分专业核心课程的形成性评价改革方案。方法在分析统计学专业培养目标、学... 详细信息

目的 2016版统计学专业培养方案以应用型人才的培养为目标,然而统计学专业学生在学习专业课程时感到枯燥,传统的终结性评价影响了学习积极性的提高,本文拟建立部分专业核心课程的形成性评价改革方案。方法在分析统计学专业培养目标、学习困境和原因分析的基础上,探索统计学专业核心课程形成性评价改革方案。结果形成统计学专业的核心课程统计预测与决策、计量经济学的形成性评价考核方式的改革方案。结论形成性评价可提高统计学专业学生的学习积极性,增强学生应用统计学解决实际问题的能力,可为其他专业相关课程的形成性评价开展提供借鉴。

关键词：形成性评价应用性人才统计学专业课程改革

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小细胞肺癌中转录因子E2F1调控的靶基因（英文）

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生理学报 2016年第3期68卷 276-284页

作者：李尊岭焦飞马颖岳真孔丽君滨州医学院生物化学与分子生物学教研室

本研究组前期研究结果表明,转录因子E2F1在大约95%的小细胞肺癌组织中表达上调,而且与其浸润、转移密切相关,但是E2F1在小细胞肺癌中调控的靶基因未见报道。本研究旨在探索E2F1在小细胞肺癌细胞株H1688中调控的靶基因。染色体免疫共沉... 详细信息

本研究组前期研究结果表明,转录因子E2F1在大约95%的小细胞肺癌组织中表达上调,而且与其浸润、转移密切相关,但是E2F1在小细胞肺癌中调控的靶基因未见报道。本研究旨在探索E2F1在小细胞肺癌细胞株H1688中调控的靶基因。染色体免疫共沉淀联合测序(chromatin immunoprecipitation sequencing,Ch IP-seq)结果显示,在小细胞肺癌H1688细胞中,E2F1能够调控5 326个靶基因的表达,其中4 700个是结构基因,626个基因编码长链非编码RNA。基因功能注释(gene ontology,GO)和基因富集图谱(enrichment map)分析显示,E2F1调控的靶基因功能主要集中在3个方面:细胞周期调控、染色体和组蛋白修饰以及蛋白转运。MEME4.7.0软件分析显示,E2F1通过结合6个序列调控相关靶基因和长链非编码序列的表达。以上结果阐明了E2F1在小细胞肺癌中调控的靶基因,为进一步研究E2F1在小细胞肺癌发生、发展、浸润与转移、复发和耐药中的作用提供了实验依据。

关键词： E2F1 小细胞肺癌染色体免疫共沉淀联合测序

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中医学专业中药学教学质量监控初探

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滨州医学院学报 2017年第4期40卷 298-300页

作者：林海燕于佳宁于京平滨州医学院中西医结合学院中药方剂学教研室烟台264003 滨州医学院烟台附属医院两腺外科

中药学是中医学专业的核心课程,其教学质量直接影响到后续方剂学、经典课程以及临床课程的学习。故对中药学教学质量进行全程监控为培养高质量的应用型中医人才具有举足轻重的作用。目前,对中药学课程进行教学改革,大多从教学方法、教... 详细信息

中药学是中医学专业的核心课程,其教学质量直接影响到后续方剂学、经典课程以及临床课程的学习。故对中药学教学质量进行全程监控为培养高质量的应用型中医人才具有举足轻重的作用。目前,对中药学课程进行教学改革,大多从教学方法、教学内容等方面进行,尚缺乏系统、

关键词：中药学教学质量监控

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基因敲除质粒载体的构建及其在幽门螺杆菌基因敲除中的应用

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中国病原生物学杂志 2016年第12期11卷 1066-1069,1073页

作者：季晓飞赵慧琳张莹柏雪莲张艳丽荣倩玉李波清滨州医学院病原生物学教研室山东烟台264003

目的构建用于幽门螺杆菌(helicobacter pylori,Hp)同源重组双交换基因敲除的质粒载体,实现Hp内基因的快速敲除。方法以质粒pLYL03为骨架,重新排列质粒上的基因元件以减少冗余序列,用卡那霉素抗性基因(aphA)替换原质粒上的红霉素抗性基... 详细信息

目的构建用于幽门螺杆菌(helicobacter pylori,Hp)同源重组双交换基因敲除的质粒载体,实现Hp内基因的快速敲除。方法以质粒pLYL03为骨架,重新排列质粒上的基因元件以减少冗余序列,用卡那霉素抗性基因(aphA)替换原质粒上的红霉素抗性基因作为抗性筛选标记,在抗性筛选标记两端构建多克隆位点用于同源重组同源臂的插入,由此构建用于Hp同源重组双交换基因敲除的质粒载体pSJHK。以质粒pSJHK为载体构建hp0169基因的同源重组双交换敲除质粒pSJHK-0169,通过电击转化方法将敲除质粒pSJHK-0169转入Hp中,用卡那霉素筛选转化子。结果以质粒pLYL03为基础构建用于Hp同源重组双交换基因敲除的质粒载体pSJHK,大小4 371bp。以基因hp0169作为目标基因构建同源重组双交换敲除质粒pSJHK-0169,经电击转化Hp中,获得卡那霉素抗性阳性转化子,测序确证基因敲除成功。结论构建的基因敲除质粒载体pSJHK实现了对Hp中目标基因的敲除,为Hp新基因功能研究和致病因子的发掘提供了有效的基因操作工具。

关键词：幽门螺杆菌基因敲除质粒同源重组

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STIM1在KA致痫大鼠大脑皮质内的表达上调

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解剖科学进展 2017年第6期23卷 642-644,648页

作者：卢敏祝晓莹黄鹂河南科技大学医学院人体解剖与组织胚胎学教研室河南洛阳471003 河南科技大学医学院病原学教研室河南洛阳471003

目的研究基质相互作用分子1(stromal interaction molecule l,STIM1)在海人酸(Kainic acid,KA)致痫大鼠大脑皮质中的表达变化,探讨其与癫痫发病的关系及意义。方法 48只成年雄性SD大鼠随机分为正常对照组(NS组)24只和海人酸致痫组(KA组... 详细信息

目的研究基质相互作用分子1(stromal interaction molecule l,STIM1)在海人酸(Kainic acid,KA)致痫大鼠大脑皮质中的表达变化,探讨其与癫痫发病的关系及意义。方法 48只成年雄性SD大鼠随机分为正常对照组(NS组)24只和海人酸致痫组(KA组)24只,海人酸致痫组给予侧脑室注射KA 2μg/kg(7μl左右)制作KA致痫模型,正常对照组给予侧脑室注射等量生理盐水,观察记录各组大鼠癫痫发作的行为学表现,并于癫痫发作后不同时间点(48h、72h)随机取12只大鼠伤侧皮层脑组织,用半定量RT-PCR、Western blot和免疫组织化学技术检测STIM1的mRNA和蛋白的表达。结果 KA致痫组大鼠于造模后5min左右出现典型痫性发作,达Ⅳ~Ⅴ级,持续数小时;海人酸致痫组STIM1mRNA和蛋白表达水平在各时间点均较对照组显著增高(P<0.05)。结论 STIM1在KA致痫大鼠皮层脑组织中过表达可能参与癫痫的发病机制。

关键词：癫痫 STIM1 KA海人酸大脑皮质大鼠

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分子伴侣幽门螺杆菌Hsp60与UreB的相互作用分析

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中国病原生物学杂志 2016年第11期11卷 977-981页

作者：赵慧琳季晓飞张艳丽柏雪莲李娇娇陈醒醒张玉梅李波清滨州医学院病原生物学教研室山东烟台264003

目的检测并分析幽门螺杆菌(Hp)尿素酶β亚基(UreB)与Hsp60之间的相互作用。方法克隆Hp 26695的尿素酶β亚基基因(UreB)融合GST标签和Hsp60基因融合His标签,分别在大肠埃希菌中进行异源表达。提取两种蛋白,采用pull-down方法检测两者间... 详细信息

目的检测并分析幽门螺杆菌(Hp)尿素酶β亚基(UreB)与Hsp60之间的相互作用。方法克隆Hp 26695的尿素酶β亚基基因(UreB)融合GST标签和Hsp60基因融合His标签,分别在大肠埃希菌中进行异源表达。提取两种蛋白,采用pull-down方法检测两者间的相互作用。利用Modeller 9v2软件,以***的GroEL为基础模建Hp Hsp60的三维结构,再与已知的UreB结构利用AutoDock 4.2软件进行分子共模拟,分析二者的相互作用面和关键氨基酸。结果构建了Hp Hsp60和尿素酶β亚基(UreB)的大肠埃希菌异源表达体系并获得纯化蛋白;Pull-down试验显示部分未融合GST标签的Hsp60出现在GST-UreB的洗脱液中,表明Hsp60与GST-UreB之间存在相互作用;以***的GroEL为基础模建了Hp Hsp60的三维结构,利用docking技术构建UreB与Hp Hsp60的相互作用模型,发现其主要的相互作用面位于Hsp60的α9与UreB的α2之间,其可能形成氢键的关键位点为UreB的α2上的T147氨基酸与Hsp60的α9上的E237、K238。结论 Hp Hsp60能直接与尿素酶β亚基(UreB)相互作用,Hsp60可能通过这种相互作用在UreB成熟过程中发挥分子伴侣功能。这为阐明Hp尿素酶的组装与成熟机制奠定了基础。

关键词：幽门螺杆菌尿素酶 Hsp60 分子伴侣相互作用

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