检索结果-内蒙古大学图书馆

临床肝胆病杂志 2018年第7期34卷 1542-1542页

作者：余建周伟平杨富 Yu J 第二军医大学附属东方肝胆外科医院第二军医大学基础医学院医学遗传学教研室

【据《J Hepatol》2018年6月报道】题：环状RNA-cS MARCA5抑制肝细胞癌的生长及转移（作者Yu J等）近年来,环状RNA已被证明在癌症生物学中具有重要的调节作用。然而,环状RNA在肝细胞癌（HCC）中的作用仍不清楚。通过RNA测序鉴定出cS MAR... 详细信息

【据《J Hepatol》2018年6月报道】题：环状RNA-cS MARCA5抑制肝细胞癌的生长及转移（作者Yu J等）近年来,环状RNA已被证明在癌症生物学中具有重要的调节作用。然而,环状RNA在肝细胞癌（HCC）中的作用仍不清楚。通过RNA测序鉴定出cS MARCA5（由SMARCA5基因的第15和16外显子组成的环状RNA,编号为hsacirc0001445）,并通过实时定量PCR进行验证。体外和体内实验探索了cS MARCA5在HCC进展中的作用。

关键词：肝细胞癌环状转移生长实时定量PCR 体内实验癌症生物学 RNA

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利用酵母双杂交技术筛选人PROKR2蛋白C端相互作用蛋白

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生物技术通讯 2018年第1期29卷 38-43页

作者：周晓涛周文涛夏开德刘化蝶彭震赵云娟迪丽娜尔.波拉提李家大新疆医科大学基础医学院免疫学教研室新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学第五附属医院新疆乌鲁木齐830011 贵州省妇幼保健医院贵州贵阳550000 中南大学医学遗传学国家重点实验室湖南长沙410000

目的:利用酵母双杂交技术从人c DNA文库中筛选人前动力蛋白受体2(hPROKR2)C端相互作用蛋白。方法:复苏酵母菌Y2HGold-hPROKR2-C,与人c DNA文库杂交,计算杂交效率;筛选相互作用克隆并测序,寻找hPROKR2蛋白C端相互作用蛋白;通过在DDO/X、Q... 详细信息

目的:利用酵母双杂交技术从人c DNA文库中筛选人前动力蛋白受体2(hPROKR2)C端相互作用蛋白。方法:复苏酵母菌Y2HGold-hPROKR2-C,与人c DNA文库杂交,计算杂交效率;筛选相互作用克隆并测序,寻找hPROKR2蛋白C端相互作用蛋白;通过在DDO/X、QDO/A/X平皿上划线,对筛选到的人c DNA文库质粒的自活性进行验证;采用GST pull down进一步验证两者之间的相互作用。结果:酵母双杂交实验的杂交融合效率为1.375×10~8;在人cDNA文库中筛选出hPROKR2蛋白C端相互作用蛋白SNAPIN,GST pull down实验证实两者之间存在相互作用。结论:SNAPIN可与hPROKR2蛋白C端结合。

关键词：人前动力蛋白受体2(hPROKR2) SNAPIN 相互作用蛋白酵母双杂交

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突变质粒CMV-3flag-hPROKR2(343YFK/AAA345,351HWR/AAA353)的构建及表达

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生物技术 2018年第2期28卷 113-118,150页

作者：周晓涛周文涛彭震刘化蝶陈丹娜夏开德迪丽娜尔.波拉提赵云娟李家大新疆医科大学基础医学院免疫学教研室新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学第五附属医院新疆乌鲁木齐830011 中南大学医学遗传学国家重点实验室湖南长沙410000 贵州省妇幼保健医院贵州贵阳550000

[目的]构建CMV-3flag-h PROKR2(343YFK/AAA345,351HWR/AAA353)真核表达质粒并观察其蛋白表达。[方法]将NotⅠ的酶切位点(GCGGCCGCC)引入第一次PCR的后引物,扩增并突变h PROKR2的1-1035 bp(343YFK/AAA345),再将NotⅠ的酶切位点和3个连续甘氨酸突变碱基GCCGCCGCA引入第二次PCR的前引物扩增并突变h PROKR2的1036-1152bp(351HWR/AAA353),通过NotⅠ酶切位点连接前后两个片段,即可构建pc DNA3.1-h PROKR2-myc-his(343YFK/AAA345,351HWR/AAA353),最后通过测序鉴定突变是否成功。扩增h PROKR2(343YFK/AAA345,351HWR/AAA353),连接入CMV-3flag。Western Blot检测相应蛋白的表达。[结果]成功构建CMV-3flag-h PROKR2(343YFK/AAA345,351HWR/AAA353)质粒,并验证到相应蛋白表达。[结论]利用NotⅠ酶的碱基序列特性(GCGGCCGCC)进行3个连续氨基酸突变的方法简单有效。质粒CMV-3flag-h PROKR2(343YFK/AAA345,351HWR/AAA353)的成功构建为后期进一步实验创造条件。

关键词： hPROKR2 连续多位点碱基突变限制性内切酶NotⅠ 质粒构建

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徐州地区赖氨酰氧化酶基因G473A多态性与食道癌发病风险研究

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中国保健营养 2017年第20期27卷 34-35页

作者：王会平徐州医科大学基础医学院遗传学教研室 221004

目的:研究在中国徐州地区汉族人群中,赖氨酰氧化酶(LOX)基因G473A多态性和食道癌(EC)发病风险的相关性.方法:应用基因测序法检测577例EC患者和696例正常对照者LOX基因G473A多态基因型频率,经统计分析探讨其与EC的关联性.结果:受试患者... 详细信息

目的:研究在中国徐州地区汉族人群中,赖氨酰氧化酶(LOX)基因G473A多态性和食道癌(EC)发病风险的相关性.方法:应用基因测序法检测577例EC患者和696例正常对照者LOX基因G473A多态基因型频率,经统计分析探讨其与EC的关联性.结果:受试患者和健康对照组人群的性别和年龄分布无统计学差别.基因分型结果显示:EC患者GG,GA和AA基因型频率分别为0.589,0.309和0.102,正常对照组分别为0.687,0.273和0.040.基因型为GA和AA的个体EC患病风险升高(OR=1.31,95%CI:1.02-1.68,P=0.03)(OR=2.86,95%CI:1.78-4.59,P<0.001).结论:LOX基因G473A多态性与EC发病风险存在关联,本发现对EC风险预测及发病机制研究具有重要意义.

关键词：赖氨酰氧化酶多态性食道癌

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小RNA干扰联合电针治疗对脊髓损伤后结缔组织生长因子的沉默作用

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解剖学报 2016年第2期47卷 185-190页

作者：赵伟柴勇房清敏杨成滨州医学院附属医院脊柱外科滨州医学院人体解剖学教研室山东滨州256603

目的探讨结缔组织生长因子(CTGF)siRNA联合电针治疗对脊髓损伤(SCI)后CTGF阳性表达的沉默作用。方法将SD大鼠随机分为对照(control)组、脊髓损伤(SCI)组、电针(EA)组、CTGF干扰(CTGF)组、CTGF干扰联合电针(EA+CTGF)组。制备SCI模型,将含... 详细信息

目的探讨结缔组织生长因子(CTGF)siRNA联合电针治疗对脊髓损伤(SCI)后CTGF阳性表达的沉默作用。方法将SD大鼠随机分为对照(control)组、脊髓损伤(SCI)组、电针(EA)组、CTGF干扰(CTGF)组、CTGF干扰联合电针(EA+CTGF)组。制备SCI模型,将含有CTGF siRNA/invivofectamine的复合物植入CTGF、EA+CTGF组大鼠的脊髓(T10)损伤断端,SCI、EA组用invivofectamine转染试剂代替。EA、EA+CTGF组在模型制备后每天给予电针治疗。各组在3 d、7 d、14 d取损伤脊髓,应用Western blotting、RT-PCR测定CTGF、转化生长因子β-1(TGF-β1)及GFAP蛋白和mRNA表达变化,应用免疫荧光做形态学观察。结果与SCI组相比,CTGF组、EA+CTGF组的CTGF、TGF-β1、GFAP蛋白表达下调,联合治疗效果更明显(P<0.05);EA+CTGF组CTGF、TGF-β1、GFAP mRNA表达明显低于SCI组、EA组和CTGF组(P<0.01)。免疫荧光发现,SCI组CTGF阳性细胞反应性增生;CTGF组CTGF表达减弱,阳性细胞数减少;EA+CTGF组CTGF阳性细胞数明显减少。结论 CTGF siRNA联合电针治疗使损伤脊髓CTGF表达下调,胶质反应减轻,抑制瘢痕形成。

关键词：脊髓损伤结缔组织生长因子小RNA干扰电针胶质化免疫荧光大鼠

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肝内肿块型胆管细胞癌的MDCT动态增强表现与病理特征研究

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世界最新医学信息文摘 2017年第3期 25-26页

作者：薄小波王东滨州医学院组织学与胚胎学教研室枣庄矿业集团中心医院

目的探讨肝内肿块型胆管细胞癌多层螺旋CT动态增强表现与病理特征的关系。方法对18例经病理证实为肝内肿块型胆管细胞癌患者的增强CT及病理资料进行回顾性分析,对比分析IMCC的CEMDCT增强程度及模式与病理特征的关系。结果 18例肿瘤均为... 详细信息

目的探讨肝内肿块型胆管细胞癌多层螺旋CT动态增强表现与病理特征的关系。方法对18例经病理证实为肝内肿块型胆管细胞癌患者的增强CT及病理资料进行回顾性分析,对比分析IMCC的CEMDCT增强程度及模式与病理特征的关系。结果 18例肿瘤均为单发病灶,大小约1.5;cm,其中7例位于肝右叶,11例位于肝左叶,10例有包膜回缩征,8例有周围性胆管扩张,2例有淋巴结转移,4例有门静脉及肝静脉血管侵犯。平扫时肿块呈低或稍低密度;18例动态CECT中9例增强模式呈I型,3例呈II型,3例呈III型,2例呈IV型,1例呈V型。结论肝内肿块型胆管细胞癌的MDCT动态增强模式多样,在诊断肿块型肝内胆管细胞癌中有非常重要的价值。

关键词：肝内肿块型胆管细胞癌断层影像学动态增强

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核转录因子及其突变基因的克隆与GST融合蛋白的表达纯化及磷酸化活性的检测

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汕头大学医学院学报 2017年第2期30卷 65-68页

作者：蔡娜丽俞飞远巫丹丹臧中盛戴丽娟尧月赛留羊梁展羚刘道然许彦鸣汕头大学医学院细胞生物学与遗传学教研室广东汕头515041

目的:原核表达IκBα及IκBα(S32,36A)基因,纯化获得GST-IκBα及GST-IκBα(S32,36A)融合蛋白。方法:利用PCR扩增含有酶切位点EcoRⅠ及NotⅠ的IκBα基因,将其装入pGEX-5X-1原核表达载体中。通过点突变获得pGEX-5X-1-IκBα(S32,36A)... 详细信息

目的:原核表达IκBα及IκBα(S32,36A)基因,纯化获得GST-IκBα及GST-IκBα(S32,36A)融合蛋白。方法:利用PCR扩增含有酶切位点EcoRⅠ及NotⅠ的IκBα基因,将其装入pGEX-5X-1原核表达载体中。通过点突变获得pGEX-5X-1-IκBα(S32,36A)质粒。将正确的重组载体转入大肠杆菌BL21(DE3),用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达蛋白,再用Glutathione Sepharose 4B beads纯化GST融合蛋白,最后通过Western Blot鉴定纯化后的融合蛋白。结果:成功构建了pGEX-5X-1-IκBα及pGEX-5X-1-IκBα(S32,36A)原核表达载体。在37℃条件下,0.1mmol/L的IPTG能够诱导表达大量可溶性GST-IκBα与GST-IκBα(S32,36A)蛋白;纯化的融合蛋白可被抗IκBα的单克隆抗体特异性识别。最后通过体外激酶试验验证了IκBα能被HeLa细胞中存在的上游激酶所磷酸化,而第32,36位丝氨酸突变后IκBα不具有磷酸化活性。结论:纯化的GST-IκBα/IκBα(S32,36A)蛋白具有生物学活性,可用于后续的生物学研究。

关键词： IκBα IκBα(S32,36A) 原核表达蛋白纯化磷酸化活性

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不同类型茶叶水提取液对衰老小鼠学习记忆和胆碱能神经功能的影响

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滨州医学院学报 2017年第5期40卷 340-342页

作者：许勇李金莲王桂华栾海云滨州医学院药学院药理学教研室烟台264003 滨州医学院实验教学管理中心机能学实验室

目的探讨茶叶水提取液对自然衰老小鼠学习记忆和胆碱能神经功能的影响。方法 80只昆明种小鼠随机分成5组:对照组、模型组、绿茶水提取液组、红茶水提取液组、黑茶水提取液组。对照组采用3月龄小鼠,其余小鼠均采用16月龄小鼠。茶叶水提... 详细信息

目的探讨茶叶水提取液对自然衰老小鼠学习记忆和胆碱能神经功能的影响。方法 80只昆明种小鼠随机分成5组:对照组、模型组、绿茶水提取液组、红茶水提取液组、黑茶水提取液组。对照组采用3月龄小鼠,其余小鼠均采用16月龄小鼠。茶叶水提取液组小鼠每天灌服1次,连续给药4周。用Morris水迷宫实验测定小鼠逃避潜伏期、目标象限搜索时间百分比和通过目标区域次数这三个指标,观察茶叶水提取液对衰老小鼠空间学习记忆能力的作用;测定脑组织中SOD、GSH-PX、MDA的活性;海马和皮层组织中ChAT活性,观察茶叶水提取液清除体内自由基和对胆碱能系统功能的影响。结果与模型组比较,茶叶组小鼠明显缩短小鼠的逃避潜伏期,增加小鼠在目标象限搜索时间百分比,增加目标区域通过次数,能明显改善学习记忆功能。酶活性检测结果显示,茶叶组小鼠能显著增加脑组织中SOD、GSH-PX活性和降低MDA含量,增加皮层和海马组织中ChAT活性。结论茶叶水提取液能改善衰老小鼠的空间学习记忆能力,其机制可能与其增强中枢胆碱能神经系统功能有关。

关键词：茶叶水提取液学习和记忆抗氧化酶乙酰胆碱转移酶

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HeLa细胞中ERK8突变基因的发现

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汕头大学医学院学报 2017年第1期30卷 1-3,F0002页

作者：蔡娜丽杜纪英俞飞远巫丹丹刘道然许彦鸣汕头大学医学院细胞生物学与遗传学教研室广东汕头515041

目的:检测HeLa细胞中ERK8基因的表达并对其进行序列分析。方法:Westernblot检测HeLa细胞中ERK8蛋白的表达。提取HeLa细胞中的RNA,用RT-PCR方法得到ERK8基因片段,克隆后进行序列测定和分析。结果:首次发现HeLa细胞中存在ERK8基因突变:ERK... 详细信息

目的:检测HeLa细胞中ERK8基因的表达并对其进行序列分析。方法:Westernblot检测HeLa细胞中ERK8蛋白的表达。提取HeLa细胞中的RNA,用RT-PCR方法得到ERK8基因片段,克隆后进行序列测定和分析。结果:首次发现HeLa细胞中存在ERK8基因突变:ERK8 S192P。结论:ERK8基因在HeLa细胞中的表达及其突变的发现,为进一步研究ERK8突变体在HeLa细胞中的功能研究奠定基础。

关键词： HeLa细胞 ERK8基因突变

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反义RNA与肝癌的研究进展

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安徽医科大学学报 2017年第4期52卷 618-621页

作者：吕贝李华玲崔恒宓扬州大学医学院生物化学教研室扬州225001 扬州大学表观遗传学及表观基因组学研究所扬州225009

反义RNA是一类能与特异性mRNA互补并从翻译、转录或转录后水平上高度特异地抑制靶基因表达的RNA分子。肝癌是全球最常见且致命的恶性肿瘤。肝癌组织的无限增殖、侵袭转移、放化疗耐受等能力成为其无法治愈并不断恶化的重要原因。反义RN... 详细信息

反义RNA是一类能与特异性mRNA互补并从翻译、转录或转录后水平上高度特异地抑制靶基因表达的RNA分子。肝癌是全球最常见且致命的恶性肿瘤。肝癌组织的无限增殖、侵袭转移、放化疗耐受等能力成为其无法治愈并不断恶化的重要原因。反义RNA在肝癌肿瘤中异常表达,肿瘤的恶性表型维持需要众多反义RNA的参与。近年来,利用反义RNA技术治疗恶性肿瘤已经成为了一个新的研究方向,本文对这一技术治疗肝癌进行了综述。

关键词：肝癌反义RNA 研究进展

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