检索结果-内蒙古大学图书馆

中国药理学通报 2017年第2期33卷 206-211页

作者：刘红霞于腊梅黄瑾张立霞岳真李庆忠滨州医学院基础医学院生理学教研室山东烟台264003 滨州医学院附属医院院办山东烟台264003 滨州医学院医药研究中心山东烟台264003 滨州医学院基础医学院生物化学教研室山东烟台264003 滨州医学院药理学教研室山东烟台264003

目的探讨创伤后应激障碍(posttraumatic stress disorder,PTSD)大鼠行为学改变及脑内胱硫醚-β-合成酶(cysta-thionine-β-synthase,CBS)/硫化氢(hydrogen sulfide,H_2S)水平的变化,并研究外源性补充H_2S对大鼠行为学影响的作用及机制。方法应用连续单一应激方案制备创伤后应激障碍动物模型,用Morris水迷宫检测大鼠空间学习记忆能力,Western blot技术和亚甲基蓝法检测海马脑区CBS/H_2S体系含量,用多管微电极在体细胞外电生理记录海马神经元放电情况。结果 (1)与正常对照组比较,PTSD组大鼠逃避潜伏期增加(P<0.01),在平台所在象限停留时间百分比和通过原平台位置次数明显减少(P<0.01);海马脑区的CBS/H_2S体系含量明显降低(P<0.01,P<0.05)。(2)与PTSD组比较,PTSD+硫氢化钠(sodium hydrosulfide,NaH S)组大鼠逃避潜伏期减小(P<0.01),在平台所在象限停留时间百分比和通过原平台位置次数明显增加(P<0.01)。(3)微量压力注射L-半胱氨酸(L-cysteine)使海马神经元自发放电频率明显升高(P﹤0.01)。结论PTSD大鼠通过抑制海马脑区CBS/H_2S体系导致空间学习记忆能力降低。H_2S改善PTSD大鼠空间学习记忆能力的机制可能与其增加海马神经元放电频率和兴奋性有关。海马脑区CBS/H_2S体系导致空间学习记忆能力降低。H_2S改善PTSD大鼠空间学习记忆能力的机制可能与其增加海马神经元放电频率和兴奋性有关。

关键词：硫化氢胱硫醚-β-合成酶硫氢化钠创伤后应激障碍海马在体细胞外电生理记录

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乳酸经Akt信号途径促进胃癌细胞中高迁移率族蛋白盒1的磷酸化及释放

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中华肿瘤杂志 2023年第11期45卷 919-925页

作者：陈雪雷葛菲万梦琪齐世美戚之琳皖南医学院生物化学与分子生物学教研室芜湖241002 皖南医学院药学院芜湖241002

目的探讨乳酸诱导胃癌细胞高迁移率族蛋白盒1(HMGB1)释放的分子机制。方法将胃癌HGC-27细胞分为对照组和乳酸处理6 h组,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养液中HMGB1的水平,激光共聚焦和核质分离实验分别检测HMGB1的胞内定位及核... 详细信息

目的探讨乳酸诱导胃癌细胞高迁移率族蛋白盒1(HMGB1)释放的分子机制。方法将胃癌HGC-27细胞分为对照组和乳酸处理6 h组,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养液中HMGB1的水平,激光共聚焦和核质分离实验分别检测HMGB1的胞内定位及核转位,免疫共沉淀检测HMGB1磷酸化和乙酰化,Western blot检测Akt和蛋白激酶C的磷酸化。以Akt抑制剂LY294002与乳酸联合作用HGC-27细胞后,采用免疫共沉淀和Western blot分别检测HMGB1和Akt的磷酸化,激光共聚焦检测HMGB1的胞内定位,EdU实验检测细胞的增殖能力,Transwell实验检测细胞的迁移能力。将HGC-27细胞注射于BALB/C裸鼠腋部皮下建立移植瘤模型。乳酸组小鼠隔天腹腔注射乳酸(0.2 g/kg),对照组小鼠隔天腹腔注射等量PBS,连续20 d。ELISA法检测裸鼠内眦静脉血HMGB1含量,免疫共沉淀和Western blot检测肿瘤组织中HMGB1和Akt的磷酸化。结果乳酸作用6和12 h,HMGB1的释放量分别为(2995.00±660.91)pg/ml和(696.33±22.03)pg/ml,均高于对照组[(485.00±105.83)pg/ml,P值分别为<0.001和0.028]。乳酸处理6 h后,HGC-27细胞的细胞质中HMGB1蛋白的相对表达量为1.13±0.09,高于对照组(0.83±0.07,P=0.001),而细胞核中HMGB1的相对表达量为0.79±0.06,低于对照组(1.07±0.06,P=0.007);HMGB1的磷酸化水平达1.41±0.09,高于对照组(0.97±0.10,P=0.031);Akt的磷酸化水平为11.16±0.06,高于对照组(0.91±0.022,P=0.002)。抑制Akt活化后,乳酸诱导的HMGB1磷酸化水平降低,HMGB1核转位明显减少,细胞增殖和迁移能力亦下降。体内实验显示,乳酸组小鼠外周血中HMGB1的含量为(1280.70±389.66)pg/ml,高于对照组[(595.11±44.75)pg/ml,P=0.008],肿瘤组织中HMGB1和Akt的磷酸化水平明显增强。结论乳酸通过激活Akt信号通路增强胃癌细胞中HMGB1的磷酸化,促进HMGB1释放。

关键词：胃肿瘤乳酸高迁移率族蛋白盒1 核转位 Akt

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CyclinD1反义核酸诱导肺腺癌细胞A549的凋亡

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生理学报 2011年第3期63卷 261-266页

作者：李尊岭邵淑红谢书阳岳真马颖滨州医学院生物化学与分子生物学教研室分子遗传学研究所烟台264003 滨州医学院应用心理学教研室烟台264003

为了探讨CyclinD1反义核酸在肺癌基因治疗中的作用,本研究构建了含有CyclinD1反义核酸的表达载体(命名为:pcDNA3.1-CyclinD1),并将该载体转染肺腺癌细胞A549,进行G418筛选后,获得稳定表达CyclinD1反义核酸的A549细胞(命名为:anti-Cyclin... 详细信息

为了探讨CyclinD1反义核酸在肺癌基因治疗中的作用,本研究构建了含有CyclinD1反义核酸的表达载体(命名为:pcDNA3.1-CyclinD1),并将该载体转染肺腺癌细胞A549,进行G418筛选后,获得稳定表达CyclinD1反义核酸的A549细胞(命名为:anti-CyclinD1-A549)。通过MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞的凋亡情况,结果显示稳定转染CyclinD1反义核酸后,A549细胞增殖显著被抑制,细胞凋亡增加。为探讨CyclinD1反义核酸诱导细胞凋亡的机理,应用Westernblot的方法检测了细胞内视网膜母细胞瘤蛋白质(retinoblastoma protein,pRb)、adenovirus E2 factor-1(E2F-1)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-2和MMP-9的表达,其结果显示,稳定转染CyclinD1反义核酸后,A549细胞内pRb、E2F-1、VEGF、MMP-2和MMP-9蛋白表达均显著降低。以上结果表明,Cy-clinD1反义核酸可引起肺癌细胞的凋亡,其机制可能与细胞内pRb、E2F-1、VEGF、MMP-2和MMP-9的表达降低相关。

关键词：肺癌凋亡 CyclinD1 基因治疗

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固态发酵贵州绿僵菌产壳聚糖酶的亲和层析纯化及其性质研究

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四川大学学报（医学版） 2007年第4期38卷 713-716页

作者：杨俐张涛李晓红余蓉四川大学华西药学院生物制药学教研室成都610041 成都医学院生物化学教研室

目的寻找壳聚糖酶新酶源并简化壳聚糖酶纯化工艺。方法将贵州绿僵菌固态发酵物粗提液经交联壳聚糖树脂层析,以5‰Cu2+洗脱,洗脱液透析浓缩后经Superdex75层析。结果该菌株在发酵120h时,每克干培养基酶活力可达(83.09±2.9)U。经亲... 详细信息

目的寻找壳聚糖酶新酶源并简化壳聚糖酶纯化工艺。方法将贵州绿僵菌固态发酵物粗提液经交联壳聚糖树脂层析,以5‰Cu2+洗脱,洗脱液透析浓缩后经Superdex75层析。结果该菌株在发酵120h时,每克干培养基酶活力可达(83.09±2.9)U。经亲和层析和分子筛分离可获得电泳纯的壳聚糖酶,酶活力回收率为43.52%。每克干培养基可获壳聚糖酶328μg,比活达106.39U/mg。酶蛋白相对分子质量为50.3×103。结论固态发酵贵州绿僵菌生产壳聚糖酶可作为壳聚糖酶的新酶源。用交联壳聚糖树脂亲和层析、Cu2+洗脱和分子筛分离的方法可以纯化壳聚糖酶。

关键词：贵州绿僵菌固态发酵壳聚糖酶亲和层析交联壳聚糖树脂 Cu2+

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精准医学与计算主义

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医学与哲学（A） 2017年第5期38卷 5-7页

作者：焦飞谢书阳李有杰阎云飞许森滨州医学院生物化学教研室山东烟台264003

精准医学体现了生物医学与数据科学的深入融合,为医学发展勾勒出美好蓝图。当今时代,计算概念已渗透到生命科学的各个领域,计算主义生命观试图从数据和计算的角度理解生命现象,其观念和方法既具合理性,又有明显的局限性。作为精准医学... 详细信息

精准医学体现了生物医学与数据科学的深入融合,为医学发展勾勒出美好蓝图。当今时代,计算概念已渗透到生命科学的各个领域,计算主义生命观试图从数据和计算的角度理解生命现象,其观念和方法既具合理性,又有明显的局限性。作为精准医学的两个基本要素,数据和计算同样与精准医学密切相关。精准医学的发展现状表明,其认识论层面存在某些逻辑缺陷,方法论层面亦存在一定不足。只有深刻把握医学数据的内在特征,辩证地理解计算主义生命观,才能为包括精准医学在内的医学实践提供科学指导。

关键词：精准医学计算主义算法数据

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精准医学与不确定性

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医学与哲学（A） 2016年第1期37卷 27-29页

作者：焦飞谢书阳李有杰李尊岭阎云飞滨州医学院生物化学教研室山东烟台264003

精准医学有其深刻的思想基础和完备的技术支撑,对医学发展现状的深刻反思是其思想基础,生物技术及信息技术的迅猛发展是其技术支撑。精准医学为人类健康水平的提升勾勒出了美好蓝图,为未来医学的发展指明了方向。不确定性具有一定的客观... 详细信息

精准医学有其深刻的思想基础和完备的技术支撑,对医学发展现状的深刻反思是其思想基础,生物技术及信息技术的迅猛发展是其技术支撑。精准医学为人类健康水平的提升勾勒出了美好蓝图,为未来医学的发展指明了方向。不确定性具有一定的客观性,根植于事物本身,人类实践的具体过程实质是通过消除不确定性而达到相对的确定性。作为一种新型的医学实践模式,精准医学同样体现了确定性与不确定性的辩证统一,是一个有着丰富内涵的复杂概念,需要对其进行认真地思考和谨慎地解读。

关键词：精准医学确定性不确定性复杂性

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miRNA调控药用植物生长发育和次生代谢

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中国生物化学与分子生物学报 2019年第4期35卷 361-370页

作者：史磊郭艳兵申远新乡医学院基础医学院生物化学与分子生物学教研室河南新乡453003 新乡医学院药学院中药学教研室河南新乡453003

microRNA(miRNA)作为一类内源性的短链非编码RNA,广泛存在于真核细胞中,主要通过对转录本剪切和抑制翻译等方式,参与转录后基因的表达调控。近年来研究表明,多种药用植物中鉴定出大量的miRNA。这些miRNA对药用植物的生长发育和次生代谢... 详细信息

microRNA(miRNA)作为一类内源性的短链非编码RNA,广泛存在于真核细胞中,主要通过对转录本剪切和抑制翻译等方式,参与转录后基因的表达调控。近年来研究表明,多种药用植物中鉴定出大量的miRNA。这些miRNA对药用植物的生长发育和次生代谢产物合成具有调控功能。次生代谢产物是药用植物的主要有效成分,研究miRNA对药用植物次生代谢过程的调控作用具有十分重要的意义。本文综述了miRNA在植物中的产生途径、作用方式和体内功能,在此基础上重点介绍了miRNA对药用植物生长发育和次生代谢产物生物合成的调控作用,并对药用植物miRNA的研究进行了展望,以期为提高药用植物产量,高效获得药用植物有效成分以及临床应用开拓新的思路。

关键词：微RNA 药用植物调控作用生长发育次生代谢

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单细胞显微注射技术在原生动物草履虫研究中的应用

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中国生物化学与分子生物学报 2020年第12期36卷 1508-1513页

作者：史磊申香玉申远新乡医学院基础医学院生物化学与分子生物学教研室河南新乡453003 新乡医学院药学院中药学教研室河南新乡453003

对大多数单细胞原生动物的分子遗传学研究,目前还缺乏行之有效的转基因手段。针对这种情况,本研究以第四双小核草履虫为对象,将包含自身调控序列的草履虫纤毛内运输蛋白(intraflagellar transport,IFT)基因IFT43或IFT46插入表达载体Pzz0... 详细信息

对大多数单细胞原生动物的分子遗传学研究,目前还缺乏行之有效的转基因手段。针对这种情况,本研究以第四双小核草履虫为对象,将包含自身调控序列的草履虫纤毛内运输蛋白(intraflagellar transport,IFT)基因IFT43或IFT46插入表达载体Pzz02-GFP中,用单细胞显微注射术将重组质粒注入到第四双小核草履虫营养大核内。蛋白质免疫印记结果显示,与绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)标签偶联的IFT43或IFT46在草履虫细胞中表达,利用荧光显微镜或激光共聚焦成像系统观察,IFT43-GFP与IFT46-GFP融合蛋白显示出相似的纤毛定位,同时它们在草履虫多纤毛内的运输过程被动态记录。本研究表明,显微注射方法能够在草履虫细胞中实现外源基因转入和表达,在对单细胞模式生物的研究中具有广泛的应用前景。

关键词：显微注射技术草履虫单细胞模型外源基因表达

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二苯乙烯类化合物对蛋白激酶C的抑制作用

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药学学报 1994年第11期29卷 818-822页

作者：徐光张礼萍陈力芳胡昌奇上海医科大学基础医学院生物化学教研室上海药学院天然药物化学教研室

报道１５种二苯乙烯类化合物对蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）活性的影响。其中从中药金雀根中分得的３种二苯乙烯类低聚体α－ｖｉｎｉｆｅｒｉｎ，ｋｏｂｏｐｈｅｎｏｌＡ和ｍｉｙａｂｅｎｏｌＣ，它们抑制ＰＫＣ的ＩＣ５０分别为６２．５，５... 详细信息

报道１５种二苯乙烯类化合物对蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）活性的影响。其中从中药金雀根中分得的３种二苯乙烯类低聚体α－ｖｉｎｉｆｅｒｉｎ，ｋｏｂｏｐｈｅｎｏｌＡ和ｍｉｙａｂｅｎｏｌＣ，它们抑制ＰＫＣ的ＩＣ５０分别为６２．５，５２．０和２７．５μｍｏｌ·Ｌ－１。另外６种含酚羟基的二苯乙烯化合物对ＰＫＣ也显示不同程度的抑制作用，但当酚羟基全甲基化或全乙酰化后其抑制作用大大降低甚至消失。酶动力学研究证明ｍｉｙａｂｅｎｏｌＣ对ＰＫＣ的抑制作用属于非竞争性抑制。

关键词：二苯乙烯类蛋白激酶C 金雀根

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寿光黑鸡成纤维细胞的体外培养与冷冻保存

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安徽农业科学 2009年第6期37卷 2521-2523,2526页

作者：王娟于媛王跃嗣马云焦飞滨州医学院药学院细胞工程教研室山东烟台264003 滨州医学院基础学院生物化学教研室山东烟台264003 滨州医学院基础学院病理教研室山东烟台264003

[目的]建立鸡成纤维细胞的体外培养体系。[方法]用组织块法和消化法分别分离培养鸡皮肤成纤维细胞;比较细胞生长速率及冻存复苏率。[结果]酶消化培养的成纤维细胞原代生长较快,约5 d便可形成单层;2种方法传代细胞的生长速度相似,仅需2-... 详细信息

[目的]建立鸡成纤维细胞的体外培养体系。[方法]用组织块法和消化法分别分离培养鸡皮肤成纤维细胞;比较细胞生长速率及冻存复苏率。[结果]酶消化培养的成纤维细胞原代生长较快,约5 d便可形成单层;2种方法传代细胞的生长速度相似,仅需2-3 d就可形成单层;使用酶消化法和反复贴壁法,经3-4代后,可获得纯化的成纤维细胞;成纤维细胞经冷冻复苏后有75%-80%存活;分离纯化的胚胎和皮肤成纤维细胞的生长曲线均正常,可传至12代,传代后染色体数目不变。[结论]采用组织块法及酶消化法培养鸡成纤维细胞均可获得ES细胞建系所需的饲养层细胞。该研究为ES细胞系的成功建立奠定了基础。

关键词：皮肤胚胎成纤维细胞体外培养冷冻保存

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