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干扰素α-1b对HepG2细胞MMP-2和TIMP-2表达水平影响的研究

中华肿瘤防治杂志 2012年第3期19卷 201-204页

作者：赵铭锋朱玉红刘鲁英曹璋滨州医学院病理学教研室山东滨州256603 滨州医学院附属医院病理科山东滨州256603

目的:研究α干扰素(IFN-α-1b)对人肝癌细胞系HepG2细胞MMP-2和TIMP-2表达水平的影响,探讨IFN-α抗肝细胞癌生长与转移复发的相关分子机制。方法:培养HepG2细胞,在不同剂量的IFN-α干预下,于不同时间提取上清液,通过ELISA方法检测MMP-2... 详细信息

目的:研究α干扰素(IFN-α-1b)对人肝癌细胞系HepG2细胞MMP-2和TIMP-2表达水平的影响,探讨IFN-α抗肝细胞癌生长与转移复发的相关分子机制。方法:培养HepG2细胞,在不同剂量的IFN-α干预下,于不同时间提取上清液,通过ELISA方法检测MMP-2、TIMP-2蛋白的表达浓度。逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法半定量检测IFN-α干预组与对照组MMP-2、TIMP-2基因mRNA的表达。结果:在培养HepG2细胞24及48h后,IFN-α剂量为3 000IU/mL时的MMP-2蛋白浓度分别为(1 725.3±300.7)及(2 899.8±343.2)ρg/mL,与空白对照组相比明显降低,差异有统计学意义,P值分别为0.001和0.000;各时间段TIMP-2浓度与对照组比较差异均无统计学意义;MMP-2、TIMP-2浓度比值较对照组显著降低,差异有统计意义,P值分别为0.003和0.001。48h干预组(3 000IU/mL)与对照组比较MMP-2mRNA表达水平差异有统计学意义,F=2.711,P=0.005。结论:大剂量IFN-α可通过抑制HepG2细胞MMP-2的表达水平下调MMP-2、TIMP-2浓度比值,并呈剂量效应关系。IFN-α对HepG2细胞MMP-2表达的抑制作用在其抗肝细胞癌生长与转移复发中发挥一定作用。

关键词：癌,肝细胞 α干扰素 MMP-2 TIMP-2

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3,4-二羟基苯乙酮调控JNK/Nrf2信号通路减轻ox-LDL诱导的内皮细胞损伤的作用研究

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中国病理生理杂志 2022年第5期38卷 788-794页

作者：曹黛虹王韵涵张代娟刘江月潍坊医学院病理生理教研室山东潍坊261053

目的:观察3,4‐二羟基苯乙酮(3,4-DHAP)减轻氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的内皮细胞损伤的作用,并从c-Jun氨基末端激酶(JNK)/核因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路来探讨其可能的作用机制。方法:将常规培养的***926细胞随机分为空白对照(... 详细信息

目的:观察3,4‐二羟基苯乙酮(3,4-DHAP)减轻氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的内皮细胞损伤的作用,并从c-Jun氨基末端激酶(JNK)/核因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路来探讨其可能的作用机制。方法:将常规培养的***926细胞随机分为空白对照(CON)组、3,4‐DHAP(0.1 mmol/L)对照(3,4-DHAP-C)组、ox-LDL(100 mg/L)组,ox-LDL+低剂量(0.01 mmol/L)3,4‐DHAP(3,4-DHAP-L)组及ox-LDL+高剂量(0.1 mmol/L)3,4-DHAP(3,4‐DHAP-H)组。通过免疫荧光法观察细胞活性氧(ROS)的生成,黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶(SOD)活力,硝酸还原酶法检测一氧化氮(NO)水平;酶联免疫吸附法(ELISA)检测内皮素1(ET-1)水平,CCK-8法检测细胞活力,TUNEL法检测细胞凋亡情况;RT-qPCR法检测Nrf2和血红素加氧酶1(HO-1)的mRNA表达;Western blot法检测JNK、磷酸化JNK(p-JNK)、Nrf2和HO-1蛋白水平。结果:与ox-LDL组比较,ox-LDL+3,4‐DHAP-H组ROS生成显著减少(P<0.05),SOD活性显著升高(P˂0.05),NO水平显著升高(P<0.05),而ET-1水平降低(P˂0.05),细胞凋亡显著减少,活力显著增强(P˂0.05),Nrf2和HO-1 mRNA及蛋白表达显著升高(P˂0.05),p-JNK/JNK比值显著增大(P˂0.05),Nrf2核内表达显著增多(P˂0.05)。结论:3,4‐DHAP能够有效地减轻ox-LDL诱导的***926细胞损伤,其机制可能与激活JNK/Nrf2信号通路,抑制氧化应激反应有关。

关键词： 3,4‐二羟基苯乙酮 JNK/Nrf2信号通路氧化应激内皮细胞损伤

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钙中性蛋白酶2及Bax在肝纤维化大鼠肝组织中的表达变化及意义

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中国病理生理杂志 2013年第9期29卷 1603-1608页

作者：谢汝佳韩冰杨婷温静静杨勤贵阳医学院病理生理教研室贵州贵阳550004

目的:探讨钙中性蛋白酶2(calpain 2)及Bcl-2相关X蛋白(Bax)在肝纤维化过程中的表达变化及其在肝纤维化过程中的可能作用。方法:雄性Wistar大鼠40只,随机分为正常对照4周、8周组和肝纤维化模型4周、8周组,每组各10只。肝纤维化组按3 mL/k... 详细信息

目的:探讨钙中性蛋白酶2(calpain 2)及Bcl-2相关X蛋白(Bax)在肝纤维化过程中的表达变化及其在肝纤维化过程中的可能作用。方法:雄性Wistar大鼠40只,随机分为正常对照4周、8周组和肝纤维化模型4周、8周组,每组各10只。肝纤维化组按3 mL/kg体重的剂量皮下注射40%CCl4植物油溶液,每隔3 d注射1次,造模时间分别为4周和8周;对照组大鼠皮下注射等量植物油溶液。采用TUNEL法检测肝组织中肝细胞凋亡情况;real-time PCR检测肝组织中calpain 2及bax mRNA的表达变化。免疫组织化学法及Western blotting检测肝组织中calpain 2及Bax蛋白的表达情况。结果:Real-time PCR检测发现肝纤维化4周和8周组大鼠肝组织中calpain2及bax mRNA表达较相应的正常对照组显著增加。免疫组化及Western blotting检测显示肝纤维化4周组大鼠肝组织中calpain 2蛋白的表达与正常4周组比较无显著差异;随着肝纤维化程度的加重,肝纤维化8周时大鼠肝组织中calpain 2的表达显著增加;而肝组织中Bax的表达从肝纤维化4周时就显著增加,肝纤维化8周时达到高峰。此外,通过TUNEL法检测发现肝纤维化4周和8周组大鼠肝组织中肝细胞凋亡的数目较正常组大鼠显著增加。结论:Calpain 2与Bax可能参与了肝纤维化的发生发展过程。

关键词：肝纤维化钙中性蛋白酶2 Bcl-2相关X蛋白

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血管升压素V2受体再认识

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生理学报 2024年第6期76卷 893-907页

作者：李蒙王蔚东李春凌中山大学中山医学院生理教研室中山大学中山医学院病理生理教研室

精氨酸血管升压素(arginine vasopressin, AVP)参与机体水的重吸收、心血管稳态、激素分泌和社会行为等诸多生理过程的调控。AVP有三种受体亚型：V1a、V1b和V2。血管升压素V2受体(vasopressin V2 receptor, V2R)最初发现于肾脏集合管主... 详细信息

精氨酸血管升压素(arginine vasopressin, AVP)参与机体水的重吸收、心血管稳态、激素分泌和社会行为等诸多生理过程的调控。AVP有三种受体亚型：V1a、V1b和V2。血管升压素V2受体(vasopressin V2 receptor, V2R)最初发现于肾脏集合管主细胞，主要参与调节肾脏对水的重吸收，但近年来，日益成熟的影像学及生物信息学等技术使研究者对V2R的微观结构、蛋白质结合与具体分布有了更多的了解，并通过异位过表达、激动或拮抗等方式发现V2R在很多疾病中的靶点作用。本文拟就近年来有关V2R的生理功能、病理生理机制与相关药物的研究现状进行简要综述。

关键词：精氨酸血管升压素血管升压素V2受体抗利尿激素抵抗环磷酸腺苷

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肝纤维化大鼠肝脏中内质网应激相关分子CHOP和TRB3的表达变化

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中国病理生理杂志 2013年第5期29卷 906-912页

作者：杜锡潮韩冰谢汝佳邹河杨勤贵阳医学院病理生理教研室贵州贵阳550004

目的:观察内质网应激相关分子CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)和Tribbles同源蛋白3(TRB3)在四氯化碳(CCl4)致大鼠肝纤维化过程中的表达变化,探讨其在肝纤维化过程中的可能作用。方法:体重180～200 g的雄性Wistar大鼠随机分为正常4... 详细信息

目的:观察内质网应激相关分子CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)和Tribbles同源蛋白3(TRB3)在四氯化碳(CCl4)致大鼠肝纤维化过程中的表达变化,探讨其在肝纤维化过程中的可能作用。方法:体重180～200 g的雄性Wistar大鼠随机分为正常4周组、正常8周组、肝纤维化4周组和肝纤维化8周组,肝纤维化组大鼠皮下注射40%CCl4制备肝纤维化模型,分别在4周和8周处死大鼠,观察肝组织病理改变,Western blotting检测肝脏活化转录因子6(ATF6)蛋白,免疫组化、Western blotting和real-time PCR分别检测肝脏CHOP和TRB3蛋白和mRNA表达变化,TUNEL法检测肝脏细胞凋亡。结果:肝纤维化组大鼠肝脏可见假小叶形成,p90ATF6蛋白表达量较正常组明显减少(P<0.01),p50ATF6蛋白表达量较正常组明显增加(P<0.01),肝细胞胞浆CHOP和TRB3蛋白及mRNA表达量较正常组显著增加(P<0.01),细胞凋亡率较正常组显著增加(P<0.01)。结论:内质网应激相关分子CHOP和TRB3在CCl4致大鼠肝纤维化过程中蛋白及mRNA表达水平明显增加,其变化趋势与大鼠肝细胞凋亡率一致,提示内质网应激可能通过CHOP和TRB3促进肝细胞凋亡,参与肝纤维化发生发展。

关键词：大鼠肝纤维化内质网应激细胞凋亡 CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白 Tribbles同源蛋白3

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不同来源LMP1基因转染对CNE1细胞TGFβ1抗性的影响

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癌症 2003年第12期22卷 1254-1259页

作者：黄河黄培春广东医学院病理生理学教研室广东湛江524023

背景与目的:有研究表明不同来源的EB病毒(Epstein-Barrvirus,EBV)潜伏膜蛋白1(latentmembraneprotein1,LMP1)对人高分化鼻咽癌(nasopharyngealcarcinoma,NPC)细胞株CNE1有不同程度的生长促进作用。本研究拟进一步探讨不同来源的LMP1基因转染对转化生长因子β1(transforminggrowthfactorβ1,TGFβ1)抗性的影响及其可能机制。方法:采用脂质体介导法分别将质粒J124(不含LMP1基因的空载体)、J124-B95-8(含B95-8淋巴细胞标准株来源的LMP1基因,简称B95-8-LMP1)和J124-CAO-5(含NPC组织来源的LMP1基因,简称CAO-LMP1)转染CNE1,分别命名三种质粒的转染细胞株为CNE1-V、CNE1-B和CNE1-C;分别用逆转录聚合酶链反应(reversetranscription-polymerasechainreaction,RT-PCR)和蛋白印迹法鉴定LMP1基因和蛋白表达;分别用MTT法和流式细胞术观察TGFβ1处理对细胞生长的抑制效应和细胞周期分布的改变;蛋白印迹法检测转化生长因子β受体Ⅰ(transforminggrowthfactorβreceptorⅠ,TGFβRⅠ)、转化生长因子β受体Ⅱ(TGFβRⅡ)以及cyclinD1蛋白的表达;半定量RT-PCR检测p15mRNA的表达。结果:成功建立稳定表达不同来源LMP1的CNE1细胞株CNE1-B和CNE1-C。5ng/mlTGFβ1对CNE1、CNE1-V、CNE1-B和CNE1-C的生长抑制率分别为31.8%、27.9%、

关键词： LMP1 基因转染 CNE1细胞 TGFβ1 抗性鼻咽肿瘤

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丹参提取物F对大鼠乙酸-消炎痛胃溃疡愈合的影响

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中国病理生理杂志 1997年第5期13卷 479-482页

作者：周平李和泉中国医科大学病理生理教研室锦州医学院病理生理教研室

以大鼠乙酸－消炎痛胃溃疡为动物模型，用甲氰咪胍作为对照药，观察了丹参提取物Ｆ对溃疡愈合过程的影响及其与胃粘膜微循环、粘膜细胞再生、胃壁结合粘液分泌的关系。结果表明，丹参提取物Ｆ组的溃疡指数和溃疡边缘毛细血管网眼面积明... 详细信息

以大鼠乙酸－消炎痛胃溃疡为动物模型，用甲氰咪胍作为对照药，观察了丹参提取物Ｆ对溃疡愈合过程的影响及其与胃粘膜微循环、粘膜细胞再生、胃壁结合粘液分泌的关系。结果表明，丹参提取物Ｆ组的溃疡指数和溃疡边缘毛细血管网眼面积明显低于对照组和低于甲氰米胍组，而溃疡边缘粘膜血流量、细胞标记率及胃壁结合粘液量明显高于对照组，亦高于甲氰咪胍组。提示：丹参提取物Ｆ能促进大量乙酸－消炎痛胃溃疡的愈合，其作用优于甲氰咪胍。其机制可能与改善胃粘膜微循环、边速粘膜细胞的再生、促进粘液分泌有关。

关键词：粘液胃溃疡丹参丹参提取物F 愈合

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甲状腺内胃动素对禁食状态下大鼠胃肠移行性复合运动的影响

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第二军医大学学报 2009年第12期30卷 1338-1343页

作者：蔡建美徐珞青岛大学医学院病理生理学教研室青岛266021

目的:研究大鼠禁食状态下甲状腺内胃动素(MTL)对胃肠移行性复合运动(MMC)的影响。方法:采用免疫荧光法、放射免疫法检测MTL在甲状腺组织的表达;采用清醒状态下胃肠运动记录法观察甲状腺内MTL对MMC的调控作用。结果:免疫荧光结果显示,正... 详细信息

目的:研究大鼠禁食状态下甲状腺内胃动素(MTL)对胃肠移行性复合运动(MMC)的影响。方法:采用免疫荧光法、放射免疫法检测MTL在甲状腺组织的表达;采用清醒状态下胃肠运动记录法观察甲状腺内MTL对MMC的调控作用。结果:免疫荧光结果显示,正常甲状腺组织中有MTL免疫阳性反应物(MTL-IR)的表达,且MTL-IR与降钙素(CT)共存,提示MTL表达于甲状腺的C细胞。放射免疫结果显示,十二指肠黏膜有大量MTL表达,其含量分别是甲状腺和胃窦部MTL表达的128.02和100.57倍。大鼠尾静脉注射MTL,胃窦和十二指肠的MMC呈剂量依赖性增加,表现为收缩频率增快(P<0.05,P<0.01)和收缩波幅增大(P<0.05,P<0.01)。静脉注射MTL受体拮抗剂GM109,MMC收缩频率显著减慢(P<0.05),收缩波幅显著变小(P<0.05);GM109可显著阻断MTL的促进MMC作用。摘除一侧甲状腺,MMC周期显著变长,收缩频率显著减慢(P<0.05),收缩波幅显著变小(P<0.05)。甲状腺内注射MTL抗血清,胃窦和十二指肠的MMC运动均显著减少,其收缩频率显著减慢(P<0.05),收缩波幅显著变小(P<0.05)。结论:甲状腺C细胞可表达MTL;甲状腺内MTL参与胃肠MMC的调控。

关键词：消化间期移行性复合运动胃动素甲状腺

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禁食应激对机体不同组织内Zn、Cu水平的影响

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中国老年学杂志 2000年第6期20卷 351-352页

作者：眭建任春兰镇江医学院病理生理教研室镇江212001

目的　为了揭示应激时体内 Zn、Cu元素的代谢规律 ,本实验观察了禁食后不同时期豚鼠不同组织中 Zn、Cu水平的变化。方法　短毛种豚鼠 2 4只 ,随机分为 4组 (正常组和实验组 1、2、3) ,实验组分别禁食 2 4、48、72 h。结果　 (1 )血浆中... 详细信息

目的　为了揭示应激时体内 Zn、Cu元素的代谢规律 ,本实验观察了禁食后不同时期豚鼠不同组织中 Zn、Cu水平的变化。方法　短毛种豚鼠 2 4只 ,随机分为 4组 (正常组和实验组 1、2、3) ,实验组分别禁食 2 4、48、72 h。结果　 (1 )血浆中 Zn和 Cu水平 ,肾、肌肉组织中 Cu水平 ,大脑、小脑和肠组织中 Zn水平均随禁食时间的延长而下降。(2 )肝、肾组织中 Zn水平和大脑、肝、心组织中 Cu水平则随禁食时间的延长而上升。 (3)间脑、小脑组织中 Cu水平和肌肉组织中 Zn水平在禁食早期略有上升 ,以后下降甚至低于正常。 (4)肾上腺组织中的 Cu水平在禁食早期明显上升 ,以后恢复至正常 ;而 Zn水平则呈现先降低而后恢复至正常。结论　应激可引起微量元素 Zn、Cu在体内的重新分布。

关键词：禁食应激反应锌铜

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Ghrelin对豚鼠胃平滑肌收缩的影响及机制

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第二军医大学学报 2009年第3期30卷 238-243页

作者：陶园徐珞青岛大学医学院病理生理学教研室青岛266021

目的:探讨并比较Ghrelin及其拟似剂生长激素释放肽-6(GHRP-6)对豚鼠胃平滑肌舒缩活动的影响及机制。方法:采用电场刺激豚鼠胃底和胃窦部肌间神经方法,观察Ghrelin和GHRP-6对胃平滑肌舒缩活动的影响,并通过观察一氧化氮合酶(NOS)抑制剂N... 详细信息

目的:探讨并比较Ghrelin及其拟似剂生长激素释放肽-6(GHRP-6)对豚鼠胃平滑肌舒缩活动的影响及机制。方法:采用电场刺激豚鼠胃底和胃窦部肌间神经方法,观察Ghrelin和GHRP-6对胃平滑肌舒缩活动的影响,并通过观察一氧化氮合酶(NOS)抑制剂Nω-硝基-L-精氨酸(L-NNA)、一氧化氮前体L-精氨酸(L-AA)对Ghrelin和GHRP-6调控胃平滑肌运动的影响以阐明其机制。结果:不同频率(1～16Hz)电刺激胃底部肌间神经,平滑肌条呈现开电刺激(on-re-sponse)的舒张波和随后出现的断电刺激(off-response)收缩波,其中产生的开电刺激舒张效应可被L-NNA消除,而断电刺激诱导的收缩效应可被阿托品和胍乙啶(NANC)阻断。在胃底部,Ghrelin和GHRP-6可使开电刺激诱导的平滑肌舒张活动减弱,断电刺激诱导的肌条收缩活动增强,且Ghrelin作用明显强于GHRP-6。L-NNA可显著增强Ghrelin和GHRP-6的促平滑肌收缩效应,但L-AA可显著减弱该作用。在胃窦部,电场刺激肌间神经,舒张波消失,仅出现断电刺激的收缩波。Ghrelin和GHRP-6均可使该收缩作用增强。结论:Ghrelin和GHRP-6均可通过肌间神经丛促进胃底部、胃窦部平滑肌收缩,该效应可能与一氧化氮通路有关。

关键词： Ghrelin GHRP-6 一氧化氮胃肌收缩胃肌间神经

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