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光谱实验室 2012年第1期29卷 67-70页

作者：张洪芹张怀斌郭澎王倩倩滨州医学院组织胚胎学教研室滨州医学院化学教研室

荧光光谱法研究了注射用盐酸头孢替安（Cefotiam Hydrochloride for Injection,CH）与牛血清白蛋白（BSA）的相互作用。盐酸头孢替安对BSA具有荧光猝灭作用,其猝灭方式为静态猝灭,在291K时,求出了猝灭常数K_（KV）=2.49×10~4L/mol... 详细信息

荧光光谱法研究了注射用盐酸头孢替安（Cefotiam Hydrochloride for Injection,CH）与牛血清白蛋白（BSA）的相互作用。盐酸头孢替安对BSA具有荧光猝灭作用,其猝灭方式为静态猝灭,在291K时,求出了猝灭常数K_（KV）=2.49×10~4L/mol、结合常数K_A=3.8×10~3L/mol及结合位点数n=0.81。在同步荧光光谱中BSA色氨酸和酪氨酸发射峰红移,色氨酸和酪氨酸的微环境发生变化。

关键词：注射用盐酸头孢替安牛血清白蛋白荧光猝灭吸收光谱

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发育中小鼠肾淋巴管内皮细胞透明质酸受体-1^+细胞的研究

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中国现代医学杂志 2010年第22期20卷 3396-3399页

作者：秦燕霞李京敏冯国营霍冠华济宁医学院人体解剖学教研室山东日照276826 滨州医学院解剖学和组织学与胚胎学研究室山东烟台264003 滨州医学院组织学与胚胎学教研室山东烟台264003

目的探讨淋巴管内皮细胞透明质酸受体-1(LYVE-1)阳性细胞在发育中小鼠肾内的分布及形态特点。方法胚胎期第13～16天(E13～16)的胎鼠和出生后第1、4、14和21天(P1～21)及成年的小鼠肾,震动切片后进行LYVE-1免疫组织化学和免疫荧光染色。... 详细信息

目的探讨淋巴管内皮细胞透明质酸受体-1(LYVE-1)阳性细胞在发育中小鼠肾内的分布及形态特点。方法胚胎期第13～16天(E13～16)的胎鼠和出生后第1、4、14和21天(P1～21)及成年的小鼠肾,震动切片后进行LYVE-1免疫组织化学和免疫荧光染色。结果 LYVE-1+细胞在小鼠胚胎期第13天的肾髓质开始表达,这种细胞的数量逐渐增多直到出生后第4天,然后逐渐减少,直到出生后第21天完全消失。这些细胞有粗而不规则的突起,出生后这些突起逐渐变细变长。免疫荧光证实其为巨噬细胞。结论 LYVE-1+细胞为巨噬细胞,并在淋巴管的发生中起一定的作用。

关键词：肾淋巴管内皮细胞透明质酸受体-1 巨噬细胞小鼠

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降钙素基因相关肽对大鼠胃平滑肌的调控作用

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解剖学杂志 2016年第2期39卷 145-148页

作者：李聪蔡恒冯国营刘桂香许春胜滨州医学院附属医院神经内科滨州256603 滨州医学院组织学与胚胎学教研室烟台264003

目的：探讨降钙素基因相关肽（CGRP）对大鼠胃平滑肌的调控作用。方法：贴块法原代培养大鼠胃平滑肌细胞，特异性平滑肌肌动蛋白a-actin免疫细胞化学鉴定。实验分CGRPI组（10-7mol／LCGRP）、CGRPⅡ组（10～mol／LCGRP）、CGRPI]]组（10... 详细信息

目的：探讨降钙素基因相关肽（CGRP）对大鼠胃平滑肌的调控作用。方法：贴块法原代培养大鼠胃平滑肌细胞，特异性平滑肌肌动蛋白a-actin免疫细胞化学鉴定。实验分CGRPI组（10-7mol／LCGRP）、CGRPⅡ组（10～mol／LCGRP）、CGRPI]]组（10-9^mol／LCGRP）和干预组（10-6mol／LCGRP8-37）与空白对照组。图像分析系统测定大鼠胃平滑肌细胞长度；Ca3＋荧光指示剂测定细胞内Ca2＋浓度；CellTiter-Glo试剂盒检测细胞内ATP含量。结果：CGRP可舒张胃平滑肌细胞，降低胃平滑肌细胞游离Ca2＋浓度及ATP含量。结论：CGRP通过受体介导直接参与胃平滑肌细胞松弛；CGRP可能通过降低胃平滑肌细胞游离Ca3＋浓度、ATP含量而发挥其调控作用。

关键词：胃平滑肌细胞降钙素基因相关肽免疫组织化学原代培养

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甲状腺激素对胸腺上皮细胞CK19蛋白表达的影响

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中国组织化学与细胞化学杂志 2009年第5期18卷 541-546页

作者：王东殷彦君马云崔春红冯国营梁琛滨州医学院组织胚胎学教研室滨州256603 滨州医学院形态学实验室滨州256603 山东万杰医学院组织胚胎学教研室淄博255213

目的探讨甲状腺激素对胸腺的发育的影响及可能的机制。方法将12只怀孕4d的大鼠随机分成A组和B组,A组正常饮水,B组孕鼠供以含有0.02%甲巯咪唑的饮水制备仔鼠甲状腺功能低下动物模型,将A组的仔鼠随机分成对照组和甲状腺素钠组,将B组的仔... 详细信息

目的探讨甲状腺激素对胸腺的发育的影响及可能的机制。方法将12只怀孕4d的大鼠随机分成A组和B组,A组正常饮水,B组孕鼠供以含有0.02%甲巯咪唑的饮水制备仔鼠甲状腺功能低下动物模型,将A组的仔鼠随机分成对照组和甲状腺素钠组,将B组的仔鼠随机分成甲低组和甲低+甲状腺素钠组。甲状腺素钠组和甲低+甲状腺素钠组于出生后15d给予腹腔注射甲状腺素钠(0.5mg/kg体重,1次/d),连续给药25 d。所有动物于出生后40d麻醉处死,测定仔鼠的胸腺重量及脏器指数;采用放射免疫技术测定仔鼠血清中三碘甲状腺原氨酸(triiodothyronine,T3)、四碘甲状腺原氨酸(tetraiodothyronine,T4)、促甲状腺激素(thyroid-stimulatinghormone,TSH)水平,免疫组织化学技术检测胸腺上皮细胞细胞角蛋白19(cytokeratin19,CK19)蛋白的表达量。结果与对照组比较,甲状腺素钠组仔鼠血清中T3、T4显著升高,TSH减少,胸腺重量增大;甲低组仔鼠血清中T3、T4明显降低,TSH显著增高,胸腺重量降低,胸腺上皮细胞CK19蛋白表达减少。与甲低组比较,甲低+甲状腺素钠组仔鼠血清中T3、T4升高,TSH降低,胸腺指数增大,胸腺上皮细胞CK19蛋白的表达明显增多。结论甲状腺激素可以通过影响胸腺上皮细胞CK19的表达量,使胸腺发育或退化。

关键词：甲状腺激素胸腺上皮细胞细胞角蛋白19

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镉染毒大鼠胚胎神经上皮中Zic2蛋白的表达

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环境与健康杂志 2008年第10期25卷 861-863,F0003页

作者：王东蔡恒崔春红冯国营滨州医学院组织胚胎学教研室山东滨州256000 济宁医学院组织胚胎学教研室山东济宁272000

目的探讨在神经系统发育过程中镉对 Zic2表达的时空顺序的影响。方法将40只 Wistar 孕鼠随机分为对照组和镉染毒组,镉染毒组孕鼠于胚胎6.5 d(embryonic day 6.5,E6.5)一次性按4 mg/kg 的剂量腹腔注射氯化镉,对照组和镉染毒组各分为4个亚... 详细信息

目的探讨在神经系统发育过程中镉对 Zic2表达的时空顺序的影响。方法将40只 Wistar 孕鼠随机分为对照组和镉染毒组,镉染毒组孕鼠于胚胎6.5 d(embryonic day 6.5,E6.5)一次性按4 mg/kg 的剂量腹腔注射氯化镉,对照组和镉染毒组各分为4个亚组,分别在E9.0、E9.5、E10.5和 E11.5断椎处死孕鼠。随机取1/2妊娠子宫,在体视显微镜下取出胚胎,对胚胎神经系统分化进行评分。其余的1/2妊娠子宫置于4%多聚甲醛中固定,常规石蜡包埋,从胚体头端向尾端行5μm连续切片,采用二步法免疫组织化学技术检测 Zic2在神经上皮的表达情况。结果镉染毒组大鼠胚胎的神经系统发育异常,主要表现为发育迟缓、前后神经孔延迟闭合或不闭合等。镉染毒组大鼠胚胎的前脑、中脑和后脑的发育评分均低于相应的对照组,除 E9.5的中脑的发育评分与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05)外,其余差异均有统计学意义(9<0.05)。E9.5、E10.0、E10.5和 E11.5的镉染毒组的神经系统发育评分低于相应的对照组,差异均有统计学意义(t 值分别为2.71、4.72、3.78、5.61,P 值均小于0.05)。与对照组的大鼠胚胎相比较,镉染毒组 Zic2蛋白在 E9.5的神经板区的表达减少(t=1.978,P<0.05);在 E10.0的神经沟处表达明显减少(t=4.106,P<0.05),神经褶处有少量表达(t=5.677,P<0.05);在E10.5的神经管上表达明显减少(t=5.231,P<0.05);在 E11.5的前、中、后脑及神经管上主要表达在背侧,但是表达量明显低于对照组(t=3.405,P<0.05)。结论镉可以通过影响 Zic2表达的时空顺序,使大鼠胚胎神经系统发育异常。

关键词：金属重镉 Zic2 神经系统大鼠

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氢水对脑缺血再灌注大鼠脑组织一氧化氮及其合酶的影响

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解剖学杂志 2014年第2期37卷 196-198,251页

作者：张连双路青忠王秀秀撒焕兰刘同慎冯国营赵伟王希锋滨州医学院组织学与胚胎学教研室烟台264000 滨州医学院临床医学系烟台264000 滨州医学院烟台市毓璜顶医院ICU烟台264000

目的：探讨氢水治疗对急性脑缺血/再灌注损伤引起的脑组织一氧化氮（NO）含量和一氧化氮合酶活力改变的影响.方法：成年SD大鼠随机分为假手术组、模型组、氢水治疗组.采用线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血再灌注（MCAO）模型,免疫组织化学... 详细信息

目的：探讨氢水治疗对急性脑缺血/再灌注损伤引起的脑组织一氧化氮（NO）含量和一氧化氮合酶活力改变的影响.方法：成年SD大鼠随机分为假手术组、模型组、氢水治疗组.采用线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血再灌注（MCAO）模型,免疫组织化学测定大脑皮层一氧化氮合酶的表达,硝酸还原酶法测定缺血侧脑组织匀浆中NO含量,分光光度计法测定脑组织提取液中一氧化氮合酶的活性.结果：术后6h时,模型组脑组织一氧化氮合酶阳性细胞灰度值、NO浓度及一氧化氮合酶活性均较假手术组显著升高,而氢水治疗后其水平较模型组显著下降,但仍高于假手术组.治疗24 h时,模型组一氧化氮合酶阳性细胞灰度值、NO浓度及一氧化氮合酶活性仍显著高于假手术组,但治疗组与模型组相比差异无统计学意义.结论：氢水治疗可通过早期减少缺血后脑组织中NO含量及降低一氧化氮合酶的活性来减轻脑缺血/再灌注损伤.

关键词：氢水脑缺血再灌注一氧化氮一氧化氮合酶大鼠

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褪黑素对损毁弓状核大鼠所致肥胖的干预研究

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中国临床药理学杂志 2011年第3期27卷 195-198页

作者：孙倩杨美子王东王桂华许勇滨州医学院药理学教研室滨州医学院药物研究所滨州医学院组织胚胎学教研室滨州医学院生理学教研室

目的观察褪黑素对损毁弓状核大鼠所致肥胖的干预作用。方法皮下注射谷氨酸钠,建立大鼠弓状核损毁所致中枢性肥胖,比较各组大鼠体质量指数(BMI);测定体温变化、摄食量和脂肪重;检测甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)... 详细信息

目的观察褪黑素对损毁弓状核大鼠所致肥胖的干预作用。方法皮下注射谷氨酸钠,建立大鼠弓状核损毁所致中枢性肥胖,比较各组大鼠体质量指数(BMI);测定体温变化、摄食量和脂肪重;检测甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)等和血压;观察弓状核病理学变化。结果褪黑素处理肥胖大鼠后,体温逐渐升高,其中高、低剂量给药组大鼠的BMI均明显回降(P<0.05,P<0.01),血压降低(P<0.01,P<0.05)。褪黑素高、低剂量组大鼠体内白色脂肪重量,较模型组明显降低(P<0.01,P<0.05),棕色脂肪量明显增多(P<0.05,P<0.01)。甘油三酯、高密度脂蛋白和低密度脂蛋白含量,褪黑素治疗组明显降低(P<0.01)。结论褪黑素对损毁大鼠弓状核所致肥胖具有干预作用,可能是由于其使能量消耗增多对肥胖有一定的抵抗作用。

关键词：褪黑素弓状核肥胖

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针刺对备用背根节神经元表皮生长因子表达的影响

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解剖学杂志 2006年第4期29卷 508-510页

作者：张连双王希锋殷彦君章为王廷华于振海滨州医学院组织学与胚胎学教研室滨州256603 滨州医学院附属医院滨州256603 四川大学基础与法医学院成都610045

成年哺乳动物的脊髓具有可塑性,且针刺可促进脊髓可塑性,但其机制尚不清楚.有实验表明针刺可促进NGF、NT-3在部分去背根动物背根节的表达,表明了针刺可能通过改变背根节部分神经营养因子的表达进而在脊髓可塑性中发挥作用.表皮生长因子... 详细信息

成年哺乳动物的脊髓具有可塑性,且针刺可促进脊髓可塑性,但其机制尚不清楚.有实验表明针刺可促进NGF、NT-3在部分去背根动物背根节的表达,表明了针刺可能通过改变背根节部分神经营养因子的表达进而在脊髓可塑性中发挥作用.表皮生长因子（EGF）与神经系统发育及损伤修复有关,但EGF与成体动物脊髓可塑性及针刺促进脊髓可塑性的关系报道不多.本实验拟通过成体猫备用背根模型来初步探讨EGF与脊髓可塑性及针刺促进脊髓可塑性的关系.

关键词：表皮生长因子(EGF) 背根节神经元针刺成年哺乳动物脊髓可塑性神经系统发育神经营养因子备用背根模型部分去背根 NT-3

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Cpd5对人卵巢癌SKOV3细胞增殖抑制和凋亡诱导作用

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中国临床药理学与治疗学 2009年第10期14卷 1121-1127页

作者：陈莉霍冠华吕耀凤张芹滨州医学院妇产科学教研室滨州医学院组织胚胎学教研室

目的:观察Cpd5[2-(2-巯基乙醇)-3-甲基-1,4-萘醌,Compound5]对人卵巢癌SKOV3细胞增殖和凋亡的影响。方法:MTT法观察Cpd5对SK-OV3细胞的生长抑制作用,AnnexinV/PI双标记流式细胞术检测Cpd5对SKOV3细胞的凋亡诱导,Hoechst-33258染色荧光显微镜观察细胞凋亡形态。结果:5、10、20、30、40、50、60μmol/LCpd5处理SKOV3细胞48h,生长抑制率分别为2.77%、5.19%、10.61%、41.15%、71.37%、82.90%、89.81%。不同时间点(12、24、48和72h)检测,细胞生长抑制率存在剂量-时间依赖关系。流式细胞术检测,30μmol/LCpd5处理12、24和48h后,细胞凋亡率分别达9.25%、20.07%、56.16%;50μmol/L组的细胞凋亡率明显高于30μmol/L,且随时间增加而显著增加。用40、50和60μmol/LCpd5处理细胞12h,光镜观察即可见明显的形态学改变。荧光显微镜观察:AnnexinV-EGFP/PI双染显示,实验组比阴性对照组细胞凋亡率明显增多;Cpd5作用24、48h后,Hoechst-33258染色可见细胞出现明显的凋亡形态,20μmol/L浓度组凋亡率增加,30、40、50、60μmol/L各组细胞凋亡率显著增加。结论:Cpd5能以剂量-时间依赖的方式抑制SKOV3细胞增殖并诱导凋亡,是潜在的抗卵巢癌新化合物。

关键词： Cpd5 细胞凋亡卵巢癌 SKOV3

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β-巯基乙醇在大鼠骨髓基质细胞向神经干细胞诱导分化中的作用

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中国组织工程研究与临床康复 2007年第20期11卷 3991-3993页

作者：鞠文博李淑波周艳潘安娜李大宁北华大学医学院组织学和胚胎学教研室吉林省吉林市132013

目的:探讨骨髓基质细胞诱导分化为神经干细胞的更佳培养液组成。方法:实验于2005-10/2006-08在省级实验室北华大学医学院实验中心完成。①实验材料:体质量120～160g的Wistar大鼠,由北华大学动物中心提供。②实验方法:取120～160g大鼠3只... 详细信息

目的:探讨骨髓基质细胞诱导分化为神经干细胞的更佳培养液组成。方法:实验于2005-10/2006-08在省级实验室北华大学医学院实验中心完成。①实验材料:体质量120～160g的Wistar大鼠,由北华大学动物中心提供。②实验方法:取120～160g大鼠3只,体外分离培养大鼠骨髓基质细胞。培养约14d,待原代细胞贴满培养瓶,呈成纤维细胞样生长,用0.25%胰蛋白酶消化原代细胞约3min,在倒置显微镜下见贴壁细胞基本收缩成类圆形后,加入含胎牛血清的DMEM培养液终止消化,并将细胞液吹打均匀,以1×107L-1接种于2个细胞培养瓶中进行1∶2传代扩增培养。在传代培养细胞培养液中加入神经细胞诱导剂,选取生长良好的2,3,4代细胞进行实验。取第5代培养细胞,以8×103/cm2接种于预铺有盖玻片3.5cm培养皿中制备细胞爬片,每孔加入含体积分数为0.1胎牛血清的DMEM培养液2mL,达80%融合时更换新鲜培养液,并在培养液中加入1mmol/Lβ-巯基乙醇,诱导24h,磷酸盐缓冲液洗涤,换成含1mmol/Lβ-巯基乙醇的无血清培养液,5h后更换为改良神经细胞培养液,并设立未加入含β-巯基乙醇培养液的为对照。利用免疫组织化学方法检测神经元特有巢蛋白。结果:①培养的骨髓基质细胞形态学变化:接种初期,细胞贴壁生长是以分散的、克隆集落方式增殖,细胞呈圆形漂浮于培养液中,培养10d后,细胞形态基本为纺锤形的成纤维细胞样,偶有宽大扁平的多边形细胞,细胞逐渐长出小突起,出现出芽现象,14～20d后,突起细胞增多,突起延长并相互连接成网,具有神经细胞形态特征。②免疫组织化学染色检测神经元特有巢蛋白:1周左右,细胞可表达巢蛋白阳性,细胞大而圆,呈棕褐色,经培养诱导分化2周后的长突起细胞,表达神经元特异性抗原巢蛋白阳性细胞互相成网状连接。实验组第4代90%细胞巢蛋白阳性,在荧光显微镜下细胞发黄绿荧光,对照组第1代细胞约30%细胞呈巢蛋白阳性,荧光弱。结论:在诱导培养液中加入β-巯基乙醇,可明显促进骨髓基质细胞的分化,并可获得神经干细胞。

关键词：骨髓基质细胞碱性成纤维细胞生长因子分裂

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