检索结果-内蒙古大学图书馆

第三军医大学学报 2014年第14期36卷 1460-1466页

作者：舒静田文琳李林刘玉林陈俊霞重庆医科大学基础医学院细胞生物学与遗传学教研室、分子医学与肿瘤研究中心重庆400016

目的构建人血管生成素（angiogenin,ANG）基因siRNA干扰质粒,检测其对膀胱癌T24细胞增殖、凋亡的影响。方法将针对人ANG基因siRNA表达质粒和无同源性的对照质粒稳定转染T24细胞后经G418筛选出阳性克隆。根据转染质粒不同分为3组：T24组... 详细信息

目的构建人血管生成素（angiogenin,ANG）基因siRNA干扰质粒,检测其对膀胱癌T24细胞增殖、凋亡的影响。方法将针对人ANG基因siRNA表达质粒和无同源性的对照质粒稳定转染T24细胞后经G418筛选出阳性克隆。根据转染质粒不同分为3组：T24组（未转染组）、T24-NC组（转染阴性对照质粒组）、T24-siANG组（转染干扰质粒组）。通过RT-PCR检测T24细胞中ANG的mRNA表达水平,Western blot检测ANG蛋白的表达;MTT法检测细胞增殖活力;流式细胞术、TUNEL及Hochest 33342检测细胞凋亡;Western blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax及Caspase-3的表达;构建BALB/c裸鼠[4-6周龄,体质量（20±3）g]移植瘤模型,组织HE染色和免疫荧光CD31检测微血管变化;组织免疫化学方法检测移植瘤中ANG、Bax、Caspase-3、Bcl-2的表达。结果酶切和测序结果证明重组质粒构建成功;T24-siANG组ANG的mRNA水平及蛋白表达水平显著降低（P〈0.05）;T24-siANG组细胞增殖活力明显下降（P〈0.05）;流式细胞仪检测结果显示：与T24-NC组和T24细胞组相比,T24-siANG组细胞的凋亡率明显升高（P〈0.01）;TUNEL检测结果显示：T24-siANG组出现大量凋亡细胞;Hochest检测结果显示：T24-siANG组出现典型的凋亡形态特征如染色质凝集、核碎裂和明亮的蓝色荧光等;Western blot结果显示,在T24-siANG组中,Bcl-2的表达明显降低（P〈0.01）,而Bax和激活的Caspase-3的表达明显升高（P〈0.05）;组织HE染色和组织免疫荧光显示：T24-siANG组肿瘤微血管生成较T24与T24-NC组明显减少（P〈0.01）;组织免疫化学结果也表明：T24-siANG组ANG、Bcl-2蛋白显著降低,而Bax、活化的Caspase-3蛋白明显升高。结论成功构建的干扰质粒通过降低ANG的表达、抑制膀胱癌T24细胞的增殖、调节凋亡关键蛋白的表达,从而促进膀胱癌T24细胞的凋亡。

关键词：血管生成素膀胱癌增殖凋亡

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核糖核酸酶抑制因子与血管生成素的相互作用

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第三军医大学学报 2014年第14期36卷 1454-1459页

作者：李林舒静刘玉林陈俊霞重庆医科大学基础医学院细胞生物学与遗传学教研室、分子医学与肿瘤研究中心重庆400016

目的探讨核糖核酸酶抑制因子(ribonuclease inhibitor,RI)与血管生成素(angiogenin,ANG)的相互作用。方法利用免疫荧光标记结合共聚焦显微镜技术来确立RI与ANG蛋白在细胞内的共定位。利用激光共聚焦显微镜的荧光共振能量转移(fluorescen... 详细信息

目的探讨核糖核酸酶抑制因子(ribonuclease inhibitor,RI)与血管生成素(angiogenin,ANG)的相互作用。方法利用免疫荧光标记结合共聚焦显微镜技术来确立RI与ANG蛋白在细胞内的共定位。利用激光共聚焦显微镜的荧光共振能量转移(fluorescence resonance energy transfer,FRET)技术验证RI和ANG蛋白的相互作用。构建原核表达质粒pGEX-4T-RI,转化*** BL21大肠杆菌(DE3)表达,并经谷胱甘肽琼脂糖凝胶4B(glutathione sepharose4B)纯化GST-RI蛋白,考马斯亮蓝染色和免疫印迹鉴定表达情况,利用GST蛋白沉降技术检测RI与ANG蛋白在体外的结合作用。应用免疫共沉淀(co-immunoprecipitation,Co-IP)实验检测两蛋白在真核细胞内的结合作用。结果细胞内免疫荧光标记的RI和ANG蛋白在激光共聚焦显微镜观察下存在共定位现象。FRET结果显示RI与ANG在细胞内存在相互作用。另外酶切和测序结果证明原核表达质粒pGEX-4T-RI构建成功,GST-RI蛋白诱导表达正确,GST蛋白沉降结果显示RI和ANG蛋白在原核细胞反应体系中存在相互作用。结论 RI和ANG蛋白在原核细胞反应体系和真核细胞中均存在相互结合作用。

关键词：核糖核酸酶抑制因子血管生成素相互作用

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谷氧还蛋白1调节高糖诱导的心肌细胞自噬

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中国生物化学与分子生物学报 2014年第9期30卷 912-918页

作者：张春晶侯金才齐晓丹王滨孙艳于海涛齐齐哈尔医学院生物化学教研室齐齐哈尔医学院肿瘤分子生物学研究室齐齐哈尔医学院临床生化检验教研室齐齐哈尔医学院生理学教研室齐齐哈尔医学院临床病原微生物学教研室齐齐哈尔医学院生物遗传学教研室

人谷氧还蛋白1（Grx1）在体内具有广泛的抗氧化、抗凋亡作用,与氧化应激损伤导致的糖尿病和心肌病等多种疾病的发病机制密切相关.研究表明,糖尿病心血管病与自噬调节异常密切相关,但糖尿病心血管病变时自噬水平如何调节才能够保护受损... 详细信息

人谷氧还蛋白1（Grx1）在体内具有广泛的抗氧化、抗凋亡作用,与氧化应激损伤导致的糖尿病和心肌病等多种疾病的发病机制密切相关.研究表明,糖尿病心血管病与自噬调节异常密切相关,但糖尿病心血管病变时自噬水平如何调节才能够保护受损的心肌还尚未定论.为研究自噬在高糖诱导心肌细胞凋亡中的作用及其与Grx1的关系,以明确Grx1对高糖诱导的心肌细胞凋亡的抑制作用及相关机制,本研究以高糖诱导大鼠心肌细胞H9c2建立高糖损伤模型,采用氧化还原蛋白免疫印迹法检测蛋白质的氧化水平.免疫印迹检测活性caspase 3蛋白和自噬蛋白Beclin1和LC3以及抗凋亡蛋白Bcl-2的表达水平.研究发现,高糖可诱导蛋白质的氧化水平增加,而Grx1可拮抗高糖诱导的H9c2细胞中蛋白质的氧化.并且含血清的高糖（25和50 mmol/L）作用H9c2心肌细胞后,自噬蛋白Beclin 1表达水平在6-48 h显著上调.同时发现,活性caspase 3水平也呈时间依赖性表达上调,caspase 3和自噬蛋白表达水平的同趋势增加,说明升高的自噬水平与心肌细胞凋亡的调节有关.Grx1保护组的自噬蛋白及活性caspase 3表达水平均显著下调,Grx1抑制剂镉组可拮抗Grx1调节的自噬蛋白和凋亡蛋白水平,说明Grx 1通过抑制自噬及caspase 3水平抑制高糖诱导的心肌细胞凋亡.以上研究结果提示,通过提高Grx1/GSH抗氧化系统功能,调节氧化还原稳态,可以有效减少高糖诱导的心肌损伤,保护糖尿病心脏功能.

关键词：谷氧还蛋白1 糖尿病心肌病自噬凋亡

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智能手机App在高等医学临床和教学中的应用

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继续医学教育 2015年第12期29卷 18-19页

作者：叶海虹霍春月吉正国韩玉英首都医科大学基础医学院医学遗传学与发育生物学学系北京100069 首都医科大学燕京医学院生化分子生物学与细胞教研室北京101300 首都医科大学附属北京友谊医院泌尿科北京100050

分析目前智能手机App的模式特点及其在我国高等医学教育中的应用现状,深入分析了智能手机App在高等医学临床实践以及和高等医学院校教学科研中的实践和应用。由于高等医学教育的特殊性和局限性,解析智能手机App在高等医学教育中的优势... 详细信息

分析目前智能手机App的模式特点及其在我国高等医学教育中的应用现状,深入分析了智能手机App在高等医学临床实践以及和高等医学院校教学科研中的实践和应用。由于高等医学教育的特殊性和局限性,解析智能手机App在高等医学教育中的优势和挑战。

关键词：智能手机App 高等医学教育应用

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日照市农村老年人慢性病调查分析

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中国老年学杂志 2014年第11期34卷 3123-3125页

作者：胡乃宝王玖董兆举张诗琴孙聪潘董琳滨州医学院卫生管理学院卫生统计学教研室山东烟台264003 滨州医学院劳动卫生与环境卫生学教研室烟台市芝罘区疾病预防控制中心

目的了解日照市农村老年人健康状况、常见慢性病患病率及分布特征。方法方法面对面访谈。结果农村老年人慢性病患病率为74.35%,患病率位于前3位的是风湿病(36.31%)、高血压(24.50%)和慢性支气管炎(18.16%);女性风湿病患病率高于男性(P=0... 详细信息

目的了解日照市农村老年人健康状况、常见慢性病患病率及分布特征。方法方法面对面访谈。结果农村老年人慢性病患病率为74.35%,患病率位于前3位的是风湿病(36.31%)、高血压(24.50%)和慢性支气管炎(18.16%);女性风湿病患病率高于男性(P=0.000 4),慢性胃炎患病率则低于男性(P=0.009 1);随着增龄,风湿病、慢性支气管炎、慢性胃炎和慢性前列腺疾病患病率均有增加趋势(P<0.05),高血压则有降低趋势(P=0.005 9),随着经济收水平升高风湿病患病率有降低趋势(P=0.030 4);不同居住方式间慢性胃炎患病率有差别(P=0.000 1)。结论日照市农村老年人慢性病患病率较高,医疗卫生部门要充分考虑其疾病谱和人群特点,有针对性地开展医疗服务。

关键词：慢性病风湿病高血压

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N-叔丁基-α-苯基硝酮对大鼠脊髓损伤后神经生长因子表达的影响

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中国康复理论与实践 2014年第8期20卷 709-712页

作者：刘少辉刘伟邱少汕徐锡金汕头大学医学院细胞生物学与遗传学教研室广东汕头市515041

目的：观察N-叔丁基-α-苯基硝酮（PBN）对脊髓损伤大鼠脊髓组织和血清中神经生长因子（NGF）蛋白表达的影响。方法174只健康雌性Sprague-Dawley大鼠，体质量180～220 g，随机分为正常对照组（n=54）、生理盐水（NS）对照组（n=60）和PB... 详细信息

目的：观察N-叔丁基-α-苯基硝酮（PBN）对脊髓损伤大鼠脊髓组织和血清中神经生长因子（NGF）蛋白表达的影响。方法174只健康雌性Sprague-Dawley大鼠，体质量180～220 g，随机分为正常对照组（n=54）、生理盐水（NS）对照组（n=60）和PBN组（n=60），每时间段6只。鞘内置管后，采用自行改制的O型NYU装置建立大鼠脊髓损伤模型。PBN组鞘内注射PBN 3 mg （15μl）， NS对照组注射NS 15μl，术后30 min第1次注射，连续注射7 d，每天1次。术前3 d和1 d，以及术后1 d、5 d、10 d、15 d、20 d、25 d、30 d和35 d对NS对照组和PBN组进行Basso-Beattie-Bresnahan （BBB）运动功能评价，并在术后1 h、12 h、24 h、48 h、3 d、7 d、14 d和21 d各组取血清和脊髓组织测定NGF水平。结果术后血清中NGF蛋白含量出现明显改变，而脊髓组织中含量变化不明显。血清NGF/总蛋白比值48 h时达到峰值， NS对照组（0.92%±0.02%）与PBN组（0.77%±0.05%）相比有显著性差异（P=0.021）。两组大鼠BBB评分在伤后第10天开始升高，PBN组恢复程度明显好于NS对照组（P〈0.01）。结论 PBN能有效降低脊髓损伤大鼠血清中NGF蛋白的表达，促进神经功能恢复。

关键词：脊髓损伤自由基 N-叔丁基-α-苯基硝酮神经生长因子大鼠

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试验用和临床用紫杉醇诱导肝癌细胞凋亡的比较

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安徽农业科学 2014年第6期42卷 1711-1713,1738页

作者：单长民李京敏李娟孙业盈王东滨州医学院医学遗传学教研室山东滨州256603 滨州医学院人体解剖学与组织学胚胎学研究所山东滨州256603 滨州医学院附属医院药剂科山东滨州256603 滨州医学院组织学与胚胎学教研室山东滨州256603

[目的]为了探讨试验用和临床用紫杉醇对肝癌HepG2细胞凋亡诱导作用的差异。[方法]用不同浓度的试验用和临床用紫杉醇处理肝癌HepG2培养细胞后,通过显微观察和流式细胞术检测其细胞凋亡。[结果]临床用紫杉醇在终浓度为0.5、1.0和2.0 mg/m... 详细信息

[目的]为了探讨试验用和临床用紫杉醇对肝癌HepG2细胞凋亡诱导作用的差异。[方法]用不同浓度的试验用和临床用紫杉醇处理肝癌HepG2培养细胞后,通过显微观察和流式细胞术检测其细胞凋亡。[结果]临床用紫杉醇在终浓度为0.5、1.0和2.0 mg/ml时,24 h非常显著性诱导细胞凋亡,48 h诱导细胞凋亡更剧烈。试验用紫杉醇24 h在终浓度为2.5、5.0和10.0 mg/ml时,非常显著诱导细胞凋亡;当试验用紫杉醇浓度为2.5 mg/ml时,48 h诱导细胞凋亡更剧烈。当试验用紫杉醇浓度为5和10 mg/ml细胞凋亡率逐步变低,可能走向死亡。[结论]在诱导肝癌细胞凋亡中,试验用紫杉醇要比临床所用紫杉醇的浓度要高。

关键词：紫杉醇肝癌细胞HepG2 细胞凋亡流式细胞术

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BAMBI基因过表达人结肠癌细胞移植斑马鱼致肝转移模型的构建

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中华临床医师杂志（电子版） 2015年第21期9卷 88-92页

作者：崔戈谢珊珊张婷李芳张晓涓桂建芳周天华冯文明湖州师范学院附属第一医院中心实验室浙江省313000 浙江大学医学院基础医学系细胞生物学教研室杭州310058 湖州师范学院医学院病理学教研室浙江省313000 中国科学院水生生物研究所鱼类生物学及渔业生物技术研究中心鱼类发育遗传学与细胞工程学学科组武汉430072

目的构建BAMBI基因过表达人结肠癌细胞移植斑马鱼肝转移模型,分析斑马鱼肝内转移性结肠癌细胞BAMBI基因表达水平与肝转移发生率的关联性。方法分别构建BAMBI过表达稳转结肠癌细胞株SW620(BAMBI+组)、空载体红色荧光蛋白基因转染结肠癌... 详细信息

目的构建BAMBI基因过表达人结肠癌细胞移植斑马鱼肝转移模型,分析斑马鱼肝内转移性结肠癌细胞BAMBI基因表达水平与肝转移发生率的关联性。方法分别构建BAMBI过表达稳转结肠癌细胞株SW620(BAMBI+组)、空载体红色荧光蛋白基因转染结肠癌细胞株SW620(EV组),分别显微注射到受精后第2天转基因斑马鱼Tg(Apo14∶GFP)胚胎卵黄囊(每组各680条),激光共聚焦荧光显微镜观察、拍摄,采用Image J软件测量转移至斑马鱼肝脏内结肠癌细胞红色荧光表达强度,计算肝转移发生率;采用t检验比较BAMBI+组及EV组斑马鱼肝脏内结肠癌细胞红色荧光表达强度及肝转移发生率的差异。结果与EV组相比,激光共聚焦荧光显微观察显示BAMBI+组斑马鱼肝内结肠癌细胞红色荧光表达量显著增加(t=6.247,P=0.003 3);BAMBI+组斑马鱼肝转移发生率与EV组相比显著增加(t=4.276,P=0.012 9)。结论构建了基因修饰人结肠癌细胞移植斑马鱼致肝转移模型,可较好地模拟活体状态的结肠癌肝转移;BAMBI基因可促进异种移植入斑马鱼的结肠癌细胞发生肝转移。

关键词：结肠肿瘤肝转移斑马鱼模型 BAMBI

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贵州省侗族、土家族和仡佬族13项遗传性状分析

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华中师范大学学报（自然科学版） 2014年第5期48卷 722-729页

作者：张志敏肖代敏张文刚卢家秀遵义医学院细胞生物学与遗传学教研室贵州遵义563099 遵义医学院附属医院检验中心贵州遵义563099

调查了贵州省侗族59例、仡佬族53例、土家族发型53例大学生的耳垂、卷舌、前额发际、发旋、拇指类型、环食指长、双手嵌合、上眼睑、酒窝、惯用手、发型、耳耵聍、红绿色盲13项遗传性状的基因频率.结果显示,有8项性状的隐性基因频率在3... 详细信息

调查了贵州省侗族59例、仡佬族53例、土家族发型53例大学生的耳垂、卷舌、前额发际、发旋、拇指类型、环食指长、双手嵌合、上眼睑、酒窝、惯用手、发型、耳耵聍、红绿色盲13项遗传性状的基因频率.结果显示,有8项性状的隐性基因频率在3个民族中均为隐性高于显性;3个民族的性状分布在男性和女性中无显著性差异;贵州侗族中耳垂与酒窝显著相关,双手嵌合与酒窝、耳垂与惯用手、环食指长与惯用手极显著相关;仡佬族中耳垂与卷舌、耳垂与惯用手、前额发际与惯用手、发旋与惯用手、环食指长与惯用手极显著相关;土家族中性状间无显著相关性.3个民族的性状基因频率与国内其他民族存在差异,具有独特的遗传性状特征.

关键词：贵州侗族贵州土家族贵州仡佬族遗传性状基因频率

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NO信号通过I-kappaB磷酸化激活人肝细胞内源凝血因子Ⅷ重表达的调控作用

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吉林大学学报（医学版） 2014年第6期40卷 1155-1160页

作者：温泉何玉霞周云飞王娟张军重庆医科大学基础医学院细胞生物学与遗传学教研室重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心重庆400016

目的:建立一氧化氮(NO)前体化合物L-精氨酸激活人肝细胞L02内源凝血因子Ⅷ(FⅧ)重表达的分子细胞生物学模型,探讨NO信号激活L02中内源FⅧ重表达的调控通路及分子基础。方法:取对数生长期L02细胞随机分为对照组、加药组(L-精氨酸)、抑制... 详细信息

目的:建立一氧化氮(NO)前体化合物L-精氨酸激活人肝细胞L02内源凝血因子Ⅷ(FⅧ)重表达的分子细胞生物学模型,探讨NO信号激活L02中内源FⅧ重表达的调控通路及分子基础。方法:取对数生长期L02细胞随机分为对照组、加药组(L-精氨酸)、抑制剂组(L-NAME和L-精氨酸)和抑制剂对照组(L-NAME),分别培养12、24、36、48和60h,采用流式细胞术检测作用48h后L02中人FⅧ蛋白的表达,Griess法检测不同时间点L02细胞内NO水平,RT-PCR法检测L02中人FⅧ基因、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)基因、核转录因子(NF-κB1)基因和核因子κB(免疫球蛋白κ轻链基因增强子)抑制蛋白α亚基(I-κB alpha)基因的转录水平,Western blotting法检测L02中人磷酸化I-kappaB(磷酸化I-κB)表达水平。结果:流式细胞术检测,加L-精氨酸培养48h后L02中出现人FⅧ蛋白的表达。Griess法检测,加药组L02在3、6和12h内NO表达水平显著增加(P<0.05),随后又基本恢复到正常水平,正常组、抑制剂组和抑制剂对照组L02细胞内NO水平无变化;RT-PCR检测,加药组L02中人FⅧmRNA转录;对照组、抑制剂组和抑制剂对照组均无人FⅧmRNA的转录,加药组iNOS、NF-κB1和I-κB alpha转录水平均上升(P<0.05),对照组、抑制剂组和抑制剂对照组上述基因转录水平均无明显变化。Western blotting法检测,加入L-精氨酸后,磷酸化I-κB表达水平明显增加(P<0.05),其他组则无此变化。结论:L-精氨酸通过NO信号通路进而激活I-κB磷酸化,导致人FⅧ基因启动子上游调控相关的转录因子NF-κB1进入胞核从而激活人离体肝细胞L02中内源人FⅧ的表达。

关键词：人凝血因子Ⅷ L-精氨酸一氧化氮信号通路磷酸化 human coagulation factor Ⅷ

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