检索结果-内蒙古大学图书馆

中华微生物学和免疫学杂志 2015年第3期35卷 219-224页

作者：于晓锋杜镇镇孙旭红石传芹张怀祥胡涛滨州医学院免疫学教研室烟台264003 基础医学概论教研室

目的：探讨结肠癌细胞株HT-29中Tn（＋）细胞表达Tn抗原的机制。方法免疫磁珠分选结肠癌细胞株HT-29中HT-29-Tn（＋）细胞与HT-29-Tn（－）细胞；RT-PCR、PCR 扩增Cosmc基因，测序比对是否存在基因突变。野生型Cosmc转染正常及肿瘤细胞... 详细信息

目的：探讨结肠癌细胞株HT-29中Tn（＋）细胞表达Tn抗原的机制。方法免疫磁珠分选结肠癌细胞株HT-29中HT-29-Tn（＋）细胞与HT-29-Tn（－）细胞；RT-PCR、PCR 扩增Cosmc基因，测序比对是否存在基因突变。野生型Cosmc转染正常及肿瘤细胞；Western blot检测转染后Cosmc蛋白表达状况；荧光分析法检测转染前后T-synthase活性。结果分选后的HT-29-Tn（＋）细胞缺乏T-synthase活性，Cosmc基因编码区缺失，转染WtCosmc可恢复Tn抗原阳性细胞的T-synthase活性，抑制Tn抗原表达。结论 Cosmc基因编码区缺失引起T-synthase活性丧失导致人结肠癌HT-29-Tn（＋）细胞表达Tn抗原。

关键词： Tn抗原 HT-29细胞基因突变

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稳定表达miR-17-5p的PC12细胞株构建及鉴定

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实验技术与管理 2015年第12期32卷 66-68页

作者：张皓云王鲁娟王凤斌刘红兵苏文霞潍坊医学院基础医学概论教研室山东潍坊261053 潍坊医学院诊断学教研室山东潍坊261053 潍坊医学院生理学教研室山东潍坊261053

目的:构建稳定表达miR-17-5p的PC12细胞株。方法:将质粒PEGFP-N1-vector空载体和PEGFPN1-miR-17-5p表达载体扩增、抽提,利用脂质体转染技术将质粒转染PC12细胞,荧光显微镜观察绿色荧光蛋白GFP表达,Real-time PCR检测转染PC12细胞miR-17... 详细信息

目的:构建稳定表达miR-17-5p的PC12细胞株。方法:将质粒PEGFP-N1-vector空载体和PEGFPN1-miR-17-5p表达载体扩增、抽提,利用脂质体转染技术将质粒转染PC12细胞,荧光显微镜观察绿色荧光蛋白GFP表达,Real-time PCR检测转染PC12细胞miR-17-5p的表达。结果:荧光显微镜观察到空载组和miR-17-5p组细胞都有绿色荧光蛋白高表达,Real-time PCR检测稳定转染miR 17-5p后PC12细胞内miR-17-5p的表达较空载组明显升高(P<0.01)。结论:miR-17-5p在PC12细胞稳定表达,为进一步研究miR-17-5p对神经细胞的调制作用提供有用的细胞模型。

关键词：微小RNA miR-17-5p PC12细胞

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非医学专业基础医学概论课程教学改革探讨

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中国组织化学与细胞化学杂志 2015年第3A期23卷 288-290页

作者：张皓云王孝文陈燕春王凤斌潍坊医学院基础医学概论教研室潍坊医学院人体解剖学教研室潍坊医学院组织胚胎学教研室潍坊医学院生理学教研室山东261053

《基础医学概论》课程是为医学院校中非医学专业的学生开设,目的是普及非医学专业学生的医学基础知识,为他们以后从事与医疗有关的工作奠定基础。本文分析了我校目前《基础医学概论》教学存在的问题,提出了以"器官、系统"为... 详细信息

《基础医学概论》课程是为医学院校中非医学专业的学生开设,目的是普及非医学专业学生的医学基础知识,为他们以后从事与医疗有关的工作奠定基础。本文分析了我校目前《基础医学概论》教学存在的问题,提出了以"器官、系统"为中心的《基础医学概论》教学模式,强调形态与功能的联系;打破了学科之间的界线,强化了各学科间的有机联系,将各单一的课程式教学转变为综合性、形式多样的教学,有利于提高教学效果,对于医学院校的非医学专业学生来讲,是一种行之有效的教学改革。

关键词：医学院校非医学专业基础医学概论教学改革

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RNAi双沉默Survivin和hTERT基因抑制人结肠癌SW480细胞增殖促进凋亡

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基础医学与临床 2015年第1期35卷 38-43页

作者：肖琳王平董俊红王守训刘顺梅潍坊医学院基础医学院生化教研室山东潍坊261042

目的探讨双向沉默Survivin和h TERT基因对结肠癌SW480细胞增殖和凋亡的影响,为结肠癌的基因治疗提供实验依据。方法设计并构建能够稳定转录shRNA并可分别及联合干扰Survivin和h TERT分子表达的质粒,将其转染结肠癌SW480细胞后,分阴性对... 详细信息

目的探讨双向沉默Survivin和h TERT基因对结肠癌SW480细胞增殖和凋亡的影响,为结肠癌的基因治疗提供实验依据。方法设计并构建能够稳定转录shRNA并可分别及联合干扰Survivin和h TERT分子表达的质粒,将其转染结肠癌SW480细胞后,分阴性对照组、空白质粒对照组、Survivin RNAi组、h TERT RNAi组和Survivinh TERT RNAi组。转染48h后TRAP-PCR-ELISA法检测端粒酶活性,RT-PCR法检测Survivin和h TERT mRNA的表达,Western blot检测Survivin和h TERT蛋白的表达,流式细胞仪及cck-8法分别检测细胞凋亡和细胞增殖的变化。结果 Survivin-h TERT RNAi组SW480细胞端粒酶活性明显下降(P<0.01),Survivin-h TERT RNAi组Survivin及h TERT的mRNA水平较正常对照组分别减低82.8%和73.6%(P<0.01),蛋白表达抑制率分别为79.2%和66.7%(P<0.01)。实验各组中Survivin-h TERT RNAi组细胞增殖抑制率和凋亡率最高,分别为43.6%±0.1%和39.2%±2.3%(P<0.01)。结论 Survivin和h TERT双干扰质粒可明显下调Survivin和h TERT蛋白的表达,抑制结肠癌SW480细胞的增殖,促进其凋亡。

关键词： RNA干扰 Survivin h TERT 结肠癌

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垂体瘤转化基因抑制乳腺癌细胞的侵袭能力

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肿瘤 2015年第10期35卷 1106-1112页

作者：张红霞尹崇高李洪利孙永红潍坊医学院基础医学院临床病理学系山东潍坊261053 潍坊医学院护理学院外科护理学教研室山东潍坊261053 潍坊医学院医学研究实验中心山东潍坊261053 潍坊医学院附属医院病理科山东潍坊261041

目的 :探讨垂体瘤转化基因(pituitary tumor transforming gene,PTTG)在乳腺癌细胞侵袭中的作用。方法 :应用蛋白质印迹法检测PTTG蛋白在不同侵袭性乳腺癌细胞中的表达。将靶向PTTG的si RNA片段转染至高侵袭性乳腺癌MDA231细胞(命名为si... 详细信息

目的 :探讨垂体瘤转化基因(pituitary tumor transforming gene,PTTG)在乳腺癌细胞侵袭中的作用。方法 :应用蛋白质印迹法检测PTTG蛋白在不同侵袭性乳腺癌细胞中的表达。将靶向PTTG的si RNA片段转染至高侵袭性乳腺癌MDA231细胞(命名为si PTTG/MDA231)后,应用蛋白质印迹法检测细胞中PTTG蛋白的表达水平;应用Transwell法检测si PTTG/MDA231细胞的侵袭能力;表皮细胞生长因子(epithelial growth factor,EGF)刺激si PTTG/MDA231细胞后,应用蛋白质印迹法检测细胞中磷酸化-Akt(phospho-Akt,p-Akt)和磷酸化-AMP相关蛋白激酶相关的蛋白激酶5[phospho-AMP-related protein kinase(AMPK)-related protein kinase 5,p-ARK5]的表达水平。结果 :高侵袭性乳腺癌MDA231细胞中PTTG蛋白的表达水平高于低侵袭性乳腺癌MCF7和T47-D细胞(P值均<0.05)。si PTTG/MDA231细胞中PTTG蛋白的表达水平低于空白对照组(MDA231细胞未进行任何转染)和阴性对照组(MDA231细胞转染阴性对照片段scrambling,命名为scr/MDA231细胞)(P值均<0.05)。si PTTG/MDA231细胞的侵袭能力低于空白对照组和阴性对照组(P值均<0.01)。EGF刺激0、5和10 min后,scr/MDA231细胞中p-Akt和p-ARK5蛋白的表达水平逐渐上调(P值均<0.05),而si PTTG/MDA231细胞中p-Akt和p-ARK5蛋白的表达水平无显著改变(P值均>0.05)。结论 :高侵袭性乳腺癌细胞中PTTG蛋白的表达水平较高。抑制PTTG的表达后,MDA231细胞的侵袭能力下降,这一作用可能与p-Akt和p-ARK5蛋白的表达调控有关。

关键词：乳腺肿瘤 RNA 小分子干扰肿瘤浸润垂体瘤转化基因

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狂犬病病毒糖蛋白膜外区重组基因的表达与鉴定

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中国病原生物学杂志 2015年第8期10卷 677-680页

作者：路静付玉荣伊正君潍坊医学院医学检验学系山东潍坊261053 潍坊医学院基础医学院病原生物学教研室

目的构建狂犬病病毒糖蛋白外膜区基因质粒并在大肠埃希菌中表达,为研制狂犬病病毒抗原诊断试剂盒奠定基础。方法采用RT-PCR方法扩增狂犬病病毒CTN株糖蛋白膜外区基因,目的片段与表达载体PET32a(+)分别经双酶切、胶回收后连接并转化至***... 详细信息

目的构建狂犬病病毒糖蛋白外膜区基因质粒并在大肠埃希菌中表达,为研制狂犬病病毒抗原诊断试剂盒奠定基础。方法采用RT-PCR方法扩增狂犬病病毒CTN株糖蛋白膜外区基因,目的片段与表达载体PET32a(+)分别经双酶切、胶回收后连接并转化至*** BL21(DE3)菌株。阳性重组菌经IPTG诱导表达,表达产物用SDS-PAGE分析后进行纯化,利用Western blot鉴定其反应原性。结果以狂犬病病毒CTN株为模板扩增的糖蛋白膜外区基因片段经1%琼脂糖凝胶电泳鉴定大小为1 323bp,与理论值相符;重组质粒经酶切鉴定后转化入*** BL21(DE3),经IPTG诱导表达的融合蛋白分子质量单位大小约为66.6ku,与理论值相符;重组菌在IPTG终浓度为1mmol/L,诱导时间为4h,温度为37℃时蛋白表达产量最高。该融合蛋白主要以包涵体形式存在,可被His标签抗体识别。结论成功表达了狂犬病病毒糖蛋白膜外区蛋白,该蛋白反应原性良好,为研制狂犬病病毒抗原诊断试剂盒奠定了基础。

关键词：狂犬病病毒糖蛋白膜外区基因克隆原核表达

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狂犬病病毒抗原、抗体的实验室诊断研究进展

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中国病原生物学杂志 2015年第7期10卷 659-662页

作者：路静付玉荣伊正君潍坊医学院医学检验学系山东潍坊261053 潍坊医学院基础医学院病原生物学教研室

狂犬病是由狂犬病病毒引起的人兽共患烈性传染病,发病后死亡率几乎为100%。近年来,我国狂犬病的发病率呈上升趋势。当前急需一种快速、准确、经济、简便、易于推广的实验室诊断方法。本文从抗原诊断、抗体诊断对目前国内外狂犬病病毒的... 详细信息

狂犬病是由狂犬病病毒引起的人兽共患烈性传染病,发病后死亡率几乎为100%。近年来,我国狂犬病的发病率呈上升趋势。当前急需一种快速、准确、经济、简便、易于推广的实验室诊断方法。本文从抗原诊断、抗体诊断对目前国内外狂犬病病毒的实验室诊断作一综述,并分析各种方法的优点和缺点,为狂犬病的快速实验室诊断提供参考依据,以更有效地预防和控制狂犬病。

关键词：狂犬病病毒抗原诊断抗体诊断实验室诊断综述

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乙醛脱氢酶1作为宫颈癌干细胞标记物的实验研究

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中华临床医师杂志（电子版） 2016年第2期10卷 234-237页

作者：王静赵冬梅滨州医学院基础医学院人体解剖学教研室山东烟台264003 潍坊市中医院手术室山东省261041

目的探讨宫颈癌Hela、Caski细胞系中乙醛脱氢酶1(ALDH1)+细胞的生物学特性。方法 (1)利用平板、克隆形成实验检测ALDH1+和ALDH1-细胞的自我增殖能力;(2)无血清悬浮成球实验检测ALDH1+和ALDH1-细胞的自我更新能力;(3)小鼠体内成瘤实验检... 详细信息

目的探讨宫颈癌Hela、Caski细胞系中乙醛脱氢酶1(ALDH1)+细胞的生物学特性。方法 (1)利用平板、克隆形成实验检测ALDH1+和ALDH1-细胞的自我增殖能力;(2)无血清悬浮成球实验检测ALDH1+和ALDH1-细胞的自我更新能力;(3)小鼠体内成瘤实验检测ALDH1+和ALDH1-细胞的致瘤能力。结果平板克隆实验显示,Hela细胞系ALDH1+细胞克隆形成率为(37.33±9.45)%,ALDH1-细胞克隆形成率为(17.67±2.51)%,二者克隆形成率差异有统计学意义(P<0.05);Caski细胞系ALDH1+细胞克隆数为(49.67±10.40)%,ALDH1-细胞克隆形成率为(14.00±5.29)%,二者克隆形成率差异有统计学意义(P<0.05)。无血清悬浮成球实验显示,Hela细胞系ALDH1+细胞球个数为(72.00±8.88)个,ALDH1-细胞球个数为(19.00±4.00)个,二者成球率差异有统计学意义(P<0.05);Caski细胞系ALDH1+细胞球个数为(80.33±9.86)个,ALDH1-细胞球个数为(29.00±3.60)个,二者成球率差异有统计学意义(P<0.05)。小鼠体内成瘤实验显示,接种细胞数量为1×103个时,ALDH1+细胞即可形成移植瘤,接种细胞数量为1×105、1×106个时,ALDH1+和ALDH1-细胞均可形成移植瘤;与ALDH1-细胞比较,ALDH1+细胞成瘤率较高且肿瘤表面积较大,两者比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 ALDH1+细胞与ALDH1-细胞相比,具有较强的克隆、自我更新和成瘤能力,具备干细胞的部分特征,可以作为宫颈癌干细胞的标记物。

关键词：宫颈肿瘤肿瘤干细胞 ALDH1

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降钙素(PCT)与多发伤严重程度及评分(ISS)相关性的临床研究

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中国医药导刊 2016年第5期18卷 468-469页

作者：张增高张新琪张磊朱强潍坊医学院附属青岛市胶州中心医院急诊外科胶州266300 青岛第二卫校基础教研室胶州266300

目的:研究降钙素(PCT)与多发伤严重程度及评分(ISS)相关性。方法:选择2013年5月至2015年10月我院收治的80例多发伤严重患者作为研究对象,根据ISS入院创伤严重程度评分,将80例患者分成轻微创伤组(L-ISS)与重伤组(H-ISS),轻微创伤ISS评分... 详细信息

目的:研究降钙素(PCT)与多发伤严重程度及评分(ISS)相关性。方法:选择2013年5月至2015年10月我院收治的80例多发伤严重患者作为研究对象,根据ISS入院创伤严重程度评分,将80例患者分成轻微创伤组(L-ISS)与重伤组(H-ISS),轻微创伤ISS评分均小于16分,重伤组创伤评分均大于16分。两组患者在创伤后24h内进行血降钙素原(PCT)的检测,对比两组患者降钙素原与多发伤严重程度及ISS评分的相关性。结果:重伤组PCT评分明显比轻微创伤组高,重伤组ICU时间与机械通风时间均长于轻微创伤组,轻微创伤组病死率也明显低于重伤组,两组对比差异显著(P<0.05)。结论:降钙素(PCT)与多发伤严重程度有着密切的关系,会直接影响ISS评分,具有良好相关性,可见,降钙素能作为多发伤患者预后重要评价指标。

关键词：降钙素多发伤 ISS评分相关性

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颗粒蛋白前体调控胃癌细胞增殖与衰老的效应研究

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中国癌症杂志 2015年第3期25卷 173-178页

作者：李媛媛王红艳吴晓燕宋瑞卉李敬潍坊医学院形态学实验室山东潍坊261053 潍坊医学院病原生物学教研室山东潍坊261053 山东省高校免疫学重点实验室山东潍坊261053 潍坊医学院基础医学院山东潍坊261053

背景与目的:颗粒蛋白前体(progranulin,PGRN)是一种新型生长因子,在细胞迁移、细胞周期进展及肿瘤形成过程中发挥着重要作用。PGRN在多种恶性肿瘤细胞中高表达,不仅参与肿瘤的生长过程,还与肿瘤的发生、演变过程关系密切。本研究旨在探... 详细信息

背景与目的:颗粒蛋白前体(progranulin,PGRN)是一种新型生长因子,在细胞迁移、细胞周期进展及肿瘤形成过程中发挥着重要作用。PGRN在多种恶性肿瘤细胞中高表达,不仅参与肿瘤的生长过程,还与肿瘤的发生、演变过程关系密切。本研究旨在探讨PGRN在胃癌组织中的表达,及其对胃癌BGC823细胞增殖与衰老的影响。方法:利用免疫组化方法检测胃癌组织及癌旁组织中PGRN的表达;利用实时定量聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)干扰胃癌细胞株BGC823中PGRN的表达;通过四甲基偶氮唑盐(MTT)法、细胞克隆形成和细胞衰老检测实验,探讨PGRN对BGC823细胞增殖与衰老的影响。结果:PGRN在胃癌组织中高表达。PGRN表达降低后,胃癌细胞的增殖与克隆形成能力均显著降低。PGRN-siRNA细胞的克隆形成率为(25.3±3.1)%,对照组细胞的克隆形成率为(72.1±5.7)%,正常组细胞的克隆形成率为(80.3±4.0)%。两两比较,对照组与正常组间差异无统计学意义(P>0.05),实验组与其他两组间差异均有统计学意义(P均<0.05)。干扰PGRN表达能够明显促进BGC823细胞衰老。PGRN-siRNA细胞衰老阳性率为(27.6±2.1)%,对照组细胞衰老阳性率为(3.2±1.3)%,正常组细胞衰老阳性率为(1.9±1.2)%。两两比较,对照组与正常组间差异无统计学意义(P>0.05),实验组与其他两组间差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论:PGRN可作为新的胃癌标志物,为临床胃癌的靶向治疗提供新的思路。

关键词：胃肿瘤颗粒蛋白前体 siRNA 细胞衰老

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