背景与目的:越来越多的研究表明,序列相似性为83的家族成员A(family with sequence similarity 83 member A,FAM83A)与肿瘤的侵袭和转移相关,但FAM83A在肺腺癌中的作用尚不清楚。探讨FAM83A在肺腺癌组织中的表达情况,与肺腺癌患者预后...
详细信息
背景与目的:越来越多的研究表明,序列相似性为83的家族成员A(family with sequence similarity 83 member A,FAM83A)与肿瘤的侵袭和转移相关,但FAM83A在肺腺癌中的作用尚不清楚。探讨FAM83A在肺腺癌组织中的表达情况,与肺腺癌患者预后的关系以及对肺腺癌细胞增殖、侵袭转移能力的影响。方法:运用人类蛋白质图谱(Human Protein Atlas,HPA)和基因表达谱动态分析(Gene Expression Profiling Interactive Analysis,GEPIA)数据库分析并选取与肺腺癌预后相关的基因;运用UALCAN和GEPIA数据库研究FAM83A的表达量对肺腺癌生存率的影响;采用UALCAN数据库分析FAM83A在肺腺癌组织中的表达及其与肺腺癌患者的性别、淋巴结的分期和转移的关系;采用蛋白质印迹法(Western blot)检测人正常肺上皮细胞BEAS-2B和肺腺癌细胞A549中FAM83A蛋白的表达情况及FAM83A的转染效率;采用细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检测转染后敲减FAM83A对肺腺癌细胞增殖能力的影响;采用transwell侵袭实验检测FAM83A对肺腺癌细胞侵袭能力的影响。结果:采用HPA、GEPIA和UALCAN数据库分析发现高表达的FAM83A与肺腺癌不良预后相关且FAM83A在肺腺癌组织中高表达,差异有统计学意义(P<0.05);FAM83A的表达与肺腺癌的临床分期和淋巴结转移相关;Western blot检测结果显示,FAM83A在肺腺癌细胞中高表达且敲减质粒转染成功;CCK-8细胞增殖实验结果提示FAM83A可促进细胞的增殖能力(P<0.05);Transwell侵袭实验提示FAM83A促进A549的侵袭能力(P<0.05)。结论:FAM83A在肺腺癌组织和细胞中高表达且促进肺腺癌细胞的增殖、侵袭和转移。
吞噬和细胞活力蛋白1(engulfment and cell motility protein 1,ELMO1)可以促进多种癌细胞的侵袭和转移,但ELMO1的表达是否受miRNA的调控鲜有研究。本研究旨在探讨miR-145与ELMO1表达的相关性,以及miR-145通过结合ELMO1的mRNA对乳腺癌...
详细信息
吞噬和细胞活力蛋白1(engulfment and cell motility protein 1,ELMO1)可以促进多种癌细胞的侵袭和转移,但ELMO1的表达是否受miRNA的调控鲜有研究。本研究旨在探讨miR-145与ELMO1表达的相关性,以及miR-145通过结合ELMO1的mRNA对乳腺癌侵袭的影响。通过TargetScan(http://***/)靶基因预测软件预测与ELMO1的3′UTR结合的miR-145。荧光素酶结果证实两者互补结合。Transwell侵袭结果显示,miR-145组和siELMO1+miR-145组MDA-231乳腺癌细胞穿膜数较对照组分别降低40%(P<005)和79%(P<005)。siELMO1+miR-145组和siELMO1组细胞穿膜数则无显著差异(P>005)。结果提示,miR-145通过与ELMO1的mRNA结合抑制细胞侵袭。qRT-PCR显示,低侵袭的MCF-7乳腺癌细胞miR-145的表达量较高侵袭的MDA-435细胞高80%(P<005),较MDA-231乳腺癌细胞高75%(P<005),即miR-145与癌细胞侵袭能力呈负相关。Western印迹结果表明,miR-145组ELMO1表达量低于阴性对照组,miR-145抑制组ELMO1表达量高于抑制剂NC组(P<005),证明miR-145抑制ELMO1的表达。qRTPCR显示,过表达miR-145后ELMO1 mRNA含量与对照组无显著差异(P>005)。结果提示,miR-145对ELMO1的调控作用通过抑制其翻译实现。F-肌动蛋白聚合实验表明,miR-145组和阴性对照组于20 s和60 s时F-肌动蛋白聚合结果存在明显区别(P<005)。Western印迹结果表明,miR-145组活化的Rac1表达量较阴性对照组降低60%(P<005),抑制剂NC组活化的Rac1较miR-145抑制组降低55%(P<005);miR-145组磷酸化的整合素β1较对照组于15 min时降低42%(P<005),于30 min时降低31%(P<005)。由此得出的miR-145过表达显著促进乳腺癌细胞F-肌动蛋白聚合、Rac1活化和整合素β1磷酸化结论。综上所述,miR-145通过靶向ELMO1的mRNA抑制ELMO1翻译,从而抑制乳腺癌的侵袭。
为研究香椿子正丁醇提取物(n-butyl alcohol extract of Toona sinensis,NBAE)对糖尿病肾病肾小球内皮细胞炎症的作用及机制,采用Wistar雄性大鼠,STZ注射造模,成功后分为DN组、DN+NBAE干预组,另设对照组。8周后取血测生化指标,取肾脏行H...
详细信息
为研究香椿子正丁醇提取物(n-butyl alcohol extract of Toona sinensis,NBAE)对糖尿病肾病肾小球内皮细胞炎症的作用及机制,采用Wistar雄性大鼠,STZ注射造模,成功后分为DN组、DN+NBAE干预组,另设对照组。8周后取血测生化指标,取肾脏行HE和PAS染色,并行免疫组化检测MCP-1、ICAM-1、磷酸化p65的表达。以高糖(HG)、HG+NBAE、HG+NF-κB阻断剂吡咯烷二硫基甲酸盐(pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC)刺激肾小球内皮细胞,采用Western blot法检测相关蛋白的表达。结果显示,与DN组大鼠相比,DN+NBAE组大鼠血糖明显降低,肾脏损伤减轻,相关蛋白表达均减少。细胞水平,NBAE明显降低MCP-1、ICAM-1的表达,差异具有统计学意义(P <0. 01),各指标改变情况与PDTC处理组类似。这表明NBAE明显改善DN肾小球内皮细胞的炎症,推测可能与抑制NF-κB信号通路有关。
暂无评论