检索结果-内蒙古大学图书馆

中国生物化学与分子生物学报 2021年

作者：薛李婷赵天叶海虹首都医科大学基础医学院医学遗传学与发育生物学教研室首都医科大学神经再生与修复北京市重点实验室

中枢神经系统控制高级神经活动，例如知觉、运动、语言和认知等。它作为人体神经系统最重要的部分，其正常的发育及功能活动在人体发育过程中至关重要。更好地了解调节神经系统发育的基本分子途径以及对大脑的基本生物学理解，可以帮助... 详细信息

中枢神经系统控制高级神经活动，例如知觉、运动、语言和认知等。它作为人体神经系统最重要的部分，其正常的发育及功能活动在人体发育过程中至关重要。更好地了解调节神经系统发育的基本分子途径以及对大脑的基本生物学理解，可以帮助诊断和治疗各种神经疾病。RNA分子m;A修饰状态的动态变化及其功能主要由m;A甲基转移酶、m;A去甲基化酶和m;A阅读蛋白等蛋白质复合物共同调控。本文对此进行了详细介绍，并详细概述了m;A修饰对神经发育的影响，重点介绍了表观转录组学在基因调控中的作用。此外，还强调了m;A修饰在神经发育过程中的生物学意义，包括神经发生、神经分化、轴突导向、突触形成及突触可塑性等。根据不同的实验原理和实验技术，本文详细介绍了最近发展的几种检测m;A位点的技术，每种方法都有各自的优点，据此将能够更广泛和更深入地研究这一修饰，并选择合适的方法去研究课题。RNA m;A甲基化是神经科学领域的一个新前沿。近年来，随着m;A检测技术的发展，m;A甲基化在神经系统发育过程中及神经疾病发生中的作用研究逐渐成为热点，具有很大潜力，为神经发育和神经疾病的研究提供了新视角。

关键词：表观转录组学 N -腺苷酸甲基化神经发育神经发生突触

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番茄红素对Fscn2基因敲除小鼠听力的保护作用

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滨州医学院学报 2023年第6期46卷 406-410页

作者：刘荣荣李玲金安潼王艳婷商文静陈良韩锋产滨州医学院基础医学院生物化学与分子生物学教研室山东烟台264003 青岛大学附属烟台毓璜顶医院耳鼻咽喉头颈外科山东烟台264000

目的探讨番茄红素对Fscn2^(-/-)小鼠听力减退的保护作用。方法通过PCR技术鉴定小鼠的基因型。取1周龄的Fscn2^(-/-)小鼠20只,随机分为2组,每组10只。实验组腹腔注射(20μg/g)番茄红素(用玉米油稀释),对照组给予等量的玉米油(1.0μL/g),... 详细信息

目的探讨番茄红素对Fscn2^(-/-)小鼠听力减退的保护作用。方法通过PCR技术鉴定小鼠的基因型。取1周龄的Fscn2^(-/-)小鼠20只,随机分为2组,每组10只。实验组腹腔注射(20μg/g)番茄红素(用玉米油稀释),对照组给予等量的玉米油(1.0μL/g),隔天1次,持续5周。末次注射药物48 h后,检测小鼠的听性脑干反应(ABR)阈值;耳蜗基底膜铺片,鬼笔环肽对毛细胞进行染色,观察毛细胞的变化;提取内耳蛋白,Western blot检测Bax、Bcl-2和Cleaved caspase 12在小鼠内耳中的水平。结果在不同音频(8、16、32 kHz和click)刺激下,番茄红素治疗组小鼠的ABR阈值均低于对照组,在8、16 kHz和click音频刺激下的ABR阈值差异有统计学意义(P<0.05)。毛细胞铺片发现,番茄红素治疗组小鼠耳蜗各回外毛细胞缺失率均减少,在底回的丢失率减少(P<0.05)。Western blot结果显示,番茄红素治疗组小鼠内耳凋亡相关分子(Bax和Cleaved caspase 12)水平降低,而Bcl-2表达升高。结论番茄红素治疗可以改善Fscn2^(-/-)小鼠的听力,减轻Fscn2^(-/-)小鼠外毛细胞的损害,其听力保护作用可能与抗凋亡机制有关。

关键词： fascin2 听力减退小鼠模型毛细胞番茄红素

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基于SLBFC的人体分子与细胞整合课程的教学探索

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基础医学教育 2024年第10期26卷 837-842页

作者：侯妮杨旭东吕社民彭小倩陈煜倪磊王一东李冬民西安交通大学医学部人体分子与细胞整合教研室西安710061 西安交通大学医学部基础医学院细胞生物学与遗传学系西安交通大学医学部基础医学院生物化学与分子生物学系

整合课程是医学基础课程教学改革的方向。人体分子与细胞有机整合生物化学、细胞生物学、分子生物学和医学遗传学四门学科内容,课程容量大、知识点多。教师在教学过程中采用基于科研文献研读的翻转课堂(scientific literature-based fli... 详细信息

整合课程是医学基础课程教学改革的方向。人体分子与细胞有机整合生物化学、细胞生物学、分子生物学和医学遗传学四门学科内容,课程容量大、知识点多。教师在教学过程中采用基于科研文献研读的翻转课堂(scientific literature-based flipped classroom, SLBFC),旨在提升学生阅读科研文献的能力,提高学生的学习自主性,促进其将所学知识融会贯通,提高学生从分子和细胞水平认知疾病的能力。问卷调查结果显示:90%以上的学生对SLBFC课堂持满意态度,超过85%的学生认为SLBFC有助于理解人体分子与细胞整合课程的理论知识,养成从分子细胞水平分析医学问题的意识和提升综合能力。文章从SLBFC的设计、实施和评价过程予以展示、分析和总结,以期为我国医学整合课程改革提供参考和借鉴。

关键词：人体分子与细胞整合课程翻转课堂科研文献多元化教学

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重组表达华支睾吸虫半胱氨酸蛋白酶的枯草杆菌芽孢保存条件的研究

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中国病原生物学杂志 2021年第7期16卷 759-763,768页

作者：唐泽丽吴展帅余新炳黄艳中山大学中山医学院寄生虫学教研室广东广州510080 中山大学热带病防治研究教育部重点实验室广西医科大学基础医学院细胞生物学与遗传学教研室广西中医药大学基础医学院医学免疫学教研室广西高发传染病中西医结合转化医学重点实验室

目的探究重组表达华支睾吸虫半胱氨酸蛋白酶(CsCP)的枯草杆菌芽孢(B.s-CsCP)的保存方法,并评价其保存效果。方法制备B.s-CsCP芽孢并将其分为单蒸水重悬(液体芽孢)和冷冻干燥成粉末(冻干芽孢)两份,分别用EP管均等分装,储存在室温(RT)、4... 详细信息

目的探究重组表达华支睾吸虫半胱氨酸蛋白酶(CsCP)的枯草杆菌芽孢(B.s-CsCP)的保存方法,并评价其保存效果。方法制备B.s-CsCP芽孢并将其分为单蒸水重悬(液体芽孢)和冷冻干燥成粉末(冻干芽孢)两份,分别用EP管均等分装,储存在室温(RT)、4℃、-20℃及-80℃温度条件下,使用稀释平板计数法定期检测芽孢的存活率,免疫荧光法检测芽孢保存24个月后融合蛋白的表达情况。将4℃保存≥24个月的液体芽孢(B.s-CsCP-W-4)、RT保存≥24个月的冻干芽孢(B.s-CsCP-P-RT)及新鲜制备的重组芽孢分别经口免疫小鼠,ELISA及微板法测定小鼠肠黏液和胆汁中CsCP特异性sIgA水平以及肝功能指标。结果液体芽孢在4℃、-20℃及-80℃保存24个月的存活率分别为84.5%、93.5%和94.3%,冻干芽孢在RT、4℃、-20℃及-80℃保存24个月的存活率分别为84.6%、92.4%、93.8%和92.8%。除了RT,液体芽孢在其余3个温度下保存24个月均具有较高的CsCP融合蛋白表达率,冻干芽孢在4个温度条件下均高表达。B.s-CsCP-W-4和B.s-CsCP-P-RT均能显著提高小鼠肠黏液以及胆汁中特异性sIgA的水平(P<0.01),与新鲜制备的芽孢比较差异无统计学意义(P>0.05)。此外,B.s-CsCP-W-4和B.s-CsCP-P-RT对小鼠肝功能均无不良影响。结论 B.s-CsCP芽孢的低温液体和常温冻干粉剂型均能长期有效保存,其具有制作简便、安全有效及存储和运输方便等优势。

关键词：华支睾吸虫半胱氨酸蛋白酶枯草杆菌芽孢口服疫苗保存

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土茯苓通过槲皮素抑制黄嘌呤氧化酶降尿酸

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智慧健康 2023年第11期9卷 125-131,136页

作者：彭佳琦于志豪王浩臻毕一凡柳青高兵沈阳医学院细胞生物与遗传学教研室辽宁沈阳110034 辽宁大学生命科学院辽宁沈阳110036 沈阳市红十字医院辽宁沈阳110014

目的土茯苓具有降尿酸作用,但其发挥作用的有效成分和机制仍不清楚,本研究基于黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase,XO)尿酸代谢靶点探讨土茯苓降尿酸有效活性小分子及其作用机制。方法通过TCMSP数据库构建土茯苓的小分子成分配体库,从PDB... 详细信息

目的土茯苓具有降尿酸作用,但其发挥作用的有效成分和机制仍不清楚,本研究基于黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase,XO)尿酸代谢靶点探讨土茯苓降尿酸有效活性小分子及其作用机制。方法通过TCMSP数据库构建土茯苓的小分子成分配体库,从PDB蛋白数据库获得人源黄嘌呤氧化酶3D接受体结构,分子对接计算结合能,筛选土茯苓抑制黄嘌呤氧化酶的潜在活性小分子,观察2D分子间相互作用。将人肾小管上皮细胞(HK-2)分为空白组、高尿酸血症模型组及低中高剂量实验药物组,采用微量法尿酸检测试剂盒检测细胞外液尿酸含量,结合细胞水平降尿酸作用分析黄嘌呤氧化酶钼蝶呤疏水通道口袋关键相互作用氨基酸。结果分子对接结果显示,土茯苓中的6个小分子成分(2R,3R)-2-(3,5-dihydroxyphenyl)-3,5,7-trihydroxychroman-4-one,taxifolin,(-)-taxifolin,quercetin,naringenin和cis-Dihydroquercetin与XO通往钼蝶呤疏水通道的活性位点有良好结合能力。细胞实验结果显示,槲皮素、花旗松素和柚皮素均具有一定程度的浓度依赖性降尿酸作用,三者相比,槲皮素具有更好的抑制尿酸合成作用。分子相互作用分析发现,影响降尿酸靶点作用效果的关键是与通往钼蝶呤疏水通道的GLN870和ASP871氨基酸形成氢键,同时与CYS648形成疏水作用。结论土茯苓主要成分槲皮素,花旗松素和柚皮素是发挥降尿酸作用的关键小分子,以槲皮素为最强。黄嘌呤氧化酶结构中通往钼蝶呤疏水通道的GLN870、ASP871和CYS648是影响XO尿酸合成的关键氨基酸靶点。

关键词：土茯苓分子对接尿酸黄嘌呤氧化酶槲皮素

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沉默HRH3减少伪足形成抑制结肠癌细胞迁移

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中国生物化学与分子生物学报 2020年第8期36卷 945-951页

作者：朱剑军石丽洪山西医科大学基础医学院细胞生物与遗传学教研室太原030001 山西医科大学基础医学院人体解剖学教研室太原030001

组胺受体H3(histamine receptor H3, HRH3)的异常高表达与肝癌、胰腺癌、和肝内胆管癌的发生发展有关,但其在结肠癌中的作用尚不清楚。本文以结肠癌细胞系为细胞模型,探索HRH3对细胞迁移的影响。通过化学合成特异性靶向沉默HRH3基因的si... 详细信息

组胺受体H3(histamine receptor H3, HRH3)的异常高表达与肝癌、胰腺癌、和肝内胆管癌的发生发展有关,但其在结肠癌中的作用尚不清楚。本文以结肠癌细胞系为细胞模型,探索HRH3对细胞迁移的影响。通过化学合成特异性靶向沉默HRH3基因的siRNA序列。实时荧光定量PCR和免疫印迹技术检测siRNA沉默效率。结果发现,沉默HRH3,结肠癌Ls174T和Lovo细胞侧向迁移能力分别降低62.50%和73.70%;Transwell小室实验结果显示,沉默HRH3,结肠癌Ls174T和Lovo细胞穿过Transwell小室膜的细胞数目分别降低62.49%和66.67%。鬼笔环肽染色细胞骨架显示,沉默HRH3,结肠癌Ls174T和Lovo细胞伪足数量显著减少。酶联免疫吸附检测细胞内蛋白激酶A活性发现,沉默HRH3,结肠癌Ls174T和Lovo细胞蛋白激酶A活性分别降低54.33%和63.67%。以上研究结果表明,HRH3可能通过调控PKA活性影响伪足形成在结肠癌细胞迁移过程中发挥关键作用。

关键词：组胺受体H3 结肠癌细胞迁移伪足形成

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LAIR-1对GM-CSF介导的JAK/STAT信号通路的调节作用及其对Mo7e细胞功能的影响

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医学研究杂志 2023年第11期52卷 39-44页

作者：张娅薇吴肖婕杨蕊樊翠周嘉迪薛江楠滨州医学院免疫学教研室 264003 滨州市人民医院中心实验室 256610 临沂市中医医院超声医学科 276000 陕西中医药大学附属医院检验科咸阳712000

目的研究人白细胞相关免疫球蛋白样受体1(leukocyte-associated immunoglobulin-like receptor-1,LAIR-1)对粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony-stimulating factor,GM-CSF)依赖的Mo7e细胞增殖、凋亡和迁移的影响,并探讨LAIR-1调节GM-CSF功能的分子机制,为进一步研究LAIR-1在造血细胞分化中的作用提供资料。方法采用LAIR-1慢病毒表达载体(LV-LAIR-1)转染GM-CSF依赖的Mo7e细胞,建立稳定高表达LAIR-1的Mo7e-LAIR-1细胞株,并采用流式细胞术、Western blot法检测、反转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)以及激光扫描共聚焦显微镜(laser scanning confocal microscopy,LSCM)鉴定LAIR-1分子的表达;采用CCK-8试剂盒、FITC Annexin V凋亡试剂盒以及Transwell实验分别检测LAIR-1对Mo7e细胞功能的影响;采用Western blot法检测LAIR-1对酪氨酸蛋白激酶/信号转导及转录激活因子(janus kinase/signal transducer and activator of transcription,JAK/STAT)信号通路影响。结果经LV-LAIR-1转染的Mo7e细胞高表达LAIR-1分子;与对照组比较,LAIR-1能够显著抑制Mo7e细胞的增殖(P<0.001),促进细胞迁移(P<0.05),但对细胞凋亡无明显影响(P>0.05);GM-CSF能够上调JAK2、STAT1、STAT3和STAT5的磷酸化水平,而LAIR-1的表达能够明显抑制STAT1、STAT3和STAT5蛋白酪氨酸的磷酸化水平。结论免疫抑制性受体LAIR-1可能通过抑制细胞因子GM-CSF介导的JAK/STAT信号通路的活化,参与对髓系造血细胞分化的调节。

关键词： LAIR-1 GM-CSF 酪氨酸磷酸化增殖迁移凋亡

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Y染色体微缺失检测在不育患者病因诊断中的应用

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基因组学与应用生物学 2020年第12期39卷 5816-5822页

作者：苏小超王娟周云飞刘桂岑代晓璐汪子轩张军重庆医科大学基础医学院细胞生物学与遗传学教研室重庆400016

不育是一个由多种因素引起的全球性健康问题,其中遗传因素占30%。Y染色体无精子因子(azoospermia factor,AZF)微缺失是精子发生障碍的第二大遗传因素,因此研究Y染色体微缺失对男性健康具有重要意义。为了解西南地区的缺失频率及其临床... 详细信息

不育是一个由多种因素引起的全球性健康问题,其中遗传因素占30%。Y染色体无精子因子(azoospermia factor,AZF)微缺失是精子发生障碍的第二大遗传因素,因此研究Y染色体微缺失对男性健康具有重要意义。为了解西南地区的缺失频率及其临床相关性,我们收集了该地区精子浓度小于10×10^(6)/m L的男性不育患者1273例,建立两组多重PCR体系对所有样本做Y染色体微缺失检测,并结合精液浓度和临床病理资料分析结果。建立的多重PCR电泳图条带清晰、间隔均匀,检出Y染色体微缺失的患者39例,缺失率为3.06%(39/1273)。84.6%(33/39)的缺失患者精子浓度低于1.5×10^(6)/m L,仅发现1例精子浓度高于5×10^(6)/m L的缺失患者。缺失组精子浓度较无缺失组低(p<0.05)。AZFc缺失为最常见的缺失类型,占缺失病例数的71.7%(28/39),AZFa缺失最少见,占5.1%(2/39)。病理结果显示AZFa和AZFb缺失均无精子,分别与唯支持细胞综合征和精母细胞成熟过程有关,AZFc缺失与临床相关性不明显。本研究拓展了Y染色体微缺失基因型与表型关系的知识,证实了Y微缺失检测具有重要的诊断和预后价值,为此类患者的遗传咨询提供了有用的信息。

关键词： Y染色体微缺失男性不育缺失率多重PCR

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基因组拷贝数变异测序技术联合染色体核型分析在产前诊断中的应用价值

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中国妇幼保健 2023年第23期38卷 4701-4705页

作者：刘新周林孙雪晶于秀杰郭云霄李有杰滨州医学院生物化学与分子生物学教研室山东烟台264003 聊城市东昌府区妇幼保健院检验科山东聊城252000

目的探讨基因组拷贝数变异测序技术(CNV-seq)联合染色体核型分析在产前诊断中的应用价值。方法选取2017年4月—2022年3月在聊城市东昌府区妇幼保健院进行产前诊断的1 826例孕妇为研究对象,抽取羊水进行染色体核型分析及CNV-Seq,比较... 详细信息

目的探讨基因组拷贝数变异测序技术(CNV-seq)联合染色体核型分析在产前诊断中的应用价值。方法选取2017年4月—2022年3月在聊城市东昌府区妇幼保健院进行产前诊断的1 826例孕妇为研究对象,抽取羊水进行染色体核型分析及CNV-Seq,比较分析两种方法的检测结果。结果 1 826例羊水标本中,染色体核型分析异常检出率为8.21%(150/1 826),CNV-seq异常检出率为16.59%(303/1 826),两种方法联合应用的异常检出率为17.80%(325/1 826)。染色体核型分析与CNV-seq均检出数目异常93例;染色体核型分析检出结构异常34例,其中平衡性结构异常16例(CNV-seq未检出),非平衡性结构异常18例(CNV-seq也检出);CNV-seq额外检出168例染色体拷贝数变异(CNVs)。结论 CNV-seq与染色体核型分析联合检测可以提高染色体异常的检出率,降低出生缺陷发生率,还可以对结构异常片段进行精确定位,为临床遗传咨询提供更精准的信息。

关键词：基因组拷贝数变异测序技术染色体核型分析产前诊断

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rhPGRN通过MAPK/PI3K通路调控自噬和内质网应激并促进细胞增殖

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中国病理生理杂志 2020年第6期36卷 1071-1081页

作者：罗瑞秦启忠刘敏尹丹旸郭风劲重庆医科大学基础医学院细胞生物学与遗传学教研室发育生物学与模式动物平台重庆400016

目的:探讨重组人颗粒体蛋白前体(rhPGRN)对人软骨细胞C28I2和小鼠巨噬细胞RAW264. 7增殖、自噬和内质网应激(ERS)的影响及作用机制。方法:采用Ni-NTA琼脂糖树脂对组氨酸标签蛋白进行特异性亲和纯化,通过考马斯亮蓝染色、BCA法和Western ... 详细信息

目的:探讨重组人颗粒体蛋白前体(rhPGRN)对人软骨细胞C28I2和小鼠巨噬细胞RAW264. 7增殖、自噬和内质网应激(ERS)的影响及作用机制。方法:采用Ni-NTA琼脂糖树脂对组氨酸标签蛋白进行特异性亲和纯化,通过考马斯亮蓝染色、BCA法和Western blot验证目的蛋白的浓度和纯度。将细胞随机分为对照组、rhPGRN组、U0126组、3-甲基腺嘌呤(3-MA)组、rhPGRN+U0126、rhPGRN+3-MA、rhPGRN+巴弗洛霉素A1(Baf-A1)和rhPGRN+4-苯基丁酸(4-PBA)组,采用细胞计数法、Western blot和RT-qPCR检测rhPGRN对C28I2和RAW264. 7两种不同类型细胞增殖、自噬和ERS的影响。结果:(1)在含有His标签的PGRN稳转细胞株中成功提取高纯度、具有生物活性的人源重组蛋白rhPGRN。(2)rhPGRN能促进C28I2和RAW264. 7细胞的增殖,促进细胞周期相关分子(PCNA、cyclin B1和cyclin D1)的mRNA表达(P<0. 05),上调细胞周期调控蛋白Ki67表达,并提高增殖相关信号分子ERK和Akt蛋白的磷酸化水平(P<0. 05)。(3)ERK通路抑制剂U0126抑制了rhPGRN诱导的细胞增殖、自噬和ERS(P<0. 05);使用3-MA抑制PI3K/Akt通路后,rhPGRN诱导的细胞自噬被显著抑制(P<0. 05);自噬抑制剂Baf-A1和ERS抑制剂4-PBA显著下调了rhPGRN诱导的Ki67蛋白表达(P<0. 05)。结论:rhPGRN通过MAPK和PI3K/Akt通路调控自噬和ERS,从而促进C28I2和RAW264. 7细胞增殖。

关键词：重组人颗粒体蛋白前体真核表达细胞增殖自噬内质网应激

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