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中国中药杂志 2023年第16期48卷 4381-4393页

作者：陈晓琳王雪纯白国玉赵一然曾浩元高澄枫李娜肖颖卞西清澳门科技大学中医药学院中药质量研究国家重点实验室中国澳门999078 澳门科技大学医学院中国澳门999078

该研究开发经典名方瓜蒌薤白半夏汤(Gualou Xiebai Banxia Decoction,GXBD)基准物质最优前处理技术,建立GXBD基准物质全面质量控制方法,为其整体质量评价提供参考。作者制备15批GXBD样品并创新性地采用基峰色谱图模式下的提取离子色谱... 详细信息

该研究开发经典名方瓜蒌薤白半夏汤(Gualou Xiebai Banxia Decoction,GXBD)基准物质最优前处理技术,建立GXBD基准物质全面质量控制方法,为其整体质量评价提供参考。作者制备15批GXBD样品并创新性地采用基峰色谱图模式下的提取离子色谱图建立液相色谱-质谱联用(LC-MS)指纹图谱,鉴别其特征峰,对其进行归属,并对指标性成分进行定量分析。15批GXBD样品的出膏率50.28%~76.20%。在正离子模式下,LC-MS指纹图谱共检测到12个共有特征峰,通过与对照品比对,鉴定了其中5个共有峰的结构,不同批次样品指纹图谱与对照指纹图谱的相似度在0.920~0.984。最后,采用液相色谱-三重四极杆质谱联用仪(LC-QQQ/MS)以多反应监测(MRM)模式对GXBD中8个指标性成分黑麦草内酯、金圣草黄素、芦丁、葫芦素D、薤白皂苷Ⅰ、25S-知母皂苷BⅡ、25R-知母皂苷BⅡ和五肽脯氨酸-色氨酸-缬氨酸-脯氨酸-甘氨酸(proline-tryptophan-valine-proline-glycine,PWVPG)进行了含量测定。该研究所建立的方法能降低复方中基质干扰,准确性、稳定性良好,具有较大实用价值,有效地反映出GXBD样品的质量属性,可用于GXBD全面整体的质量控制。

关键词：瓜蒌薤白半夏汤 LC-MS指纹图谱含量测定质量控制

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基于网络药理学探讨麻黄活性成分治疗血管痉挛的作用机制

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中国畜牧兽医 2024年第6期51卷 2680-2696页

作者：武博文颜培宇武密山澳门科技大学中医药学院中国澳门999078 澳门科技大学中药质量研究国家重点实验室中国澳门999078

【目的】运用网络药理学和体外细胞试验探究麻黄活性成分治疗血管痉挛的相关分子机制。【方法】从中药系统药理学数据库及分析平台(TCMSP)、SwissTargetPrediction和PharMapper数据库获取麻黄的主要活性成分及作用靶点,通过DrugBank、Ge... 详细信息

【目的】运用网络药理学和体外细胞试验探究麻黄活性成分治疗血管痉挛的相关分子机制。【方法】从中药系统药理学数据库及分析平台(TCMSP)、SwissTargetPrediction和PharMapper数据库获取麻黄的主要活性成分及作用靶点,通过DrugBank、GeneCards、OMIM数据库获取疾病靶点,取交集得到药物成分-疾病交集靶点。利用STRING数据库进行蛋白-蛋白互作(PPI)分析,通过Cytoscape 3.9.1软件筛选得到核心靶点与核心成分。采用Metascape平台进行GO功能与KEGG通路富集分析,AutoDock Vina平台进行分子对接。在此基础上,通过MTT法检测麻黄活性成分对血管紧张素Ⅱ所致血管平滑肌细胞(vSMCs)增殖影响的机制。【结果】麻黄的有效活性成分主要包括木犀草素、槲皮素、β-槲皮素、圣草酚、柚皮素、豆甾醇、山柰酚等,这些药物成分主要作用靶点488个,血管痉挛的相关靶点394个。麻黄防治血管痉挛有67个预测靶点,主要包括基质金属肽酶Ⅸ(MMP9)、MMP2、血管紧张素Ⅱ受体1型(AGTR1)、丝裂原活化蛋白激酶1(MAPK1)、血管内皮生长因子A(VEGFA)、表皮生长因子受体(EGFR)、一氧化氮合酶2(NOS2)等。对上述67个靶点进行富集分析发现,与正向调节细胞迁移、对外来刺激反应、对缺氧反应、血管生成正向调节等生物过程,等离子体膜、突触后膜、突触前膜、树突、膜筏、轴突末端等细胞组分,RNA聚合酶Ⅱ转录因子活性、配体激活序列特异性DNA结合、丝氨酸型内肽酶活性、肽链内切酶活性、酶结合、锌离子结合等分子功能,以及钙信号通路、血管平滑肌收缩、松弛素信号通路、磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B信号通路(PI3K-Akt)、鞘脂类信号通路等途径相关。分子对接结果表明,麻黄主要活性成分木犀草素、槲皮素与关键靶点MMP2和MMP9结合具有稳定构象。体外试验结果表明,麻黄活性成分木犀草素能抑制血管紧张素Ⅱ所致vSMCs增殖,其机制可能与其抑制MAPK1信号转导通路的活化有关。【结论】麻黄多种活性成分通过作用于MMP2、MMP9、血管紧张素Ⅰ转化酶(ACE)、NOS2等靶点治疗血管痉挛,本研究结果为麻黄活性成分治疗血管痉挛的作用机制研究提供了科学参考。

关键词：麻黄网络药理学分子对接血管痉挛细胞增殖血管平滑肌细胞血管紧张素Ⅱ

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乳香有效成分治疗冠心病的作用机制研究进展

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中草药 2023年第16期54卷 5379-5389页

作者：叶琪苏宏娜杨艺罗培张志锋澳门科技大学中医药学院中国澳门特别行政区999078 中药质量研究国家重点实验室澳门科技大学中国澳门特别行政区999078

乳香Olibanum为活血止痛之常用药,是胸痹心痛方剂中的常用药材。现代研究表明乳香在冠心病的治疗中具有较大的开发前景,其主要活性成分为萜类和挥发油等。通过查阅近年来国内外有关乳香有效成分治疗冠心病的相关文献,综述了乳香单味药... 详细信息

乳香Olibanum为活血止痛之常用药,是胸痹心痛方剂中的常用药材。现代研究表明乳香在冠心病的治疗中具有较大的开发前景,其主要活性成分为萜类和挥发油等。通过查阅近年来国内外有关乳香有效成分治疗冠心病的相关文献,综述了乳香单味药材及其有效成分治疗冠心病的作用机制与药效作用的研究进展,列举了含乳香复方的临床应用,并总结了乳香的不良反应,为乳香治疗冠心病的临床应用提供依据与参考。

关键词：乳香冠心病作用机制不良反应 11-羰基-β-乙酰乳香酸 β-乳香酸 11-羰基-β-乳香酸

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宏基因组技术在中药材质量研究中的应用现状

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中国中药杂志 2022年第23期47卷 6271-6277页

作者：欧阳月张志锋澳门科技大学中医药学院中国澳门999078 澳门科技大学中药质量研究国家重点实验室中国澳门999078

宏基因组学通过直接从环境样品中提取全部微生物的DNA构建基因组文库,利用微生物学和基因组学等对物种多样性和功能组成进行研究。采用宏基因组技术及基因组测序的手段可以用于发现难培养和不可培养的环境微生物,并以此类微生物及其相... 详细信息

宏基因组学通过直接从环境样品中提取全部微生物的DNA构建基因组文库,利用微生物学和基因组学等对物种多样性和功能组成进行研究。采用宏基因组技术及基因组测序的手段可以用于发现难培养和不可培养的环境微生物,并以此类微生物及其相关中药材进行关联性研究,进而摆脱了微生物的分离与培养技术的局限性。中药材的质量安全一直是研究所关注的热点话题,研究发现除了从药材自身出发进行调控外,环境因子及人为的外界干预也会很大程度上影响其质量和临床疗效。与此同时,环境微生物、根际微生物、内生菌等在药用植物生长发育、次生代谢、加工贮藏等过程中均起到不可替代的作用,因此,中药材外周及自身内微环境与其质量间,必将存在不可忽略的关联性。而宏基因组技术作为一门已广泛运用于各个领域的近代新兴学科,不仅可以避免因有限实验技术条件或实验要求的不满足而造成的阻碍和问题,更可以从一个全新的角度评估和保证中药材质量。该文对宏基因组技术在中药材研究中的应用现状进行介绍,为中药质量研究和品种鉴定提出宏基因组技术的运用理论基础和研究方向。

关键词：宏基因组微生物药用植物中药材质量安全

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基于网络药理学与体外实验探讨附子活性成分治疗血管痉挛的作用机制

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环球中医药 2024年第8期17卷 1523-1536页

作者：武博文颜培宇武密山澳门科技大学中医药学院中药质量研究国家重点实验室中国澳门999078

目的运用网络药理学和体外细胞实验探究附子活性成分治疗血管痉挛的潜在作用机制。方法检索TCMSP数据库、SwissTargetPrediction数据库、Uniprot数据库、Genecards数据库、OMIM数据库、TTD数据库、Disgenet数据库和String数据库等,获得... 详细信息

目的运用网络药理学和体外细胞实验探究附子活性成分治疗血管痉挛的潜在作用机制。方法检索TCMSP数据库、SwissTargetPrediction数据库、Uniprot数据库、Genecards数据库、OMIM数据库、TTD数据库、Disgenet数据库和String数据库等,获得附子活性成分、作用靶点及血管痉挛相应疾病靶点,并将其作用靶点与获得的疾病靶点的交集作为潜在靶点;利用String平台,对潜在靶点构建蛋白—蛋白互作(protein-protein interaction network,PPI)网络;采用R语言软件包对潜在靶点进行基因本体(gene ontology,GO)功能及京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)富集分析,然后使用Cytoscape软件分析其网络拓扑结构,筛选其核心靶点,并进行分子对接验证。在此基础上,通过MTT法检测附子活性成分对血管紧张素Ⅱ所致血管平滑肌细胞增殖影响的机制。结果附子治疗血管痉挛的主要潜在活性成分有15个;药物—疾病核心靶点有27个;涉及的信号通路主要有脂质和动脉粥样硬化、钙信号通路、刺激神经组织的中的交互、鞘脂类信号通路、流体剪切应力与动脉粥样硬化、松弛素信号通路、血管平滑肌收缩等;关键核心靶点与活性成分次乌头碱、谷甾醇结合具有稳定构象。体外实验结果表明,附子活性成分次乌头碱能抑制血管紧张素Ⅱ所致血管平滑肌细胞增殖,其机制可能与其抑制丝裂原活化蛋白激酶信号转导通路的活化有关。结论附子多种活性成分可能通过作用于丝裂原活化蛋白激酶1、核受体亚家族3 C群成员1、血管紧张素I转化酶、一氧化氮合酶3等靶点治疗血管痉挛,为附子活性成分治疗血管痉挛的作用机制研究提供了科学参考。

关键词：附子网络药理学分子对接血管痉挛细胞增殖血管平滑肌细胞血管紧张素II

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基于网络药理学与体外实验探讨杏仁活性成分治疗血管痉挛的作用机制

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中南药学 2024年第7期22卷 1748-1756页

作者：武博文颜培宇武密山澳门科技大学中医药学院中国澳门999078 中药质量研究国家重点实验室中国澳门999078

目的运用网络药理学和体外细胞实验探究杏仁活性成分治疗血管痉挛的潜在作用机制。方法检索TCMSP数据库、Genecards数据库、SwissTargetPrediction数据库、Drugbank数据库等,获得杏仁的活性成分、作用靶点及血管痉挛相应疾病靶点,并将... 详细信息

目的运用网络药理学和体外细胞实验探究杏仁活性成分治疗血管痉挛的潜在作用机制。方法检索TCMSP数据库、Genecards数据库、SwissTargetPrediction数据库、Drugbank数据库等,获得杏仁的活性成分、作用靶点及血管痉挛相应疾病靶点,并将其作用靶点与获得的疾病靶点的交集作为潜在靶点;利用String平台,对潜在靶点构建蛋白-蛋白互作(PPI)网络;采用R语言软件包对潜在靶点进行基因本体(GO)功能及京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析,然后使用Cytoscape软件分析其网络拓扑结构,筛选其核心靶点,并进行分子对接验证。在此基础上,通过MTT法检测苦杏仁苷对血管紧张素Ⅱ所致血管平滑肌细胞增殖的影响。结果杏仁治疗血管痉挛的主要潜在活性成分有17个;药物-疾病核心靶点有68个;涉及的信号通路主要有钙信号通路、神经活性配体-受体相互作用、鞘脂信号通路、血管平滑肌收缩、EGFR酪氨酸激酶抑制剂耐药性、松弛素信号通路等;关键核心靶点与活性成分苦杏仁苷、雌酚酮结合具有稳定构象。体外实验结果表明,苦杏仁苷能抑制血管紧张素Ⅱ所致血管平滑肌细胞增殖,其机制可能与其抑制MAPKs信号转导通路的活化有关。结论杏仁活性成分可能通过作用于基质金属肽酶9、雌酚酮等靶点治疗血管痉挛,为杏仁活性成分治疗血管痉挛的作用机制研究提供了参考。

关键词：苦杏仁苷网络药理学分子对接血管痉挛细胞增殖血管平滑肌细胞血管紧张素Ⅱ

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中医药在新型冠状病毒肺炎炎症损伤中的作用研究进展

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科学通报 2021年第26期66卷 3377-3384页

作者：李云彤王喆林静张桂林徐友华澳门科技大学中医药学院中药质量研究国家重点实验室澳门999078 广东省中医院珠海医院珠海519000

新型冠状病毒肺炎(NCP)是一种由COVID-19引起的感染性呼吸道疾病.炎性风暴(也称为细胞因子风暴)在COVID-19诱导的肺损伤中起重要作用,并且是导致NCP患者病情加重甚至死亡的核心病理因素.促炎性细胞因子的过度表达和释放将导致组织损伤.... 详细信息

新型冠状病毒肺炎(NCP)是一种由COVID-19引起的感染性呼吸道疾病.炎性风暴(也称为细胞因子风暴)在COVID-19诱导的肺损伤中起重要作用,并且是导致NCP患者病情加重甚至死亡的核心病理因素.促炎性细胞因子的过度表达和释放将导致组织损伤.研究表明,对炎性损伤的干预可能是中医药治疗NCP的重要机制之一.临床研究发现,对NCP患者进行中医药早期干预可以显著缓解体征和症状,缩短病程,降低患者进入严重期的可能性,并降低病死率.通过对《新型冠状病毒肺炎诊疗方案(试行第八版)》及已发表文献的分析发现,中医药对NCP患者炎性损伤的调控通过多靶点实现.一方面,一些中药对病毒的增殖具有直接作用;另一方面,某些中药通过调节免疫细胞的功能,减少促炎细胞因子的产生,同时增加抗炎介质的分泌而重构机体免疫平衡.NCP的流行尚未结束,世界仍在遭受COVID-19病毒的攻击.本文旨在综述中医药对COVID-19诱导的炎症反应的作用及其机制,以期为临床和科研工作者提供资料帮助.

关键词：新冠肺炎炎症风暴中医药研究进展

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尺寸排阻-反相液相色谱-质谱联用技术在大鼠肾脏翻译后修饰蛋白质鉴定中的应用

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色谱 2021年第1期39卷 87-95页

作者：李健民卓越张毅达李娜伍建林澳门科技大学中医药学院中药质量研究国家重点实验室中国澳门999078

LC-MS联用技术在蛋白质组学研究中具有重要的作用,但是在复杂的生物体系中,由于样品的高度复杂性和其中蛋白质含量的巨大差异,执行全面且无倾向的蛋白质组分析是一项挑战。因此,在液相色谱分离中采用基于不同原理的色谱分离方法来降低... 详细信息

LC-MS联用技术在蛋白质组学研究中具有重要的作用,但是在复杂的生物体系中,由于样品的高度复杂性和其中蛋白质含量的巨大差异,执行全面且无倾向的蛋白质组分析是一项挑战。因此,在液相色谱分离中采用基于不同原理的色谱分离方法来降低蛋白质样本的复杂度,并对微量蛋白质进行富集,对后续采用质谱方法进行信息的采集和深入分析至关重要。在这里我们开发了一种基于尺寸排阻色谱(SEC)与反相液相色谱(RPLC)结合的新方法来进行复杂体系蛋白质的分离和鉴定,特别是对于微量蛋白质的分析。首先使用SEC对蛋白质进行分离和富集,并酶解成多肽,再通过RPLC-MS联用的方法对酶解后的多肽进行分离和鉴定。结果显示使用上述方法可以有效降低蛋白质样本的复杂度,并有效提高微量蛋白质的鉴定能力,可从大鼠肾脏鉴定出23621个肽段及1345个蛋白质,比常规的二维强阳离子交换-反相液相色谱法(2D SCX-RPLC)鉴定到的肽段及蛋白质分别多出69%及27%。此外,该方法对肾脏翻译后修饰(PTM)蛋白质的鉴定显示出更多的优势,翻译后修饰的多肽鉴定率显著增加,特别是磷酸化肽段的鉴定效率可达到靶向富集策略的水平。在此展示的SEC-RPLC-MS可以更好地了解蛋白质翻译后修饰对肾脏的影响,最终将有助于增加我们对正常的生理性肾功能以及病理过程机制的理解。

关键词：蛋白质组学尺寸排阻色谱翻译后修饰

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基于MaxEnt模型附子的全国药材生产区划研究

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西南农业学报 2022年

作者：崔颢景志贤张小波周华澳门科技大学中医药学院中国中医科学院/国家中药资源中心道地药材国家重点实验室育种基地中药质量研究国家重点实验室(澳门科技大学)

【目的】对附子生态适应性进行研究，为附子生产区划提供依据。【方法】通过产地调研、文献收集及标本信息整理，采用MaxEnt模型研究影响附子产量和质量的生态环境因子，用ArcGIS软件分析附子在全国的潜在分布区，依靠ROC 曲线和Jackkn... 详细信息

【目的】对附子生态适应性进行研究，为附子生产区划提供依据。【方法】通过产地调研、文献收集及标本信息整理，采用MaxEnt模型研究影响附子产量和质量的生态环境因子，用ArcGIS软件分析附子在全国的潜在分布区，依靠ROC 曲线和Jackknife法验证主要环境因子并结合生产实践，明确附子在全国的生态适应性区划。【结果】对影响附子的74个生态因子采用MaxEnt模型进行4次运算，除去贡献率为0的生态因子，最终选择26个生态因子进行分析，结果表明，附子主要潜在环境因子贡献率从大到小依次是10月月降水量（35.6%）>海拔（24.9%）>湿润指数（10%）>昼夜温差与年温差比值（5.6%）>土壤有效含水量等级（3.6%）>植被类型（2.2%）=11月月降水量（2.2%）>最干月降雨量（1.3%）>5月月降水量（1.1%）；附子在我国的最大生态相似度区域主要集中在云南、四川、西藏自治区三省区结合部，贵州、重庆、陕西秦岭一带，湖南、河南与陕西交界部分区域，辽宁、吉林与黑龙江东部的部分地区。附子新产区及传统产区均属于分布最适宜区，新产区年均温度低、附子生长期较长，产量较高。【结论】10月月降水量、海拔、植被类型、11月月降水量、5月月降水量这5个环境因子是影响附子分布的主要环境因子；按照耕地面积占国土面积12%计算，适宜附子种植的耕地面积约为173×104hm2，其中最适宜区47×104hm2左右，考虑到轮作等因素，适宜附子种植的耕地面积约为33×104hm2。附子的最适道地产区为四川、云南、西藏自治区三省区结合部以及陕西南部区域。该研究结果将有助于为附子道地产区的规划和基地建设提供理论依据。

关键词：附子生产区划生态因子生态适应性 MaxEnt模型 ArcGIS

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基于应激颗粒的中药神经保护研究设想

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中草药 2022年第16期53卷 5185-5192页

作者：陈畅罗婉君段飞鹏王寓平胥雄飞杨萌楚姜金铸谢永艳黄锦伟黄丽萍江西中医药大学药学院江西南昌330004 澳门科技大学中药质量研究国家重点实验室中国澳门999078 中国中医科学院中药研究所北京100700

应激颗粒是存在于胞质的一种无膜致密颗粒,通过包裹mRNA、转录起始因子、RNA结合蛋白等翻译起始阶段的重要元件,使细胞在遭受不利刺激时出现短暂的蛋白翻译阻滞,从而起到细胞保护作用。研究发现,应激颗粒广泛分布于海马和皮层的神经元... 详细信息

应激颗粒是存在于胞质的一种无膜致密颗粒,通过包裹mRNA、转录起始因子、RNA结合蛋白等翻译起始阶段的重要元件,使细胞在遭受不利刺激时出现短暂的蛋白翻译阻滞,从而起到细胞保护作用。研究发现,应激颗粒广泛分布于海马和皮层的神经元细胞、星形胶质细胞、小胶质细胞和浦肯野细胞等神经细胞中,生物过程涉及蛋白异常聚集、突触的成熟和可塑性、免疫调节、抗氧化应激反应、抑制细胞凋亡等,在急性缺血性脑卒中和神经退行性疾病的发生发展中发挥着重要作用。尤其是其多样化的物质组成和广泛参与的生物过程,为中医证候生物学及“同病异治”“整体调节”等中医药传统理论和治法的研究提供了崭新的思路和视野。对应激颗粒的基本特征、神经保护及研究方法等进行系统的梳理,同时以急性缺血性脑卒中为范例,尝试将应激颗粒这一现代生物学现象纳入到中医药现代研究中,提出研究设想和思路,以期用科学的语言阐释传统中医药相关理论与治法,也为行业同仁的相关研究提供参考。

关键词：应激颗粒脑缺血 RNA结合蛋白 Ras-GTPase活化蛋白SH3结构域结合蛋白1 神经保护

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