检索结果-内蒙古大学图书馆

滨州医学院学报 2024年第6期47卷 452-458页

作者：刘润楷贾玉萱赵鑫钰李尊岭烟台毓璜顶医院检验科山东烟台264003 滨州医学院附属烟台山医院手术室山东烟台264003 滨州医学院基础医学院生物化学与分子生物学教研室山东烟台264003 山东省肿瘤免疫治疗研究创新团队山东烟台264003 山东省医药卫生呼吸系统感染与肿瘤免疫重点实验室山东烟台264003

目的获得程序性死亡受体-1基因(Pdcd1)敲除鼠,即C57BL/6J-Pdcd1^(-/-)鼠;构建小鼠荷瘤模型,初步探究Pdcd1基因敲除对肿瘤生长的影响。方法应用CRISPR/Cas9技术,将Cas9 mRNA和靶向Pdcd 1的gRNA显微注射到C57BL/6J小鼠的受精卵中,利用非... 详细信息

目的获得程序性死亡受体-1基因(Pdcd1)敲除鼠,即C57BL/6J-Pdcd1^(-/-)鼠;构建小鼠荷瘤模型,初步探究Pdcd1基因敲除对肿瘤生长的影响。方法应用CRISPR/Cas9技术,将Cas9 mRNA和靶向Pdcd 1的gRNA显微注射到C57BL/6J小鼠的受精卵中,利用非同源重组修复引入突变的方式,造成Pdcd1基因蛋白读码框移码和功能缺失,获得C57BL/6J-Pdcd1^(+/-)杂合子小鼠;杂合子小鼠自交,获得Pdcd1基因敲除的纯合子小鼠(C57BL/6J-Pdcd1^(-/-));接下来,应用PCR和基因测序确定小鼠基因型。提取C57BL/6J-Pdcd 1^(+/+)和C57BL/6J-Pdcd1^(-/-)小鼠外周血,流式细胞仪检测各免疫细胞水平;取小鼠脾脏CD3^(+)T细胞,anti-CD3/CD28 beads激活4天后,流式细胞仪检测活化CD3^(+)T细胞表面PD-1的表达。将3×10^(6)个小鼠结肠癌细胞MC38接种于C57BL/6J-Pdcd1^(+/+)和C57BL/6J-Pdcd 1^(-/-)小鼠皮下,每隔2天测量一次肿瘤体积,绘制肿瘤生长曲线;取小鼠肿瘤组织,拍照并称重,分析Pdcd1基因敲除对肿瘤生长大小的影响。结果测序结果序列对比表明,Pdcd1基因2-4号外显子之间缺失1691 bp,即Pdcd1基因产生了读码框移码突变;小鼠基因型的检测结果显示,引物P1/P2 PCR获得单一的341 bp片段,P3/P4 PCR不能获得条带,成功构建C57BL/6J-Pdcd1^(-/-)小鼠。流式检测结果显示,与C57BL/6J-Pdcd 1^(+/+)小鼠相比较,C57BL/6J-Pdcd 1^(-/-)小鼠外周血各免疫细胞水平无明显变化,活化的CD3^(+)T细胞表面几乎检测不到PD-1的表达。MC38小鼠皮下荷瘤模型表明,与WT小鼠相比较,C57BL/6J-Pdcd 1^(-/-)小鼠荷瘤后肿瘤生长显著被抑制。结论成功构建Pdcd1基因敲除鼠,小鼠Pdcd1基因敲除能够显著抑制肿瘤生长。

关键词：免疫检查点 PD-1 CD3^(+)T细胞肿瘤免疫

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CNV-seq技术在流产组织遗传病因学中的临床应用价值

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中国妇幼保健 2023年第9期38卷 1700-1705页

作者：孙雪晶张俊梅舒静周林魏娜席作明李有杰滨州医学院生物化学与分子生物学教研室山东烟台264003 聊城市东昌府区妇幼保健院检验科山东聊城252000

目的利用CNV-seq技术对流产组织或绒毛进行染色体异常分析,探讨早期流产和晚期流产患者的遗传学病因,为再生育提供指导。方法收集2015年7月—2021年8月在聊城市东昌府区妇幼保健院进行流产手术患者的流产物绒毛或肌肉组织,采用CNV-seq... 详细信息

目的利用CNV-seq技术对流产组织或绒毛进行染色体异常分析,探讨早期流产和晚期流产患者的遗传学病因,为再生育提供指导。方法收集2015年7月—2021年8月在聊城市东昌府区妇幼保健院进行流产手术患者的流产物绒毛或肌肉组织,采用CNV-seq技术进行染色体异常检测。结果检测样本622例,共检出染色体异常369例(59.3%),包括常染色体非整倍体210例(33.8%),性染色体非整倍体60例(9.6%),染色体微缺失/微重复83例(13.3%),非整倍体合并微缺失/微重复16例(2.6%)。早期流产和晚期流产患者染色体异常比例分别为62.5%(324/518)和43.3%(45/104)。早期流产患者常染色体非整倍体发生率(37.3%)高于晚期流产患者(16.3%),差异有统计学意义(χ^(2)=19.50,P<0.05),早期流产患者性染色体非整备体、染色体微缺失/微重复发生率(9.8%、12.4%)与晚期流产患者(8.6%、18.3%)比较,差异均无统计学意义(χ^(2)=0.47、2.62,均P>0.05)。所有流产胚胎中共检测出83例CNVs,其中“致病性”35例(42.2%)、“可能致病性”4例(4.8%)、“临床意义不明”41例(49.4%)、“可能良性”和“良性”3例(3.6%),35例“致病性”CNVs中发现22例微缺失/微重复综合征。结论利用CNV-seq技术进行流产组织的遗传学病因分析可以明确流产原因,为遗传咨询提供依据,为再生育提供指导。

关键词：流产染色体异常病因学 CNV-seq 再生育指导

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齐墩果酸聚乙二醇修饰自组装及其对白血病细胞K562的增殖抑制作用

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山西医科大学学报 2022年第10期53卷 1227-1234页

作者：赵彬男毛晶葛堂栋张鹏霞王迪迪朴金花佳木斯大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室佳木斯154007 滨州医学院烟台附属医院医学美容科

目的用聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)对齐墩果酸(oleanolic acid,OA)进行修饰,并探讨其衍生物对人慢性粒细胞白血病细胞K562的抑制作用。方法以OA和PEG为原料,酯化法、纳米沉淀法合成齐墩果酸聚乙二醇衍生物,核磁共振、电子显微镜... 详细信息

目的用聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)对齐墩果酸(oleanolic acid,OA)进行修饰,并探讨其衍生物对人慢性粒细胞白血病细胞K562的抑制作用。方法以OA和PEG为原料,酯化法、纳米沉淀法合成齐墩果酸聚乙二醇衍生物,核磁共振、电子显微镜、动态光散射检测衍生物表征。CCK-8法检测齐墩果酸聚乙二醇衍生物对K562细胞增殖抑制的影响,倒置显微镜检测齐墩果酸聚乙二醇衍生物对K562细胞形态的影响,流式细胞术检测齐墩果酸聚乙二醇衍生物对K562细胞凋亡的影响,Western blot检测K562细胞凋亡蛋白(Caspase-3、Caspase-9、PARP-1)及其剪切后蛋白表达。结果成功合成了齐墩果酸聚乙二醇自组装颗粒OAP5,粒径为(584.49±76.2)nm,结构为核-壳结构,电位趋近于0 mV。OAP5对白血病细胞K562具有增殖抑制作用,处理48 h后的IC_(50)为(16.10±0.64)μg/ml。OAP5处理K562细胞后,细胞密度降低,萎缩变形,折光性变差。OAP5能够促进K562细胞凋亡,剪切Caspase-3、剪切Caspase-9、剪切PARP-1表达增多(P<0.05)。结论OAP5能够通过诱导白血病细胞K562凋亡作用而抑制K562细胞增殖,为齐墩果酸抗肿瘤临床应用提供了依据。

关键词：齐墩果酸聚乙二醇自组装 K562 凋亡

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细胞自噬与肝细胞癌的研究进展

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基础医学与临床 2021年第10期41卷 1514-1517页

作者：吴娜王东白咸勇滨州医学院基础医学院组织学与胚胎学教研室山东烟台264003

细胞自噬是真核生物维持内环境稳态的一种保护性机制。同时,在维持肿瘤细胞存活及能量代谢方面具有重要作用,并通过不同机制影响肝癌的治疗效果。如肝细胞通过自噬维持肝内稳态,自噬引起肝癌细胞产生耐药性,以及自噬抑制剂和天然提取物... 详细信息

细胞自噬是真核生物维持内环境稳态的一种保护性机制。同时,在维持肿瘤细胞存活及能量代谢方面具有重要作用,并通过不同机制影响肝癌的治疗效果。如肝细胞通过自噬维持肝内稳态,自噬引起肝癌细胞产生耐药性,以及自噬抑制剂和天然提取物通过自噬途径发挥抗肝癌作用。对深入探讨自噬在肝癌预防和治疗中的调控具有重大意义。

关键词：自噬肝细胞癌治疗自噬相关基因

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羟基红花黄色素A抑制人肝癌细胞系Huh7发生上皮-间质转化

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基础医学与临床 2021年第10期41卷 1423-1427页

作者：吴娜王东李京敏白咸勇滨州医学院基础医学院组织学与胚胎学教研室山东烟台264003

目的研究羟基红花黄色素A(HSYA)对人肝癌细胞系Huh7迁移及侵袭的影响,并通过体内外实验探究其是否影响肝癌细胞上皮-间质转化(EMT)。方法体外培养Huh7细胞,分为对照组、HSYA 80和160μmol/L实验组,分别处理24 h,用transwell小室法和细... 详细信息

目的研究羟基红花黄色素A(HSYA)对人肝癌细胞系Huh7迁移及侵袭的影响,并通过体内外实验探究其是否影响肝癌细胞上皮-间质转化(EMT)。方法体外培养Huh7细胞,分为对照组、HSYA 80和160μmol/L实验组,分别处理24 h,用transwell小室法和细胞划痕实验检测细胞侵袭和迁移能力;Western blot检测细胞vimentin和E-cadherin蛋白表达;建立Huh7细胞裸鼠皮下移植瘤模型,HE染色观察移植瘤和肝脏组织形态;免疫组化检测移植瘤组织TGF-β1、vimentin和E-cadherin表达情况。结果与对照组相比,HSYA实验组Huh7细胞迁移与侵袭能力明显下降,E-cadherin蛋白表达升高,vimentin蛋白表达下降(P<0.05);与移植组相比,HSYA实验组(2.25 mg/kg)肝内无肿瘤细胞转移,移植瘤组织出现肿瘤细胞坏死,E-cadherin表达升高,vimentin和TGF-β1表达下降(P<0.05)。结论HSYA通过抑制肝癌细胞发生EMT,抑制肝癌细胞的迁移及侵袭能力。

关键词：羟基红花黄色素A 肝癌上皮-间质转化 TGF-β1

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番茄红素对Fscn2基因敲除小鼠听力的保护作用

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滨州医学院学报 2023年第6期46卷 406-410页

作者：刘荣荣李玲金安潼王艳婷商文静陈良韩锋产滨州医学院基础医学院生物化学与分子生物学教研室山东烟台264003 青岛大学附属烟台毓璜顶医院耳鼻咽喉头颈外科山东烟台264000

目的探讨番茄红素对Fscn2^(-/-)小鼠听力减退的保护作用。方法通过PCR技术鉴定小鼠的基因型。取1周龄的Fscn2^(-/-)小鼠20只,随机分为2组,每组10只。实验组腹腔注射(20μg/g)番茄红素(用玉米油稀释),对照组给予等量的玉米油(1.0μL/g),... 详细信息

目的探讨番茄红素对Fscn2^(-/-)小鼠听力减退的保护作用。方法通过PCR技术鉴定小鼠的基因型。取1周龄的Fscn2^(-/-)小鼠20只,随机分为2组,每组10只。实验组腹腔注射(20μg/g)番茄红素(用玉米油稀释),对照组给予等量的玉米油(1.0μL/g),隔天1次,持续5周。末次注射药物48 h后,检测小鼠的听性脑干反应(ABR)阈值;耳蜗基底膜铺片,鬼笔环肽对毛细胞进行染色,观察毛细胞的变化;提取内耳蛋白,Western blot检测Bax、Bcl-2和Cleaved caspase 12在小鼠内耳中的水平。结果在不同音频(8、16、32 kHz和click)刺激下,番茄红素治疗组小鼠的ABR阈值均低于对照组,在8、16 kHz和click音频刺激下的ABR阈值差异有统计学意义(P<0.05)。毛细胞铺片发现,番茄红素治疗组小鼠耳蜗各回外毛细胞缺失率均减少,在底回的丢失率减少(P<0.05)。Western blot结果显示,番茄红素治疗组小鼠内耳凋亡相关分子(Bax和Cleaved caspase 12)水平降低,而Bcl-2表达升高。结论番茄红素治疗可以改善Fscn2^(-/-)小鼠的听力,减轻Fscn2^(-/-)小鼠外毛细胞的损害,其听力保护作用可能与抗凋亡机制有关。

关键词： fascin2 听力减退小鼠模型毛细胞番茄红素

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LAIR-1对GM-CSF介导的JAK/STAT信号通路的调节作用及其对Mo7e细胞功能的影响

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医学研究杂志 2023年第11期52卷 39-44页

作者：张娅薇吴肖婕杨蕊樊翠周嘉迪薛江楠滨州医学院免疫学教研室 264003 滨州市人民医院中心实验室 256610 临沂市中医医院超声医学科 276000 陕西中医药大学附属医院检验科咸阳712000

目的研究人白细胞相关免疫球蛋白样受体1(leukocyte-associated immunoglobulin-like receptor-1,LAIR-1)对粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony-stimulating factor,GM-CSF)依赖的Mo7e细胞增殖、凋亡和迁移的影响,并探讨LAIR-1调节GM-CSF功能的分子机制,为进一步研究LAIR-1在造血细胞分化中的作用提供资料。方法采用LAIR-1慢病毒表达载体(LV-LAIR-1)转染GM-CSF依赖的Mo7e细胞,建立稳定高表达LAIR-1的Mo7e-LAIR-1细胞株,并采用流式细胞术、Western blot法检测、反转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)以及激光扫描共聚焦显微镜(laser scanning confocal microscopy,LSCM)鉴定LAIR-1分子的表达;采用CCK-8试剂盒、FITC Annexin V凋亡试剂盒以及Transwell实验分别检测LAIR-1对Mo7e细胞功能的影响;采用Western blot法检测LAIR-1对酪氨酸蛋白激酶/信号转导及转录激活因子(janus kinase/signal transducer and activator of transcription,JAK/STAT)信号通路影响。结果经LV-LAIR-1转染的Mo7e细胞高表达LAIR-1分子;与对照组比较,LAIR-1能够显著抑制Mo7e细胞的增殖(P<0.001),促进细胞迁移(P<0.05),但对细胞凋亡无明显影响(P>0.05);GM-CSF能够上调JAK2、STAT1、STAT3和STAT5的磷酸化水平,而LAIR-1的表达能够明显抑制STAT1、STAT3和STAT5蛋白酪氨酸的磷酸化水平。结论免疫抑制性受体LAIR-1可能通过抑制细胞因子GM-CSF介导的JAK/STAT信号通路的活化,参与对髓系造血细胞分化的调节。

关键词： LAIR-1 GM-CSF 酪氨酸磷酸化增殖迁移凋亡

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基因组拷贝数变异测序技术联合染色体核型分析在产前诊断中的应用价值

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中国妇幼保健 2023年第23期38卷 4701-4705页

作者：刘新周林孙雪晶于秀杰郭云霄李有杰滨州医学院生物化学与分子生物学教研室山东烟台264003 聊城市东昌府区妇幼保健院检验科山东聊城252000

目的探讨基因组拷贝数变异测序技术(CNV-seq)联合染色体核型分析在产前诊断中的应用价值。方法选取2017年4月—2022年3月在聊城市东昌府区妇幼保健院进行产前诊断的1 826例孕妇为研究对象,抽取羊水进行染色体核型分析及CNV-Seq,比较... 详细信息

目的探讨基因组拷贝数变异测序技术(CNV-seq)联合染色体核型分析在产前诊断中的应用价值。方法选取2017年4月—2022年3月在聊城市东昌府区妇幼保健院进行产前诊断的1 826例孕妇为研究对象,抽取羊水进行染色体核型分析及CNV-Seq,比较分析两种方法的检测结果。结果 1 826例羊水标本中,染色体核型分析异常检出率为8.21%(150/1 826),CNV-seq异常检出率为16.59%(303/1 826),两种方法联合应用的异常检出率为17.80%(325/1 826)。染色体核型分析与CNV-seq均检出数目异常93例;染色体核型分析检出结构异常34例,其中平衡性结构异常16例(CNV-seq未检出),非平衡性结构异常18例(CNV-seq也检出);CNV-seq额外检出168例染色体拷贝数变异(CNVs)。结论 CNV-seq与染色体核型分析联合检测可以提高染色体异常的检出率,降低出生缺陷发生率,还可以对结构异常片段进行精确定位,为临床遗传咨询提供更精准的信息。

关键词：基因组拷贝数变异测序技术染色体核型分析产前诊断

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黄芩苷对脂多糖诱导的大鼠滑膜RSC-364细胞自噬的抑制作用

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吉林大学学报（医学版） 2020年第3期46卷 498-503页

作者：王映映孙利娟范紫微古虹游先梅关天昊张成义陈曦北华大学医学院病原学教研室吉林吉林132013 北华大学药学院药理教研室吉林吉林132013 北华大学医学院医学影像学教研室吉林吉林132013 北华大学医学技术学院医学检验技术教研室吉林吉林132013

目的:探讨黄芩苷通过磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/雷帕霉素(PI3k/Akt/mTOR)信号通路对脂多糖(LPS)诱导的大鼠滑膜RSC-364细胞自噬的影响,并阐明其作用机制。方法:将对数生长期大鼠滑膜RSC-364细胞分为对照组、模型组、地塞米松(DXMS)组... 详细信息

目的:探讨黄芩苷通过磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/雷帕霉素(PI3k/Akt/mTOR)信号通路对脂多糖(LPS)诱导的大鼠滑膜RSC-364细胞自噬的影响,并阐明其作用机制。方法:将对数生长期大鼠滑膜RSC-364细胞分为对照组、模型组、地塞米松(DXMS)组、10μmol·L-1黄芩苷组、20μmol·L-1黄芩苷组和40μmol·L-1黄芩苷组。对照组RSC-364细胞只加入培养基,其他各组RSC-364细胞均采用1 mg·L-1LPS体外刺激12 h制作炎症细胞模型。采用MTT法检测各组RSC-364细胞存活率,RT-PCR法检测各组RSC-364细胞中PI3k、Akt、mTOR、Beclin1和微管相关蛋白-轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)mRNA表达水平,Western blotting法检测各组RSC-364细胞中Beclin1、Atg5、Atg7、Atg12、LC3-Ⅱ和P62蛋白表达水平。结果:与对照组比较,模型组RSC-364细胞存活率明显升高(P<0.01),模型组RSC-364细胞中PI3k、Akt、mTOR mRNA和P62蛋白表达水平明显降低(P<0.05或P<0.01),Atg5、Atg7、Atg12、LC3-Ⅱ、Beclin1 mRNA及蛋白表达水平明显升高(P<0.01);与模型组比较,不同浓度黄芩苷组RSC-364细胞存活率明显降低(P<0.05或P<0.01),RSC-364细胞中PI3k、Akt、mTOR mRNA和P62蛋白表达水平明显升高(P<0.05或P<0.01),Atg5、Atg7、Atg12、LC3-Ⅱ、Beclin1 mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.05或P<0.01)。结论:黄芩苷可能通过激活PI3k/Akt/mTOR信号通路抑制LPS诱导的RSC-364细胞自噬。

关键词：黄芩苷 RSC-364细胞风湿性关节炎滑膜成纤维细胞自噬

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基于成果导向的局部解剖学线上线下混合式教学设计

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基础医学教育 2021年第4期23卷 262-264页

作者：梁少华纪丕友魏明超王利民滨州医学院基础医学院人体解剖学教研室烟台264003 滨州医学院烟台附属医院肝胆胰脾外科滨州医学院烟台附属医院胸外科

为打造临床医学专业人才知识-能力-素质协同发展的局部解剖学教学新模式,提高教学质量,文章在对局部解剖学的课情、学情及教情现状深度剖析基础上,贯穿以学生为中心、成果为导向、持续改进的理念,借助中国大学慕课平台,就“教什么-怎么... 详细信息

为打造临床医学专业人才知识-能力-素质协同发展的局部解剖学教学新模式,提高教学质量,文章在对局部解剖学的课情、学情及教情现状深度剖析基础上,贯穿以学生为中心、成果为导向、持续改进的理念,借助中国大学慕课平台,就“教什么-怎么教-怎么考-怎么评”进行教学设计,提出了临床手术案例导向-学生线上自主学习-线下课堂小组讨论-思维导图总结的线上线下混合式教学模式,学生认同度达90%。

关键词：局部解剖学混合式教学教学设计成果导向

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