检索结果-内蒙古大学图书馆

中国中药杂志 2011年第15期36卷 2129-2133页

作者：戴支凯黄大林石京山余丽梅吴芹徐庆桂林医学院药理学教研室广西桂林541004 贵州省基础药理重点实验室贵州遵义563003 桂林医学院微生物学教研室广西桂林541001 贵州省细胞工程重点实验室贵州遵义563003

目的:探讨丹参酮ⅡA(tanshinoneⅡA,TanⅡA)抗人鼻咽癌CNE作用及其可能作用机制。方法:通过细胞形态学观察、生长曲线绘制、MTT检测以及克隆实验观察TanⅡA对CNE细胞增殖的影响;应用Hoechest33258和PI双染法观察TanⅡA对CNE细胞凋亡的影... 详细信息

目的:探讨丹参酮ⅡA(tanshinoneⅡA,TanⅡA)抗人鼻咽癌CNE作用及其可能作用机制。方法:通过细胞形态学观察、生长曲线绘制、MTT检测以及克隆实验观察TanⅡA对CNE细胞增殖的影响;应用Hoechest33258和PI双染法观察TanⅡA对CNE细胞凋亡的影响;采用荧光分光光度计检测TanⅡA对CNE细胞细胞内钙及线粒体膜电位的影响;RT-PCR检测TanⅡA对CNE细胞Bad,MT-1A mRNA表达的影响。结果:TanⅡA能抑制CNE细胞增殖,且随TanⅡA剂量的增加和作用时间的延长而增强,TanⅡA作用CNE细胞24,48,72 h的IC50分别为45.7,24.8,3.3 mg.L-1。TanⅡA作用CNE细胞24 h后,CNE细胞出现染色质聚集等典型的凋亡形态学改变,且随TanⅡA剂量的增加,CNE细胞凋亡百分率逐渐增大。TanⅡA作用后,CNE细胞的细胞内钙升高、线粒体膜电位降低、Bad mRNA表达增加、MT-1A mRNA表达上调。结论:TanⅡA具有抗CNE作用,其诱导细胞凋亡可能与钙依赖性通路和MT-1A表达上调有关。

关键词：丹参酮ⅡA 肿瘤人鼻咽癌CNE细胞凋亡钙依赖性通路 MT-1A

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脐带血造血干/祖细胞罗丹明123荧光染色及其意义

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中国医科大学学报 2009年第3期38卷 206-207,210页

作者：章涛方宁张潜万卫红祁莹陈代雄遵义医学院附属医院贵州省细胞工程重点实验室贵州遵义563003 遵义医学院解剖学教研室贵州遵义563003

目的探讨人脐带血造血干/祖细胞(UCB-HSPC)罗丹明123(Rho123)荧光染色特点及其应用价值。方法采用密度梯度离心法获取脐带血单个核细胞(UCB-MNC),用含终浓度为0.1μg/mlRho123的2%胎牛血清-PBS液、37℃下孵育UCB-MNC细胞(细胞浓度为106/... 详细信息

目的探讨人脐带血造血干/祖细胞(UCB-HSPC)罗丹明123(Rho123)荧光染色特点及其应用价值。方法采用密度梯度离心法获取脐带血单个核细胞(UCB-MNC),用含终浓度为0.1μg/mlRho123的2%胎牛血清-PBS液、37℃下孵育UCB-MNC细胞(细胞浓度为106/ml)20min,之后用Lin抗体(PE标记的CD19、CD13、CD2、CD8、CD3)及造血干/祖细胞(HSPC)标志抗体CD34-PerCP和CD38-APC标记UCB-MNC细胞,流式细胞仪分析HSPC亚群及其Rho123染色特点。结果流式细胞术检测结果表明,UCB-Lin-MNC中的HSPC比例高于MNC中约6倍;UCB-CD34+CD38+造血祖细胞(HPC)的Rho123染色平均荧光强度值为23.55±2.40,是UCB-CD34+CD38-造血干细胞(HSC)值10.22±1.03的2倍多(P<0.01)。结论UCB-Lin-MNC中富含HSPC;UCB-HSC的Rho123染料聚集能力明显低于UCB-HPC,提示Rho123拒染法可作为进一步纯化人UCB-HSC的新手段。

关键词：人脐带血造血干细胞造血祖细胞罗丹明123 荧光激活细胞分选

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兔动员外周血间充质干细胞集落形成能力与神经元诱导分化研究

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西安交通大学学报（医学版） 2014年第1期35卷 26-29页

作者：刘小慧章涛张潜刘金伟刘祖林汤宁宁遵义医学院附属医院贵州省细胞工程重点实验室贵州遵义563099 遵义医学院人体解剖学教研室贵州遵义563003

目的研究动员后兔外周血间充质干细胞(PBMSCs)的存在频率,并对PBMSCs进行神经元诱导分化鉴定。方法采用粒细胞集落刺激因子(G-CSF)皮下注射动员,结合密度梯度离心和贴壁培养法分离、培养兔外周血样品中的PBMSCs,利用集落形成率分析动员... 详细信息

目的研究动员后兔外周血间充质干细胞(PBMSCs)的存在频率,并对PBMSCs进行神经元诱导分化鉴定。方法采用粒细胞集落刺激因子(G-CSF)皮下注射动员,结合密度梯度离心和贴壁培养法分离、培养兔外周血样品中的PBMSCs,利用集落形成率分析动员兔PBMSCs的存在频率,并对PBMSCs的神经元分化能力进行体外诱导鉴定。结果动员后的PBMSCs原代培养24h后,可见较多短梭形及多角形贴壁细胞,3～4d后出现集落样生长,传代培养的PBMSCs形态均一、呈长梭形漩涡状生长;未动员的外周血样品中的贴壁细胞少,集落形成少,且易老化,无法传代。集落形成率实验显示,动员后的PBMSCs在每百万外周血单个核细胞中有2.8～10.8个;而未动员组PBMSCs仅有0～3个。免疫细胞化学染色显示,PBMSCs经神经诱导7d后其神经元特异性烯醇化酶(NSE)、神经元特性核蛋白(NeuN)染色阳性。结论动员剂可提高兔外周血中的PBMSCs含量,所获取的PBMSCs具备神经元分化能力。

关键词：兔周血间充质干细胞集落形成率神经元诱导分化

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血管内皮生长因子基因修饰骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠糖尿病后肢缺血

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解剖学杂志 2013年第5期36卷 901-905页

作者：章涛刘艳枚张潜蔡争赵开飞方宁刘金伟余丽梅石荣书遵义医学院附属医院贵州省细胞工程重点实验室遵义医学院解剖学教研室遵义医学院附属医院介入病房遵义563003

目的：探讨血管内皮生长因子（VEGF）基因修饰的骨髓间充质干细胞（BM-MSCs）移植治疗糖尿病后肢缺血的应用价值。方法：制备大鼠Ⅱ型糖尿病后肢缺血模型。实验分为Ad—VEGF转染BM-MSCs移植组，Ad-GFP转染BM-MSCs移植组和BM-MSCs移植对... 详细信息

目的：探讨血管内皮生长因子（VEGF）基因修饰的骨髓间充质干细胞（BM-MSCs）移植治疗糖尿病后肢缺血的应用价值。方法：制备大鼠Ⅱ型糖尿病后肢缺血模型。实验分为Ad—VEGF转染BM-MSCs移植组，Ad-GFP转染BM-MSCs移植组和BM-MSCs移植对照组。取上述各组BM-MSCs（细胞总数2×106个），分点注射入模型大鼠左后肢的股直肌和腓肠肌中，右后肢相同部位注射等量生理盐水作为对照。于移植后2、6、10周进行数字减影血管造影（DSA）及后肢肌肉毛细血管密度分析，并对Brdu标记各组移植细胞的体内存活进行冷冻切片免疫荧光观察。结果：各检测时间点Ad—VEGF转染BM-MSCs组大鼠双侧后肢血管显影及毛细血管密度均较BM-MSCs组、Ad-GFP转染BM-MSCs组丰富，差异有统计学意义。移植后2周，各组左后肢均见BrdU标记阳性移植细胞。结论：后肢肌肉注射移植VEGF基因修饰BM-MSCs可定植在病损组织中，并可改善大鼠糖尿病后肢缺血血供。

关键词：骨髓间充质干细胞移植血管内皮生长因子糖尿病血管病变疾病模型

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曲格列酮诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡的研究

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滨州医学院学报 2009年第5期32卷 324-326,334页

作者：于媛王娟杨建谢书阳焦飞滨州医学院生物化学与分子生物学教研室烟台市264003 滨州医学院细胞工程教研室烟台市中心血站

目的观察过氧化物酶体增殖激活受体γ(PPARγ)的配体曲格列酮(troglitazone,TGZ)对胃癌SGC-7901细胞凋亡的影响。方法体外培养人胃癌SGC-7901细胞,SGC-7901细胞分为对照组和曲格列酮不同浓度(5、10、15、20μmol/L)加药组,应用流式细胞... 详细信息

目的观察过氧化物酶体增殖激活受体γ(PPARγ)的配体曲格列酮(troglitazone,TGZ)对胃癌SGC-7901细胞凋亡的影响。方法体外培养人胃癌SGC-7901细胞,SGC-7901细胞分为对照组和曲格列酮不同浓度(5、10、15、20μmol/L)加药组,应用流式细胞仪检测曲格列酮不同浓度对胃癌SGC-7901细胞凋亡率的影响;RT-PCR及W estern b lot方法观察PPARγ、p53的mRNA及蛋白表达变化。结果曲格列酮可诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡,凋亡率与浓度呈正相关;曲格列酮干预后,p53的mRNA及蛋白在胃癌SGC-7901细胞中表达上调,而PPARγ的mRNA及蛋白表达水平无明显改变。结论曲格列酮依赖激活PPARγ能在体外诱导胃癌细胞凋亡,其机制可能是通过上调抑癌基因p53表达而实现,提示PPARγ可能是胃癌治疗的一个新分子靶点。

关键词：曲格列酮过氧化物酶体增殖激活受体γ p53 胃癌凋亡

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大鼠胸深肌GLUT4表达的肌纤维型特异性

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中国医科大学学报 2007年第6期36卷 638-640页

作者：张潜章涛陈代雄柏树令遵义医学院解剖学教研室贵州遵义563003 遵义医学院附属医院贵州省细胞工程重点实验室中国医科大学基础医学院解剖学教研室

目的:研究大鼠胸深肌不同肌纤维型的组成分布及其葡糖转运蛋白4(GLUT4)表达差异,借以了解胸深肌功能。方法:采用GUTH-SAMAHA肌球蛋白ATP酶染色法并稍做改良,对成年SD大鼠胸深肌冰冻切片进行肌纤维分型研究,并用免疫组织化学方法对肌纤... 详细信息

目的:研究大鼠胸深肌不同肌纤维型的组成分布及其葡糖转运蛋白4(GLUT4)表达差异,借以了解胸深肌功能。方法:采用GUTH-SAMAHA肌球蛋白ATP酶染色法并稍做改良,对成年SD大鼠胸深肌冰冻切片进行肌纤维分型研究,并用免疫组织化学方法对肌纤维分型后的切片进行GLUT4表达分析。结果:2种骨骼肌纤维在大鼠胸深肌内呈棋盘样均匀分布;Ⅱ型肌纤维比例为(64.8±6.3)%,而Ⅰ型肌纤维仅占(35.2±4.6)%,前者明显高于后者(P<0.01)。GLUT4主要存在于Ⅰ型肌纤维膜及包裹肌束的肌膜上,而Ⅱ型肌纤维膜表达不明显。结论:大鼠胸深肌以Ⅱ型肌纤维为主,偏重于力量和速度型肌;Ⅰ型肌纤维膜的GLUT4表达高于Ⅱ型肌纤维,表明前者葡萄糖摄取能力高于后者。

关键词：胸深肌肌纤维型葡糖转运蛋白4 大鼠

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芹菜素对脂多糖致小鼠急性肺损伤的作用机制研究

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中国中西医结合急救杂志 2014年第3期21卷 170-174页

作者：马明明李岩朱委委张小强李君刘向勇王晓芝滨州医学院附属医院重症医学科山东滨州256603 德州市人民医院重症医学科山东德州253014 滨州医学院细胞生物学教研室山东烟台264003

目的观察芹菜素对脂多糖（LPS）诱导小鼠急性肺损伤（ALI）的影响，探讨其可能的作用机制。方法将40只健康雄性昆明小鼠按随机数字表法分为对照组、模型组及芹菜素低、中、高剂量组，每组8只。采用腹腔注射LPS 5mg／kg制备ALI模型；芹... 详细信息

目的观察芹菜素对脂多糖（LPS）诱导小鼠急性肺损伤（ALI）的影响，探讨其可能的作用机制。方法将40只健康雄性昆明小鼠按随机数字表法分为对照组、模型组及芹菜素低、中、高剂量组，每组8只。采用腹腔注射LPS 5mg／kg制备ALI模型；芹菜素低、中、高剂量组分别于制模前1h腹腔注射芹菜素10、25、50mg／kg进行干预。制模后6h进行指标检测，取右肺上叶行苏木素-伊红（HE）染色观察肺组织病理改变并对其进行病理评分，取右肺下叶称重测湿／干质量（W／D）比值，酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清及支气管肺泡灌洗液（BALF）中细胞间黏附分子-1（ICAM-1）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的含量，逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测p38丝裂素活化蛋白激酶（p38MAPK）、ICAM-1和TNF-α的mRNA表达。结果与对照组比较，模型组肺W／D比值增高（17．79±2．89比5．56±0．37，P〈0．05），肺组织病理评分增加（分：10．32±0．23比1．87±0．54，P〈0．05），血清及BALF中ICAM-1、TNF-α含量升高[血清中ICAM-1（ng／L）：21．4±2．7比14．3±3．5，TNF—α（ng／L）：254．8±10．6比1423±13．7；BALF中ICAM-1（ng／L）：20．3±2．4比11．5±3．2，TNF—α（ng／L）：230.3±5．8比110．5±11．2，均P〈0．05]，且p38MAPK、ICAM-1和TNF—α的mRNA表达亦明显升高（以对照组为1，p38MAPK、ICAM-1、TNF-α的相对表达量分别为4．42±0．37、4．89±0．27、3．28±0．13，均P〈0．05）；不同剂量芹菜素可减轻上述损伤效应，以中剂量组改善最为明显，肺W／D比值为13．28±1．21，血清中ICAM-1为（18．5±4．3）ng／L，TNF—α为（169．4±20．8）ng／L，BALF中ICAM-1为（17．8±3．5）ng／L，TNF-α为（150．4±7．1）ng／L，肺组织p38MAPK、ICAM-1、TNF—α的mRNA表达分别为2．99±0．28、3．97±0．17、2．87±0．27，与模型组比较差异均有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）。结论芹菜素可不同程度的拮抗LPS引起的小鼠ALI，以中剂量组改善效果最好，其保护作用可能与抑制p38MAPK信号通路活化、减少TNF—α和ICAM—1等炎症因子表达有关。

关键词：芹菜素脂多糖急性肺损伤肿瘤坏死因子-α 细胞间黏附分子-1 p38丝裂素活化蛋白激酶

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Runx2调控成釉细胞Amelotin基因表达的研究

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牙体牙髓牙周病学杂志 2013年第2期23卷 80-85页

作者：刘晓影王玉敏李伯翰张娟娟孙岩孙学玲高玉光潍坊医学院细胞生物学教研室山东潍坊261042 滨州医学院附属医院口腔内科山东滨州256603 潍坊医学院口腔医学研究所山东潍坊261042

目的:研究Runx2与Amelotin基因表达之间的关系,并寻找Runx2在Amelotin启动子上重要的结合位点。方法:利用免疫组化方法定位Runx2与Amelotin在体内的表达;通过RNA干扰和过量表达Runx2的方法,改变Runx2在成釉细胞中的表达量;利用qRT-PCR... 详细信息

目的:研究Runx2与Amelotin基因表达之间的关系,并寻找Runx2在Amelotin启动子上重要的结合位点。方法:利用免疫组化方法定位Runx2与Amelotin在体内的表达;通过RNA干扰和过量表达Runx2的方法,改变Runx2在成釉细胞中的表达量;利用qRT-PCR的方法检测Runx2表达量的改变对Amelotin基因表达的影响;利用软件分析Amelotin启动子近端区域Runx2的可能结合位点后,以PCR方法获取含有该位点的Amelotin基因上游启动子片段,进一步克隆含有该位点的Amelotin启动子荧光报告载体pGL3-Amtn-1463,并对该位点进行定点突变,以此瞬时转染成釉细胞,通过检测荧光素酶活性来分析定点突变对该段启动子转录活性的影响。结果:Runx2在成釉细胞核中有表达,而Amelotin在成釉细胞分泌的牙釉基质中有表达;过量表达或降低表达Runx2时,Amelotin的表达也受到相应影响;成功克隆pGL3-Amtn-1463和pGL3-Amtn-1463-Runx2mut并瞬转染成釉细胞发现,潜在的Runx2结合位点的突变能降低Amelotin启动子的转录活性。结论:-1342/-1336区域的Runx2结合位点在Runx2调控Amelotin基因表达过程中具有重要作用。

关键词： Runx2 Amelotin 成釉细胞定点突变

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人胎盘贴壁细胞定向诱导神经样细胞

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基础医学与临床 2009年第12期29卷 1258-1262页

作者：王跃嗣孟凡刚王延伟李建远滨州医学院生物技术教研室山东烟台264003 山东大学齐鲁医院神经外科山东济南250012 山东干细胞工程技术研究中心山东烟台264003

目的探讨胎盘组织培养贴壁细胞的分离培养以及定向诱导神经细胞分化的生物潜能,从而研究胎盘贴壁细胞与神经发育的相互关系。方法用胰酶消化分离培养人胎盘组织中的贴壁细胞,并应用抗体Nestin、MAP2、MBP、CD133、CD34等进行免疫细胞化... 详细信息

目的探讨胎盘组织培养贴壁细胞的分离培养以及定向诱导神经细胞分化的生物潜能,从而研究胎盘贴壁细胞与神经发育的相互关系。方法用胰酶消化分离培养人胎盘组织中的贴壁细胞,并应用抗体Nestin、MAP2、MBP、CD133、CD34等进行免疫细胞化学染色,用2-巯基乙醇和反式维甲酸进行体外向神经细胞诱导分化。结果分离培养出胎盘组织贴壁细胞,是一异质性细胞群体。培养的贴壁细胞表达CD133,不表达CD34,同时表达Nestin和MAP2。经定向神经诱导后的人胎盘贴壁细胞出现神经样细胞的形态,强表达Nestin和MAP2,弱表达MBP和GFAP。结论人胎盘贴壁细胞经体外定向诱导可分化为神经样细胞,其具有间充质干细胞(MSC)性质,胎盘组织是MSC的一个重要来源。

关键词：胎盘贴壁细胞神经细胞间充质干细胞分化

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吴茱萸碱抑制NOD1通路诱导肝癌HepG2和SMMC-7721细胞凋亡

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中国药理学通报 2018年第11期34卷 1588-1593页

作者：郭星娴李晓朋吕晓婷陈益周鹏吕艳伟李静陈地龙重庆医科大学基础医学院组织细胞工程与干细胞研究室组织学与胚胎学教研室重庆400016 三峡医药高等专科学校重庆400016

目的探讨吴茱萸碱诱导肝癌HepG2和SMMC-7721细胞凋亡的机制。方法以肝癌HepG2和SMMC-7721细胞为研究对象,CCK-8法检测吴茱萸碱对细胞增殖的影响;Hoechst 33258染色法在显微镜下观察细胞凋亡现象的改变;定量逆转录-聚合酶链反应(qRT-PCR... 详细信息

目的探讨吴茱萸碱诱导肝癌HepG2和SMMC-7721细胞凋亡的机制。方法以肝癌HepG2和SMMC-7721细胞为研究对象,CCK-8法检测吴茱萸碱对细胞增殖的影响;Hoechst 33258染色法在显微镜下观察细胞凋亡现象的改变;定量逆转录-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测NOD1在正常肝细胞HL-7702与肝癌细胞中的表达; Western blot检测NOD1、NF-κB p65、p-p65,以及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、p53的表达。结果 CCK-8结果显示,给予吴茱萸碱(0、0. 25、0. 5、1、2、4μmol·L-1) 12、24、48 h后,Hep G2和SMMC-7721细胞抑制率明显增高,并且呈剂量和时间依赖性; Hoechst33258染色结果显示,经吴茱萸碱诱导后,Hep G2和SMMC-7721细胞出现核固缩、核边集等形态学改变; qRT-PCR结果显示,与正常肝细胞HL-7702相比,NOD1在肝癌细胞中的表达明显较高; Western blot结果显示,吴茱萸碱可下调NOD1、p-p65和Bcl-2蛋白水平,上调Bax、p53蛋白表达水平,对p65表达水平无影响。结论吴茱萸碱通过下调NOD1,抑制NF-κB的活性,激活p53信号通路,改变Bcl-2/Bax的比值,诱导肝癌Hep G2和SMMC-7721细胞的凋亡。

关键词：吴茱萸碱 NOD1 肝癌 HepG2 SMMC-7721 凋亡

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