检索结果-内蒙古大学图书馆

实用医学杂志 2023年第16期39卷 2037-2042页

作者：李林殷月王晨晨庄宝祥王岱君潍坊医学院基础医学院解剖学教研室山东潍坊261053 潍坊医学院基础医学院生理学教研室山东潍坊261053 潍坊医学院基础医学院形态学实验室山东潍坊261053

目的探讨氢气通过肿瘤坏死因子样细胞因子1A(tumor necrosis factor-like cytokine 1A,TL1A)/死亡受体3(death receptor 3,DR3)通路对兔肢体缺血-再灌注后心肌细胞凋亡的影响。方法下载基因表达数据库(gene expression omnibus,GEO)GSE160516数据集,进行基因组百科全书(kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集。采用随机数字表法将18只雄性新西兰大耳白兔随机分为对照组(C组),肢体缺血-再灌注组(R组),氢气组(H组),每组6只。建立兔双后肢缺血-再灌注模型,各组动物取静脉血离心制备血清,摘取心脏。酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测血清TL1A和DR3水平。终端脱氧核苷酸转移酶UTP介导的缺口端标记(terminal deoxynucleotidyl transferase UTP mediated nicked end labeling,TUNEL)法检测心肌细胞凋亡率。免疫印迹(western blotting)法测定心肌组织中TL1A、DR3与半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase3)蛋白相对表达量。实时逆转录聚合酶链反应(real-time reverse transcription polymerase chain reaction,RT-q PCR)测定心肌组织中TL1A、DR3与Caspase3 mRNA相对表达量。结果KEGG通路富集分析发现,小鼠心肌缺血-再灌注后,基因表达富集在Apoptosis信号通路、TNF信号通路和MAPK信号通路等。实验观察到,与C组比较,R组血清TL1A和DR3表达水平显著升高(P<0.01);与R组比较,H组血清TL1A和DR3表达水平显著降低(P<0.01)。与C组比较,R组心肌细胞凋亡率显著升高(P<0.01);与R组比较,H组心肌细胞凋亡率显著降低(P<0.01)。与C组比较,R组心肌组织内TL1A、DR3和Caspase3蛋白与mRNA相对表达量均显著升高(P<0.01);与R组比较,H组心肌组织内TL1A、DR3和Caspase3蛋白与mRNA相对表达量均显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论氢气可通过抑制TL1A/DR3通路减轻肢体缺血-再灌注后心肌细胞凋亡。

关键词：氢气缺血-再灌注心肌细胞凋亡

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铁转运相关蛋白在肌萎缩性侧索硬化症转基因鼠脊髓中的表达变化

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解剖学报 2021年第2期52卷 161-167页

作者：张雅雯高莹孙菡聪张皓云王凤斌潍坊医学院基础医学院生理学教研室山东潍坊261053 潍坊医学院生命科学与技术学院山东潍坊261053 潍坊医学院临床医学院山东潍坊261053 潍坊医学院基础医学院基础医学概论教研室山东潍坊261053 潍坊医学院山东省神经疾病与再生修复重点实验室山东潍坊261053

目的探讨肌萎缩性侧索硬化症(ALS)转基因鼠脊髓内铁转运相关蛋白表达变化与铁稳态失衡的关联。方法选取h SOD1G93A转基因鼠(ALS鼠)和同窝野生型鼠(WT鼠),分别于生后70、95和122 d分离脊髓,每时间点每组各9只实验动物。Western blotting... 详细信息

目的探讨肌萎缩性侧索硬化症(ALS)转基因鼠脊髓内铁转运相关蛋白表达变化与铁稳态失衡的关联。方法选取h SOD1G93A转基因鼠(ALS鼠)和同窝野生型鼠(WT鼠),分别于生后70、95和122 d分离脊髓,每时间点每组各9只实验动物。Western blotting检测脊髓组织内铁转运蛋白二价金属转运蛋白-1(DMT1)、铁转运蛋白-1(FPN1)及调节蛋白铁调节蛋白-1(IRP1)的表达;免疫荧光双重标记检测脊髓腰段前角内细胞共定位情况。结果Western blotting显示,与WT鼠比较,各时间点ALS鼠脊髓内DMT1表达均显著降低(P<0.05,P<0.01);70 d FPN1表达升高(P<0.05),95 d和122 d表达下降(P<0.01);95 d、122 d IRP1表达降低(P<0.01)。免疫荧光双重标记显示,在70 d WT鼠和ALS鼠腰段脊髓中DMT1主要与β-微管蛋白Ⅲ(β-tubulinⅢ)共表达。与WT组相比,95 d ALS鼠脊髓腰段前角神经元内DMT1免疫反应强,而FPN1荧光强度减弱。随疾病进展,DMT1、FPN1与反应性胶质细胞共定位表达增多。IRP1随疾病进展表达强度降低。结论随ALS病程进展,发病早期神经元铁转入增加,转出减少,反应性神经胶质细胞铁转运活性增强,参与局部铁稳态失衡及脊髓前角运动神经元进行性丢失。IRP1表达降低,部分参与局部铁代谢调节。

关键词：肌萎缩侧索硬化症铁稳态二价金属转运蛋白-1 铁转运蛋白1 铁调节蛋白免疫印迹法小鼠

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基于转录组学研究岩藻黄素在扰动剪切应力对EPCs炎性及增殖影响

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中国海洋药物 2022年第3期41卷 34-42页

作者：傅洁于洁张晓芸李鑫金成文刘顺梅成敏崔晓栋潍坊医学院基础医学院医学生理学实验室山东潍坊261053 潍坊医学院基础医学院机能学实验室山东潍坊261053 潍坊医学院医学研究实验中心山东潍坊261053

目的在扰动剪切应力(Oscillatory shear stress, OSS,±4 dynes/cm2, 1 Hz)作用下内皮祖细胞(Endothelial progenitor cells, EPCs)转录组学数据生物信息学分析的基础上,探讨岩藻黄素(Fucoxanthin, FUCO)对OSS作用下的EPCs炎性、增殖以及细胞周期等生物活性改变的影响作用。方法采用Flexcell flow STR-4000流体系统模拟体内扰动流剪切应力环境;利用Illumina高通量测序平台对相应处理的EPCs进行转录组测序分析,并对筛选到的差异蛋白编码基因进行功能以及通路分析;利用实时荧光定量PCR技术(RT-qPCR)验证相应生物信息学数据;Western blot(WB)检测筛选基因-前列腺素内过氧化物合酶2(PTGS2)蛋白表达;采用EdU和PI染色分别进行EPCs增殖和周期检测。结果与静止对照组相比,共计差异表达基因1 066个,涉及细胞增殖和死亡、感染性疾病等信号转导通路;GO功能分析显示,该类基因功能主要影响的过程有细胞及细胞组分、细胞进程、细胞器及生物进程等生物活动;根据P<0.05且差异倍数(FC)>2的条件,筛选显著差异基因数17个,并经RT-qPCR以及WB验证,显示PTGS2 mRNA差异表达最为显著(P<0.001),PTGS2蛋白表达差异明显(P<0.05);进一步的结果显示,与OSS组EPCs相比,FUCO处理的OSS组EPCs中PTGS2 mRNA表达显著降低(P<0.001),其蛋白表达被抑制(P<0.05),并且FUCO处理过的OSS组EPCs增殖活性以及DNA合成能力增强。结论结合转录组数据基础,提示FUCO能够显著降低OSS引发的EPCs炎症反应,尤其明显抑制炎性因子PTGS2表达;促进EPCs细胞增殖和DNA合成,这为FUCO临床干预EPCs进而完善心血管疾病干细胞治疗提供理论依据。

关键词：岩藻黄素动脉粥样硬化内皮祖细胞细胞周期细胞增殖

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CDDO-Me对三阴性乳腺癌细胞泛素特异性蛋白酶2a活性及细胞增殖的抑制作用

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上海交通大学学报（医学版） 2021年第8期41卷 1025-1032页

作者：季艳杰罗浩蔡海燕刘欣宇金诗佳粟深月徐含章雷虎吴英理上海交通大学医学院病理生理学教研室细胞分化与凋亡教育部重点实验室上海200025 潍坊医学院基础医学院临床病理系潍坊261053

目的·在三阴性乳腺癌(triple negative breast cancer,TNBC)细胞中研究筛选得到的泛素特异性蛋白酶2a(ubiquitin-specific protease 2a,USP2a)抑制剂甲基巴多索隆(bardoxolone methyl,CDDO-Me)对USP2a活性及细胞增殖的影响。方法·利用泛素特异性蛋白酶抑制剂筛选系统筛选得到USP2a抑制剂CDDO-Me,采用分子对接分析技术预测CDDO-Me与USP2a的结合情况,采用细胞热迁移实验(cellular thermal shift assay,CETSA)检测CDDO-Me与3种TNBC细胞株内USP2a蛋白的结合情况。通过Western blotting检测USP2a的底物β连环素(β-catenin)和肿瘤坏死因子受体相关因子6(tumor necrosis factor receptor-associated factor 6,TRAF6)蛋白水平以及凋亡相关蛋白胱天蛋白酶3(caspase3)和聚腺苷二磷酸核糖聚合酶1[poly(ADP-ribose)polymerase1,PARP1]的变化。利用细胞活性检测试剂盒8(cell counting kit-8,CCK8)检测CDDO-Me对TNBC细胞增殖的影响。MDA-MB-468细胞瞬时转染pLVX(pLVX组)或pLVX-USP2a(pLVX-USP2a组)质粒,经CDDO-Me处理后,采用Western blotting检测β-catenin和TRAF6的蛋白水平,流式细胞术检测细胞周期以及台盼蓝拒染法检测活细胞数。结果·CDDO-Me在体外可以抑制USP2a活性,50%抑制浓度为3.84μmol/L。分子对接分析结果显示,CDDO-Me可以和USP2a的His456残基之间形成氢键,和Phe409、Tyr514残基之间具有疏水相互作用。CETSA实验结果显示,CDDO-Me能够和3种TNBC细胞中的USP2a蛋白结合。Western blotting结果显示,CDDO-Me可以下调USP2a底物β-catenin和TRAF6的蛋白水平,而相同浓度的CDDO-Me处理USP2a过表达的MDA-MB-468细胞,发现β-catenin和TRAF6蛋白水平未出现明显降低。CDDO-Me呈剂量依赖性抑制TNBC细胞的增殖,使细胞发生caspase3活化和PARP1的剪切并且导致细胞出现S期和G2/M期阻滞。与pLVX组相比,pLVX-USP2a组活细胞数目更多,细胞也未出现周期阻滞。结论·CDDO-Me可以抑制TNBC细胞中USP2a的活性,并且抑制TNBC细胞的增殖,诱导其凋亡。

关键词：甲基巴多索隆泛素特异性蛋白酶2a 三阴性乳腺癌泛素特异性蛋白酶抑制剂筛选系统 β连环素肿瘤坏死因子受体相关蛋白6

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岩藻黄素在振荡剪切应力致EPCs功能改变及衰老中的影响作用

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中国海洋药物 2020年第5期39卷 38-44页

作者：贺燕婷李振凤崔星慧于洁王美月成敏张晓芸崔晓栋潍坊医学院基础医学院医学生理学实验室山东潍坊261053 潍坊医学院医学研究实验中心山东潍坊261053

目的探讨岩藻黄素(Fucoxanthin,FUCO)对振荡剪切应力作用下内皮祖细胞(Endothelial progenitor cells,EPCs)生物学功能及细胞衰老的影响作用。方法采用Flexcell STR-4000平行板流动系统模拟体内扰动流剪切应力(振荡剪切应力,Oscillatory... 详细信息

目的探讨岩藻黄素(Fucoxanthin,FUCO)对振荡剪切应力作用下内皮祖细胞(Endothelial progenitor cells,EPCs)生物学功能及细胞衰老的影响作用。方法采用Flexcell STR-4000平行板流动系统模拟体内扰动流剪切应力(振荡剪切应力,Oscillatory shear stress,OSS,±4 dynes/cm^2,1 Hz)并加载于EPCs;利用结晶紫染色法观察OSS作用后EPCs的形态学改变;应用Boyden小室、自发性细胞贴壁及Matrigel基质胶分别检测细胞迁移、黏附和体外血管形成能力的变化;采用Western blot检测促沉默信息调节因子1(Silent mating type information regulation 2 homolog-1,SIRT1)蛋白和β-半乳糖苷酶法检测细胞衰老程度的改变;通过Dihydroethidium(DHE)荧光探针法检测细胞内超氧化物阴离子。结果与静态培养组相比,OSS导致EPCs形态学发生明显改变,表现为细胞长宽比降低,细胞之间间距增加;而FUCO对OSS导致的EPCs形态学改变无显著影响作用;与OSS处理组相比,FUCO可显著促进EPCs的迁移(10.00±1.73 vs 21.00±2.65)、黏附(8.00±1.00 vs 20.00±1.73)及体外血管形成能力(8538.67±1231.47 vs 11009.33±570.08)。进一步研究发现,FUCO可降低OSS导致的β-半乳糖苷酶阳性细胞比例(21.18%±1.38%vs 12.69%±3.94%)以及促进SIRT1蛋白表达上调;同时,FUCO可减弱OSS诱导的EPCs胞内超氧阴离子的产生(P<0.05)。结论FUCO可缓解OSS环境下引发的EPCs细胞功能降低、细胞衰老的发生,提示其可有效提升内源性EPCs的血管修复能力。

关键词：岩藻黄素振荡剪切应力细胞衰老活性氧内皮祖细胞

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以髓系肉瘤合并皮肌炎为初发表现的急性早期前体T淋巴细胞白血病1例

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同济大学学报（医学版） 2023年第5期44卷 773-776页

作者：王莹莹周世颖胡月梅罗浩翁巍上海交通大学医学院病理生理学系细胞分化与凋亡教育部重点实验室上海2000252 上海交通大学医学院附属同仁医院输血科上海200336 上海交通大学医学院附属同仁医院病理科上海200336 潍坊医学院基础医学院临床病理系山东潍坊261053

急性早期前体T淋巴细胞白血病(early T-cell precursor acute lymphoblastic leukemia,ETP-ALL)属于早期非成熟的急性T淋巴细胞白血病(T-cell acute lymphoblastic leukemia,T-ALL),其肿瘤细胞即早期前体T细胞为早期从骨髓迁移至胸腺的胸腺细胞亚群,表达丰富的T系、干细胞和髓系相关的转录物,保留着多能分化潜能,是一种成熟阻滞、分化很差的干细胞白血病[1]。

关键词：早期前体T淋巴细胞白血病皮肌炎髓系肉瘤

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长链非编码RNA核旁斑组装转录本1(NEAT1)在免疫相关性疾病中的研究进展

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细胞与分子免疫学杂志 2020年第12期36卷 1141-1144页

作者：张鑫任启伟董冠军潍坊医学院医学检验学院潍坊医学院临床检验诊断学山东省“十二五”高校重点实验室山东潍坊261053 济宁医学院基础医学院病理生理学教研室山东济宁272067 济宁医学院基础医学院免疫学与分子医学研究所泰山学者实验室山东济宁272067

严格调控免疫反应是有效清除病原体和防止过度炎症的基础。核旁斑组装转录本1(NEAT1)是近年来被广泛关注的参与调控免疫反应的长链非编码RNA。已证实,NEAT1在免疫相关性疾病中异常表达(多数是上调),如脓毒症、炎症性肠病、自身免疫性疾... 详细信息

严格调控免疫反应是有效清除病原体和防止过度炎症的基础。核旁斑组装转录本1(NEAT1)是近年来被广泛关注的参与调控免疫反应的长链非编码RNA。已证实,NEAT1在免疫相关性疾病中异常表达(多数是上调),如脓毒症、炎症性肠病、自身免疫性疾病及病毒感染。然而,其在疾病发病进程的作用却错综复杂。在机制上,主要作为微小RNA(miRNA)海绵来抑制miRNA与目标mRNA之间的相互作用,也可以影响核旁斑介导的基因表达调控。我们总结了NEAT1在免疫相关性疾病中的表达变化及作用,重点分析其调控免疫细胞分化和功能的机制,为人们理解NEAT1在免疫相关性疾病中的作用提供理论依据。

关键词：核旁斑组装转录本1(NEAT1) 感染炎症自身免疫性疾病综述

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国内研究人员对动物实验设计方法与报告标准认知情况的调查

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中国循证心血管医学杂志 2019年第1期11卷 17-23页

作者：张婷廖绪亮李博拜争刚刘雅莉赵霏陈红梅马彬兰州大学循证医学中心兰州大学基础医学院兰州730000 甘肃省循证医学与临床转化重点实验室兰州730000 首都医科大学附属北京中医医院/北京市中医研究所北京100010 南京理工大学循证社会科学与健康融合发展研究中心公共事务学院南京210094 首都医科大学附属北京儿童医院临床流行病学与循证医学中心北京100045 西北民族大学医学院兰州730030 兰州大学基础医学院医学生理学与心理学研究所兰州730000

目的了解SYRCLE动物实验风险评估工具和动物实验研究报告标准(ARRIVE指南和GSPC清单)在国内动物实验基础研究领域相关科研人员中的认知率和实际应用情况。方法采用自行设计的问卷在全国范围内对动物实验基础研究人员进行调查,调查内容... 详细信息

目的了解SYRCLE动物实验风险评估工具和动物实验研究报告标准(ARRIVE指南和GSPC清单)在国内动物实验基础研究领域相关科研人员中的认知率和实际应用情况。方法采用自行设计的问卷在全国范围内对动物实验基础研究人员进行调查,调查内容包括调查对象基本信息、SYRCLE动物实验偏倚风险工具、ARRIVE指南和GSPC清单的认知率、动物实验偏倚风险控制因素认知率、已发表动物实验研究的报告现状等。采用Epi Data 3.1软件进行数据录入,Excel(Microsoft Excel 2013)进行统计描述,对分类资料采用例数(n)和百分比(%)进行统计描述,组间(研究生vs.高校教师/医生/研究人员)比较采用卡方检验。结果共发放问卷298份,回收272份,其中有效问卷266份(包括研究生118人、高校教师/医生/研究人员148人)。SYRCLE动物实验偏倚风险工具知晓率仅为15.8%,组间差异有统计学意义(P=0.003),大部分被调查者认为其条目1(85.7%,228/266)和条目8(81.6%,217/266)非常必要,超过半数的被调查者认为其条目3(78.9%,210/266)、条目6(59.4%,158/266)和条目7(64.7%,172/266)非常必要,低于半数的被调查者认为其条目2(40.2%,107)、条目4(30.8%,82/266)、条目5(41.4%,110/266)、条目9(49.6%,132)非常必要。ARRIVE指南和GSPC清单知晓率分别仅为9.4%和9.0%,且58.6%的被调查者认为当前已发表的动物实验相关文献存在报告不充分问题,且组间差异有统计学意义(P=0.004)。此外,大部分被调查者(77.4%,206/266)听说过系统评价/Meta分析这种研究方法,仅1/3左右的人阅读过动物实验系统评价/Meta分析研究,开展/参与和发表过动物实验系统评价/Meta分析研究的人则更少(6.0%,16/266;4.1%,11/266)。结论国内基础医学科研人员对SYRCLE动物实验风险评估工具、ARRIVE指南和GSPC清单的知晓率均较低,实际应用率更低。因此,我们建议有必要采取针对性措施推广与普及这些标准和规范,并尽快在国内相关期刊的"稿约"中的引入这些标准和规范,以提高研究人员、期刊编辑等对其的知晓率,最终促进动物实验方法和报告质量的提升。

关键词：动物实验风险评估工具 ARRIVE指南 GSPC清单动物实验调查

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循证构建动物实验系统评价制作流程

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中国循证医学杂志 2017年第11期17卷 1357-1364页

作者：许家科赵璐璐廖绪亮王欢闫琼武凯楠谢晔赵梦娜魏晨如侯皓中肖政赵霏陈红梅刘雅莉姜彦彪马彬兰州大学循证医学中心兰州大学基础医学院兰州730000 兰州大学第一临床医学院兰州730000 遵义医学院附属医院遵义医学院循证医学中心循证医学教育部网上合作研究中心遵义医学院分中心贵州遵义563000 西北民族大学医学院兰州730030 兰州大学基础医学院医学生理学与心理学研究所兰州730000 甘肃省循证医学与临床转化重点实验室兰州730000

目前,动物实验系统评价已成为整合动物实验结果、改善动物实验质量和指导临床研究的新趋势和重要手段。但已发表的动物实验系统评价在设计和实施过程均存在较多问题。因此,急需一个设计科学、实施规范的系统评价标准流程以提高动物实验... 详细信息

目前,动物实验系统评价已成为整合动物实验结果、改善动物实验质量和指导临床研究的新趋势和重要手段。但已发表的动物实验系统评价在设计和实施过程均存在较多问题。因此,急需一个设计科学、实施规范的系统评价标准流程以提高动物实验系统评价的质量。本文将详细介绍动物实验系统评价制作流程,以推动国内高质量动物实验系统评价的开展。

关键词：系统评价 Meta分析动物实验

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侏儒大鼠海马组织GH/IGF1及其受体的表达与正常大鼠有差别吗

侏儒大鼠海马组织GH/IGF1及其受体的表达与正常大鼠有差别吗

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中国生理学会内分泌代谢专业委员会2015年学术会议

作者：高伊媚赵钊赵芳毓杨帆沈艳许晓雅陈桃香宋健万瑜武汉大学基础医学院医学生理学系湖北武汉430071 武汉大学基础医学院解剖学系湖北武汉430071 武汉大学海外学者开放实验室湖北武汉430071 武汉大学基础医学院医学生理学系湖北武汉430071 武汉大学海外学者开放实验室湖北武汉430071

前言：人和动物在幼年期若垂体GH分泌不足,将引起循环血中GH、IGF-1明显缺乏,最终导致躯体侏儒,但侏儒患者认知功能基本正常,并不像甲状腺激素缺乏那样又小又"呆"。先前认为这是由于GH并不影响中枢神经系统的发育和功能。果... 详细信息

前言：人和动物在幼年期若垂体GH分泌不足,将引起循环血中GH、IGF-1明显缺乏,最终导致躯体侏儒,但侏儒患者认知功能基本正常,并不像甲状腺激素缺乏那样又小又"呆"。先前认为这是由于GH并不影响中枢神经系统的发育和功能。果真如此？为探究其中的奥秘,本研究选用不同年龄(0m、21d、3m、10m、20m、30m)的Lewis侏儒(dwarf, DW)大鼠,以同系野生型(wild type,WT)大鼠作为对照,针对与认知功能密切相关的脑区—海马,比较GH、IGF-1及其受体(GHR,IGF-1R)在生长发育、衰老退化各个阶段中的变化。方法：实验采用qPCR和Western Blot分别检测海马、垂体的GH、GHR、IGF-1、IGF-1R以及肝脏组织GHR和IGF-1的mRNA与蛋白表达;采用酶联免疫法(ELISA)检测血清IGF-1水平。

关键词：侏儒大鼠海马 GH IGF-1 GHR IGF-1R

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