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基质金属蛋白酶MMP-26能有效促进人绒毛膜上皮癌细胞JEG-3浸润能力

生物化学与生物物理进展 2006年第6期33卷 524-530页

作者：吴晓秋李玉侠付雅媛李殿俊 SANG Qing-Xiang 王雁玲哈尔滨医科大学基础医学院免疫教研室中国科学院动物研究所计划生育生殖生物学国家重点实验室 Department of Chemistry and Biochemistry and Institute of Molecular Biophysics Florida State UniversityTallahasseeFL 32306USA

胚胎植入过程中,滋养层细胞浸润与肿瘤的迁移过程非常相似,但显著的区别在于前者是受严格调控的有节制的浸润,基质金属蛋白酶(MMPs)的许多成员在其中起重要的作用.MMP-26是近年来发现的MMPs家族的新成员,它在滋养层细胞中的作用所知甚少... 详细信息

胚胎植入过程中,滋养层细胞浸润与肿瘤的迁移过程非常相似,但显著的区别在于前者是受严格调控的有节制的浸润,基质金属蛋白酶(MMPs)的许多成员在其中起重要的作用.MMP-26是近年来发现的MMPs家族的新成员,它在滋养层细胞中的作用所知甚少.利用国际常用的人滋养层细胞模型——人绒毛膜上皮癌细胞系(JEG-3)作为体外实验模型,探讨MMP-26在人滋养层细胞浸润调节中的作用.将含有MMP-26全长cDNA的pCR3.1质粒转染到JEG-3细胞中,获得过量表达MMP-26基因的稳定细胞系JEG-3/MMP-26;细胞浸润分析表明JEG/MMP-26细胞的浸润能力较母本细胞明显增强;RT-PCR和明胶酶谱分析显示JEG-3/MMP-26细胞中MMP-9的表达和分泌水平提高;双荧光免疫细胞化学进一步显示MMP-26和MMP-9蛋白在细胞中有共定位现象.上述结果表明MMP-26能有效促进人滋养层细胞浸润,其作用可能是通过与其他MMP分子(如MMP-9)的协调来实现的.

关键词：基质金属蛋白酶 JEG-3细胞细胞浸润人滋养层细胞

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生殖细胞核因子及Oct-4在P19细胞系诱导分化中的表达

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解剖学报 2013年第3期44卷 349-352页

作者：王菊熊承良高启云李红钢王苗赵凯周宗瑶石河子大学医学院组织学胚胎学教研室新疆石河子832002 华中科技大学同济医学院计划生育研究所/生殖医学中心武汉430030

目的体外培养未成熟畸胎瘤细胞(P 19细胞)并诱导分化,检测生殖细胞核因子(GCNF)及Oct-4在P 19细胞诱导分化前后的表达。方法用全反式维甲酸(ATRA)诱导P 19细胞分化,通过间接免疫荧光染色和RT-PCR方法检测GCNF及Oct-4在P 19细胞诱导分化... 详细信息

目的体外培养未成熟畸胎瘤细胞(P 19细胞)并诱导分化,检测生殖细胞核因子(GCNF)及Oct-4在P 19细胞诱导分化前后的表达。方法用全反式维甲酸(ATRA)诱导P 19细胞分化,通过间接免疫荧光染色和RT-PCR方法检测GCNF及Oct-4在P 19细胞诱导分化前后的表达。结果 Oct-4在P 19细胞诱导前呈强阳性表达,诱导2 d后表达下降;而GCNF在P 19细胞诱导前呈阴性表达,诱导2 d后呈阳性表达。结论 GCNF参与了恶性生殖细胞肿瘤的体外分化。GCNF可能是通过下调Oct-4基因的表达参与了恶性生殖细胞肿瘤的分化。

关键词： Oct4 生殖细胞核因子 P 19细胞分化间接免疫荧光反转录-聚合酶链反应

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宫颈癌HeLa细胞株GCNF和Oct-4诱导分化表达

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中华肿瘤防治杂志 2014年第15期21卷 1153-1157,1163页

作者：王菊熊承良李红刚王苗赵凯周宗瑶石河子大学医学院组胚教研室新疆石河子832002 华中科技大学同济医学院计划生育研究所生殖医学中心湖北武汉430030

目的:检测生殖细胞核因子(germ cell nuclear factor,GCNF)及Oct-4在宫颈癌HeLa细胞诱导分化前后的表达。方法:用全反式维甲酸(all-trans-retinoicacid,ATRA)诱导HeLa细胞分化,HE染色观察诱导前后细胞的形态变化;通过免疫组化和半定量的... 详细信息

目的:检测生殖细胞核因子(germ cell nuclear factor,GCNF)及Oct-4在宫颈癌HeLa细胞诱导分化前后的表达。方法:用全反式维甲酸(all-trans-retinoicacid,ATRA)诱导HeLa细胞分化,HE染色观察诱导前后细胞的形态变化;通过免疫组化和半定量的RT-PCR方法,检测GCNF及Oct-4在HeLa细胞诱导分化前后的表达。应用SPSS 13.0软件进行统计学处理。结果:随着诱导时间的延长HeLa细胞体积变小,圆形细胞逐渐增多,细胞核开始固缩;GCNF在诱导前后的HeLa细胞中均有表达,随着诱导时间延长其表达逐渐增强但3d后表达强度开始下降,F=14.67,P<0.001。3d组和1d组、2d组和5d组比较差异无统计学意义;但与对照组比较,差异有统计学意义,P<0.05;Oct-4在诱导前后的细胞中均不表达。结论:GCNF参与了肿瘤细胞的体外分化;在体外培养的宫颈癌细胞株中,GCNF基因可能关闭了Oct-4的激素反应元件。

关键词：子宫肿瘤 Oct-4 生殖细胞核因子 HeLa细胞分化

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奥硝唑对雄性大鼠生育功能的影响

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生殖与避孕 2006年第2期26卷 81-85页

作者：熊芬李高庞雪冰明钰华中科技大学同济医学院药学院药剂教研室武汉430030 华中科技大学同济医学院计划生育研究所武汉430030

目的:探讨奥硝唑(ORN)对雄性大鼠生育功能的影响。方法:选择健康成年雄鼠分别给予ORN100mg/kg(低剂量组)、400mg/kg(中剂量组)和800mg/kg(高剂量组),连续灌胃给药20d,并以正常组(1%CMC-Na溶液)为对照。各组半数动物于末次给药后24h处死... 详细信息

目的:探讨奥硝唑(ORN)对雄性大鼠生育功能的影响。方法:选择健康成年雄鼠分别给予ORN100mg/kg(低剂量组)、400mg/kg(中剂量组)和800mg/kg(高剂量组),连续灌胃给药20d,并以正常组(1%CMC-Na溶液)为对照。各组半数动物于末次给药后24h处死,进行生殖系统毒性的观察。剩下的雄鼠,进行停药后24h和恢复期的交配实验。结果:①与对照组相比,高剂量组的睾丸系数、附睾系数、精子的活力及日产量均显著降低(P<0.01),精子头部畸形率显著升高(P<0.01);随着剂量的增加,各给药组的精子存活率逐渐降低,均与对照组差异显著(P<0.01)。②组织切片显示,低、中剂量组无明显改变,高剂量组大鼠睾丸的多数生精小管管腔内可见坏死、脱落的生精细胞团,附睾管腔中有较多的非精子细胞成分。③低、中、高剂量组均能降低雄鼠的生育力,其降低程度与给药剂量相关。低、中剂量组雄鼠停药35d后生育力与正常组无明显差异;高剂量组停药35d后生育率仅为43%。结论:奥硝唑具有明显的抗雄性生育作用,其影响程度与给药剂量有关。在一定剂量范围内其对雄性大鼠生育功能的影响是可逆的。

关键词：奥硝唑(ORN) 雄性大鼠生育

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成都市计划生育指导所，

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生理学报 2004年第3期56卷 347-352页

作者：岳利民张蕾何亚平张金虎谢怡敏郑煜张立黄萍王丽刘伟信四川大学华西基础医学与法医学院生理学教研室，成都610041 四川大学华西医院，成都610041 成都市计划生育指导所，成都610031

为了研究整合素是否作为跨膜信号传递受体介导小鼠卵[Ca^2+]i的变化并探讨其机制。本实验采用甘-精-甘-天冬-丝-脯(GLY-ARG-GLY-ASP-SER-PRO，RGD肽)、纤连蛋A(fibronectin，Fn)及抗整合素α6、β1的单克隆抗体作用于负载了钙探针Fluo-3... 详细信息

为了研究整合素是否作为跨膜信号传递受体介导小鼠卵[Ca^2+]i的变化并探讨其机制。本实验采用甘-精-甘-天冬-丝-脯(GLY-ARG-GLY-ASP-SER-PRO，RGD肽)、纤连蛋A(fibronectin，Fn)及抗整合素α6、β1的单克隆抗体作用于负载了钙探针Fluo-3／AM的去透明带小鼠卵，用激光共聚焦显微镜检测小鼠卵的荧光强度以反映卵[Ca^2+]；用无钙液替代有钙液、或用酪氨酸激酶抑制剂或蛋白激酶C的抑制剂预先作用于卵，然后再观察RGD肽所致卵[Ca^2+]i的变化。结果显示整合素配体RGD肽或Fn作用于去透明带小鼠卵可引起卵[Ca^2+]i增加，增加的程度与精子作用相似；去除培养液中的Ca^2+后，再用RGD肽、Fn作用仍可引起卵[Ca^2+]i增加：用功能性的抗小鼠整合素α6、β1的单克隆抗体也可引起不同程度的卵[Ca^2]i增加，尤其以抗小鼠整合素α6、β1单克隆抗体的作用明显；用酪氨酸激酶抑制剂预先作用于鼠卵，RGD肽或精子作用都不再引起卵[Ca^2+]i增加；蛋白激酶C抑制剂预先作用鼠卵，RGD肽及Fn也不再引起卵[Ca^2+]i增加。实验证明。小鼠卵膜整合素与其配体结合可使卵内贮存钙离子释放，引起卵[Ca^2+]i增加这一卵激活的早期事件；整合素介导小鼠卵激活需要酪氨酸激酶信号转导途径的参与；蛋白激酶C也参与了整合素介导的卵激活。

关键词：整合素小鼠卵钙离子酪氨酸激酶蛋白激酶C

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男性不育症治疗前后精浆IL-6的动态研究

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中华泌尿外科杂志 1999年第7期20卷 7-7页

作者：夏振开刘素英高美华王海燕胡涛周荣祥山东省滨州医学院计划生育研究室

精浆细胞因子由男性泌尿生殖道各种细胞亚群释放，其水平反映生殖器官的炎性反应程度，免疫状况以及它们对精子功能和生育能力的影响［１］。精浆ＩＬ６是所有受试的细胞因子、生长因子或免疫调节因子中与精子功能关系最为密切的因子... 详细信息

精浆细胞因子由男性泌尿生殖道各种细胞亚群释放，其水平反映生殖器官的炎性反应程度，免疫状况以及它们对精子功能和生育能力的影响［１］。精浆ＩＬ６是所有受试的细胞因子、生长因子或免疫调节因子中与精子功能关系最为密切的因子之一。本研究旨在探讨ＩＬ６与不育...

关键词：精浆男性细胞因子相关性 IL-6 精液白细胞

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母亲妊娠期和围生期因素与青少年血压的关系

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中华疾病控制杂志 2016年第1期20卷 34-37,41页

作者：李玉艳武俊青赵瑞任静朝戎芬周颖纪红蕾高尔生上海市计划生育科学研究所/国家卫计委计划生育药具重点实验室上海200032 新乡医学院公共卫生学院流行病与卫生统计学教研室河南新乡453003 上海中医药大学基础医学院预防医学教研室上海201203

目的探讨母亲妊娠期因素和围生期因素与子女青少年期血压之间的关系。方法对1993-1995年无锡市建立的出生队列于2011-2013年（青少年期）进行随访，开展问卷调查、身高、体重和血压的测量，采用x。检验、多元线性回归分析、多因素二项... 详细信息

目的探讨母亲妊娠期因素和围生期因素与子女青少年期血压之间的关系。方法对1993-1995年无锡市建立的出生队列于2011-2013年（青少年期）进行随访，开展问卷调查、身高、体重和血压的测量，采用x。检验、多元线性回归分析、多因素二项式回归等统计方法进行数据分析。结果共随访到年龄16-18岁之间的青少年2256人。调整性别、青少年期年龄、青少年期超重或肥胖、青少年期生活行为因素，将母亲妊娠期和围生期相关变量纳入多因素模型，结果显示：母亲产时有妊高症的对象，青少年期的收缩压和舒张压升高，“血压升高比例”增加（RR=1．54，95％CI：1．26～1．90）；随着出生身长的增加，青少年的收缩压升高。结论母亲产时妊高症是子女青少年期血压升高的危险因素，应采取一定的措施，控制妊高症的发生。

关键词：孕妇青少年血压

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基于社区人群的吸烟与男性睾酮水平关系的初步研究

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环境与健康杂志 2015年第8期32卷 684-687页

作者：余纳申旭波郑懿史勇军熊承良周远忠遵义医学院公共卫生学院卫生毒理学教研室贵州遵义563099 遵义医学院公共卫生学院预防医学教研室华中科技大学同济医学院计划生育研究所

目的探讨吸烟对男性生殖激素水平的影响。方法于2013年8月至9月以社区(居委会或村)为单位,采用分层整群抽样方法抽取遵义地区20岁及以上成年男性1 213人进行问卷调查,并空腹抽取静脉血,检测生殖激素水平。按烟龄和吸烟量分为非吸烟组、... 详细信息

目的探讨吸烟对男性生殖激素水平的影响。方法于2013年8月至9月以社区(居委会或村)为单位,采用分层整群抽样方法抽取遵义地区20岁及以上成年男性1 213人进行问卷调查,并空腹抽取静脉血,检测生殖激素水平。按烟龄和吸烟量分为非吸烟组、吸烟A组(烟龄≤15年且日吸烟量<20支)、吸烟B组(烟龄≤15年且日吸烟量≥20支)、吸烟C组(烟龄>15年且日吸烟量<20支)、吸烟D组(烟龄>15年且日吸烟量≥20支),分析各组生殖激素水平。结果年龄与烟龄(r=0.330)、累积吸烟量(r=0.214)、性激素结合球蛋白(SHBG,r=0.458)、黄体生成素(LH,r=0.514)呈正相关;与游离睾酮(c FT,r=-0.429)、睾酮分泌指数(TSI,r=-0.463)、游离睾酮指数(FTI,r=-0.540)均呈负相关。以年龄为协变量进行协方差分析显示,吸烟C组人群血清TT水平高于非吸烟组、吸烟B组和吸烟D组,吸烟B组血清TT水平低于吸烟A组;吸烟C组、吸烟D组血清FTI水平均低于非吸烟组;吸烟A组血清TSI高于非吸烟组和吸烟D组,吸烟D组血清TSI水平低于吸烟C组,上述差异均有统计学意义(P<0.05)。结论少量短期吸烟可能会导致睾酮分泌能力应激性提高;而长期大量吸烟可能会导致睾酮分泌能力下降,活性睾酮水平降低。

关键词：吸烟男性睾酮

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整合素亚基α_5、β_1在人精子的表达及其与受精的关系

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生殖与避孕 2002年第2期22卷 70-74页

作者：张蕾岳利民张金虎何亚平郑煜黄萍王丽刘伟信四川大学华西医学中心基础医学院生理教研室成都610041 成都市计划生育技术指导所成都610044

目的 :研究精子表面整合素亚基 α5、β1的表达及其与精子功能状态和受精力的关系 ;整合素亚基 α5、β1的表达与不明原因不育症的关系。方法 :1 3例生育力正常男性的精液标本 ,9例临床诊断为不明原因不育症患者的精液标本。以精子穿透... 详细信息

目的 :研究精子表面整合素亚基 α5、β1的表达及其与精子功能状态和受精力的关系 ;整合素亚基 α5、β1的表达与不明原因不育症的关系。方法 :1 3例生育力正常男性的精液标本 ,9例临床诊断为不明原因不育症患者的精液标本。以精子穿透去透明带的金黄地鼠卵行体外受精试验 (SPA)检测精子受精力 ;对新鲜、获能和孕酮诱导顶体反应后精子行间接免疫荧光染色 ,流式细胞仪检测精子表面整合素亚基α5、β1表达阳性的精子百分率。以三色法染色 ,观察精子顶体反应的发生率。结果 :流式细胞仪检测显示正常组新鲜精子表面α5亚基的表达 (1 3 .3± 5 .4% )与对照组 (1 0 .7± 6 .4% )无显著差异 (P>0 .0 5 )。获能组精子表面 α5亚基的表达率 (6 5 .7± 1 7.6 % )比新鲜组和对照组显著增高 (P<0 .0 5 )。孕酮诱导顶体反应后 ,α5亚基的表达率 (6 5 .3± 1 8.9% )比新鲜组和对照组显著增高 (P<0 .0 5 ) ,但与获能精子组相比无显著差异 (P>0 .0 5 )。β1亚基的表达率分别为新鲜组1 2 .9± 7.4% ,获能组 1 5 .9± 7.9% ,诱导顶体反应组 1 6 .9± 6 .2 % ,与对照组 (分别为 :9.3± 3 .4% ,1 7.3± 7.8% ,1 2 .2± 8.7% )比较均无显著差异 (P>0 .0 5 )。获能精子表面α5亚基的阳性表达率与受精率有一定的线性相关 (r=0 .

关键词：整合素人精子受精

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人新基因hbrp的染色体定位及其对TPK活性的抑制作用(简报)

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实验生物学报 2005年第2期38卷 177-182页

作者：张杰冯晨刘莹姜淼杨嘉宁陈菲宋宇彤王格于秉治中国医科大学基础医学院生化教研室沈阳110001 辽宁省计划生育科学研究院生殖医学重点开放实验室

hbrp(Human BSP-Related Protein)是我们实验室最近在睾丸组织中克隆的一个人与BSP(bovine seminal plasma)蛋白相关的新基因.为了将有关该新基因信息与现有人类基因组转录图相整合,我们应用荧光原位杂交(fluorescent in situ hybridiza... 详细信息

hbrp(Human BSP-Related Protein)是我们实验室最近在睾丸组织中克隆的一个人与BSP(bovine seminal plasma)蛋白相关的新基因.为了将有关该新基因信息与现有人类基因组转录图相整合,我们应用荧光原位杂交(fluorescent in situ hybridization-FISH)法进行了该基因的人染色体基因定位,结果成功地将hbrp基因定位在人19号染色体长臂1区3带上.hbrp基因是在对BSP蛋白功能的研究过程中发现并克隆的,其同源性分析发现,与其序列最相近的是BSP蛋白家族.hbrp基因编码的蛋白质氨基酸序列中含有四个纤连蛋白Ⅱ型结构域,而BSP蛋白结构中含有两个前后排列的纤连蛋白Ⅱ型结构域,表明该蛋白可能是一种与BSP蛋白相关的结合蛋白.以前的研究中,我们发现BSP不仅能抑制PKC的活性,还能抑制酪氨酸蛋白激酶(TPK)的活性,根据BSP的这一功能,对HBRP蛋白与TPK的关系进行了研究,结果证明HBRP蛋白对TPK活性有明显的抑制作用.现将实验方法及所观察结果报道如下:

关键词： hbrp 新基因染色体定位抑制作用 TPK 活性荧光原位杂交 19号染色体基因定位人类基因组同源性分析睾丸组织基因信息人染色体研究过程 BSP 实验室克隆蛋白转录

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