检索结果-内蒙古大学图书馆

山东医药 2009年第35期49卷 1-3页

作者：姜文国张树平杨茗李淑翠滨州医学院药理学教研室山东烟台264003

目的探讨抗CD3-抗CD20微型双功能抗体的优化表达条件及其生物学活性,为细胞免疫治疗提供依据。方法在不同培养基及不同浓度诱导剂异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)中表达抗CD3-抗CD20微型双功能抗体,用亲和层析法纯化该产物并经SDS-PAGE... 详细信息

目的探讨抗CD3-抗CD20微型双功能抗体的优化表达条件及其生物学活性,为细胞免疫治疗提供依据。方法在不同培养基及不同浓度诱导剂异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)中表达抗CD3-抗CD20微型双功能抗体,用亲和层析法纯化该产物并经SDS-PAGE和Western Blot鉴定,用流式细胞仪(FACS)法测定其双功能活性。结果IPTG浓度为400μM,培养基选用2YT时目的蛋白实现可溶性表达,培养表达量可达3.5 mg/L,其纯度较高,且与Jurkat和Daudi细胞均具有很好的结合活性。结论本研究优化了抗CD3-抗CD20微型双功能抗体表达条件,且表达产物具有双功能活性;此为细胞免疫治疗奠定了基础。

关键词：抗原,CD3 抗原,CD20 免疫治疗

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PTEN在哮喘大鼠气道平滑肌细胞增生中的作用

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天津医药 2009年第10期37卷 869-871,916页

作者：李庆忠李玉玲田锋栾海云张树平山东省滨州医学院药理教研室 264000 山东省滨州医学院图书馆采编部山东省临沂市人民医院呼吸内科

目的:探讨哮喘大鼠肺组织中PTEN表达的变化及其在气道平滑肌细胞增生中的作用。方法:清洁级雄性Wistar大鼠16只随机分为对照组和哮喘组,每组8只。用卵蛋白(OVA)致敏与激发建立大鼠哮喘模型,末次激发后HE染色法观察哮喘组大鼠支气管-肺... 详细信息

目的:探讨哮喘大鼠肺组织中PTEN表达的变化及其在气道平滑肌细胞增生中的作用。方法:清洁级雄性Wistar大鼠16只随机分为对照组和哮喘组,每组8只。用卵蛋白(OVA)致敏与激发建立大鼠哮喘模型,末次激发后HE染色法观察哮喘组大鼠支气管-肺组织中炎性细胞浸润情况及气道形态学改变,免疫组化法检测增生细胞核抗原(PCNA)及PTEN蛋白在大鼠肺组织中的表达,RT-PCR法检测肺组织PTEN mRNA表达。结果:哮喘组大鼠气道壁和肺组织中可见大量炎症细胞浸润,气道平滑肌增生肥厚;与对照组比较,哮喘组PCNA蛋白表达显著增强(P<0.05),PTEN蛋白及其mRNA表达则显著减弱(P<0.05)。结论:PTEN基因失活可能在哮喘气道平滑肌增生中起重要作用,该作用可能与PI3K信号传导通路有关。

关键词：哮喘肌细胞,平滑肌基因,肿瘤抑制基因表达细胞增殖大鼠,Wistar

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PBL教学法在麻醉药理学中的应用

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中国药理通讯 2009年第4期26卷 39-40页

作者：许勇秦国民张树平姜文国孙雪华滨州医学院药理学教研室滨州医学院教务处滨州医学院麻醉学基础教研室烟台264003

麻醉药理学是药理学的一个分支，又是麻醉学专业的重要专业基础课，教材所涉及到的药物在药理学课程中均已包含，但内容又有加深，更偏重临床麻醉应用。因此，教学过程中既要帮助学生掌握基本理论，又要逐步培养学生的临床思维。本教研... 详细信息

麻醉药理学是药理学的一个分支，又是麻醉学专业的重要专业基础课，教材所涉及到的药物在药理学课程中均已包含，但内容又有加深，更偏重临床麻醉应用。因此，教学过程中既要帮助学生掌握基本理论，又要逐步培养学生的临床思维。本教研室首先在药理学教学中应用案例式教学法，

关键词： PBL教学法麻醉药理学临床思维专业基础课麻醉学专业药理学课程药理学教学麻醉应用

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医事法学专业药理学双语教学的实践与探索

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中国医疗前沿 2009年第17期4卷 67-67页

作者：杨美子张树平许勇姜文国滨州医学院烟台校区药理学教研室

医事法学专业是培养既懂医又懂法的应用型,复合型人才。为培养高素质创新型医学人才,有效促进我国医学教育与国际接轨,对医事法学专业进行药理学双语教学是必要的。通过对医事法学专业药理学双语教学的实践,对其存在的问题和改进方法进... 详细信息

医事法学专业是培养既懂医又懂法的应用型,复合型人才。为培养高素质创新型医学人才,有效促进我国医学教育与国际接轨,对医事法学专业进行药理学双语教学是必要的。通过对医事法学专业药理学双语教学的实践,对其存在的问题和改进方法进行了探讨。

关键词：医事法学专业药理学双语教学

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知母皂苷元对成骨细胞活性和破骨细胞分化及功能的影响

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中国药科大学学报 2009年第6期40卷 544-548页

作者：杨茗季晖张树平姜文国戴胜军滨州医学院药理学教研室烟台264003 中国药科大学药理学教研室南京210009 山东省天然药物工程技术研究中心烟台264005

目的:考察知母皂苷元(SAR)对体外培养成骨细胞活性和破骨细胞分化及功能的影响。方法:培养小鼠胚胎成骨细胞MC3T3-E1,分别采用MTT法、碱性磷酸酶(ALP)试剂盒检测及茜素红染色法观察SAR对MC3T3-E1细胞增殖、ALP活性及矿化结节形成的影响... 详细信息

目的:考察知母皂苷元(SAR)对体外培养成骨细胞活性和破骨细胞分化及功能的影响。方法:培养小鼠胚胎成骨细胞MC3T3-E1,分别采用MTT法、碱性磷酸酶(ALP)试剂盒检测及茜素红染色法观察SAR对MC3T3-E1细胞增殖、ALP活性及矿化结节形成的影响;分别采用皮质骨来源破骨细胞分离及骨髓间充质干细胞诱导破骨细胞形成两种方法培养破骨细胞,利用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)阳性细胞计数及骨吸收陷窝计数来观察不同浓度SAR对成熟破骨细胞活性及破骨细胞诱导分化的影响。结果:与对照组相比,各质量浓度SAR(0.01,0.1,1μg/mL)对MC3T3-E1细胞均具有明显的促增殖作用(P<0.05,P<0.01);处于快速增殖的MC3T3-E1细胞给药处理后各组间ALP活性未见明显差异,但对于增殖晚期MC3T3-E1细胞,不同浓度SAR均可使ALP活性增高,其中1μg/mL组效应最强,与对照组相比差异非常显著(P<0.01);连续给药处理细胞15 d,SAR各组矿化结节形成数量与对照组相比均有增多趋势。此外,各浓度SAR对成熟破骨细胞数量及骨吸收能力均无明显影响,但均能抑制骨髓细胞分化形成破骨细胞。结论:SAR能促进体外培养的成骨细胞的增殖与分化成熟;SAR对分化成熟的破骨细胞无明显影响,但可抑制骨髓细胞向破骨细胞的分化,从而减少破骨细胞的产生。

关键词：知母皂苷元成骨细胞破骨细胞

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大鼠缺血再灌注心肌TLR4,TNF-α,NF-κB表达及其关系

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第四军医大学学报 2009年第20期30卷 2133-2135页

作者：王桂花孟凡学张树平陈晓建杨凤兰初芳陈长兴巩爱菊烟台海港医院山东烟台264002 滨州医学院烟台校区药理学教研室山东烟台264003

目的:研究缺血再灌注大鼠心肌TLR-4,TNF-α和NF-κB的表达及相互关系.方法:建立大鼠缺血再灌注模型,大鼠随机分为假手术组、缺血组、再灌注30min组、再灌注60min组、再灌注90min组.以RT-PCR法检测心肌中TLR4及TNF-αmRNA的表达.结果:各... 详细信息

目的:研究缺血再灌注大鼠心肌TLR-4,TNF-α和NF-κB的表达及相互关系.方法:建立大鼠缺血再灌注模型,大鼠随机分为假手术组、缺血组、再灌注30min组、再灌注60min组、再灌注90min组.以RT-PCR法检测心肌中TLR4及TNF-αmRNA的表达.结果:各种心肌中均检测到TLR4的表达,缺血及再灌注后TLR-4mRNA含量显著增加,随着再灌注时间延长,TLR-4mRNA含量增加更为显著.缺血组与假手术组TNF-αmRNA表达无统计学差异,而再灌注后表达显著增加,随再灌注时间延长,TNF-αmRNA含量继续增加更为明显.缺血及再灌注后心肌NF-κBmRNA表达增加,随再灌注时间延长,NF-κBmRNA含量继续增加,具有统计学意义.TLR-4表达增加时TNF-α和NF-κB表达也增加,三者有一定相关性.结论:心肌缺血再灌注损伤使TLR-4,TNF-α表达增高,阻断TLR-4可能有助于减轻缺血再灌注所致心肌损伤,并抑制急性炎症反应的发生.

关键词：缺血再灌注损伤心肌Toll样受体4 TNF-α NF—κB

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基于4-1BBL的双功能融合蛋白的构建及比较

基于4-1BBL的双功能融合蛋白的构建及比较

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2009医学前沿论坛暨第十一届全国肿瘤药理与化疗学术会议

作者：姜文国张树平滨州医学院药理学教研室

目的:双功能融合蛋白(包括双功能抗体),双功能融合蛋白具有双特异性,能使效应器细胞(T细胞,NK细胞等)重定向到治疗靶点,极大增强目标选择性。人4-1BBL是T细胞激活重要的协同刺激信号,人4-1BB/4-1BBL信号途径的协同刺激在许多模型显示出... 详细信息

目的:双功能融合蛋白(包括双功能抗体),双功能融合蛋白具有双特异性,能使效应器细胞(T细胞,NK细胞等)重定向到治疗靶点,极大增强目标选择性。人4-1BBL是T细胞激活重要的协同刺激信号,人4-1BB/4-1BBL信号途径的协同刺激在许多模型显示出抗肿瘤效应。CD20主要表达在前B细胞和成熟B细胞及95%以上的NHL淋巴瘤细胞,是可以用来作为肿瘤定向免疫治疗的抗原。为使4-1BB信号严格定位在肿瘤位点,结合实验室现有工作基础,我们构建了两种不同形式(Fab'型和Fv型)人4-1BBL胞外区/抗CD20双功能融合蛋白,并对两种融合蛋白作以比较。方法:采用PCR和ovelap PCR方法构建人4-1BBL胞外区/抗CD20双功能融合蛋白,并用双脱氧终止法测定DNA序列;采用亲和层析法纯化该产物,并用SDS-PAGE和Western Blot鉴定纯化产物;采用BIO-RAD蛋白分析试剂盒测定蛋白浓度。结果:DNA序列测定结果表明:两种人4-1BBL胞外区/抗CD20双功能融合蛋白已构建成功,表达可溶性产物的产量Fab'型约200ug/L,Fv型约4 mg/L。结论:双功能融合蛋白的构建形式影响其抗肿瘤活性的发挥。本研究所构建的两种双功能融合蛋白在产量上有明显的区别,Fv型的产量是Fab'型的20倍,显然Fv型的双功能融合蛋白的产量更适合将要开展的活性实验。究其原因,Fab'型性融合蛋白部分保留了抗体恒定区,分子量较大,对于将来的筛选纯化以及抗体活性是有意义的。Fv型融合蛋白只保留了与抗原结合的可变区,分子量较小,容易表达产量高,并且4-1BBL采取双价形式,有二聚化的意义,更符合其生物学特点,适合进-步的动物体内活性研究。两种人4-1BBL胞外区/抗CD20融合蛋白各有优缺点,它们的构建和初步表达成功为进一步活性实验奠定了基础,今后的工作将是在动物体内活性实验的基础上研究克服两者各自缺点,筛选适合临床人体内使用的双功能融合蛋白。

关键词：功能融合 Fab DNA 胞外区

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缩醛磷脂酰乙醇胺对羟自由基所致脑线粒体损伤影响的实验研究

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山东医药 2009年第51期49卷 42-44页

作者：张树平田京伟王垣芳姜文国王超云杨建雄滨州医学院药理学教研室山东烟台264003 烟台大学药学院陕西师范大学生命科学学院

目的探讨缩醛磷脂酰乙醇胺(P-Et)对羟自由基所致大鼠脑线粒体损伤的保护作用及机制。方法采用改良蔗糖梯度离心法分离脑线粒体,利用Fe2++维生素C系统产生羟自由基诱导大鼠脑线粒体损伤,并采用不同浓度P-Et处理。测定线粒体肿胀度、膜流... 详细信息

目的探讨缩醛磷脂酰乙醇胺(P-Et)对羟自由基所致大鼠脑线粒体损伤的保护作用及机制。方法采用改良蔗糖梯度离心法分离脑线粒体,利用Fe2++维生素C系统产生羟自由基诱导大鼠脑线粒体损伤,并采用不同浓度P-Et处理。测定线粒体肿胀度、膜流动性、膜磷脂含量、呼吸功能、线粒体呼吸酶等。结果羟自由基可造成线粒体肿胀、膜磷脂水平及膜流动性下降、能量代谢抑制等,终浓度为0.03、0.06、0.12、0.24、0.48mmol/L的P-Et处理后上述损伤显著减轻。结论P-Et对羟自由基所致大鼠脑线粒体损伤具有保护作用,机制与减少自由基对线粒体膜的损伤、抑制脂质过氧化等有关。

关键词：缩醛磷脂酰乙醇胺线粒体羟自由基能量代谢

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地塞米松对肺纤维化大鼠肺组织STAT1和PDGF表达的影响

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医学研究杂志 2009年第2期38卷 40-42,116页

作者：刘金苹翟乃亮范贤明牟爱琴高福泉王晓芝山东省滨州医学院药理教研室 256603 山东省滨州医学院附属医院呼吸内科四川省泸州医学院附属医院呼吸内科 646000

目的观察地塞米松(dexamethasone,DXM)对肺纤维化大鼠肺组织信号传导子和转录活化子1(STAT1)和血小板源性生长因子(PDGF)表达的影响,探讨其抗纤维化的作用机制。方法45只Wistar大鼠随机分为地塞米松组(DXM组)、博来霉素组(BLM组)和对照... 详细信息

目的观察地塞米松(dexamethasone,DXM)对肺纤维化大鼠肺组织信号传导子和转录活化子1(STAT1)和血小板源性生长因子(PDGF)表达的影响,探讨其抗纤维化的作用机制。方法45只Wistar大鼠随机分为地塞米松组(DXM组)、博来霉素组(BLM组)和对照组(NS组):①DXM组,气管内灌注BLM(5mg/kg,用生理盐水配制BLM溶液浓度为5mg/ml)诱导肺纤维化,随后每日用地塞米松3mg/kg腹腔注射进行干预;②BLM组,气管内灌注BLM(剂量与用法同上),随后每日用生理盐水(NS)3mg/kg腹腔注射进行干预;③NS组,气管内灌注和腹腔注射均用NS(剂量与用法同上)。于气管内灌注后第7、14和28天各分别处死5只大鼠,取右肺支气管肺泡灌洗液(BALF),进行细胞分类、计数;采用免疫组织化学法测定STAT1和PDGF蛋白的表达。结果①BLM组BALF中细胞总数在第7天达到高峰,第14天和第28天开始下降;DXM不同时间组细胞总数均低于BLM组,尤其以第7天差异明显(P<0.05);②BLM组肺组织中STAT1和PDGF蛋白表达在第7天达高峰,之后下降,第28天时仍高于NS组(P<0.05),均与BALF中的细胞总数呈正相关(r=0.880和0.902,P均<0.01);DEX组STAT1和PDGF蛋白表达明显低于同期BLM组(P<0.01)。结论地塞米松能够抑制BLM诱导的肺泡炎和肺纤维化程度,其机制可能通过早期抑制肺组织STAT1和PDGF的表达而发挥作用。

关键词：肺纤维化博来霉素地塞米松信号传导子和转录活化子1 血小板源性生长因子

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人4-1BBL胞外区/抗CD20融合蛋白的构建和表达

人4-1BBL胞外区/抗CD20融合蛋白的构建和表达

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天津市生物医学工程学会第29届学术年会暨首届生物医学工程前沿科学研讨会

作者：刘荣姜文国刘芳张砚君范冬梅杨铭邵晓枫王金宏熊冬生杨纯正中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室滨州医学院药理教研室

目的构建和表达人4-1BBL胞外区/抗CD20双功能融合蛋白,并测定该融合蛋白的生物学活性。方法采用PCR和ovelapPCR方法构建人4-1BBL胞外区/抗CD20双功能融合蛋白,并用双脱氧终止法测定DNA序列。采用亲和层析法纯化该产物,并用150 g/L SDS-P... 详细信息

目的构建和表达人4-1BBL胞外区/抗CD20双功能融合蛋白,并测定该融合蛋白的生物学活性。方法采用PCR和ovelapPCR方法构建人4-1BBL胞外区/抗CD20双功能融合蛋白,并用双脱氧终止法测定DNA序列。采用亲和层析法纯化该产物,并用150 g/L SDS-PAGE和Western blot鉴定纯化产物。采用FACS法鉴定纯化产

关键词：胞外区功能融合

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