检索结果-内蒙古大学图书馆

中国病原生物学杂志 2023年第9期18卷 1039-1046页

作者：高敏吴家红程金芝张霞牟小会聂映彭哲慧李志强赵久刚商正玲刘磊蓝静刘红美贵州医科大学生物与工程学院/健康医药现代产业学院生物技术教研室贵州贵阳550025 贵州医科大学基础医学院人体寄生虫学教研室贵州医科大学现代病原生物学特色重点实验室贵州医科大学基础医学院免疫学教研室

目的初探白纹伊蚊唾液蛋白Antigen5-3(Alb-AG5-3)的结构与功能特征,并采用果蝇S2真核表达体系表达Alb-AG5-3。方法采取同源比对的方式,从NCBI数据库中钓取Antigen5-3序列,根据白纹伊蚊分泌蛋白Antigen5-3基因参考序列(GenBank:AY82610... 详细信息

目的初探白纹伊蚊唾液蛋白Antigen5-3(Alb-AG5-3)的结构与功能特征,并采用果蝇S2真核表达体系表达Alb-AG5-3。方法采取同源比对的方式,从NCBI数据库中钓取Antigen5-3序列,根据白纹伊蚊分泌蛋白Antigen5-3基因参考序列(GenBank:AY826105.1)设计特异性引物,从白纹伊蚊安顺株中扩增基因全长。经序列比对后利用美国国家生物技术信息中心(NCBI)和瑞士生物信息学研究所的蛋白分析专家系统(Expasy)以及生物信息学在线软件SignalP、TMHMM、SOPMA、SWISS-MODEL、AlphaFold等对该蛋白进行生物信息学分析。Trizol法提取白纹伊蚊雌蚊与雄蚊整蚊以及吸血前后雌蚊唾液腺RNA,qRT-PCR检测Alb-AG5-3在RNA相对表达量;以白纹伊蚊整蚊cDNA为模板,特异性扩增除信号肽外的Alb-AG5-3编码区,PCR产物经切胶回收纯化后与昆虫真核表达载体pMT/BiP/V5连接,构建真核重组质粒pMT/BiP/V5-Alb-AG5-3。随后转入果蝇S2细胞中,500μmol/L CuSO4诱导重组蛋白Alb-AG5-3的表达。收集上清,采用Western blot鉴定V5表达标签,镍柱亲和层析纯化重组蛋白Alb-AG5-3。结果生物信息学分析该基因CDS(Coding sequence)区扩增全长为768 bp,编码255个氨基酸,二、三级结构预测以无规则卷曲和a-螺旋为主,具CAP超家族经典的PR-1结构域,该基因编码的蛋白是一种强亲水性(GRAVY:-0.864)的富含半胱氨酸的分泌蛋白。Alb-AG5-3 mRNA在雌蚊中表达量高于雄蚊且吸血后的表达量显著下调。成功构建了白纹伊蚊唾液蛋白pMT/BiP/V5-Alb-AG5-3真核表达质粒并通过果蝇S2表达体系表达出真核蛋白,镍柱亲和纯化后的Alb-AG5-3经Western blot检测能被V5标签蛋白抗体识别。结论成功构建白纹伊蚊Alb-AG5-3真核质粒并在果蝇S2细胞中表达真核蛋白Alb-AG5-3,镍柱亲和纯化后获得单一的Alb-AG5-3蛋白以备后续分析。

关键词：白纹伊蚊唾液腺 Alb-AG5-3蛋白真核表达

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蒲公英甾醇对2,4-二硝基氯苯诱导的特应性皮炎小鼠模型的改善作用

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中国免疫学杂志 2023年第10期39卷 2160-2165页

作者：马天怡毛敏吴秋月赵益朴英实金桂花任香善(指导) 延边大学医学院病理学教研室肿瘤研究中心延吉133002 延边大学医学院延吉133002 延边大学国家民委重点实验室/吉林省科技厅重点实验室延吉133002 延边大学医学院免疫学与病原生物学教研室延吉133002

目的:初步探讨蒲公英甾醇对特应性皮炎小鼠模型的治疗作用及可能的分子机制。方法:选用BALB/c雄性小鼠,采用2,4-二硝基氯苯构建特应性皮炎小鼠模型,并灌胃低浓度和高浓度的蒲公英甾醇进行治疗,观察皮损情况、搔抓次数,测定脏器指数,进... 详细信息

目的:初步探讨蒲公英甾醇对特应性皮炎小鼠模型的治疗作用及可能的分子机制。方法:选用BALB/c雄性小鼠,采用2,4-二硝基氯苯构建特应性皮炎小鼠模型,并灌胃低浓度和高浓度的蒲公英甾醇进行治疗,观察皮损情况、搔抓次数,测定脏器指数,进行病理学HE染色、CD4^(+)免疫组化实验,ELISA法检测炎症因子TNF-α、IL-4、IL-6水平。结果:蒲公英甾醇能够显著降低小鼠的皮损程度、皮肤厚度、搔抓次数、脏器指数,减少炎症细胞浸润、表皮角化、棘层增厚,降低血清中TNF-α、IL-4、IL-6水平。结论:蒲公英甾醇能够改善小鼠特应性皮炎状况,其机制可能与抑制TNF-α、IL-4、IL-6有关。

关键词：蒲公英甾醇特应性皮炎 2,4-二硝基氯苯炎症因子

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结核分枝杆菌c-di-AMP磷酸二酯酶的重组腺病毒的构建及其诱导的体液免疫应答

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中国人兽共患病学报 2025年

作者：胡家豪宁唤唤董梦娟路延之代婷张从玥徐子晴王姝予周正言柏银兰空军军医大学基础医学院微生物与病原生物学教研室空军军医大学基础医学院学员队空军军医大学军事医学创新中心宁夏医科大学基础医学院生理学和神经生物学系延安大学生命科学学院

目的构建表达结核分枝杆菌（Mtb）c-di-AMP磷酸二酯酶CnpB的重组腺病毒（rAd）并检测其诱导的体液免疫应答。方法经密码子优化的MtbCnpB编码基因克隆入质粒pcADV，获得的重组质粒pcADV-CnpB转染HEK293T细胞，并用Westernblot鉴定表达... 详细信息

目的构建表达结核分枝杆菌（Mtb）c-di-AMP磷酸二酯酶CnpB的重组腺病毒（rAd）并检测其诱导的体液免疫应答。方法经密码子优化的MtbCnpB编码基因克隆入质粒pcADV，获得的重组质粒pcADV-CnpB转染HEK293T细胞，并用Westernblot鉴定表达。重组pcADV-CnpB与骨架质粒共转染HEK293T细胞包装获得重组腺病毒rAd-CnpB，以HEK293T细胞扩增rAd-CnpB，Westernblot和免疫荧光检测rAd-CnpB表达目的蛋白。以rAd-CnpB滴鼻免疫小鼠，收集小鼠血清与肺泡灌洗液（BALF），ELISA检测抗原特异性抗体水平。结果酶切和测序鉴定表明重组质粒pcADV-CnpB构建成功，该质粒能够在真核细胞中表达。在HEK293T细胞内包装并获得rAd-CnpB，大量扩增并纯化获得滴度为5.53×1010PFU/mL的rAd-CnpB。rAd-CnpB可在HEK293T细胞中表达目的蛋白CnpB。rAd-CnpB滴鼻免疫小鼠，可诱导BALF中CnpB特异性IgG与分泌型IgA水平的增加，同时诱导血清中产生高水平的CnpB特异性IgG。结论成功构建表达Mtb c-di-AMP磷酸二酯酶CnpB的重组腺病毒rAd-CnpB，并且rAd-CnpB经黏膜免疫可诱导抗原特异性体液免疫与黏膜免疫应答，可用于结核病新疫苗策略的研究。

关键词：结核分枝杆菌重组腺病毒 c-di-AMP 磷酸二酯酶黏膜免疫

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MSMEG_0372基因敲除、回补及过表达耻垢分枝杆菌的构建与鉴定

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石河子大学学报（自然科学版） 2022年第5期40卷 620-626页

作者：刘仪牛宏红杨赛丽曹旭东袁俐石河子大学医学院病原生物学与免疫学教研室新疆石河子832000

目的为研究MSMEG_0372基因的功能,构建该基因敲除、回补及过表达耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis,***)并鉴定。方法聚合酶链反应(PCR)扩增MSMEG_0372基因的左、右臂(即等位基因互换底物,allele exchange substrates,AES)。AES与p0004s经过酶切并连接,构建p0004s-AES质粒。p0004s-AES与phAE159经过酶切并连接,构建phAE159-AES噬菌粒。噬菌粒转化至***,30℃培养,扩增重组噬菌体。用重组噬菌体侵染***,37℃培养,发生基因同源重组,形成MSMEG_0372基因敲除菌株。筛选阳性菌落,PCR鉴定。PCR扩增MSMEG_0372基因,构建pMV361-MSMEG_0372质粒。将pMV361-MSMEG_0372质粒分别导入MSMEG_0372基因敲除菌株和野生型***,构建MSMEG_0372基因回补菌株和MSMEG_0372基因过表达菌株。筛选阳性菌落,PCR鉴定。结果PCR扩增出MSMEG_0372的左、右臂(AES),构建了p0004s-AES质粒和phAE159-AES噬菌粒,制备了高滴度的重组噬菌体并侵染***,从而成功构建了MSMEG_0372基因敲除菌株。构建了pMV361-MSMEG_0372质粒,成功构建了MSMEG_0372基因回补和过表达菌株。结论成功构建并鉴定了MSMEG_0372基因敲除、回补及过表达***,为进一步研究该基因的功能奠定了基础。

关键词：耻垢分枝杆菌 MSMEG_0372基因基因敲除基因回补基因过表达

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MSMEG3150调控耻垢分枝杆菌细胞壁的结构与生物膜的形成

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石河子大学学报（自然科学版） 2022年第3期40卷 352-361页

作者：牛宏红刘仪杨赛丽曹旭东袁俐石河子大学医学院病原生物学与免疫学教研室新疆石河子832000

目的探讨耻垢分枝杆菌中MSMEG_3150蛋白的功能。方法构建耻垢分枝杆菌MSMEG_3150过表达株;采用CRISPRi技术构建耻垢分枝杆菌MSMEG_3150沉默株。使用MSMEG_3150过表达株、沉默株和野生型菌株进行实验研究。测定细菌生长曲线;刚果红实... 详细信息

目的探讨耻垢分枝杆菌中MSMEG_3150蛋白的功能。方法构建耻垢分枝杆菌MSMEG_3150过表达株;采用CRISPRi技术构建耻垢分枝杆菌MSMEG_3150沉默株。使用MSMEG_3150过表达株、沉默株和野生型菌株进行实验研究。测定细菌生长曲线;刚果红实验检测细菌表面疏水性。透射电镜、扫描电镜等观察菌体形态、结构。LC-MS测定脂肪酸含量。结晶紫染色定量生物膜形成。结果过表达MSMEG_3150导致菌体变长、细胞壁增厚,生长速度加快,脂质含量增多,增强细菌表面的疏水性,促进生物膜形成。结论 MSMEG_3150可能通过调控耻垢分枝杆菌细胞壁的脂质含量和表面疏水性从而影响细菌的生长特性及生物膜的形成。

关键词：结核分枝杆菌 FabG1 生物膜脂质合成表面疏水性

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卡介苗对1型糖尿病小鼠的免疫治疗作用及其机制

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解放军医学杂志 2023年第7期48卷 768-775页

作者：康亚莉扈启宽宁唤唤周洁任瑞康健路延之韦垠高晓菁张琳娜柏银兰宁夏医科大学基础医学院宁夏银川750001 空军军医大学基础医学院微生物与病原生物学教研室陕西西安710032 空军军医大学西京医院内分泌科陕西西安710032

目的评价卡介苗(BCG)对1型糖尿病(T1DM)小鼠的免疫治疗效果,并探索其作用机制。方法将15只SPF级雄性C57BL/6小鼠随机分为造模组(n=10,腹腔注射50 mg/kg链尿佐菌素建立T1DM模型)与对照组(n=5,腹腔注射等量柠檬酸缓冲液);取造模成功即随... 详细信息

目的评价卡介苗(BCG)对1型糖尿病(T1DM)小鼠的免疫治疗效果,并探索其作用机制。方法将15只SPF级雄性C57BL/6小鼠随机分为造模组(n=10,腹腔注射50 mg/kg链尿佐菌素建立T1DM模型)与对照组(n=5,腹腔注射等量柠檬酸缓冲液);取造模成功即随机血糖≥16.7 mmol/L的10只小鼠分为T1DM组(n=5)与卡介苗(BCG)组(n=5)。随后BCG组小鼠经皮下注射BCG 1×10^(6) cfu/只进行免疫治疗,4周后加强免疫治疗1次,T1DM组与对照组注射相同剂量磷酸盐缓冲液(PBS)。在实验周期(13周)内,每周监测小鼠体重和进食量变化,尾静脉采血检测各组小鼠血糖水平,采用口服葡萄糖耐量实验(OGTT)检测各组小鼠葡萄糖负荷后的血糖调节能力。采用HE染色观察各组小鼠胰腺组织病理变化,免疫组化染色检测胰腺胰岛素水平,酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组小鼠血清C-肽含量,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组小鼠脾组织细胞因子mRNA水平,流式细胞术检测各组小鼠脾细胞中调节性T细胞(Treg)比例。结果BCG免疫治疗2次后(第13周),T1DM组小鼠血糖水平明显高于对照组(P<0.001),而BCG组血糖水平虽高于对照组(P<0.01),但明显低于T1DM组(P<0.01)。OGTT结果显示,3组小鼠在葡萄糖灌胃后血糖水平迅速升高,120 min时开始下降,到180 min时,对照组小鼠血糖水平降至正常水平;与对照组比较,T1DM组及BCG组小鼠在120 min后血糖水平虽有下降趋势,但在180 min时仍明显高于对照组(P<0.001),而BCG组与T1DM组间差异无统计学意义(P>0.05)。在初次免疫时(第5周),与对照组比较,T1DM组和BCG组小鼠体重增长百分比明显降低(P<0.0001),进食量明显增加(P<0.0001)。BCG免疫治疗2次后(第13周),与对照组比较,T1DM组小鼠体重增长百分比仍明显降低(P<0.0001),进食量明显增加(P<0.0001);与T1DM组比较,BCG组小鼠体重增长百分比增高(P<0.001),进食量减少(P<0.001),且与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。HE染色结果显示,与对照组比较,T1DM组小鼠胰岛发生明显的萎缩,而BCG组小鼠胰岛形态与对照组接近,且胰岛内细胞数目明显多于T1DM组。免疫组化染色结果显示,与对照组比较,T1DM组小鼠胰腺中胰岛素阳性面积明显减少(P<0.01),而BCG组胰岛素阳性面积虽然少于对照组(P<0.05),但明显多于T1DM组(P<0.05)。ELISA检测结果显示,与对照组比较,T1DM组、BCG组血清C-肽含量明显降低(P<0.001,P<0.05),但BCG组血清C-肽含量明显高于T1DM组(P<0.05)。qRT-PCR结果显示,与对照组比较,T1DM组脾组织细胞因子mRNA水平无明显变化(P>0.05);BCG组白细胞介素-2(IL-2)、IL-10、转化生长因子-β(TGF-β)mRNA水平与对照组和T1DM组比较均明显升高(P<0.0001),而γ干扰素(IFN-γ)mRNA水平无明显变化(P>0.05)。流式细胞术检测结果显示,与对照组比较,T1DM组小鼠体内Treg细胞百分比降低(P<0.05);与T1DM组比较,BCG组小鼠Treg细胞百分比明显增高(P<0.05),且与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论BCG免疫治疗可诱导Treg细胞增多,调节自身免疫应答,并通过减轻胰腺病理损伤、恢复胰岛细胞功能以促进胰岛素分泌,从而降低T1DM小鼠的血糖水平。

关键词：卡介苗 1型糖尿病免疫治疗

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Chidamide诱导的LncRNA ENST00000448869.1靶向作用Nestin抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞的生长

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中国药理学通报 2021年第12期37卷 1694-1699页

作者：郭亚瑞周伟强沈阳医学院基础医学院病原生物学教研室辽宁沈阳110034

目的研究在Chidamide抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞生长中,LncRNA ENST00000448869.1靶向调控Nestin对细胞生长的影响。方法以人乳腺癌MDA-MB-231细胞为研究对象,通过高通量测序进行RNA文库筛查及测序比对分析,筛选经Chidamide处理后存在差... 详细信息

目的研究在Chidamide抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞生长中,LncRNA ENST00000448869.1靶向调控Nestin对细胞生长的影响。方法以人乳腺癌MDA-MB-231细胞为研究对象,通过高通量测序进行RNA文库筛查及测序比对分析,筛选经Chidamide处理后存在差异表达的LncRNA;利用蛋白互作生物学软件推测与该LncRNA互作的蛋白质;Muse细胞分析仪检测Chidamide对细胞活力的影响;Real-time PCR和Western blot检测Chidamide作用细胞后LncRNA及其互作蛋白的mRNA和蛋白表达的变化;特异siRNA敲除LncRNA后,Muse细胞分析仪检测细胞活力;Real-time PCR和Western blot检测LncRNA及其互作蛋白的mRNA和蛋白表达变化。结果从LncRNA大数据库筛查出ENST00000448869.1分子经Chidamide处理存在差异表达。蛋白互作生物学软件推测ENST00000448869.1分子与Nestin存在蛋白互作关系。Chidamide作用乳腺癌MDA-MB-231细胞后,抑制其生长,同时LncRNA ENST00000448869.1与Nestin的表达都增高;LncRNA-siRNA转染细胞后,细胞活力明显降低,LncRNA ENST00000448869.1和Nestin的表达都降低。结论在Chidamide处理MDA-MB-231细胞中,LncRNA ENST00000448869.1靶向调控Nestin抑制乳腺癌细胞生长。

关键词：乳腺癌 MDA-MB-231 LncRNA ENST00000448869.1 Chidamide Nestin

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老年患者肠道定植碳青霉烯耐药肠杆菌株的临床及耐药特征

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中华医院感染学杂志 2025年第8期35卷 1152-1156页

作者：陈建美刘利萍凌冬吴海兰周英顺西南医科大学基础医学院病原生物学教研室四川泸州646000 崇州市人民医院检验科四川崇州611230

目的探讨老年患者肠道定植碳青霉烯类耐药肠杆菌(CRE)的发生情况,临床特征和耐药特征,为临床感染的诊疗和医院感染预防控制提供依据。方法主动筛查2023年1月-2024年1月崇州市人民医院重症监护病区、肿瘤血液科、老年科等长期反复住院老... 详细信息

目的探讨老年患者肠道定植碳青霉烯类耐药肠杆菌(CRE)的发生情况,临床特征和耐药特征,为临床感染的诊疗和医院感染预防控制提供依据。方法主动筛查2023年1月-2024年1月崇州市人民医院重症监护病区、肿瘤血液科、老年科等长期反复住院老年患者粪便中CRE菌株,分析CRE定植率、临床特征及抗菌药物耐药特征。结果810例患者分离出53株CRE肠道定植菌,定植率为6.54%,其中12例发生后续感染。定植CRE菌株中肺炎克雷伯菌肺炎亚种为54.72%,大肠埃希菌为37.74%,阴沟肠杆菌为3.77%,奇异变形杆菌为1.89%,弗氏柠檬酸杆菌为1.89%。感染的CRE以肺炎克雷伯菌肺炎亚种为主,占比58.33%,大肠埃希菌占33.33%,奇异变形杆菌占8.33%。药敏结果显示53株定植CRE耐药表型相似,头孢类、哌拉西林/他唑巴坦及碳青霉烯类抗菌药物均耐药,其余抗菌药物体外有一定敏感性,替加环素敏感性最高。53例定植CRE检测到51株产碳青霉烯酶,其中产金属酶为56.61%,丝氨酸酶为35.85%,同时产两种酶的有3.77%。结论建议对高龄患者加强肠道CRE筛查,尤其是有基础疾病和侵袭性操作史患者,及早采取有效的防控措施,减少交叉传播和感染。

关键词：老年患者肠道定植碳青霉烯耐药肠杆菌科细菌耐药特征

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应用法医微生物学推断死亡时间研究进展

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刑事技术 2024年第1期49卷 80-84页

作者：赵广众梁宇董春楠河北医科大学法医学院河北省重点实验室石家庄050017 河北医科大学病原生物学教研室石家庄050017

死亡时间推断一直是法医学领域的重点和难点问题。研究发现尸体微生物群落演替规律与死亡时间之间呈现高度相关,其可为死亡时间推断提供新方法。近年来,国内外学者利用法医微生物学理论与方法对存在于不同环境中的尸体死亡时间推断进行... 详细信息

死亡时间推断一直是法医学领域的重点和难点问题。研究发现尸体微生物群落演替规律与死亡时间之间呈现高度相关,其可为死亡时间推断提供新方法。近年来,国内外学者利用法医微生物学理论与方法对存在于不同环境中的尸体死亡时间推断进行了大量研究,丰富了死亡时间推断方法,提高了死亡时间推断的准确性。本文就暴露、埋藏和水中三种环境下尸体菌群演替规律的异同进展作简要综述,以期探讨不同环境下利用法医微生物学推断死亡时间的研究现状、所面临的问题及应用前景。

关键词：法医微生物死亡时间推断高通量测序机器学习

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TAM受体在病毒感染与免疫调控中的作用

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微生物学免疫学进展 2023年第3期51卷 64-68页

作者：段甜(综述) 雷迎峰岳昌武(审校) 延安大学医学院病原生物学教研室陕西延安716000 空军军医大学基础医学院微生物与病原生物学教研室陕西西安710000

受体酪氨酸激酶家族中的3个成员TYRO3、AXL和MERTK,统称为TAM受体。TAM受体在哺乳动物的多种组织中广泛表达,参与调节神经细胞、免疫细胞、造血干细胞、生殖细胞等的存活、增殖、迁移、分化及代谢产物和细胞裂解产物的清除,并在固有免... 详细信息

受体酪氨酸激酶家族中的3个成员TYRO3、AXL和MERTK,统称为TAM受体。TAM受体在哺乳动物的多种组织中广泛表达,参与调节神经细胞、免疫细胞、造血干细胞、生殖细胞等的存活、增殖、迁移、分化及代谢产物和细胞裂解产物的清除,并在固有免疫和适应性免疫应答过程中发挥重要作用。同时研究发现,TAM受体在病毒入胞和感染过程中具有重要作用。现就TAM受体的结构、功能及其在病毒感染中的作用作一概述。

关键词： TAM受体病毒感染炎症血脑屏障黄病毒

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