检索结果-内蒙古大学图书馆

安徽农业科学 2008年第35期36卷 15367-15368页

作者：姚庆收武玉永王学全滨州医学院药学院生物技术教研室山东烟台264003

[目的]为花生的转基因研究和白芦藜醇的生物技术生产奠定基础。[方法]利用发根农杆菌R1601分别侵染花生的子叶、叶片和茎段,诱导毛状根;利用PCR技术检测毛状根。[结果]叶片和茎段在发根农杆菌R1601侵染后产生毛状根,但叶片诱导率较高,... 详细信息

[目的]为花生的转基因研究和白芦藜醇的生物技术生产奠定基础。[方法]利用发根农杆菌R1601分别侵染花生的子叶、叶片和茎段,诱导毛状根;利用PCR技术检测毛状根。[结果]叶片和茎段在发根农杆菌R1601侵染后产生毛状根,但叶片诱导率较高,其诱导率达65.6%,更适合作为转化外植体。毛状根除菌后,能在MS培养基上自主生长。PCR扩增表明,T-DNA序列整合进花生的基因组中。[结论]建立了发根农杆菌介导的花生遗传转化体系。

关键词：发根农杆菌花生毛状根转化

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IL-27联合IL-15通过磷酸化STATs途径调控NK92细胞的抗肿瘤作用

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中国肿瘤生物治疗杂志 2021年第3期28卷 261-268页

作者：蒋亚楠孙雨飞王坤付强滨州医学院免疫学教研室山东烟台264003 滨州医学院生物制药教研室山东烟台264003 山东思乐基医药科技有限公司山东烟台264003

目的:探讨IL-27联合IL-15对NK92细胞抗肿瘤作用的影响及其分子和信号通路机制。方法:将高表达IL-15的NK92(IL-15-NK92)细胞分别置于不同质量浓度的IL-27(0、10、20、30及60 ng/ml)下培养24 h,ELISA法检测IL-27对IL-15-NK92细胞分泌IL-15的影响,Transwell法检测IL-27对IL-15-NK92细胞迁移作用的影响,CCK-8法检测IL-27对IL-15-NK92细胞增殖能力的影响,流式细胞术检测IL-15-NK92细胞表面受体NKG2D、NKp30和NKp46的表达水平以及穿孔素和颗粒酶B的分泌水平,LDH法检测IL-15-NK92细胞对多种血液肿瘤和实体瘤细胞的杀伤作用,WB检测STATs通路相关蛋白的表达及其磷酸化水平。结果:30 ng/ml的IL-27可以促进IL-15-NK92细胞IL-15的分泌(P<0.01)、明显增强其迁移能力(P<0.05),但明显抑制其增殖能力(P<0.05);并且显著促进IL-15-NK92细胞表面受体NKG2D、NKp30和NKp46的表达(均P<0.05)、明显促进穿孔素分泌(P<0.05)但不影响颗粒酶B的分泌(P>0.05)。30 ng/ml的IL-27可显著促进IL-15-NK92细胞对多种血液肿瘤和实体瘤细胞的杀伤能力(P<0.05或P<0.01),并且上调STAT1、STAT3、及STAT5蛋白的磷酸化水平(均P<0.01)。结论:IL-27可增强IL-15-NK92细胞对实体肿瘤细胞和血液肿瘤细胞的杀伤作用,该作用与IL-27上调IL-15-NK92细胞中JAK-STAT通路相关蛋白STAT1、STAT3、STAT5磷酸化水平和促进该细胞中多种活化性受体相关。

关键词： IL-27 IL-15 NK92细胞抗肿瘤 JAK-STAT通路

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寿光黑鸡成纤维细胞的体外培养与冷冻保存

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安徽农业科学 2009年第6期37卷 2521-2523,2526页

作者：王娟于媛王跃嗣马云焦飞滨州医学院药学院细胞工程教研室山东烟台264003 滨州医学院基础学院生物化学教研室山东烟台264003 滨州医学院基础学院病理教研室山东烟台264003

[目的]建立鸡成纤维细胞的体外培养体系。[方法]用组织块法和消化法分别分离培养鸡皮肤成纤维细胞;比较细胞生长速率及冻存复苏率。[结果]酶消化培养的成纤维细胞原代生长较快,约5 d便可形成单层;2种方法传代细胞的生长速度相似,仅需2-... 详细信息

[目的]建立鸡成纤维细胞的体外培养体系。[方法]用组织块法和消化法分别分离培养鸡皮肤成纤维细胞;比较细胞生长速率及冻存复苏率。[结果]酶消化培养的成纤维细胞原代生长较快,约5 d便可形成单层;2种方法传代细胞的生长速度相似,仅需2-3 d就可形成单层;使用酶消化法和反复贴壁法,经3-4代后,可获得纯化的成纤维细胞;成纤维细胞经冷冻复苏后有75%-80%存活;分离纯化的胚胎和皮肤成纤维细胞的生长曲线均正常,可传至12代,传代后染色体数目不变。[结论]采用组织块法及酶消化法培养鸡成纤维细胞均可获得ES细胞建系所需的饲养层细胞。该研究为ES细胞系的成功建立奠定了基础。

关键词：皮肤胚胎成纤维细胞体外培养冷冻保存

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LBL联合PBL应用于生物技术制药教学中的构想

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中华医学教育探索杂志 2014年第8期13卷 793-796页

作者：张静张秀丽姜静徐茂磊滨州医学院药学院生物制药教研室烟台264003

比较并讨论了基于课堂的学习（1ecture-basedlearning，LBL）和以问题为基础的学习（problem-based learning，PBL）的应用现状及存在问题，提出LBL联合PBL应用于生物技术制药教学中的改革构想。拟将LBL主要应用于生物技术药物研发及制... 详细信息

比较并讨论了基于课堂的学习（1ecture-basedlearning，LBL）和以问题为基础的学习（problem-based learning，PBL）的应用现状及存在问题，提出LBL联合PBL应用于生物技术制药教学中的改革构想。拟将LBL主要应用于生物技术药物研发及制造中基本原理的授课,PBL主要应用于典型药物实例生产工艺的授课，并对实施过程中LBL和PBL的学时分配、PBL教学案例的设计与实施以及合理教学评价体系的建立三个关键点进行阐述。二者联合教学有望培养学生的自主学习能力、综合分析能力和团队合作能力，适应当前市场发展对生物制药人才的需求。

关键词：基于课堂的学习以问题为基础的学习联合教学生物技术制药

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生物技术专业校企协同育人机制的研究与实践

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基础医学教育 2020年第5期22卷 385-388页

作者：姜静刘美玲张静徐茂磊武小清马朋滨州医学院药学院生物分析教研室烟台264003 荣昌生物制药(烟台)有限公司滨州医学院药学院生物制药教研室滨州医学院药学院教学科研办滨州医学院药学院细胞生物学教研室

在中国生物技术行业对高等教育人才需求所面临的机遇与挑战中,校企协同发展推进协同育人是提升国家创新能力的重要手段和战略选择,是全面提高高等教育质量的重要着力点。文章介绍了滨州医学院生物技术专业以规模化哺乳动物细胞培养为特... 详细信息

在中国生物技术行业对高等教育人才需求所面临的机遇与挑战中,校企协同发展推进协同育人是提升国家创新能力的重要手段和战略选择,是全面提高高等教育质量的重要着力点。文章介绍了滨州医学院生物技术专业以规模化哺乳动物细胞培养为特色培养方向的应用技术型人才培养目标定位,通过“2.5+1.5”人才培养模式、课程体系设置、推行以实验为基础的基本技能教学体系、以实训为基础的应用技能教学体系、以实习为基础的创业创新能力教学体系构建生物技术专业应用技术型人才培养方案,着力培养具有创新能力的高素质应用型人才。

关键词：生物技术专业校企协同育人应用型人才培养方案

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药学本科生科研能力培养机制的思考

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基础医学教育 2012年第3期14卷 187-188页

作者：杨美子许勇张秀丽栾海云张树平滨州医学院药学院药理学教研室烟台264003 滨州医学院药学院生物制药教研室烟台264003

探索完善药学专业本科生科研能力培养机制,对于加快推进药学教育改革,促进和培养创新型人才具有重要理论和现实意义。通过对药学专业本科生科研形式及存在问题现状的分析,提出完善药学专业本科生科研能力的几点建议。

关键词：药学教学方法科研能力

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碱性成纤维细胞生长因子与胶原对组织工程软骨体外构建的影响

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中国生物工程杂志 2007年第7期27卷 45-49页

作者：吴凤麟宇丽广东药学院生命科学与生物制药学院广州510006 暨南大学医学院生物化学教研室广州510632

目的:以三维成团培养为培养系统,探讨bFGF与胶原对组织工程软骨体外构建的影响。方法:成团培养兔生长板软骨细胞,设bFGF、胶原及联合作用组。HE染色观察新生组织形态;免疫组化检测Ⅰ、Ⅱ型胶原表达以观察细胞表型;Hoechst33258法检测细... 详细信息

目的:以三维成团培养为培养系统,探讨bFGF与胶原对组织工程软骨体外构建的影响。方法:成团培养兔生长板软骨细胞,设bFGF、胶原及联合作用组。HE染色观察新生组织形态;免疫组化检测Ⅰ、Ⅱ型胶原表达以观察细胞表型;Hoechst33258法检测细胞DNA含量;羟脯氨酸法与阿新蓝法测定基质中胶原与蛋白多糖的合成。结果:新生软骨的组织学形态近似自然软骨;各实验组软骨细胞DNA含量明显上升;胶原可以显著促进基质的合成;各实验组Ⅰ型胶原的表达少于对照组,Ⅱ型胶原的表达则高于对照组;联合作用组效果更加明显。结论:三维的成团培养可以促进基质合成,有效维持软骨细胞表型;bFGF与胶原有利于工程化软骨构建,其效果具有协同效应,两者联合应用可进一步促进软骨再生。

关键词： bFGF 胶原软骨构建

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北柴胡多糖对D-gal诱导的HK-2细胞氧化损伤的保护作用

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吉林大学学报（医学版） 2022年第1期48卷 65-73页

作者：侯俊宇李明慧许梦然葛俊宏申野李坦孙新北华大学基础医学院病理生理学教研室吉林吉林132013 吉林医药学院药学院生物制药教研室吉林吉林132013 北华大学公共卫生学院社会医学与卫生教研室吉林吉林132013

目的:研究北柴胡多糖(BCP)体外抗氧化活性,阐明其对D-半乳糖(D-gal)诱导的人肾脏近曲小管HK-2细胞的保护作用。方法:采用热水浸提法提取BCP,检测其抗氧化活性,即体外羟自由基清除率、总抗氧化能力和抗超氧阴离子活性,并与维生素E的体外... 详细信息

目的:研究北柴胡多糖(BCP)体外抗氧化活性,阐明其对D-半乳糖(D-gal)诱导的人肾脏近曲小管HK-2细胞的保护作用。方法:采用热水浸提法提取BCP,检测其抗氧化活性,即体外羟自由基清除率、总抗氧化能力和抗超氧阴离子活性,并与维生素E的体外抗氧化活性进行比较。采用不同浓度BCP和D-gal分别作用于HK-2细胞24 h,采用MTT法检测细胞增殖率,确定BCP和D-gal最适作用浓度。采用D-gal构建人肾脏近曲小管HK-2细胞氧化损伤模型,HK-2细胞分为对照组、D-gal组和不同浓度(25、50、100、200及400 mg·L^(-1))BCP+D-gal组,采用MTT法检测各组细胞增殖率。HK-2细胞分为对照组、D-gal组、BCP+D-gal组和维生素E+D-gal组,采用衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色实验观察各组HK-2细胞SA-β-gal染色情况并计算衰老细胞百分率。结果:抗氧化活性检测,与相同浓度维生素E组比较,不同浓度BCP组羟自由基清除率明显升高(P<0.05),总抗氧化能力明显增强(P<0.05),5、10和15 g·L^(-1) BCP组抗超氧阴离子活性明显增加(P<0.05),且不同浓度BCP组体外抗氧化活性均高于同等浓度维生素E组。与对照组比较,处理HK-2细胞24 h,25~400 mg·L^(-1) BCP组HK-2细胞增殖率呈浓度依赖性升高(P<0.05),且200 mg·L^(-1) BCP组HK-2细胞增殖率最高。与对照组比较,不同浓度D-gal组HK-2细胞增殖率呈时间-浓度依赖性降低,在处理条件为20 g·L^(-1)、48 h时,细胞增殖率降低至对照组的64.77%。与对照组比较,D-gal组HK-2细胞增殖率明显降低(P<0.01);与D-gal组比较,100~400 mg·L^(-1) BCP+D-gal组HK-2细胞增殖率呈浓度依赖性升高(P<0.05或P<0.01)。与对照组比较,D-gal组SA-β-gal染色阳性细胞数明显增多,衰老细胞百分率明显升高(P<0.05);与D-gal组比较,BCP+D-gal组和维生素E+D-gal组SA-β-gal染色阳性细胞数明显减少,衰老细胞百分率明显降低(P<0.05)。结论:BCP具有较强的体外抗氧化活性,可通过抑制细胞衰老保护D-gal诱导的HK-2细胞氧化损伤。

关键词：北柴胡多糖人肾脏近曲小管细胞氧化损伤细胞衰老

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生物技术制药教学中的多元协同教学模式探索

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基础医学教育 2018年第10期20卷 847-849页

作者：张静于鹏飞姜静滨州医学院生物制药教研室烟台264003

在生物技术制药课程教学中,提出"以教材为基础,以问题为导向,以案例为辅助,以资源为支撑"的LBL-CBL-PBL-RBL多元协同教学模式的设计思路,探讨多元协同教学模式的具体实施过程和评价体系。在指导学生系统掌握理论知识的基础上... 详细信息

在生物技术制药课程教学中,提出"以教材为基础,以问题为导向,以案例为辅助,以资源为支撑"的LBL-CBL-PBL-RBL多元协同教学模式的设计思路,探讨多元协同教学模式的具体实施过程和评价体系。在指导学生系统掌握理论知识的基础上培养学生的独立思考、分析、解决问题的能力和创新思维,培养具备扎实的理论基础与良好的实践能力的高级专门人才。

关键词：生物技术制药多元协同教学模式 LBL教学法 PBL教学法 CBL教学法 RBL教学法

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海因酶产生菌的微孔快速筛选法

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华西医科大学学报 2001年第3期32卷 462-463,480页

作者：罗雪冯瑞山胡卓逸华西医科大学基础医学院生物化学教研室成都610041 中国药科大学生物制药学院

目的　建立微孔快速筛选法以筛选海因酶活力较高的菌株。方法　比较底物对羟基苯海因的多种有机溶剂对酶反应的影响。结果　筛选出一株酶活力较高的海因酶产生菌腐臭假单胞菌 95 0 5 (Pseudomonasputida95 0 5 )。发现吐温 - 80 (1% )... 详细信息

目的　建立微孔快速筛选法以筛选海因酶活力较高的菌株。方法　比较底物对羟基苯海因的多种有机溶剂对酶反应的影响。结果　筛选出一株酶活力较高的海因酶产生菌腐臭假单胞菌 95 0 5 (Pseudomonasputida95 0 5 )。发现吐温 - 80 (1% )能很好溶解底物 ,促进酶反应。结论　为从大批量菌株中快速筛选出较高酶活力的菌株提供了一种新的方法。

关键词：对羟基苯海因海因酶微孔快速筛选吐温-80

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