检索结果-内蒙古大学图书馆

中华男科学杂志 2011年第6期17卷 546-552页

作者：李亚潘克俭王兰任江成都医学院生物医学系细胞生物学与遗传学教研室四川成都610083

目的：采用Meta分析系统评价Y染色体AZFc区gr/gr缺失与特发性男性不育的关系。方法：检索PubMed、VIP和CNKI数据库（2003年1月至2010年8月）中有关gr/gr缺失与特发性男性不育相关性的病例-对照研究,并用RevMan4.2软件进行统计分析。结... 详细信息

目的：采用Meta分析系统评价Y染色体AZFc区gr/gr缺失与特发性男性不育的关系。方法：检索PubMed、VIP和CNKI数据库（2003年1月至2010年8月）中有关gr/gr缺失与特发性男性不育相关性的病例-对照研究,并用RevMan4.2软件进行统计分析。结果：①共纳入20篇符合条件的文献,累计特发性不育病例5 246例、对照4 380例。②20篇文献的数据合并结果显示,患者组gr/gr缺失频率显著高于对照组,其比值比（odds ratio,OR）为1.63,95%CI：1.23~2.44（P=0.002）,当Meta分析限定在16篇采用更加严格的病例和对照纳入标准的文献时,则OR增至1.84,95%CI：1.47~2.29（P〈0.000 01）。③13篇文献的研究结果显示,少精子症患者gr/gr缺失频率明显高于对照组（OR=2.12,95%CI：1.61~2.80）（P〈0.000 01）。④8篇文献的研究结果显示,患者组缺失DAZ1/DAZ2基因拷贝的gr/gr缺失亚型频率较对照组显著增高（OR=1.83,95%CI：1.31~2.55）（P=0.000 4）;但缺失DAZ3/DAZ4基因拷贝的gr/gr缺失亚型频率分布在患者和对照组间却未见显著性差异（OR=1.43,95%CI：0.97~2.11）（P=0.07）。结论：本研究提示gr/gr缺失可能是男性不育风险因子之一。

关键词：特发性男性不育 gr/gr缺失 Meta分析

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合成紫花茄皂甙诱导人肝癌细胞株Bel-7402凋亡的作用机制

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癌症 2006年第4期25卷 438-442页

作者：马朋曹同涛顾国峰赵翔杜宇国张页滨州医学院生物学教研室山东滨州256603 中国科学院生态环境研究中心北京100085 北京大学医学部细胞生物学系北京100083

背景与目的:紫花茄(SolanumindicumL.)是一种有抗炎和治疗跌打损伤作用的传统中草药,含有丰富的结构独特的薯蓣皂甙,即紫花茄皂甙。我们的研究结果已证实,数种合成紫花茄皂甙有强抗肿瘤效果。本研究探讨合成紫花茄皂甙Ⅰ("-D-木吡... 详细信息

背景与目的:紫花茄(SolanumindicumL.)是一种有抗炎和治疗跌打损伤作用的传统中草药,含有丰富的结构独特的薯蓣皂甙,即紫花茄皂甙。我们的研究结果已证实,数种合成紫花茄皂甙有强抗肿瘤效果。本研究探讨合成紫花茄皂甙Ⅰ("-D-木吡喃糖基-(1→3)-[#-L-鼠李吡喃糖基-(1→2)]-"-D-半乳吡喃糖基薯蓣苷)的抗肿瘤机制。方法:以不同浓度紫花茄皂甙处理人肝癌细胞Bel-7402后,用酸性磷酸酶(acidphosphataseassay,APA)法测定增殖抑制率和IC50。用结晶紫染色显微镜观察细胞的形态学变化。用蛋白免疫印迹法检测凋亡过程中相关蛋白的变化。结果:紫花茄皂甙对Bel-7402细胞有明显的增殖抑制作用,在皂甙Ⅰ作用72h后的IC50为4.20μg/ml。光学显微镜下可见细胞密度降低,胞质中出现膜泡等形态学变化。蛋白免疫印迹检测结果显示,紫花茄皂甙Ⅰ作用后细胞质中的细胞色素c含量明显增加,Caspase-3被激活,细胞内的poly(ADR-ribose)polymerase(PARP)蛋白被剪切。结论:紫花茄皂甙对人肝癌细胞的增殖抑制呈浓度相关性,且通过线粒体依赖性通路诱导肿瘤细胞凋亡。

关键词：紫花茄紫花茄皂甙肝肿瘤 Bel-7402细胞株凋亡

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水稻Argonaute 2蛋白的原核表达与多克隆抗体制备

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西北植物学报 2014年第10期34卷 1951-1955页

作者：程小玲杨加伟遵义医学院细胞生物学与遗传学教研室生物化学教研室贵州遵义563000

为了制备水稻Argonaute 2 （AGO2）的多克隆抗体,该研究采用RT PCR扩增OsAGO2蛋白165～401 aa片段和440～570 aa片段的编码序列,并构建了2个原核表达载体.诱导表达重组蛋白后注射家兔,制备了相应的多克隆抗体,最后利用Western blot初步... 详细信息

为了制备水稻Argonaute 2 （AGO2）的多克隆抗体,该研究采用RT PCR扩增OsAGO2蛋白165～401 aa片段和440～570 aa片段的编码序列,并构建了2个原核表达载体.诱导表达重组蛋白后注射家兔,制备了相应的多克隆抗体,最后利用Western blot初步分析水稻AGO2蛋白的表达模式.结果表明：成功构建2个表达载体,通过诱导获得了分子量约为30 kD和23 kD的重组蛋白.其中,以440～570 aa片段为抗原所制备的多克隆抗体免疫印记效果较好.Western blot表明在水稻花药、愈伤组织及小穗中检测到OsAGO2表达.该研究为进一步深入探讨水稻OsAGO2基因的特性与功能奠定了基础.

关键词： OsAGO2 原核表达多克隆抗体水稻

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rhPGRN通过MAPK/PI3K通路调控自噬和内质网应激并促进细胞增殖

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中国病理生理杂志 2020年第6期36卷 1071-1081页

作者：罗瑞秦启忠刘敏尹丹旸郭风劲重庆医科大学基础医学院细胞生物学与遗传学教研室发育生物学与模式动物平台重庆400016

目的:探讨重组人颗粒体蛋白前体(rhPGRN)对人软骨细胞C28I2和小鼠巨噬细胞RAW264. 7增殖、自噬和内质网应激(ERS)的影响及作用机制。方法:采用Ni-NTA琼脂糖树脂对组氨酸标签蛋白进行特异性亲和纯化,通过考马斯亮蓝染色、BCA法和Western ... 详细信息

目的:探讨重组人颗粒体蛋白前体(rhPGRN)对人软骨细胞C28I2和小鼠巨噬细胞RAW264. 7增殖、自噬和内质网应激(ERS)的影响及作用机制。方法:采用Ni-NTA琼脂糖树脂对组氨酸标签蛋白进行特异性亲和纯化,通过考马斯亮蓝染色、BCA法和Western blot验证目的蛋白的浓度和纯度。将细胞随机分为对照组、rhPGRN组、U0126组、3-甲基腺嘌呤(3-MA)组、rhPGRN+U0126、rhPGRN+3-MA、rhPGRN+巴弗洛霉素A1(Baf-A1)和rhPGRN+4-苯基丁酸(4-PBA)组,采用细胞计数法、Western blot和RT-qPCR检测rhPGRN对C28I2和RAW264. 7两种不同类型细胞增殖、自噬和ERS的影响。结果:(1)在含有His标签的PGRN稳转细胞株中成功提取高纯度、具有生物活性的人源重组蛋白rhPGRN。(2)rhPGRN能促进C28I2和RAW264. 7细胞的增殖,促进细胞周期相关分子(PCNA、cyclin B1和cyclin D1)的mRNA表达(P<0. 05),上调细胞周期调控蛋白Ki67表达,并提高增殖相关信号分子ERK和Akt蛋白的磷酸化水平(P<0. 05)。(3)ERK通路抑制剂U0126抑制了rhPGRN诱导的细胞增殖、自噬和ERS(P<0. 05);使用3-MA抑制PI3K/Akt通路后,rhPGRN诱导的细胞自噬被显著抑制(P<0. 05);自噬抑制剂Baf-A1和ERS抑制剂4-PBA显著下调了rhPGRN诱导的Ki67蛋白表达(P<0. 05)。结论:rhPGRN通过MAPK和PI3K/Akt通路调控自噬和ERS,从而促进C28I2和RAW264. 7细胞增殖。

关键词：重组人颗粒体蛋白前体真核表达细胞增殖自噬内质网应激

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雌二醇与ESR1靶向结合通过ERK信号通路调控软骨细胞的增殖

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南方医科大学学报 2019年第2期39卷 134-143页

作者：刘敏谢巍伟郑维尹丹旸罗瑞郭风劲重庆医科大学基础医学院细胞生物学与遗传学教研室//发育生物学与模式动物平台重庆400016

目的探讨雌二醇(E2)/ESR1(ERα)对C28I2软骨细胞增殖的影响及可能的分子机制。方法应用Ad-Easy腺病毒包装系统构建和包装过表达腺病毒Ad-ESR1,Western blot及QPCR检测该基因在细胞中蛋白及RNA表达情况。在E2处理下,设立不同病毒感染组处... 详细信息

目的探讨雌二醇(E2)/ESR1(ERα)对C28I2软骨细胞增殖的影响及可能的分子机制。方法应用Ad-Easy腺病毒包装系统构建和包装过表达腺病毒Ad-ESR1,Western blot及QPCR检测该基因在细胞中蛋白及RNA表达情况。在E2处理下,设立不同病毒感染组处理C28I2细胞,Western blot检测各处理组C28I2细胞的自噬、凋亡相关蛋白的表达及ERK信号通路的磷酸化水平;免疫荧光实验观察细胞内自噬流的强弱;FCM检测各组细胞凋亡率及周期;QPCR检测mRNA水平增殖相关标志基因(PCNA)、细胞周期蛋白B1(CyclinB1)和细胞周期蛋白D1(CyclinD1)表达。ERK特异性抑制剂处理细胞,Western blot检测抑制ERK通路后自噬及凋亡相关蛋白表达,QPCR检测增殖相关标志基因表达。结果成功构建过表达腺病毒Ad-ESR1。过表达ESR1能够促进E2处理后LC3和ATG7的表达,促进LC3和LAMP1在细胞质中共定位,抑制cleaved caspase3、cleavedcaspase12的表达并且促进PCNA、cyclinB1和cyclinD1表达,且细胞内pERK明显减少;而干扰ESR1表达后,自噬相关蛋白表达减少,自噬流减弱,凋亡蛋白表达增加,增殖标志基因表达下调,细胞内pERK相对增加。特异性抑制剂阻断ERK活化,E2/ESR1诱导的自噬增加以及凋亡减少被抑制,增殖相关基因表达被抑制。结论 E2与ESR1的靶向结合可促进软骨细胞的增殖,其作用机制可能与抑制ERK信号通路活化从而促进自噬、抑制凋亡有关。

关键词： ESR1 自噬凋亡增殖 ERK信号通路雌二醇

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口腔鳞癌中c-erbB2和p53基因的扩增和表达

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解剖学报 2003年第4期34卷 384-389页

作者：刘乃国吴淑华单长民吕增华张杰滨州医学院生物学教研室滨州医学院附属医院病理科滨州256603 滨州医学院附属医院肿瘤科滨州256603

目的　探讨c erbB2和p5 3基因扩增和表达在口腔鳞癌 (OSCC)发生发展中的作用。　方法　用原位杂交和免疫组织化学技术与图像分析相结合的方法 ,对 30例口腔鳞癌和 5例正常口腔粘膜中c erbB2和p5 3两种基因的扩增、mRNA表达和蛋白表达状... 详细信息

目的　探讨c erbB2和p5 3基因扩增和表达在口腔鳞癌 (OSCC)发生发展中的作用。　方法　用原位杂交和免疫组织化学技术与图像分析相结合的方法 ,对 30例口腔鳞癌和 5例正常口腔粘膜中c erbB2和p5 3两种基因的扩增、mRNA表达和蛋白表达状况进行了定性、定位、定量研究。　结果　OSCC中c erbB2和p5 3的扩增阳性率分别为 4 6 6 7%和 4 0 % ;而c erbB2和p5 3在OSCC中的mRNA表达率分别是 70 %和 80 % ,蛋白表达率分别是4 6 6 7%和 6 3 33%。这两种基因的扩增、mRNA表达和p5 3蛋白表达在各种性状差异之间均没有显著性差异 (P >0 0 5 ) ;erbB2蛋白表达在不同部位的口腔鳞癌中具有显著性差异 (P <0 0 2 )。　结论　c erbB2和p5 3两种基因的扩增和过表达在OSCC发生发展中都具有重要作用 ,c erbB2蛋白表达增高在腭癌和口底癌的形成过程中具有更重要的意义。

关键词：口腔鳞癌原位杂交图像分析基因扩增基因表达

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含天花粉蛋白的抗人大肠癌免疫毒素制备及其细胞毒性研究

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中国医科大学学报 1996年第2期25卷 111-113页

作者：时伟红宋今丹沈阳基础医学院细胞生物学教研室

用异型双功能连接剂ＳＰＤＰ，将核糖体抑制蛋白一天花粉蛋白（ＴＣＳ）共价连接在单克隆抗体ＮＤ－１上，制成免疫毒素，此单抗与人大肠癌细胞表面抗原一大分子表面抗原（ＬＥＡ）有高度亲合能力。连接物ＮＤ－１－ＴＣＳ用Ｓｅｐｈａ... 详细信息

用异型双功能连接剂ＳＰＤＰ，将核糖体抑制蛋白一天花粉蛋白（ＴＣＳ）共价连接在单克隆抗体ＮＤ－１上，制成免疫毒素，此单抗与人大肠癌细胞表面抗原一大分子表面抗原（ＬＥＡ）有高度亲合能力。连接物ＮＤ－１－ＴＣＳ用ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１５０分子筛层析纯化。间接免疫荧光试验结果表明，ＮＤ－１－ＴＣＳ保留了较高的抗体活性。体外细胞毒性试验表明，ＮＤ－１－ＴＣＳ对人大肠癌细胞ＣＸ－１的ＩＣ＿（５０）。为０．３６μｇ／ｍｌ．细胞毒性ＮＤ－１和ＴＣＳ混合物高１０倍。ＮＤ－１－ＴＣＳ对人大肠癌细胞的细胞毒性比非抗原携带细胞ＳＰ＿（２／０）高６０倍。此免疫毒素在人大肠癌的治疗方面有应用前景。

关键词：单克隆抗体天花粉蛋白大肠肿瘤免疫毒素

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CyclinB1、CDK1在食管鳞癌组织中的表达及临床意义

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世界华人消化杂志 2009年第23期17卷 2374-2378页

作者：赵春玲陈丽梅高志芹杜长青潘智芳于文静潍坊医学院细胞生物学教研室山东省潍坊市261053

目的:探讨食管鳞癌组织中细胞周期蛋白CyclinB1和细胞周期蛋白依赖性激酶CDK1表达及其临床病理学意义.方法:应用免疫组织化学SP法对52例食管鳞癌(组织学Ⅰ级8例,Ⅱ级20例,Ⅲ级24例;有淋巴结转移20例,无淋巴结转移32例;原位癌16例,侵袭性... 详细信息

目的:探讨食管鳞癌组织中细胞周期蛋白CyclinB1和细胞周期蛋白依赖性激酶CDK1表达及其临床病理学意义.方法:应用免疫组织化学SP法对52例食管鳞癌(组织学Ⅰ级8例,Ⅱ级20例,Ⅲ级24例;有淋巴结转移20例,无淋巴结转移32例;原位癌16例,侵袭性癌36例包括浸润至黏膜下层、肌层、全层)及其配对的癌旁正常组织进行CyclinB1、CDK1的检测,分析其阳性表达与食管鳞癌患者临床病理因素的关系.结果:食管鳞癌组织中CyclinB1、CDK1的阳性表达高于癌旁正常食管黏膜组织,2组差异都有统计学意义(71.2%vs2.0%,65.4%vs3.9%,均P<0.05).食管鳞癌组织中CyclinB1、CDK1的表达都与性别、年龄无关;与组织学分级、浸润深度及淋巴结转移有关(均P<0.05).CyclinB1阳性表达强度与CDK1的阳性表达强度之间呈正相关(r=0.697,P<0.05).结论:CyclinB1、CDK1的高表达会促进食管鳞癌的发生与发展.而且食管鳞癌中CyclinB1与CDK1的表达密切相关,可作为食管鳞癌生物学行为预测的参考指标.

关键词：食管鳞癌 CyclinB1 细胞周期蛋白依赖性激酶免疫组织化学

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微小隐孢子虫pcDNA3.0-23重组质粒免疫效果评价

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中国公共卫生 2010年第8期26卷 1007-1009页

作者：柏雪莲张玉梅周秀芝张珍孟玮耿丽李波清滨州医学院病原生物学教研室山东滨州256603

目的比较微小隐孢子虫表面抗原CP23真核表达载体pcDNA3.0-23经不同免疫途径产生的免疫效果。方法提取微小隐孢子虫基因组DNA,PCR扩增CP23基因片段,克隆至真核表达载体pcDNA3.0,构建pcD-NA3.0-23重组质粒,分别通过肌肉注射和滴鼻(粘膜)免... 详细信息

目的比较微小隐孢子虫表面抗原CP23真核表达载体pcDNA3.0-23经不同免疫途径产生的免疫效果。方法提取微小隐孢子虫基因组DNA,PCR扩增CP23基因片段,克隆至真核表达载体pcDNA3.0,构建pcD-NA3.0-23重组质粒,分别通过肌肉注射和滴鼻(粘膜)免疫2种途径免疫BALB/c小鼠,免疫3次,2周后检测抗CP23特异性抗体IgG滴度、小鼠脾脏、血清中CD4+和CD8+T细胞、细胞因子γ干扰素(IFN-γ);用微小隐孢子虫攻击感染被免疫小鼠,收集小鼠粪便,计算小鼠排出的卵囊量。结果肌注组与滴鼻组小鼠血清抗CP23特异性抗体IgG滴度随免疫次数增加均明显升高,高于对照组及空质粒组(P<0.05),肌注组高于滴鼻组(P<0.05);肌注组与滴鼻组小鼠的CD4+T细胞、CD4+/CD8+比值均高于磷酸缓冲液(PBS)对照组及pcDNA3.0空质粒组(P<0.05),但2种免疫途径的差异无统计学意义(P>0.05);肌注组和滴鼻组脾细胞培养上清中IFN-γ明显高于对照组及空质粒组(P<0.05);微小隐孢子虫攻击小鼠后,2种免疫途径的小鼠排出卵囊量明显少于对照组,且排出时间缩短,2种途径的差异无统计学意义。结论 pcDNA3.0-23重组质粒作为基因疫苗,可产生较好的细胞及体液免疫反应;不同的免疫途径可产生不同的免疫反应。

关键词：微小隐孢子虫 CP23 基因疫苗免疫途径免疫效果

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有机磷杀虫剂体外对乙酰胆碱M2受体磷酸化抑制的研究

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中华劳动卫生职业病杂志 2006年第6期24卷 352-355页

作者：邹黎明李舒音张健沈阳医学院医学基础部生物化学与分子生物学教研室 110034 沈阳医学院细胞生物学教研室 110034 辽宁中医学院职业技术学院微生物学与免疫学教研室

目的研究有机磷类杀虫剂(OPs)对G蛋白结合受体激酶-2(GRK-2)介导的毒蕈碱乙酰胆碱M2受体(mAChR2)磷酸化的影响,进一步揭示OPs可能存在的其他作用途径。方法利用亲和层析方法从大鼠脑中纯化mAChR2；将纯化的大鼠脑mAChR2、GRK-2、同位素... 详细信息

目的研究有机磷类杀虫剂(OPs)对G蛋白结合受体激酶-2(GRK-2)介导的毒蕈碱乙酰胆碱M2受体(mAChR2)磷酸化的影响,进一步揭示OPs可能存在的其他作用途径。方法利用亲和层析方法从大鼠脑中纯化mAChR2；将纯化的大鼠脑mAChR2、GRK-2、同位素磷32标记的三磷酸腺苷([γ-^(32)P] ATP)与不同浓度的对氧磷(PO)、氧毒死蜱(CPO)和毒死蜱(CPF)共同保温,聚丙烯酰胺凝胶电泳,凝胶片干燥后放射性自显影检测mAChR2磷酸化结果。将干燥凝胶片中放射性标记的磷酸化mAChR2蛋白带剪下,同位素液体闪烁计数器计数。结果CPO抑制大鼠脑mAChR2的磷酸化,其IC_(50)为70μmol/L；CPF也抑制mAChR2的磷酸化,而PO与对硫磷(PT)不抑制mAChR2的磷酸化。CPO和CPF并不抑制同样由GRK2介导的β_2肾上腺素受体(β_2-AR)的磷酸化。结论CPO和CPF选择性地抑制GRK-2介导的mAChR2磷酸化,而PO和PT无此效应。

关键词：杀虫剂有机磷受体毒蕈碱肾上腺素能β受体

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