检索结果-内蒙古大学图书馆

中国病原生物学杂志 2014年第3期9卷 230-235页

作者：孙万菊杜东龙孙辉周秀芝张珍李波清滨州医学院病原生物学教研室山东烟台264003

目的分析幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)临床分离株热休克蛋白60基因编码区序列特征。方法对分离自我国不同地区、患有不同胃肠疾病患者的63株Hp提取基因组DNA并设计hsp60特异性引物,采用聚合酶链反应(PCR)扩增hsp60基因,经1%琼脂... 详细信息

目的分析幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)临床分离株热休克蛋白60基因编码区序列特征。方法对分离自我国不同地区、患有不同胃肠疾病患者的63株Hp提取基因组DNA并设计hsp60特异性引物,采用聚合酶链反应(PCR)扩增hsp60基因,经1%琼脂糖凝胶电泳后切胶回收、纯化PCR产物并测序,用DNAstar 5.0软件中的Clustal W程序对hsp60基因序列及由该序列翻译的氨基酸序列进行比较分析。结果成功特异性扩增并纯化到hsp60全基因序列。经序列比对,发现不同胃肠疾病来源的hsp60基因核苷酸序列在877、1 399以及1 579位点处存在单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)。其中来源于非胃癌患者的Hp在以上三位点处分别有8株(8/48,16.67%)G→A置换,9株(9/48,18.75%)C→G置换,7株(7/48,14.58%)A→G置换;胃癌患者来源的Hp在以上三位点处分别有3株(3/18,16.67%)G→A置换,1株(1/18,5.55%)C→G置换,2株(2/18,11.11%)A→G置换。将核苷酸序列翻译为氨基酸序列后,在以上三位点所对应的氨基酸序列,即293、467以及527位点处分别发生了由缬氨酸(V)到异亮氨基酸(I)、谷氨酰胺(Q)到谷氨酸(E)以及苏氨酸(T)到丙氨酸(A)的改变。结论我国Hp临床分离株热休克蛋白60基因序列存在单核苷酸多态性位点。

关键词：幽门螺杆菌热休克蛋白60基因序列分析单核苷酸多态性

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

吗啡戒断性焦虑大鼠VTA和NAc脑区/核团CaMKⅡ含量与磷酸化水平改变

引用

神经解剖学杂志 2010年第4期26卷 411-414页

作者：田艳钱刚罗素元汤贤春遵义医学院细胞生物学与遗传学教研室遵义563003

目的:研究阿片类药物依赖戒断后焦虑产生的分子机制。方法:选用健康雄性SD大鼠48只,随机分为生理盐水对照组、模型组和丁螺环酮治疗组。采用剂量递增法皮下注射吗啡10d,自然戒断,并在自然戒断的1～3d给予丁螺环酮15mg/kg灌胃治疗(2次/d)... 详细信息

目的:研究阿片类药物依赖戒断后焦虑产生的分子机制。方法:选用健康雄性SD大鼠48只,随机分为生理盐水对照组、模型组和丁螺环酮治疗组。采用剂量递增法皮下注射吗啡10d,自然戒断,并在自然戒断的1～3d给予丁螺环酮15mg/kg灌胃治疗(2次/d),于末次吗啡注射后72h,高架十字迷宫检测大鼠焦虑行为后,用Western Blot法检测各组大鼠奖赏系统中脑腹侧被盖区(VTA)和伏核(NAc)神经细胞钙/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKII)的含量和磷酸化水平。结果:与生理盐水对照组比较,模型组大鼠CaMKⅡ蛋白含量和β亚基磷酸化水平均显著升高(P<0.01);与丁螺环酮组比较,模型组CaMKII蛋白的含量与β亚基的磷酸化水平同样显著增高(P<0.01)。结论:奖赏系统VTA和NAc神经细胞CaMKⅡ含量、CaMKIIβ亚基磷酸化水平的增高可能是吗啡依赖戒断焦虑行为产生的分子机制之一。

关键词：吗啡戒断焦虑 CaMKⅡ 中脑腹侧被盖区伏核

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

大鼠骨髓间充质干细胞分离培养及其生物学特性观察

引用

中国组织工程研究与临床康复 2007年第3期11卷 463-466,I0002页

作者：买霞陈莉扎拉嘎胡战丽艳徐瑞成武装警察部队医学院细胞生物学教研室天津市300162

目的:分离和培养大鼠骨髓间充质干细胞并观察其生物学特性。方法:实验于2004-05/2006-04在武装警察部队医学院细胞生物学实验室进行。在无菌条件下分离大鼠胫骨、股骨,用预冷磷酸盐缓冲液冲出骨髓,经Percoll梯度分离方法获得骨髓单个核... 详细信息

目的:分离和培养大鼠骨髓间充质干细胞并观察其生物学特性。方法:实验于2004-05/2006-04在武装警察部队医学院细胞生物学实验室进行。在无菌条件下分离大鼠胫骨、股骨,用预冷磷酸盐缓冲液冲出骨髓,经Percoll梯度分离方法获得骨髓单个核细胞,接种含体积分数为0.10胎牛血清的IMDM培养基中。对单个核细胞行贴壁培养后,通过倒置光显微镜和透射电子显微镜进行细胞形态学观察,流式细胞术进行细胞周期分析,细胞计数法测定细胞生长曲线,免疫细胞化学染色显示c-kit表达。结果:①倒置光显微镜下观察采用Percoll(1.073g/mL)分离的骨髓间充质干细胞大小较为均匀,基本上呈梭形或星形的上皮样细胞,传代培养后的细胞体积增大,成纤维样细胞逐渐增多。②透射电子显微镜下观察骨髓间充质干细胞的核质比例较大,核仁大而明显,细胞表面有微绒毛,胞浆内可见核糖体和线粒体,其他细胞器较少,表现出未分化细胞的特征。③细胞生长曲线测定表明接种后第4天细胞进入指数增生期,至第7天进入平台期。④流式细胞术证明G2+S期细胞为11.8%。⑤体积较大的多角形细胞为c-kit阳性,体积较小的成纤维样细胞为阴性细胞,阳性颗粒主要分布在细胞膜和细胞质,细胞核未见表达,阳性细胞比率为55.3%。结论:成功地建立了一种分离培养大鼠骨髓间充质干细胞的方法,获得的细胞生长稳定,增殖活跃,可作为组织工程的种子细胞。

关键词：骨髓间质干细胞大鼠细胞培养免疫细胞化学

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

华支睾吸虫parkin蛋白的分子生物学特征研究

引用

中国病原生物学杂志 2016年第7期11卷 643-648页

作者：柏雪莲李波清张玉梅张艳丽耿丽杜镇镇赵慧琳滨州医学院病原生物学教研室山东烟台256603

目的了解华支睾吸虫Parkin蛋白(Clonorchis sinensis Parkin)的生物学特性。方法从华支睾吸虫cDNA文库获得Parkin的cDNA全长,NCBI搜索与之相似度高的基因序列,预测其所含结构域和功能;应用MEGA5程序对来自GenBank中与之有较高相似度的... 详细信息

目的了解华支睾吸虫Parkin蛋白(Clonorchis sinensis Parkin)的生物学特性。方法从华支睾吸虫cDNA文库获得Parkin的cDNA全长,NCBI搜索与之相似度高的基因序列,预测其所含结构域和功能;应用MEGA5程序对来自GenBank中与之有较高相似度的基因序列进行分析,构建基因进化树;原核表达重组融合蛋白CsParkin,纯化后免疫Blab/c小鼠,获得多克隆抗体,采用Western blot鉴定天然CsParkin;采用qRT-PCR测定CsParkin基因在不同发育阶段的表达水平。结果 CsParkin蛋白含有5个结构域,分别是Ubl、RING0、RING1、IBR和RING2,具有典型的Parkin蛋白结构;该蛋白与人及各种动物的Parkin有很高的相似度,与其他吸虫有更近的进化关系;Western blot显示原核表达的重组CsParkin,与天然CsParkin分子质量相同,均为45.7ku;CsParkin在囊蚴中的表达量高于成虫;免疫组化显示CsParkin主要分布于成虫受精囊中的精子及口吸盘和睾丸,在囊蚴中广泛分布。结论肝吸虫CsParkin属蛋白于保守蛋白,具有典型的泛素连接酶3的功能结构,推测其在蛋白的泛素化中起到作用,可能在华支睾吸虫的生长过程中发挥作用。

关键词：华支睾吸虫 Parkin 泛素连接酶

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

端粒酶逆转录酶和端粒重复结合因子2在大鼠心肌细胞发育过程中的表达

引用

解剖学杂志 2005年第2期28卷 152-153,i001页

作者：张光谋郭志坤徐振平文小军王华新乡医学院细胞生物学教研室新乡453003 新乡医学院形态学研究室

目的:观察大鼠心肌细胞发育过程中端粒酶逆转录酶(TERT)和端粒重复结合因子2(TRF2)的表达,探讨TERT活性与心肌细胞分化和发育的关系。方法:应用免疫组化方法分别检测胎鼠孕16d、出生后2、5、10、20d的大鼠心脏标本,观察TERT和TRF2的表... 详细信息

目的:观察大鼠心肌细胞发育过程中端粒酶逆转录酶(TERT)和端粒重复结合因子2(TRF2)的表达,探讨TERT活性与心肌细胞分化和发育的关系。方法:应用免疫组化方法分别检测胎鼠孕16d、出生后2、5、10、20d的大鼠心脏标本,观察TERT和TRF2的表达和分布。结果:TERT分布于胎鼠心肌细胞的胞质和细胞核中,出生后2～20d,TERT在胞质的表达呈下降趋势。TRF2主要分布在胎鼠心肌细胞的胞核中,出生后5～20d,TRF2表达阳性的心肌细胞数目逐渐减少。结论:在大鼠心肌细胞发育过程中,TERT和TRF2的表达下调促使部分细胞永久地退出细胞周期而进入终末分化;TERT活性受到了心肌细胞发育过程的调节。

关键词：端粒酶逆转录酶心肌细胞发育过程结合因子大鼠 TRF2 TERT 免疫组化方法 RT活性出生后细胞分化心脏标本下降趋势细胞数目终末分化细胞周期表达下调胎鼠分布细胞核胞质

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

过表达Olig2和Nkx2.2人胚胎干细胞系的建立

引用

解剖学杂志 2015年第6期38卷 645-648页

作者：杨丽华王婷马丽罗梦娇曲学彬武秀香姚瑞芹第二军医大学细胞生物学教研室上海200433 徐州医学院细胞生物学与神经生物学教研室徐州221009

目的:建立过表达Olig2和Nkx2.2的人胚胎干细胞(hESCs)系.方法:利用RT-PCR从鼠N2A细胞克隆出Olig2和Nkx2.2的ORF片段,将Olig2和Nkx2.2基因编码序列分别和带有HA及Flag的载体连接,构建Olig2-HA和Nkx2.2-Flag重组载体.将构建的载体分别与2种病毒辅助包装原件载体质粒共转染293T细胞,制备并浓缩Olig2-HA和Nkx2.2-Flag慢病毒颗粒,感染hESCs,嘌呤霉素筛选的阳性克隆传代培养10代后鉴定细胞内Olig2和Nkx2.2的表达.结果:PCR扩增得到含Olig2和Nkx2.2基因编码序列的特异性条带;携带有Olig2和Nkx2.2基因的慢病毒能够同时感染hESCs,表达Olig2-HA和Nkx2.2-Flag融合蛋白,并稳定遗传.结论:成功构建了同时过表达Olig2和Nkx2.2的人胚胎干细胞系.

关键词： Olig2 Nkx2.2 过表达人胚胎干细胞克隆

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

Cyclin D1和 p16蛋白在胎儿心肌细胞中的表达

引用

解剖学杂志 2006年第1期29卷 112-113页

作者：张光谋徐振平井长勤郭志坤王鹏新乡医学院细胞生物学教研室新乡医学院形态学研究室新乡453003

心肌细胞从胚胎期具有增殖能力的细胞成为成年期不具有增殖能力而只有发生肥大反应能力的过程中，存在增殖能力的变化和逐渐分化现象，该现象受细胞周期调控，细胞周期素（cyclin）是对细胞周期起正性调节作用的一类物质。p16蛋白是细... 详细信息

心肌细胞从胚胎期具有增殖能力的细胞成为成年期不具有增殖能力而只有发生肥大反应能力的过程中，存在增殖能力的变化和逐渐分化现象，该现象受细胞周期调控，细胞周期素（cyclin）是对细胞周期起正性调节作用的一类物质。p16蛋白是细胞周期素依赖的蛋白激本科抑制因子（cyclin dependent kinase inhibitor,CKI）的一种，

关键词： P16蛋白心肌细胞 Cyclin 细胞周期调控细胞周期素胎儿增殖能力 cyclin p16蛋白反应能力

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

Cyclin D1调控肺癌细胞的浸润和转移

引用

生理学报 2012年第1期64卷 55-61页

作者：李尊岭邵淑红焦飞岳真马颖滨州医学院生物化学与分子生物学教研室分子遗传学研究所山东省教育厅肿瘤分子生物学重点实验室烟台264003 滨州医学院基础心理学教研室烟台264003

Cyclin D1作为细胞周期的一个调控因子,许多肿瘤细胞都过表达Cyclin D1基因,比如肺癌、乳腺癌、甲状腺癌等。但是Cyclin D1在肿瘤细胞浸润和转移中的作用报道较少。本研究旨在研究Cyclin D1对肺癌细胞浸润、转移的调控作用。以肺腺癌细... 详细信息

Cyclin D1作为细胞周期的一个调控因子,许多肿瘤细胞都过表达Cyclin D1基因,比如肺癌、乳腺癌、甲状腺癌等。但是Cyclin D1在肿瘤细胞浸润和转移中的作用报道较少。本研究旨在研究Cyclin D1对肺癌细胞浸润、转移的调控作用。以肺腺癌细胞A549(高表达Cyclin D1)和肺鳞癌细胞SK-MES-1(低表达Cyclin D1)为研究对象。取裸鼠尾静脉注射A549或SK-MES-1细胞,4周后处死,从肺脏中分离出肿瘤细胞再接种另外的裸鼠,如此经过2次循环接种构建裸鼠高转移动物模型。向A549细胞转染Cyclin D1的干扰RNA抑制Cyclin D1的表达,同时向SK-MES-1细胞转染Cyclin D1的表达载体促进Cyclin D1的表达,随后通过细胞迁移实验观察基因处理后A549和SK-MES-1细胞的转移能力变化。用Western blot检测亲本细胞、不同转移层次裸鼠的癌组织中Cyclin D1和WNT/TCF信号通路相关蛋白因子的表达。结果显示,随着转移次数增加,从动物癌组织中分离出的癌细胞转移能力显著增强,Cyclin D1表达也明显升高;在A549细胞中,干扰Cyclin D1的表达可使细胞迁移能力变弱;在SK-MES-1细胞中,过表达Cyclin D1可使细胞迁移能力增强。高转移肺癌动物模型肿瘤组织中β-catenin、LEF、TCF蛋白表达高于低转移肿瘤组织,而二者的上述蛋白表达均高于亲本肺癌细胞。以上结果提示,Cyclin D1的表达与肺癌的浸润和转移密切相关,推测WNT/TCF信号通路能够促进Cyclin D1的表达。

关键词：肺肿瘤 Cyclin D1 干扰RNA 肿瘤转移 WNT信号通路

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

华支睾吸虫生长因子受体结合蛋白2的生物学特性和功能研究

引用

中国病原生物学杂志 2015年第8期10卷 726-730,758页

作者：柏雪莲李波清张玉梅张珍耿丽杜镇镇赵慧琳滨州医学院病原生物学教研室山东烟台264003

目的探索华支睾吸虫生长因子受体结合蛋白2(Clonorchis sinensis growth factor receptor bound protein 2,CsGrb2)的生物学特性和功能。方法从华支睾吸虫cDNA文库获得CsGrb2的cDNA全长,NCBI搜索与之相似度高的基因序列,预测其所含结构... 详细信息

目的探索华支睾吸虫生长因子受体结合蛋白2(Clonorchis sinensis growth factor receptor bound protein 2,CsGrb2)的生物学特性和功能。方法从华支睾吸虫cDNA文库获得CsGrb2的cDNA全长,NCBI搜索与之相似度高的基因序列,预测其所含结构域和功能;应用MEGA5程序对来自于Genbank中与之有较高相似度的基因序列进行分析,构建基因进化树;原核表达重组融合蛋白CsGrb2,用表达的融合蛋白CsGrb2免疫小鼠,产生多克隆抗体,采用Western blot鉴定华支睾吸虫提取物中的天然CsGrb2,采用免疫组化法检测CsGrb2在华支睾吸虫成虫及囊蚴的分布;采用qRT-PCR测定CsGrb2基因在不同发育阶段的表达水平。结果 CsGrb2基因编码一个含有SH3-SH2-SH3结构的多肽,与人及各种动物的Grb2有着很高的相似度,与其他吸虫有着更近的进化关系;重组CsGrb2在原核系统中大量表达并纯化,Western blot显示天然CsGrb2与重组CsGrb2分子质量相同,均为34ku;CsGrb2在囊蚴中的表达量高于成虫。免疫组化显示CsGrb2主要分布于成虫的口、腹吸盘,间质组织,受精囊中的精子及囊蚴的大多数器官。结论CsGrb2属于保守蛋白,推测在华支睾吸虫的器官生成,能量代谢和精子的有丝分裂方面发挥作用。

关键词：华支睾吸虫生长因子受体结合蛋白2 器官生成能量代谢精子生成

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

单极纺锤体1结合蛋白2基因敲除对人肝癌SMMC-7721细胞迁移的影响

引用

中华实验外科杂志 2019年第10期36卷 1766-1769页

作者：张韦成袁晴郑璐尹伟沈维干扬州大学临床医学院细胞生物学教研室 225001

目的运用规律成簇的间隔短回文重复(CRISPR)/Cas9基因编辑技术构建敲除人单极纺锤体1结合蛋白2 (hMOB2)的肝癌SMMC-7721细胞,观察hMOB2基因敲除对其迁移的影响.方法首先将靶向hMOB2基因的导向RNA (sgRNA)的CRISPR序列克隆到慢病毒载体le... 详细信息

目的运用规律成簇的间隔短回文重复(CRISPR)/Cas9基因编辑技术构建敲除人单极纺锤体1结合蛋白2 (hMOB2)的肝癌SMMC-7721细胞,观察hMOB2基因敲除对其迁移的影响.方法首先将靶向hMOB2基因的导向RNA (sgRNA)的CRISPR序列克隆到慢病毒载体lentiCRISPRv2中,并将制备的慢病毒颗粒感染肝癌SMMC-7721细胞,然后使用嘌呤霉素筛选并挑取单克隆进行培养,用蛋白质印迹法(Western blot)方法检测hMOB2基因敲除效果,利用Transwell、细胞划痕迁移实验检测敲除hMOB2基因对SMMC-7721细胞迁移的影响,运用GraphPad Prism 8.0统计软件分析,计量资料以均值±标准差(Mean±SD)表示,组间比较采用t检验.结果成功构建了靶向hMOB2基因的慢病毒介导的CRISPR-Cas9编辑/敲除系统,筛选、建立了hMOB2基因稳定敲除的SMMC-7721细胞株,Transwell迁移实验显示,与对照组比较,敲除组中挑选的单克隆sgR-1细胞的迁移数为(224.3±6.3)个,sgR-2细胞的迁移数为(166.3±6.5)个,明显高于对照组[(114.3±10.5)个,t=16.680、9.714,P<0.01],细胞划痕实验结果显示,与对照组比较,sgR-1相对愈合面积为1.61±0.03(t =24.610,P<0.01),sgR-2为1.26 ±0.04(t=8.081,P<0.01).结论敲除hMOB2基因可促进人肝癌SMMC-7721细胞迁移.

关键词：肝癌单极纺锤体1结合蛋白2 规律成簇的间隔短回文重复/Cas9 迁移

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：