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东南大学学报（医学版） 2017年第6期36卷 897-900页

作者：霍小蕾韩玲娜裴振张毅强长治医学院组织胚胎教研室山西长治046000

目的:观察香菇多糖联合紫杉醇对食管癌细胞形态及功能的影响。方法:取人EC-109食管癌细胞,分为对照组、紫杉醇组及观察组(紫杉醇联合香菇多糖),培养24 h后光镜观察细胞形态,检测细胞凋亡、黏附及迁移率。结果:在适宜浓度下,紫杉醇组和... 详细信息

目的:观察香菇多糖联合紫杉醇对食管癌细胞形态及功能的影响。方法:取人EC-109食管癌细胞,分为对照组、紫杉醇组及观察组(紫杉醇联合香菇多糖),培养24 h后光镜观察细胞形态,检测细胞凋亡、黏附及迁移率。结果:在适宜浓度下,紫杉醇组和观察组的细胞均出现回缩、变圆,有漂浮死亡细胞出现,并且观察组细胞坏死程度大于紫杉醇组;细胞凋亡率观察组显著高于紫杉醇组(P<0.05);细胞黏附率及细胞迁移率观察组均显著低于紫杉醇组(P<0.05)。结论:香菇多糖可以增强紫杉醇的抗肿瘤能力,两者联合可以显著增加食管癌细胞的凋亡,抑制与肿瘤转移相关的细胞黏附和迁移能力。

关键词：香菇多糖紫杉醇食管癌细胞凋亡迁移黏附

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C3H1型锌指结合蛋白36介导的星形胶质细胞活化在肌萎缩侧索硬化症运动神经元退变中的作用

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解剖学报 2022年第3期53卷 273-280页

作者：丁康张烽萍齐高秀林盟陈敏陈燕春郭章玉周风华管英俊潍坊医学院基础医学院临床病理系潍坊医学院附属医院病理科潍坊医学院基础医学院组织学与胚胎学教研室山东省神经疾病与再生修复重点实验室山东潍坊261053

目的探讨C3H1型锌指结合蛋白36(ZFP36L1)介导的星形胶质细胞活化在肌萎缩侧索硬化症(ALS)运动神经元退变中的作用。方法以铜锌超氧化物歧化酶1(SOD1)-G93A转基因小鼠作为动物模型,同窝野生型小鼠作为对照(突变型及野生型小鼠各时间点分... 详细信息

目的探讨C3H1型锌指结合蛋白36(ZFP36L1)介导的星形胶质细胞活化在肌萎缩侧索硬化症(ALS)运动神经元退变中的作用。方法以铜锌超氧化物歧化酶1(SOD1)-G93A转基因小鼠作为动物模型,同窝野生型小鼠作为对照(突变型及野生型小鼠各时间点分别取13只小鼠);Real-time PCR、Western blotting检测小鼠发病早期、中期及晚期脊髓内ZFP36L1 mRNA及蛋白变化,免疫荧光染色检测ZFP36L1在脊髓内的表达及分布;出生后1~2 d新生小鼠15只,建立SOD1-G93A突变型原代星形胶质细胞模型,Real-time PCR、Western blotting检测星形胶质细胞内ZFP36L1 mRNA及蛋白水平的变化,si-ZFP36L1转染SOD1-G93A突变型原代星形胶质细胞,Western blotting检测转染效率,Western blotting及ELISA检测转染后星形胶质细胞分泌炎性因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素18(IL-18)变化;沉默SOD1-G93A突变型原代星形胶质细胞内ZFP36L1后,与SOD1-G93A突变型NSC34细胞共培养,通过5’-乙炔基-2’-脱氧尿苷(EdU)实验和观察增殖细胞核抗原(PCNA)的水平明确ZFP36L1对NSC34细胞增殖的影响,通过TUNEL实验及观察剪切Caspase-3(cleaved-Caspase-3)的水平明确ZFP36L1对NSC34细胞凋亡的影响,以转染空白小干扰RNA(siRNA)作为对照组。结果与野生型小鼠相比,ZFP36L1在SOD1-G93A转基因小鼠脊髓组织内mRNA及蛋白水平均下调,在野生型小鼠脊髓组织内,ZFP36L1主要与β-微管蛋白Ⅲ(β-tubulinⅢ)阳性的神经元共表达,而SOD1-G93A突变型小鼠的脊髓组织内,ZFP36L1在神经元内表达减弱,与胶质纤维酸性蛋白(GFAP)标记的星形胶质细胞共表达明显增加;SOD1-G93A突变型原代星形胶质细胞内ZFP36L1表达增加,si-ZFP36L1能明显降低SOD1-G93A突变型原代星形胶质细胞内ZFP36L1水平;沉默ZFP36L1后星形胶质细胞分泌炎性因子TNF-α、IL-18明显降低。此外,沉默ZFP36L1后,SOD1-G93A突变型原代星形胶质细胞能显著增强NSC34细胞增殖活性,抑制NSC34细胞凋亡。结论在ALS发病过程中,星形胶质细胞被激活,ZFP36L1通过星形胶质细胞分泌的炎性因子促进了ALS运动神经元的退变。

关键词：肌萎缩侧索硬化症 C3H1型锌指结合蛋白36 炎性因子运动神经元星形胶质细胞免疫荧光转基因小鼠

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突触体素、S-100蛋白、NSE免疫反应神经纤维在人淋巴结的分布

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中国组织化学与细胞化学杂志 2000年第3期9卷 302-304,W001页

作者：吕世军刘雨清张伟栋黄岩张式暖郭爱华吴洪娟孙永红潍坊医学院病理学教研室山东261042 潍坊医学院组织胚胎学教研室山东261042

探讨突触体素、 S- 10 0蛋白、 NSE免疫反应神经纤维在人淋巴结的分布 ,为淋巴结的神经免疫相互作用提供形态学资料。应用免疫组织化学 ABC法观察人类腹股沟、腋窝、肠系膜、肺等淋巴结 40例 ,10 %福尔马林固定 ,石蜡包埋组织切片。结... 详细信息

探讨突触体素、 S- 10 0蛋白、 NSE免疫反应神经纤维在人淋巴结的分布 ,为淋巴结的神经免疫相互作用提供形态学资料。应用免疫组织化学 ABC法观察人类腹股沟、腋窝、肠系膜、肺等淋巴结 40例 ,10 %福尔马林固定 ,石蜡包埋组织切片。结果显示 :突触体素、 S- 10 0蛋白、 NSE免疫反应神经纤维呈细丝状沿被膜和门部结缔组织小梁及血管进入皮质后主要分布于副皮质区 ,环绕淋巴小结 ,进一步分支到达髓质。同时在淋巴小结生发中心及副皮质区有 S- 10 0蛋白免疫反应阳性细胞。在髓质髓窦内有 NSE免疫反应阳性细胞。结论 :淋巴结内有突触体素、 S- 10 0蛋白、 NSE免疫反应神经纤维的支配 ,并有 S- 10 0蛋白、 NSE免疫反应阳性细胞 ,为淋巴结的神经免疫相互作用提供形态学资料。

关键词：突触体素 S-100蛋白 NSE免疫反应神经纤维淋巴结分布神经免疫相互作用神经特异性烯醇化酶免疫组织化学

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Wnt-1、Fzd-1在环磷酰胺致大鼠神经管畸形发生中的表达变化

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中国组织化学与细胞化学杂志 2015年第2A期23卷 120-123页

作者：赵春艳管英俊陈燕春高海玲潍坊医学院组织胚胎学教研室山东261053

目的观察Wnt-1、Fzd-1在环磷酰胺致大鼠神经管畸形发生中的表达变化,探讨神经管畸形的发生机制。方法将孕鼠随机分为实验组和对照组,孕13d8:00AM按15mg/kg体重分别腹腔注射环磷酰胺和生理盐水。注射后8、12、24、48h取胎鼠,制备石蜡连... 详细信息

目的观察Wnt-1、Fzd-1在环磷酰胺致大鼠神经管畸形发生中的表达变化,探讨神经管畸形的发生机制。方法将孕鼠随机分为实验组和对照组,孕13d8:00AM按15mg/kg体重分别腹腔注射环磷酰胺和生理盐水。注射后8、12、24、48h取胎鼠,制备石蜡连续切片。用免疫荧光技术检测Wnt-1、Fzd-1的表达变化。结果注射后8、12h,实验组Wnt-1、Fzd-1的表达与对照组相比无显著性差异;24、48h,Wnt-1、Fzd-1的表达强度均比对照组低,差异有统计学意义。结论环磷酰胺抑制Wnt-1、Fzd-1的表达,干扰Wnt经典通路的传导,是环磷酰胺致神经管畸形的原因之一。

关键词：环磷酰胺神经管畸形 Wnt-1 Fzd-1

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浅谈神经干细胞在临床应用中的伦理问题

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医学与哲学 2005年第11X期26卷 40-42页

作者：王晓萃吴金生付文玉陈金红陈燕春潍坊医学院组织与胚胎学教研室山东潍坊261042 潍坊医学院附属医院泌尿外科山东潍坊261041 潍坊医学院

神经干细胞在治疗中枢神经系统退形性病变中发挥重要作用,但在其移植治疗中也面临着一些问题,例如伦理问题及技术问题。如何合理地引导人们正确地认识这项研究,消除对神经干细胞移植治疗的种种误解,使全社会都能客观理性地面对这一新兴... 详细信息

神经干细胞在治疗中枢神经系统退形性病变中发挥重要作用,但在其移植治疗中也面临着一些问题,例如伦理问题及技术问题。如何合理地引导人们正确地认识这项研究,消除对神经干细胞移植治疗的种种误解,使全社会都能客观理性地面对这一新兴医疗技术,看到这一技术的巨大应用前景是我们要继续努力的目标。

关键词：神经干细胞移植刘占床应用克隆

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山柰酚通过mTOR通路诱导细胞自噬保护帕金森病模型小鼠多巴胺能神经元

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中药新药与临床药理 2022年第4期33卷 446-453页

作者：刘展蔡美云庄文欣吕娥吴正艳王虹玉宋乐乐付文玉潍坊医学院基础医学院组织学与胚胎学教研室山东潍坊261053 潍坊医学院医学研究实验中心山东潍坊261053 潍坊医学院生物技术专业山东潍坊261053

目的探讨山柰酚通过抑制哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路诱导细胞自噬,发挥对帕金森病模型小鼠黑质多巴胺能神经元的保护作用机制。方法将24只C57BL/6J雄性小鼠随机分为对照组、模型组、山柰酚组。山柰酚组小鼠按50 mg·kg^(... 详细信息

目的探讨山柰酚通过抑制哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路诱导细胞自噬,发挥对帕金森病模型小鼠黑质多巴胺能神经元的保护作用机制。方法将24只C57BL/6J雄性小鼠随机分为对照组、模型组、山柰酚组。山柰酚组小鼠按50 mg·kg^(-1)剂量灌胃给药,每日1次,连续14 d,对照组、模型组给予等体积生理盐水。于灌胃第9天采用腹腔注射MPTP(25 mg·kg^(-1))法建立帕金森病小鼠模型,连续造模5 d。采用爬杆实验和悬挂实验检测小鼠的行为学变化;采用透射电镜观察小鼠黑质多巴胺能神经元的超微结构改变;采用免疫组织化学法检测小鼠黑质酪氨酸羟化酶(TH)、自噬微管相关蛋白轻链3(LC3)、自噬效应蛋白(Beclin-1)、泛素结合蛋白(p62)的表达;采用Western Blot法检测小鼠黑质TH、Beclin-1、LC3、p62、活化半胱氨酸蛋白酶3(cleaved Caspase-3)、mTOR、p-mTOR的蛋白表达水平。结果与正常组比较,模型组小鼠的调头时间和爬杆总时间均明显延长(P<0.05,P<0.01),悬挂总积分明显降低(P<0.05);黑质多巴胺能神经元内线粒体内有空泡样变性;黑质内TH、Beclin-1、LC3蛋白表达明显下调(P<0.05,P<0.01),p62、cleaved Caspase-3、p-mTOR/mTOR蛋白表达明显上调(P<0.05,P<0.01)。与模型组相比,山柰酚组小鼠的调头时间和爬杆总时间明显缩短(P<0.05),悬挂总积分明显升高(P<0.05);多巴胺能神经元核膜及线粒体受损显著改善,胞内可见自噬体;黑质内细胞TH、Beclin-1、LC3蛋白表明显上调(P<0.05,P<0.01),p62、cleaved Caspase-3、p-mTOR/mTOR蛋白表达明显下调(P<0.05,P<0.01)。结论山柰酚可能通过抑制mTOR信号通路诱导细胞自噬发挥对多巴胺能神经元的保护作用。

关键词：山柰酚细胞自噬多巴胺能神经元哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路帕金森病小鼠

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肌萎缩侧索硬化症转基因小鼠脊髓中自噬相关基因ATG5表达降低

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中国组织化学与细胞化学杂志 2016年第2期25卷 107-111页

作者：刘永新管英俊陈燕春王巧真接琳琳周风华张皓云卢强潍坊医学院组织学与胚胎学教研室潍坊261053 潍坊医学院人体解剖学教研室潍坊261053 潍坊医学院病理学教研室潍坊261053

目的明确自噬相关基因ATG5在肌萎缩侧索硬化症(amyotrophic lateral sclerosis,ALS)转基因鼠脊髓中的表达情况.方法取95d、108d和122d ALS转基因小鼠和野生型小鼠脊髓,应用免疫荧光、Western blot和RT-PCR技术,检测ATG5在脊髓中的表达.... 详细信息

目的明确自噬相关基因ATG5在肌萎缩侧索硬化症(amyotrophic lateral sclerosis,ALS)转基因鼠脊髓中的表达情况.方法取95d、108d和122d ALS转基因小鼠和野生型小鼠脊髓,应用免疫荧光、Western blot和RT-PCR技术,检测ATG5在脊髓中的表达.结果免疫荧光染色检测显示,在脊髓内,ATG5免疫反应产物主要定位于神经元;与同窝野生型小鼠比较,脊髓内ATG5免疫反应性在95d转基因小鼠无明显差异,而在108d和122d转基因小鼠明显降低.Western blot和RT-PCR分析显示,与同窝野生型小鼠比较,脊髓内ATG5 mRNA和蛋白表达水平在95d无明显变化,但在108d和122d时,转基因小鼠脊髓内ATG5 mRNA和蛋白表达均显著低于同窝野生型小鼠.结论ATG5在ALS转基因鼠脊髓中表达降低,提示ATG5表达异常与ALS发生密切相关.

关键词：肌萎缩侧索硬化症转基因小鼠自噬 ATG5 脊髓

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香椿子多酚通过抑制P38MAPK信号通路减轻帕金森病大鼠的神经炎症反应

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细胞与分子免疫学杂志 2019年第9期35卷 794-799页

作者：庄文欣陈超马一闻宋乐乐吕娥付文玉潍坊医学院医学研究实验中心山东潍坊261053 潍坊医学院生物科学与技术学院山东潍坊261053 潍坊医学院组织学与胚胎学教研室山东潍坊261053

目的探讨香椿子多酚(PTSS)对帕金森病(PD)大鼠神经炎症的抑制作用及机制。方法成年雄性SD大鼠单侧纹状体内注射6-疑多巴胺(6-OHDA)造模。造模成功大鼠随机分为模型组、PTSS处理组,另设一组正常大鼠为对照组,每组10只。30 d后,采用阿朴吗... 详细信息

目的探讨香椿子多酚(PTSS)对帕金森病(PD)大鼠神经炎症的抑制作用及机制。方法成年雄性SD大鼠单侧纹状体内注射6-疑多巴胺(6-OHDA)造模。造模成功大鼠随机分为模型组、PTSS处理组,另设一组正常大鼠为对照组,每组10只。30 d后,采用阿朴吗啡(APO)腹腔注射诱导大鼠的旋转行为,检测各组大鼠的行为改变。免疫组织化学染色法观测各组大鼠黑质酪氨酸務化酶(TH)阳性的多巴胺(DA)能神经元、钙离子结合接头蛋白分子l(Ibal)阳性的小胶质细胞、胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)阳性的星形胶质细胞形态和数量变化;免疫组织化学染色法检测黑质诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、核因子KBp65(NF-KBp65)、P38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)和磷酸化的p38MAPK(p-p38MAPK)的表达;Western blot法检测大鼠黑质TH、GFAP、p38MAPK、p-p38MAPK蛋白水平。结果PTSS处理组大鼠的旋转圈数较模型组明显减少。模型组大鼠损毁侧黑质TH阳性细胞较对照组显著减少,PTSS处理后,TH阳性细胞数量以及蛋白表达明显增加。与对照组相比,模型组大鼠损毁侧黑质Ibal、GFAP、iNOS、NF-kB、p38MAPK和p-p38MAPK蛋白含量显著增加。PTSS处理后,上述蛋白的表达均明显减弱,蛋白含量显著降低。结论PTSS通过抑制p38MAPK信号通路,减少炎症因子的表达,对PD大鼠DA能神经元起保护作用。

关键词：香椿子多酚(PTSS) 神经炎症帕金森病大鼠黑质 p38MAPK通路

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露蜂房蛋白对急性髓细胞白血病患者骨髓单个核细胞超微结构的影响

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电子显微学报 2005年第1期24卷 65-68页

作者：辛先贵张圣明张春燕时彦吴洪娟潍坊医学院组织学与胚胎学教研室山东潍坊261042

目的:观察中药露蜂房蛋白(NVP)成份对急性髓细胞白血病(AML)患者骨髓单个核细胞(BMMNC)超微结构的影响。方法:采用体外细胞培养,加入不同浓度露蜂房蛋白成分作用于AML患者BMMNC,培养72h收集细胞,常规制备超薄切片,透射电子显微镜下观察... 详细信息

目的:观察中药露蜂房蛋白(NVP)成份对急性髓细胞白血病(AML)患者骨髓单个核细胞(BMMNC)超微结构的影响。方法:采用体外细胞培养,加入不同浓度露蜂房蛋白成分作用于AML患者BMMNC,培养72h收集细胞,常规制备超薄切片,透射电子显微镜下观察AML患者BMMNC的超微结构。结果:露蜂房蛋白各处理组细胞核染色质浓缩、边集,呈新月形或环状或细胞核碎裂呈块状。线粒体出现空泡样变及髓样变。结论:中药露蜂房蛋白成份有明显诱导AML患者体外培养BMMNC凋亡的作用,并呈现典型的细胞凋亡超微结构改变。

关键词：露蜂房患者 AML 蛋白超微结构急性髓细胞白血病骨髓单个核细胞镜下观察成份浓度

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皮肤组织教学石蜡切片的制作技术

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临床与实验病理学杂志 2015年第7期31卷 827-828页

作者：李璐吴民华陈景锋广东医学院组织胚胎教研室湛江524023 广东医学院药理教研室湛江524023

皮肤是人体最大的器官,覆盖于身体表面,由表皮和真皮构成,与皮下组织相连。由于皮肤层次丰富,结构复杂,质地坚韧,各层组织间的致密度不同,在制作教学切片中常出现皱褶、网状层松散、浅层出现碎裂等现象。为有效地解决这些问题,作者在实... 详细信息

皮肤是人体最大的器官,覆盖于身体表面,由表皮和真皮构成,与皮下组织相连。由于皮肤层次丰富,结构复杂,质地坚韧,各层组织间的致密度不同,在制作教学切片中常出现皱褶、网状层松散、浅层出现碎裂等现象。为有效地解决这些问题,作者在实际工作中通过实践,在制片方法上进行分析和改进,采用福尔马林-醋酸-乙醇（ FAA）固定后无需水洗直接投入70%无水乙醇中脱水,蜡带直接展片法,甲基乙烷溶液代替二甲苯透明、脱蜡,DPX封片剂代替中性树胶封片。实验结果表明,改进后的皮肤组织切片质量有所提高,现介绍如下。

关键词：皮肤组织固定脱蜡石蜡切片

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