检索结果-内蒙古大学图书馆

山东大学学报（医学版） 2024年第6期62卷 38-47页

作者：王文琴高贤龙巩永凤冯科滨州医学院基础医学院生理教研室山东烟台264003

目的探讨棕色脂肪组织(brown adipose tissue,BAT)中Y盒蛋白3(Y-box binding protein 3,YBX3)水平对小鼠产热和能量消耗的影响作用机制。方法将小鼠置于4℃环境作为冷刺激方法。用慢病毒侵染法构建过表达YBX3或者抑制YBX3表达的人血管... 详细信息

目的探讨棕色脂肪组织(brown adipose tissue,BAT)中Y盒蛋白3(Y-box binding protein 3,YBX3)水平对小鼠产热和能量消耗的影响作用机制。方法将小鼠置于4℃环境作为冷刺激方法。用慢病毒侵染法构建过表达YBX3或者抑制YBX3表达的人血管基质组分细胞系。测量细胞的耗氧率用于评估细胞的线粒体功能。向小鼠BAT注射YBX3的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)构建抑制小鼠BAT中YBX3表达的模型。检测小鼠的O_(2)消耗速率、CO_(2)释放速率和能量消耗速率用于评估小鼠能量代谢情况。采用qRT-PCR、Western blotting、免疫荧光染色法检测过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α(peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator 1α,PGC-1α)、解偶联蛋白1(uncoupling protein 1,UCP1)和YBX3基因的表达。采用苏木精-伊红法染色检测BAT中脂肪细胞脂滴大小。采用RNA结合蛋白免疫沉淀提取与YBX3特异性结合的mRNA。采用二代测序方法鉴定mRNA。采用双荧光素酶报告基因系统检测YBX3与目的序列结合的情况。结果在寒冷刺激下野生型小鼠BAT中YBX3的表达显著增加(P<0.05)。过表达YBX3的人血管基质组分细胞系诱导为成熟棕色脂肪细胞后可以促进产热基因PGC-1α和UCP1的表达(P<0.05)。抑制YBX3表达的人血管基质组分细胞系诱导为成熟棕色脂肪细胞后可以抑制PGC-1α和UCP1的表达(P<0.05)、抑制线粒体氧化磷酸化(P<0.05)。与对照组相比,小鼠注射si-Ybx3之后能量消耗显著降低(P<0.05),在寒冷环境难以维持体温(P<0.05),产热基因表达被显著抑制(P<0.01),BAT中脂肪细胞脂滴大小显著增加(P<0.05)。与在25℃相比,4℃环境刺激下BAT中YBX3在细胞核中的表达显著增加(P<0.05)。YBX3能够特异性地与PGC-1αmRNA 3′非翻译区特定位点相结合(P<0.05)。YBX3能够特异性地与PGC-1α和UCP1启动子区域相结合(P<0.05)。结论BAT中YBX3能够通过调控PGC-1α和UCP1的表达影响产热和能量代谢。

关键词： Y-盒蛋白3 产热能量消耗棕色脂肪组织解偶联蛋白1

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免疫球蛋白样结构域受体2缺失加重缺血再灌注诱导的肾纤维化

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中华肾脏病杂志 2023年第4期39卷 281-290页

作者：徐梦园王鑫巩永凤滨州医学院生理学教研室烟台264000 江南大学附属中心医院病理科无锡214000

目的探究免疫球蛋白样结构域受体2(immunoglobulin-like domain-containing receptor 2,Ildr2)在缺血再灌注诱导肾纤维化中的作用。方法利用CRISPR/Cas9技术构建Ildr2敲除小鼠(KO组),其对照组为野生型小鼠(WT组)。通过夹闭左侧肾蒂构建... 详细信息

目的探究免疫球蛋白样结构域受体2(immunoglobulin-like domain-containing receptor 2,Ildr2)在缺血再灌注诱导肾纤维化中的作用。方法利用CRISPR/Cas9技术构建Ildr2敲除小鼠(KO组),其对照组为野生型小鼠(WT组)。通过夹闭左侧肾蒂构建单侧肾脏缺血再灌注(unilateral renal ischemia reperfusion,UIR)模型(UIR组),造模后分为KO-UIR组和WT-UIR组;假手术小鼠(Sham组)不进行缺血处理。采用肌氨酸氧化酶法检测血清肌酐水平;二乙酰肟比色法检测血尿素氮水平;酶联免疫吸附测定法检测尿白蛋白水平,计算尿白蛋白/肌酐比值;HE、PAS及MASSON染色检测肾组织炎性细胞浸润情况和纤维化程度;实时荧光定量PCR检测Ildr2,肾损伤相关分子中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白(neutrophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL)和肾损伤分子1(kidney injury molecule-1,KIM-1),纤维化标志分子Ⅰ型胶原α1(type 1 collagenα-1,Col1α1)、纤维连接蛋白1(fibronectin,Fn1)、α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)和结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF),以及炎症相关分子巨噬细胞标志物F4/80、单核细胞趋化因子1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)的mRNA表达水平。免疫荧光和Western印迹法检测Ildr2、Col1α1及α-SMA的蛋白表达水平。结果(1)实时荧光定量PCR和Western印迹结果显示UIR组Ildr2 mRNA和蛋白表达水平均显著低于Sham组(均P<0.05)。(2)KO组和WT组小鼠体重、血清肌酐、血尿素氮、总胆固醇、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白及三酰甘油等的差异均无统计学意义(均P>0.05)。实时荧光定量PCR结果显示,KO组和WT组NGAL、KIM-1、α-SMA、Col1α1、CTGF、Fn1、MCP-1及F4/80 mRNA表达水平的差异均无统计学意义(均P>0.05)。组织学染色结果显示KO组和WT组均无炎性细胞浸润异常及间质纤维化。(3)与WT-UIR组相比,KO-UIR组血清肌酐和血尿素氮水平均较高(均P<0.05)。实时荧光定量PCR结果显示,KO-UIR组NGAL、F4/80、MCP-1、Col1α1、α-SMA和CTGF mRNA表达水平均显著高于WT-UIR组(均P<0.05)。免疫荧光和Western印迹结果显示,KO-UIR组Col1α1和α-SMA蛋白表达水平均明显高于WT-UIR组(均P<0.05)。组织学染色结果显示,相比WT-UIR组,KO-UIR组小鼠炎性细胞浸润明显较多,间质胶原纤维沉积和小管损伤较重。结论正常生理状态下Ildr2敲除未引起小鼠表型变化。Ildr2在UIR损伤中起到调控作用,Ildr2缺失导致UIR诱导的肾纤维化程度加重。

关键词：再灌注损伤肾疾病炎症肾纤维化免疫球蛋白样结构域受体2

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肠上皮脂解刺激脂蛋白受体减轻葡聚糖硫酸钠诱导的小鼠结肠炎

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中国病理生理杂志 2024年第11期40卷 2114-2123页

作者：李莹王梓琪刘浩巩永凤安雅男滨州医学院生理学教研室山东烟台264003 肾脏病防治分子医学山东省工程研究中心山东烟台264003

目的:探索脂解刺激脂蛋白受体(lipolysis-stimulated lipoprotein receptor,LSR)在葡聚糖硫酸钠(dextran sodium sulfate,DSS)诱导的结肠炎小鼠中的表达变化,以及肠上皮Lsr特异性敲除及过表达对结肠炎小鼠肠道炎症的影响。方法:C57BL/6... 详细信息

目的:探索脂解刺激脂蛋白受体(lipolysis-stimulated lipoprotein receptor,LSR)在葡聚糖硫酸钠(dextran sodium sulfate,DSS)诱导的结肠炎小鼠中的表达变化,以及肠上皮Lsr特异性敲除及过表达对结肠炎小鼠肠道炎症的影响。方法:C57BL/6J小鼠饮水中加入浓度为3%(w/v)的DSS,自由饮用6 d诱导小鼠结肠炎模型;实验结束后,通过RNA-seq对对照组和实验组中差异表达的基因进行筛选,通过RT-qPCR、Western blot和免疫荧光染色的方法检测LSR表达变化。接下来,通过Cre-loxP系统构建肠上皮Lsr特异性敲除小鼠,建立DSS诱导的结肠炎模型,检测体重变化、疾病活动度指数(disease activity index,DAI)评分、结肠长度并进行HE染色来评估小鼠肠炎症状;同时,通过ELISA检测血清中促炎细胞因子肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)、IL-6和IL-18水平;免疫荧光染色检测结肠组织中性粒细胞和巨噬细胞浸润情况;PAS染色观察杯状细胞数量。最后,腹腔注射腺相关病毒(AAV-Lsr)构建LSR过表达小鼠,确定LSR过表达成功后,通过上述方法诱导小鼠结肠炎模型后观察肠道炎症情况。结果:LSR在DSS诱导的结肠炎小鼠中表达下调,同时,肠上皮Lsr特异性敲除小鼠对DSS诱导的结肠炎的易感性增加,表现为体重显著减轻(P<0.05),DAI得分显著升高(P<0.01),结肠长度显著缩短(P<0.05),病理损伤加重,促炎细胞因子TNF-α(P<0.05)、IL-1β(P<0.01)、IL-6(P<0.05)和IL-18(P<0.01)水平显著升高,炎症细胞浸润增加,结肠杯状细胞数量减少。此外,LSR过表达显著减轻DSS诱导的结肠炎小鼠肠道炎症。结论:LSR在DSS诱导的结肠炎小鼠中表达降低,LSR缺失加重DSS诱导的结肠炎小鼠的肠道炎症,AAV介导LSR过表达能减轻DSS诱导的结肠炎小鼠的肠道炎症。

关键词：脂解刺激脂蛋白受体葡聚糖硫酸钠腺相关病毒炎性肠病

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GPRC5A调控的ABCB1表达对肺腺癌增殖的影响

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Chinese Medical Sciences Journal 2024年第1期39卷 9-18,I0002页

作者：李鋆崔雯雯杨中法刘文豪边茂旺邓炯王彤山东第二医科大学基础医学院生理教研室潍坊市261021 滨州医学院附属医院医学研究中心滨州市256600

目的ATP结合盒B亚家族成员1(ATP binding cassette subfamily B member 1,ABCB1)的异常表达在多种癌症的发生发展中发挥关键作用。然而,G蛋白偶联受体C家族5组A型(G protein coupled receptor family C group5 type A,GPRC5A)调控的ABCB1表达对肺腺癌增殖的影响仍不清楚。本研究探讨了GPRC5A调控的ABCB1表达对肺腺癌增殖的影响。方法我们采用RT-PCR、Western-blot或免疫组化实验,分析ABCB1在肺腺癌细胞系、人肺腺癌组织以及GPRC5A基因敲除小鼠和野生型小鼠的气管上皮细胞和肺组织中的表达。采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)分析GPRC5A基因敲除小鼠气管上皮细胞对化疗药物的敏感性。采用皮下肿瘤形成实验探讨下调ABCB1表达是否可抑制体内肺腺癌增殖。采用免疫荧光和免疫沉淀实验研究GPRC5A和ABCB1之间潜在的调控关系。结果ABCB1在肺腺癌细胞系和人类肺腺癌组织中表达上调。GPRC5A基因敲除小鼠的气管上皮细胞及肺组织的ABCB1表达高于野生型小鼠。与GPRC5A野生型小鼠的气管上皮细胞相比,GPRC5A基因敲除小鼠的气管上皮细胞对塔立奇达和多柔比星更敏感。注射移植细胞28天后,接受ABCB1基因敲除细胞移植的GPRC5A-/-C57BL/6小鼠的肺肿瘤的体积和重量均明显低于野生型细胞移植小鼠(P=0.0043,P=0.0060)。此外,免疫荧光和免疫沉淀实验表明,GPRC5A通过直接结合方式调控ABCB1的表达。结论GPRC5A通过抑制ABCB1表达降低肺腺癌增殖。GPRC5A调节ABCB1表达的途径有待研究。

关键词： ATP结合盒B亚家族成员1 G蛋白偶联受体家族C5组成员A 肺腺癌小鼠

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糖皮质激素受体在缺血再灌注肾损伤中的作用

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首都医科大学学报 2022年第2期43卷 260-268页

作者：王向东姜敏王鑫巩永凤滨州医学院生理学教研室山东烟台264000 滨州医学院药理学教研室山东烟台264000 青岛大学病理生理学教研室山东青岛266000

目的探究糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)在缺血再灌注(ischemia reperfusion,IR)诱导的小鼠肾损伤过程中的变化及作用。方法使用微血管夹夹闭小鼠左侧肾蒂45 min诱导小鼠缺血再灌注肾损伤模型,分别于第5、15、30和80天收... 详细信息

目的探究糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)在缺血再灌注(ischemia reperfusion,IR)诱导的小鼠肾损伤过程中的变化及作用。方法使用微血管夹夹闭小鼠左侧肾蒂45 min诱导小鼠缺血再灌注肾损伤模型,分别于第5、15、30和80天收集小鼠血液,通过试剂盒检测血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)和血肌酐(serum creatinine,Scr)的浓度。采用过碘酸希夫染色法(periodic acid-Schiff staining,PAS)和苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin staining,HE)观察肾组织炎性细胞浸润情况;通过免疫荧光(immunofluorescence,IF)法检测肾损伤分子-1(kidney injury molecular-1,Kim-1)、炎症细胞标志物F4/80和CD3的表达变化;通过实时荧光定量PCR(real time quantitative PCR,RT-qPCR)、IF和蛋白质印迹技术(Western blotting,WB)检测GR的表达。选取8周龄雌性小鼠肾脏单侧IR后进行腹腔注射米非司酮(mifepristone,MF,50 mg·kg^(-1)·d^(-1)),检测实验组和对照组的BUN和Scr浓度,IF检测Kim-1和F4/80的蛋白水平。结果与未处理组相比,小鼠缺血再灌注肾损伤后,第5天小鼠血清BUN升高4.9倍,Scr升高8.3倍;RT-qPCR结果显示,IR组小鼠炎症分子的mRNA较未处理空白组升高3~5倍,GR的mRNA较空白组下降3.5倍。IF和WB结果显示,GR的蛋白质水平显著下调;IR处理的同时,注射MF阻断GR后,BUN和Scr较注射玉米油的对照组均增高,表明阻断GR会导致IR后肾功能损伤加重,IF结果显示Kim-1和F4/80表达明显升高,说明炎性反应增强,肾损伤加重。结论GR的表达和IR诱导肾损伤存在显著的相关性,同时阻断GR会进一步加重IR诱导的肾损伤。

关键词：肾损伤糖皮质激素受体缺血再灌注炎症反应米非司酮

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中外学生同堂教学法在病理生理学双语教学中的应用研究

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中国继续医学教育 2023年第12期15卷 91-96页

作者：李钰伶石磊徐芳胡业佳刘巍蔡虹静徐明李雅娜滨州医学院病理生理学教研室山东烟台264003

目的探索合理应用中外学生同堂教学,建立适合病理生理学双语教学的新方法。方法2019年9—12月,以滨州医学院2017级临床医学专业本科生70名及2017级临床医学专业留学生22名、2016级临床医学专业留学生19名为研究对象。研究分为本科生组... 详细信息

目的探索合理应用中外学生同堂教学,建立适合病理生理学双语教学的新方法。方法2019年9—12月,以滨州医学院2017级临床医学专业本科生70名及2017级临床医学专业留学生22名、2016级临床医学专业留学生19名为研究对象。研究分为本科生组、本科+留学生合堂组(以下简称合堂组)、留学生组共3组。本科生组采用传统的双语教学法+以问题为导向的教学法(problem-based learning,PBL)+实验操作;合堂组采用双语教学+中外学生共同参与的PBL教学法+中外学生共同参与的实验操作;留学生组的理论课和实验课均为传统的全英文授课。从病理生理学期末考试成绩、英语四六级的通过人数和硕士研究生录取人数做统计学分析。结果合堂组本科生结课当年的病理生理学理论和实验操作考试成绩、追踪到毕业的英语四六级的通过人数及毕业当年的硕士研究生录取人数均高于本科生组,差异有统计学意义(P<0.05)。合堂组留学生结课当年的病理生理学理论和实验操作考试成绩,也均明显高于留学生组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论中外学生同堂教学法不仅能够提高病理生理学的教学效果,而且能够提高本科生英语运用能力,增强中外学生团队协作能力,为其走向临床、面向国际化打下坚实的基础。

关键词：本科生留学生同堂双语教学病理生理学教学改革

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病理生理学“社会主义核心价值观”思政目标设计

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继续医学教育 2023年第5期37卷 17-20页

作者：徐芳石磊刘巍胡业佳徐明李雅娜滨州医学院病理生理学教研室山东烟台264003

病理生理学教学中构建课程思政体系是落实“三位一体”教学目标的迫切问题。社会主义核心价值观是全体人民对崇高价值的追求,是培养时代新人的重要引领。本教研室积极响应国家教育教学改革的号召,在病理生理学专业课程中对社会主义核心... 详细信息

病理生理学教学中构建课程思政体系是落实“三位一体”教学目标的迫切问题。社会主义核心价值观是全体人民对崇高价值的追求,是培养时代新人的重要引领。本教研室积极响应国家教育教学改革的号召,在病理生理学专业课程中对社会主义核心价值观分别从国家、社会、个人三个层面进行思政教学目标设计。教学过程中笔者借助“案例式教学法”,依托“线上-线下混合式”教学模式选择融入点,通过线上教学案例及线下讨论话题等方式将思政点和对应的专业知识点相融合,并通过融入思政目标考核的形成性评价考核教学效果。在病理生理学专业知识传授过程中贯穿社会主义核心价值观,有助于在潜移默化中引导学生树立正确的世界观、人生观、价值观,使专业教育与思政教育能够“同向同行”,实现具有病理生理学专业特色的思政教学改革,是一次积极有益的尝试。

关键词：病理生理学社会主义核心价值观课程思政混合教学案例式教学同向同行

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VEGFB调控胰岛素介导的胰高血糖素分泌抑制作用及其机制研究

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滨州医学院学报 2024年第6期47卷 459-464页

作者：张金涛孟琴语李文浩许诺朱子明李雅娜滨州医学院基础医学院病理生理学教研室山东烟台264003 滨州医学院第二临床医学院重症医学科山东烟台264100

目的探讨血管内皮生长因子B(vascular endothelial growth factor B,VEGFB)通过作用于血管内皮生长因子受体1(vascular endothelial growth factor receptor 1,VEGFR1)对胰岛素介导的胰高血糖素分泌调节的抑制作用及其机制,为预防和治... 详细信息

目的探讨血管内皮生长因子B(vascular endothelial growth factor B,VEGFB)通过作用于血管内皮生长因子受体1(vascular endothelial growth factor receptor 1,VEGFR1)对胰岛素介导的胰高血糖素分泌调节的抑制作用及其机制,为预防和治疗葡萄糖调节受损(impaired glucose regulation,IGR)提供可借鉴的理论和实验依据。方法通过高脂饮食喂养构建IGR模型小鼠,利用腺相关病毒感染IGR小鼠,分别观察VEGFB对标准饮食的C57BL/6小鼠(Chow组)、胰腺特异性VEGFB过表达小鼠(AAV-VEGFB组)和对照组小鼠(AAV-null组)生长状态、血糖水平、葡萄糖耐量、胰岛素敏感性、胰岛素及胰高血糖素的影响。通过蛋白免疫印迹技术(Western blot)验证VEGFB、VEGFR1蛋白表达水平,通过实时荧光定量聚合酶链反应技术(qRT-PCR)测定磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)和葡萄糖-6磷酸酶(G6Pase)的mRNA表达水平。结果VEGFB过表达后,AAV-VEGFB组小鼠的生长状态良好,其空腹血糖(FBG)、餐后血糖(PBG)及糖化血红蛋白(GHb)水平降低,葡萄糖耐量和胰岛素敏感性下降;胰岛素分泌水平上升,胰高血糖素的分泌量减少。结论VEGFB结合VEGFR1增加胰岛素分泌、降低胰高血糖素分泌,进而改善IGR小鼠的糖代谢平衡。

关键词：血管内皮生长因子B 血管内皮生长因子受体1 胰岛素胰高血糖素,葡萄糖调节受损

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线粒体靶向抗氧化剂SKQ1对糖尿病小鼠肾损伤的治疗作用与机制

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滨州医学院学报 2024年第1期47卷 1-7页

作者：高治巩永凤王明霞滨州医学院基础医学院生理学教研室山东烟台264003

目的本文旨在研究线粒体靶向抗氧化剂SKQ1对糖尿病(DM)小鼠肾损伤的影响,以阐明SKQ1对肾脏的保护作用及机制。方法选取野生型雄性C57BL/6小鼠30只,行右侧肾切除术后注射诱导DM模型,分成对照组、DM组、SKQ1组各10只。用药组每天饮用SKQ1... 详细信息

目的本文旨在研究线粒体靶向抗氧化剂SKQ1对糖尿病(DM)小鼠肾损伤的影响,以阐明SKQ1对肾脏的保护作用及机制。方法选取野生型雄性C57BL/6小鼠30只,行右侧肾切除术后注射诱导DM模型,分成对照组、DM组、SKQ1组各10只。用药组每天饮用SKQ1水溶液,对照组和DM组正常饮水。连续饲养28周后,收集尿液测尿微量白蛋白的变化;通过HE和PAS染色法观察小鼠肾脏病理结构和肾脏纤维化的变化;通过q-PCR和免疫荧光法检测小鼠NPHS2、WT1、Podxl、desmin、α-SMA表达情况。结果与对照组比较,DM组小鼠尿微量白蛋白明显增加;与DM组小鼠比较,SKQ1组小鼠尿微量白蛋白降低。HE和PAS染色结果显示,与对照组比较,DM组小鼠肾小球系膜细胞增多,细胞外基质增生,有明显的胶原纤维沉积;与DM组比较,SKQ1组小鼠肾小球系膜细胞数量减少,细胞外基质增生减轻,胶原纤维沉积明显减轻。q-PCR和免疫荧光结果显示,与对照组比较,DM组小鼠足细胞相关分子NPHS2、WT1、Podxl明显降低,desmin、α-SMA表达量增加;与DM组比较,SKQ1组小鼠足细胞相关分子NPHS2、WT1、Podxl表达明显增加,但desmin、α-SMA表达量下降。结论SKQ1可上调NPHS2、WT1、Podxl的表达及下调desmin、α-SMA的表达来减轻足细胞损伤,改善小鼠尿微量白蛋白排泄和肾小球纤维化,进而延缓糖尿病肾病(DN)的进展。

关键词： SKQ1 糖尿病肾病足细胞

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肾周白色脂肪组织源外泌体远距调控大鼠血压

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中国比较医学杂志 2023年第3期33卷 51-58页

作者：张培森梁沥文施真滨州医学院生理学教研室山东烟台264003 威海市中心血站山东威海264200

目的研究肾周白色脂肪组织作为内分泌器官是否以外泌体囊泡作为运载体调控大鼠动脉血压。方法采用成年自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rat,SHR)和正常血压的Wistar-Kyoto(WKY)大鼠。将WKY大鼠和SHR的肾周白色脂肪置于无血... 详细信息

目的研究肾周白色脂肪组织作为内分泌器官是否以外泌体囊泡作为运载体调控大鼠动脉血压。方法采用成年自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rat,SHR)和正常血压的Wistar-Kyoto(WKY)大鼠。将WKY大鼠和SHR的肾周白色脂肪置于无血清(无外泌体)培养基中培养,使用外泌体分离提取试剂盒(exoEasy Maxi Kit)分离分泌囊泡。经纳米粒径测定、透射电镜和表面标志物鉴定符合外泌体囊泡(Exosomes,Exo)特征后用于后续实验。SHR或WKY大鼠各随机分为两组,分别尾静脉注射SHR大鼠外泌体(Exo-SHR)或WKY大鼠外泌体(Exo-WKY),每周1次,连续6周。在清醒状态下使用无创尾动脉加压系统测量动脉血压,每周1次。注射后第6周末进行急性实验。采用颈动脉插管法进行动脉血压直接测定,采用HE染色和Masson染色观察心血管病理重构。外周交感神经张力(peripheral sympathetic tone,PST)高低以静脉注射盐酸六烃季铵引起的降压反应与Exo-WKY处理的WKY大鼠的降压反应的比值大小表示。另外,PKH67绿色荧光染料标记外泌体后尾静脉注射进行体内示踪,与原代培养的神经元孵育进行体外示踪。结果肾周白色脂肪组织分泌的外泌体囊泡经透射电镜观察到典型外泌体半托杯状囊泡结构,纳米粒径检测平均直径集中在100 nm左右,且具有表面特异标志物肿瘤易感基因101(tumor susceptibility gene,TSG101)和白细胞分化9(cluster of differentiation 9,CD9)表达。SHR组收缩压(Systolic blood pressure,SBP)在注射Exo-WKY后的第2周开始下降,并在整个干预过程中保持低于注射前的水平(P<0.05)。应用Exo-WKY可减少SHR心肌细胞横截面积、主动脉中膜厚度及降低PST(P<0.05)。而WKY大鼠应用Exo-SHR后,SBP、心肌细胞横截面积、主动脉中膜厚度及PST均未见明显变化(P>0.05)。在体示踪发现PKH67标记外泌体囊泡经尾静脉注射24 h后,在下丘脑室旁核(paraventricular nucleus,PVH)、孤束核(nucleus tracts solitary,NTS)、延髓头端腹外侧部(rostral ventrolateral medulla,RVLM)可见绿色荧光。体外示踪发现培养神经元也可见绿色荧光。结论这些结果表明,肾周白色脂肪组织源外泌体可作为运载体发挥远距离调控动脉血压的作用。Exo-SHR缺乏抑制血压升高的内容物,补充Exo-WKY可降低动脉血压和交感紧张,并改善心血管重构。

关键词：自发性高血压肾周白色脂肪外泌体交感神经活动

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