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PT109改善链脲佐菌素诱导的散发性阿尔茨海默病小鼠认知功能障碍的作用及机制

中山大学学报（医学科学版） 2021年第5期42卷 694-702页

作者：陈秋荷涂亚林侯加卫陈晨鲁俊锋皮荣标中山大学药学院药理与毒理教研室广东广州510006 广州中医药大学中药学院广东广州510006 中山大学医学院药理教研室广东深圳518107

【目的】观察PT109能否改善侧脑室注射链脲佐菌素(icv-STZ)诱导的散发性AD小鼠模型的认知功能障碍并对其机制进行初步探讨。【方法】32只7周龄雄性C57BL/6小鼠分为正常组(7只)、模型组(7只)、PT109低剂量组(9只)、PT109高剂量组(9只)。... 详细信息

【目的】观察PT109能否改善侧脑室注射链脲佐菌素(icv-STZ)诱导的散发性AD小鼠模型的认知功能障碍并对其机制进行初步探讨。【方法】32只7周龄雄性C57BL/6小鼠分为正常组(7只)、模型组(7只)、PT109低剂量组(9只)、PT109高剂量组(9只)。将STZ于第1和3天注射入小鼠侧脑室建立散发性阿尔茨海默病小鼠模型;(3mg/kg,每个注射位点5μL)造模后,分别腹腔注射PT109(30、100 mg·kg^(-1)·d^(-1)),2周后通过Morris水迷宫和避暗实验评价小鼠学习记忆能力;随后通过免疫荧光、免疫组化、免疫印迹、高尔基染色等方法检测小胶质细胞、神经元、树突棘、磷酸化Tau蛋白等AD相关指标。【结果】行为学实验结果显示:PT109可改善icv-STZ小鼠的学习记忆障碍;免疫荧光及组化结果显示:与模型组相比,PT109减少海马区域Iba1阳性细胞数量(低剂量:P<0.001,高剂量:P<0.001),高剂量PT109增加海马和皮层区域MAP2和Tuj1阳性细胞总数量(P<0.05,P<0.01),差异具有统计学意义。高尔基染色结果显示:与模型组相比,PT109增加树突棘密度(低剂量:P<0.001,高剂量:P<0.001),差异具有统计学意义。免疫印迹实验结果表明:与模型组相比,PT109降低NLRP3(高剂量:P<0.05)、磷酸化Tau蛋白的表达水平(低剂量:P<0.05,高剂量:P<0.01),高剂量PT109提高PSD95(P<0.05)、磷酸化GSK3β(P<0.05)的表达水平,差异具有统计学差异。【结论】PT109可改善icv-STZ诱导的小鼠学习记忆障碍,可能与调节GSK3β/Tau相关通路有关。

关键词：阿尔茨海默病链脲佐菌素 PT109 多激酶抑制剂

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代谢重编程在非小细胞肺癌表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂耐药中的作用

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中南大学学报（医学版） 2021年第5期46卷 545-551页

作者：伍宇高薇刘浩蚌埠医学院药学院药理教研室安徽省生化药物工程技术研究中心安徽蚌埠233030

表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(epidermal growth factor receptor tyrosine kinase inhibitor,EGFRTKI)能够有效地抑制EGFR基因突变驱动型非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的生长,但NSCLC患者在经过长时间持续的EGFR-TKI治疗后往往会发生严重的耐药。研究表明肿瘤细胞能量代谢紊乱对EGFR-TKI耐药的产生具有重要的诱导作用。在药物、基因突变等多种因素的作用下肿瘤细胞会发生代谢重编程,上调肿瘤细胞的代谢速率和强度,促进肿瘤对糖、脂肪、谷氨酰胺等营养物质的摄入和利用,并形成有利于肿瘤生长的微环境,促进肿瘤细胞的旁路激活、表型转化、异常增殖等,从而抑制免疫细胞的活性和肿瘤细胞的凋亡,导致肿瘤细胞对EGFR-TKI产生耐药性。

关键词：表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂非小细胞肺癌细胞代谢肿瘤代谢重编程耐药机制

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雷公藤甲素调控nSMase2-Cer鞘脂代谢信号通路发挥抗胰腺癌的作用及其相关机制研究

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中南药学 2024年第3期22卷 598-605页

作者：唐科罗余琴谭亲友桂林医学院附属医院临床药学与临床药理学教研室广西桂林541001 桂林医学院药学院广西桂林541199 中美健康与疾病脂质研究中心广西桂林541001

目的探究雷公藤甲素抑制胰腺癌细胞系PANC-1细胞增殖的作用机制,揭示其抗胰腺癌的作用与神经鞘脂之间的相互联系。方法用不同浓度梯度的雷公藤甲素处理胰腺癌PANC-1细胞后,检测细胞增殖、迁移能力及凋亡情况。通过PCR array实验筛选给药... 详细信息

目的探究雷公藤甲素抑制胰腺癌细胞系PANC-1细胞增殖的作用机制,揭示其抗胰腺癌的作用与神经鞘脂之间的相互联系。方法用不同浓度梯度的雷公藤甲素处理胰腺癌PANC-1细胞后,检测细胞增殖、迁移能力及凋亡情况。通过PCR array实验筛选给药后PANC-1细胞上有变化的神经鞘脂基因,并通过q-PCR和Western blot实验验证所筛选基因的转录翻译情况。构建PANC-1细胞相关基因的过表达模型并进行细胞功能性实验验证。Western blot实验检测瞬时转染的PANC-1细胞给药前后及不同药物浓度下nSMase2蛋白水平的变化及Caspase-3蛋白水平的变化。免疫荧光实验检测不同药物梯度和过表达模型下神经酰胺(Cer)含量的变化。建立BALB/C裸鼠PANC-1皮下成瘤模型,在体内验证雷公藤甲素对裸鼠肿瘤大小的影响。提取肿瘤组织进行Western blot实验,肝组织进行HE染色实验。结果雷公藤甲素呈浓度梯度抑制PANC-1细胞的增殖、迁移能力并促进细胞凋亡。神经鞘脂相关基因SMPD3与雷公藤甲素抑制PANC-1细胞活力相关性最强,且雷公藤甲素可下调其在PANC-1细胞中的表达。过表达SMPD3后PANC-1细胞增殖、迁移能力明显增强,细胞凋亡减少。雷公藤甲素可促使PANC-1细胞内Cer含量的升高,而过表达SMPD3后是可以降低PANC-1细胞内Cer的含量,此外,雷公藤甲素还能够促进PANC-1细胞Caspase家族蛋白Caspase-3表达的上调。体内实验表明雷公藤甲素能够下调SMPD3蛋白的表达,促进Caspase-3活化进而促进肿瘤发生细胞凋亡,发挥抑制裸鼠体内肿瘤生长的作用。结论体内外实验均表明雷公藤甲素通过下调SMPD3的表达,影响nSMase2-Cer信号通路抑制PANC-1细胞的生长。

关键词：雷公藤甲素 PANC-1细胞中性鞘磷脂酶2 细胞凋亡

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黎药天然产物调控AMPK抗MAFLD作用的研究进展

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海南医学院学报 2024年第8期30卷 623-633页

作者：陈咪咪卢文蕾于晏苏周媛媛张小坡张勇张寿文江西中医药大学中药资源与民族药研究中心江西南昌330004 海南医学院药学院海南海口571199 海南医学院基础医学与生命科学学院药理教研室海南海口571199 海南医学院基础医学与生命科学学院代谢与功能组学研究中心海南海口571199

代谢相关性脂肪性肝病(MAFLD)是代谢综合征的肝脏表现,世界成人发病率高达25%,在我国已取代病毒性肝炎成为慢性肝病之首。单磷酸腺苷激活的蛋白激酶(AMPK)是体内重要的糖脂代谢调控关键酶,激活AMPK被认为能改善糖脂代谢紊乱、减轻氧化... 详细信息

代谢相关性脂肪性肝病(MAFLD)是代谢综合征的肝脏表现,世界成人发病率高达25%,在我国已取代病毒性肝炎成为慢性肝病之首。单磷酸腺苷激活的蛋白激酶(AMPK)是体内重要的糖脂代谢调控关键酶,激活AMPK被认为能改善糖脂代谢紊乱、减轻氧化应激、抗炎、调节自噬及保护线粒体等功能发挥治疗MAFLD作用。黎药是我国中药药用资源的重要宝库,黎药天然产物被广泛发现具有激活AMPK的作用,且表现出显著的改善MAFLD效果。本文将归纳总结黎药及黎药天然产物改善MAFLD的作用和激活AMPK的关联机制,以期为黎药及黎药天然产物药物的挖掘与开发提供思路和参考,助力黎药现代化产业发展。

关键词：黎药黎药天然产物 AMPK MAFLD

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《细胞工程》课程教学改革与实践

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科学咨询(教育科研) 2022年第2期 34-36页

作者：王娟潘效红高雪张道来刘沅雨邱棋海南医学院基础医学与生命科学学院医学组织工程教研室滨州医学院药学院细胞工程与免疫教研室

为提高学生对《细胞工程》知识的理解和掌握，针对细胞工程教学中存在的问题，改善教学效果，提高教学质量，本文提出优化《细胞工程》教学内容，改进教学方法，提高实验实践课程内容比例等建议。

关键词：教学改革细胞工程实践

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重组茶树菇凝集素6二聚体的原核表达、纯化及糖结合活性鉴定

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中国生物化学与分子生物学报 2023年第10期39卷 1436-1444页

作者：刘行辉刘若兰龙云峰陈邦航张峥嵘敖欣樊洁柔李准洁苏延停湖北科技学院医学部药学院药理学教研室湖北咸宁437100 湖北科技学院医学部基础医学院生物化学与分子生物学教研室湖北咸宁437100 江汉大学环境与健康研究院持久性有毒污染物环境与健康危害湖北省重点实验室武汉430056

N-连接糖基化的N-乙酰葡萄糖胺(N-acetylglucosamine,GlcNAc)末端修饰是一种缩短的糖基化修饰,与多种疾病密切相关,例如自身免疫性疾病、癌症和神经退行性疾病等。然而,因为缺乏有效的识别工具导致对这种修饰的功能研究仍然是一个挑战... 详细信息

N-连接糖基化的N-乙酰葡萄糖胺(N-acetylglucosamine,GlcNAc)末端修饰是一种缩短的糖基化修饰,与多种疾病密切相关,例如自身免疫性疾病、癌症和神经退行性疾病等。然而,因为缺乏有效的识别工具导致对这种修饰的功能研究仍然是一个挑战。之前的研究已经表明,一种识别GlcNAc的茶树菇凝集素6(Agrocybe aegerita lectin recognizing GlcNAc,AANL6)对末端的GlcNAc糖结构特异性识别,但是亲和力较低。为了改造更高效的末端GlcNAc糖识别工具,AANL6通过二聚化来提高单体的亲和力。将AANL6单体通过中间的接头序列(linker)进行分子水平的二聚化,然后克隆到pET-30a质粒上,转化至大肠杆菌表达菌BL21中。确立最优的表达条件,并大量表达纯化AANL6二聚体蛋白(根据linker命名为PA6和EAA6)。随后对AANL6二聚体进行纯度、分子量和糖结合活性研究。SDS-PAGE结果显示,AANL6二聚体纯度较高(92.5%),分子量介于66.2~116 kD之间,符合预期值88 kD的大小。等温滴定热量法(isothermal titration calorimetry,ITC)检测结果显示,二聚化的AANL6显著提高了对GlcNAc的结合能力(P<0.01)。糖结合活性检测显示,AANL6二聚体对末端的GlcNAc糖基化修饰与单体相比有着更高的特异性。这些结果显示,AANL6二聚体通过二聚化显著提高了对末端GlcNAc糖基化的亲和力和特异性,这不仅为未来的末端GlcNAc糖基化修饰的功能提供有效的识别工具,而且提供了一种新的改造凝集素的策略。

关键词： N-乙酰葡萄糖胺糖基化修饰二聚化糖识别工具

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对分课堂结合基于案例学习在药理学理论教学中的应用

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中华医学教育杂志 2023年第3期43卷 195-198页

作者：王秋宁刘晓健杨景明锦州医科大学基础医学院药理学教研室锦州121001 锦州医科大学药学院生药学教研室锦州121001

目的探讨在药理学理论教学中应用对分课堂(presentation-assimilation-discussion,PAD)结合基于案例学习(case-based learning,CBL)的教学效果。方法2021年8至12月,随机选取锦州医科大学2018级临床医学专业2个班级学生为研究对象,以班... 详细信息

目的探讨在药理学理论教学中应用对分课堂(presentation-assimilation-discussion,PAD)结合基于案例学习(case-based learning,CBL)的教学效果。方法2021年8至12月,随机选取锦州医科大学2018级临床医学专业2个班级学生为研究对象,以班级为单位随机分为对照组(29人)和试验组(32人)。试验组采用PAD结合CBL,对照组采用传统教学方法,采用学生期末考核和问卷调查评价教学效果。数据分析采用t检验和χ^(2)检验。结果试验组学生期末考核中知识掌握类型题、能力应用类型题及总成绩分别为(47.8±4.7)分、(35.8±2.6)分和(83.7±6.3)分,均高于对照组学生的(45.0±4.3)分、(30.0±3.0)分和(75.1±7.1)分,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。问卷调查结果显示,试验组中28名(87.5%)学生认为主动学习能力得到了提升,对照组中为12名(41.4%)学生,而试验组中30名(93.8%)学生对课堂感到的满意,对照组中为20名(69.0%)学生,两组学生评价的差异均具有统计学意义(均P<0.05)。结论药理学理论教学中采用PAD结合CBL的教学方法有助于学生对知识的掌握和运用,有助于培养学生的主动学习能力并提高课堂满意度。

关键词：药理学学生,医科对分课堂基于案例学习理论教学教学方法

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TRAIL在HCC治疗研究中的新进展

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华夏医学 2023年第5期36卷 179-185页

作者：黄妮唐科陈薇桂林医学院附属医院临床药学与临床药理学教研室广西桂林541001 桂林医学院附属医院药学部广西桂林541001 桂林医学院药学院广西桂林541199

肝细胞癌(HCC)是当今社会最常见的恶性肿瘤之一。手术切除仍是目前主要的治疗方法,但术后存在死亡率高、预后差等问题,因此寻求更加安全、高效的治疗策略尤为重要。肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)是肿瘤坏死因子(TNF)家族的新成... 详细信息

肝细胞癌(HCC)是当今社会最常见的恶性肿瘤之一。手术切除仍是目前主要的治疗方法,但术后存在死亡率高、预后差等问题,因此寻求更加安全、高效的治疗策略尤为重要。肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)是肿瘤坏死因子(TNF)家族的新成员之一,相关受体在治疗肿瘤方面具有良好的优势,是具有抗肿瘤作用的潜在靶点。近年来,基于TRAIL受体激动剂及其联合治疗策略已经投入临床HCC的治疗,并取得了不错的临床治疗预期。但随着HCC耐药的发展,针对现有机制的TRAIL受体激动剂似乎难以达到预期效果,因此深入探寻HCC耐药机制及其新的联合治疗策略,对于HCC治疗十分必要。本文主要对TRAIL在发挥治疗HCC中涉及的相关机制尤其是相关耐药机制以及近年临床上使用的TRAIL受体激动剂联合用药策略进行综述。

关键词： TRAIL蛋白肝细胞癌耐药性联合用药

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九龙藤总黄酮抑制自噬减轻心肌缺血/缺氧损伤

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中国药理学通报 2020年第7期36卷 978-983页

作者：杨秀芳简洁桂林医学院药学院药理学教研室广西桂林541100

目的研究九龙藤总黄酮(Bauhinia championii flavones,BCF)对心肌缺血/缺氧损伤的抑制作用及机制。方法培养H9c2大鼠心肌细胞,建立OGD模型模拟心肌缺血/缺氧,给予或不给予BCF预处理。以Giemsa染色法观察细胞形态;CCK-8检测细胞活力;ELIS... 详细信息

目的研究九龙藤总黄酮(Bauhinia championii flavones,BCF)对心肌缺血/缺氧损伤的抑制作用及机制。方法培养H9c2大鼠心肌细胞,建立OGD模型模拟心肌缺血/缺氧,给予或不给予BCF预处理。以Giemsa染色法观察细胞形态;CCK-8检测细胞活力;ELISA检测细胞培养上清液中心肌肌钙蛋I(cTnI)及肌酸激酶同工酶(CK-MB)含量;腺病毒(Ad-mRFP-GFP-LC3)转染观察自噬体及自噬溶酶体数量;RT-qPCR检测LC3、P62 mRNA表达;Western blot检测自噬相关蛋白表达。结果与模型组相比,BCF预处理明显改善心肌细胞形态和细胞活力,降低cTnI及CK-MB含量,下调LC3、P62基因及Cathepsin D蛋白表达,上调P62蛋白表达,减少LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值,抑制自噬(P<0.05 or P<0.01)。结论 BCF通过抑制自噬减轻心肌缺血/缺氧损伤。

关键词：心肌缺血/缺氧损伤九龙藤总黄酮心肌细胞自噬 LC3 P62

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基于精英教育理念探讨生物技术专业混合教学改革

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新教育时代电子杂志（教师版） 2021年第35期 145-146页

作者：高雪（通讯作者）秦加阳马运琪滨州医学院药学院细胞工程教研室山东烟台264003 滨州医学院药学院细胞工程教研室山东烟台264003 滨州医学院药学院细胞工程教研室山东烟台264003

高等教育是实现精英人才培养的关键环节，旨在培育出精英式学术人才和创新人才。生物技术专业的本科生肩负着我国未来生物医学、生物制药、人口健康、生态保护等领域发展的重任，对其进行精英式混合教学有助于提高学生创新能力和综合素... 详细信息

高等教育是实现精英人才培养的关键环节，旨在培育出精英式学术人才和创新人才。生物技术专业的本科生肩负着我国未来生物医学、生物制药、人口健康、生态保护等领域发展的重任，对其进行精英式混合教学有助于提高学生创新能力和综合素质，推动我国生物医药产业的发展。本文以精英教育理念为核心，围绕生物技术专业特点对混合教学的开展进行讨论，为生物技术混合教学建设和改革提供参考。

关键词：混合教学精英教育课程改革生物技术

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