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生理学报 2022年第4期74卷 541-547页

作者：曾婷张洪艳赵鑫刘岩关艳中牡丹江医学院第一临床医学院牡丹江157011 牡丹江医学院生理学教研室牡丹江157011

本文旨在研究α_(2)肾上腺素能受体激动剂右美托咪定对酒精依赖大鼠戒断症状的影响及作用机制,以期为酒精戒断综合征(alcohol withdrawal syndrome,AWS)的治疗提供科学依据。成年Sprague-Dawley(SD)雄性大鼠连续28 d饮用6%酒精水溶液建... 详细信息

本文旨在研究α_(2)肾上腺素能受体激动剂右美托咪定对酒精依赖大鼠戒断症状的影响及作用机制,以期为酒精戒断综合征(alcohol withdrawal syndrome,AWS)的治疗提供科学依据。成年Sprague-Dawley(SD)雄性大鼠连续28 d饮用6%酒精水溶液建立饮酒模型,然后停止饮酒以诱导AWS。用酶联免疫吸附法测定大鼠脑组织蓝斑核及海马去甲肾上腺素的含量。在大鼠AWS显著时分别腹腔注射5、10、20μg/kg右美托咪定,并记录戒断症状变化,部分大鼠预先在海马注射α_(2)肾上腺素能受体拮抗剂育亨宾。结果显示,与对照组相比,酒精戒断6 h组大鼠AWS评分和再次饮酒量显著提高,末次饮酒组和戒断6 h组海马及蓝斑核去甲肾上腺素含量显著升高。右美托咪定干预后,戒断6 h组AWS评分及海马去甲肾上腺素含量均显著降低,而育亨宾可以逆转右美托咪定的上述作用。以上结果提示,右美托咪定可能通过激活海马α_2肾上腺素能受体改善酒精依赖大鼠戒断症状。

关键词：右美托咪定酒精戒断去甲肾上腺素海马育亨宾

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雪旺细胞对不同年龄大鼠BMSCs分化的影响

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中国修复重建外科杂志 2011年第2期25卷 160-165页

作者：赵富生武庚武杨金秀东张际绯牡丹江医学院组胚教研室黑龙江牡丹江 157011 牡丹江医学院临床技能中心牡丹江医学院红旗医院心电室牡丹江医学院生理教研室

目的 BMSCs具有多向分化潜能,在不同培养条件下能够向多种细胞分化,但年龄对BMSCs分化的影响尚不明确。探讨雪旺细胞(Schwann cells,SCs)形成的体外微环境对不同年龄大鼠BMSCs向神经元和少突胶质细胞分化的影响。方法从幼年(1月龄)Wista... 详细信息

目的 BMSCs具有多向分化潜能,在不同培养条件下能够向多种细胞分化,但年龄对BMSCs分化的影响尚不明确。探讨雪旺细胞(Schwann cells,SCs)形成的体外微环境对不同年龄大鼠BMSCs向神经元和少突胶质细胞分化的影响。方法从幼年(1月龄)Wistar大鼠预变性坐骨神经中分离纯化SCs,从幼年(1月龄)、成年(6月龄)、老年(12月龄)Wistar大鼠骨髓中提取BMSCs,均行免疫荧光鉴定。将第3代SCs与PKH26标记的第2代BMSCs在双层培养皿内等体积、等密度共培养,根据BMSCs来源不同将实验分为3组:A、B、C组SCs分别与幼年(1月龄)、成年(6月龄)、老年(12月龄)大鼠BMSCs共培养。倒置相差显微镜下观察分化过程中BMSCs形态变化,免疫荧光染色检测共培养后第7天BMSCs分化表达神经特异性烯醇化酶(neuron-specifi c enolase,NSE)和磷脂碱性蛋白(myelin basicprotein,MBP)的情况,ELISA法检测各组细胞共培养0、3、6、9、12 d培养液上清神经调节蛋白1(neuregulin 1,NRG1)的表达。结果实验成功分离并培养SCs和BMSCs,免疫荧光鉴定SCs呈S-100阳性表达,BMSCs呈CD29阳性表达、CD44阳性表达、CD90阳性表达。细胞共培养第7天倒置相差显微镜观察示,A组BMSCs胞体回缩,呈圆形或锥形,并带有突起,形态类似神经组织细胞;B、C组大部分BMSCs形态无明显改变。细胞共培养第7天免疫荧光染色示,A、B、C组BMSCs的NSE阳性表达率分别为22.39%±2.86%、12.89%±1.78%和2.69%±0.80%,MBP阳性表达率分别为16.13%±2.39%、6.33%±1.40%和0.92%±0.17%,各组间NSE阳性表达率和MBP阳性表达率比较差异均有统计学意义(P<0.05)。ELISA法检测示,A组细胞培养液上清中NRG1含量于细胞共培养后逐渐增多,且呈时间依赖性增加;细胞共培养6、9、12 d,A组NRG1含量高于B、C组,B组高于C组,比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论不同年龄大鼠BMSCs与SCs共培养均可向神经元和少突胶质细胞分化,但分化能力随年龄增加而降低,SCs分泌的多种生长因子可能是诱导BMSCs分化的重要因素。

关键词： BMSCs 雪旺细胞共培养细胞分化大鼠

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丁苯酞对帕金森病细胞模型的保护作用及机制

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中国组织工程研究 2025年第30期29卷 6466-6473页

作者：张鑫郭宝娟徐慧鑫沈玉珍杨晓帆杨旭芳陈培牡丹江医科大学基础医学院病理生理学教研室黑龙江省牡丹江市157011 包头市蒙医中医医院病理科内蒙古自治区包头市014000 牡丹江医科大学附属红旗医院康复医学科黑龙江省牡丹江市157011

背景:丁苯酞具有抗氧化和抗炎作用,有研究证实其在帕金森病中具有保护作用,但具体机制尚不清楚。目的:通过网络药理学、分子对接及细胞实验探讨丁苯酞的保护机制。方法:①网络药理学、分子对接实验:利用数据库筛选丁苯酞的作用靶点及帕... 详细信息

背景:丁苯酞具有抗氧化和抗炎作用,有研究证实其在帕金森病中具有保护作用,但具体机制尚不清楚。目的:通过网络药理学、分子对接及细胞实验探讨丁苯酞的保护机制。方法:①网络药理学、分子对接实验:利用数据库筛选丁苯酞的作用靶点及帕金森病靶点,取交集后构建交集靶点蛋白互作网络并筛选核心靶点,对核心靶点进行GO和KEGG通路富集分析,将目标靶点蛋白与丁苯酞进行分子对接验证。②细胞验证:将第6代PC12细胞分6组培养:对照组使用常规培养基培养,模型组采用N-甲基-4-苯基吡啶碘化物诱导帕金森病模型,ML385抑制剂组在诱导帕金森病模型的基础上加入核因子E2相关因子2抑制剂ML385,丁苯酞治疗组在诱导帕金森病模型的基础上加入丁苯酞,丁苯酞联合ML385处理组诱导帕金森病模型的基础上加入丁苯酞与ML385,丁苯酞组使用单独含丁酚酞的常规培养基培养,检测细胞增殖、细胞内还原型谷胱甘肽和丙二醛水平以及蛋白激酶B/糖原合酶激酶3β/核因子E2相关因子2(AKT/GSK-3β/Nrf2)信号通路的蛋白表达。结果与结论:①筛选出药物与疾病靶点的交集靶点共52个,核心靶点包括基质金属蛋白酶9、GSK-3β等,涉及磷脂酰肌醇3-激酶/AKT、氧化应激相关信号通路;丁苯酞与GSK-3β的分子对接结合能为-18.27 kJ/mol,表明丁苯酞与GSK-3β具有一定的结合能力。②与模型组相比,丁苯酞治疗组PC12细胞活性与还原型谷胱甘肽水平升高(P<0.05),丙二醛水平降低(P<0.05),p-AKT、p-GSK-3β、Nu-Nrf2和T-Nrf2蛋白表达升高(P<0.05);与丁苯酞组相比,丁苯酞联合ML385处理组PC12细胞活性与还原型谷胱甘肽水平降低(P<0.05),丙二醛水平升高(P<0.05),Nu-Nrf2和T-Nrf2蛋白表达降低(P<0.05)。③结果表明,丁苯酞可通过AKT/GSK-3β/Nrf2信号通路抑制氧化应激、改善细胞活性,对N-甲基-4-苯基吡啶碘化物诱导的帕金森细胞模型具有保护作用。

关键词：网络药理学分子对接帕金森病丁苯酞氧化应激信号通路工程化组织构建

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Nucleostemin特异性RNA干扰联合化疗药物对人食管癌细胞株Eca-109的作用

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解剖学杂志 2007年第6期30卷 730-733页

作者：胡静冯玉宽郑学芝蔡子微牡丹江医学院组织学与胚胎学教研室牡丹江157011 牡丹江医学院解剖学教研室牡丹江157011 牡丹江医学院生理学教研室牡丹江157011 牡丹江医学院病理生理学教研室牡丹江157011

目的:探讨Nucleostemin(NS)特异性RNA干扰(RNAi)联合4种化疗药物对人食管癌细胞株Eca-109生长的影响。方法:NS特异性RNAi表达载体转染Eca-109细胞;实验分为沉默组、正常组、单纯用药组和联合用药组,提取各组肿瘤细胞总RNA,用RT-PCR方法... 详细信息

目的:探讨Nucleostemin(NS)特异性RNA干扰(RNAi)联合4种化疗药物对人食管癌细胞株Eca-109生长的影响。方法:NS特异性RNAi表达载体转染Eca-109细胞;实验分为沉默组、正常组、单纯用药组和联合用药组,提取各组肿瘤细胞总RNA,用RT-PCR方法检测NS的表达;利用镜下细胞形态观察和MTT法检测各组细胞的增殖情况。结果:联合用药各组NS基因表达量低于单纯用药各组,细胞增殖速率明显低于单纯用药各组,而细胞增殖抑制率明显高于单纯用药各组。结论:4种化疗药物与NS特异性RNAi联合对Eca-109细胞具有一定的协同抑制作用。

关键词： Nucleostemin RNA干扰肿瘤细胞联合细胞周期

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地黄水提液对2型糖尿病大鼠proinsulin基因表达的影响

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中药材 2008年第3期31卷 397-399页

作者：孟庆宇吕秀芳金秀东牡丹江医学院药理学教研室黑龙江牡丹江157011 牡丹江医学院生物化学与分子生物学教研室黑龙江牡丹江157011 牡丹江医学院生理学教研室黑龙江牡丹江157011

目的:探讨地黄水提液治疗2型糖尿病(2-DM)的分子生物学机制。方法:以半定量RT-PCR法和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法分别检测胰岛素原(proinsulin)基因转录及翻译水平的表达。同时观察空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)的含量,计算胰岛素分... 详细信息

目的:探讨地黄水提液治疗2型糖尿病(2-DM)的分子生物学机制。方法:以半定量RT-PCR法和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法分别检测胰岛素原(proinsulin)基因转录及翻译水平的表达。同时观察空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)的含量,计算胰岛素分泌指数(IS)、β细胞功能指数(HβCI)的变化,来研究不同剂量地黄水提液对上述各指标的影响。结果:与2-DM模型相比,地黄治疗组大鼠proinsulin基因mRNA和蛋白表达显著增高(P<0.01),FPG显著降低,FINS、IS、HβCI升高,差异均有显著性。结论:地黄水提液通过上调2-DM大鼠proinsulin基因mRNA和蛋白表达,可改善胰岛β细胞功能,降低2-DM大鼠血糖。

关键词：地黄水提液 2型糖尿病胰岛素原基因表达

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葛根素对2型糖尿病大鼠脂肪组织ADRP基因表达的影响

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中国中药杂志 2008年第16期33卷 2026-2028,2060页

作者：孙卫郑学芝徐秋玲念红刘桂莲牡丹江医学院生理教研室黑龙江牡丹江157011

目的:观察葛根素(Pue)对实验性2型糖尿病(2-DM)大鼠脂肪组织中脂肪分化相关蛋白(ADRP)基因mRNA表达的影响。方法:Wistar大鼠喂以高糖高脂饮食伴尾静脉注射小剂量链脲佐菌素(STZ)25 ***-1复制2-DM大鼠模型,将造模大鼠随机分为模型组(腹... 详细信息

目的:观察葛根素(Pue)对实验性2型糖尿病(2-DM)大鼠脂肪组织中脂肪分化相关蛋白(ADRP)基因mRNA表达的影响。方法:Wistar大鼠喂以高糖高脂饮食伴尾静脉注射小剂量链脲佐菌素(STZ)25 ***-1复制2-DM大鼠模型,将造模大鼠随机分为模型组(腹腔注射丙二醇)和3个Pue治疗组(腹腔注射40,80,160 ***-1),另选10只大鼠为正常组。各组大鼠连续腹腔注射6周后,空腹取材,测定空腹血糖(FBG)、血清胰岛素(FINS)水平,并计算胰岛素抵抗指数(IR);同时以RT-PCR法检测脂肪组织ADRP基因mRNA的表达。结果:与2-DM模型组比较,Pue高、中剂量组大鼠脂肪组织ADRP基因mRNA表达显著降低(P<0.05);Pue高、中、低剂量组大鼠FBG,IR及Pue高、中剂量组大鼠FINS显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论:Pue可通过降低2-DM大鼠ADRP基因mRNA表达,降低胰岛素抵抗水平,从而降低2-DM大鼠血糖。

关键词：葛根素 2型糖尿病脂肪分化相关蛋白基因表达

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酚妥拉明阻断去甲肾上腺素对大鼠束旁核痛反应神经元电活动的影响

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中国临床解剖学杂志 2008年第1期26卷 91-94页

作者：金秀东关艳中张书捷孙卫牡丹江医学院生理学教研室黑龙江牡丹江157011

目的:去甲肾上腺素及其α受体阻断剂酚妥拉明对大鼠束旁核痛反应神经元电活动的影响。方法:以串刺激右侧坐骨神经为伤害性刺激,用玻璃微电极细胞外记录大鼠束旁核痛反应神经元电活动。结果:脑室去甲肾上腺素抑制旁核束旁核痛兴奋神经元... 详细信息

目的:去甲肾上腺素及其α受体阻断剂酚妥拉明对大鼠束旁核痛反应神经元电活动的影响。方法:以串刺激右侧坐骨神经为伤害性刺激,用玻璃微电极细胞外记录大鼠束旁核痛反应神经元电活动。结果:脑室去甲肾上腺素抑制旁核束旁核痛兴奋神经元放电,促进痛抑制神经元放电,此作用可被酚妥拉明阻断。结论:酚妥拉明阻断去甲肾上腺素对大鼠束旁核痛反应神经元电活动的抑制作用,提示去甲肾上腺素的镇痛作用与α肾上腺素能受体关系密切。

关键词：酚妥拉明去甲肾上腺素大鼠束旁核痛反应神经元

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高胆固醇血症致大鼠心室肌细胞L-型钙电流失衡的机制

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中国药理学通报 2008年第3期24卷 336-339页

作者：吴红金秀东白云龙关立新吕延杰杨宝峰哈尔滨医科大学药理学教研室黑龙江哈尔滨150086 牡丹江医学院生理学教研室黑龙江牡丹江157011 牡丹江医学院药理学教研室黑龙江牡丹江157011

目的研究高胆固醇血症(HC)对大鼠心室肌细胞L-型钙电流(ICa-L)以及细胞内钙浓度[Ca2+]i的影响。方法Wistar大鼠随机分为高胆固醇血症组和对照组各6只,分别给予高胆固醇饲料和普通饲料饲养4wk后,检测血脂;酶解法急性分离大鼠单个心肌细胞... 详细信息

目的研究高胆固醇血症(HC)对大鼠心室肌细胞L-型钙电流(ICa-L)以及细胞内钙浓度[Ca2+]i的影响。方法Wistar大鼠随机分为高胆固醇血症组和对照组各6只,分别给予高胆固醇饲料和普通饲料饲养4wk后,检测血脂;酶解法急性分离大鼠单个心肌细胞,采用全细胞膜片钳技术和激光扫描共聚焦显微镜观察高胆固醇血症对大鼠心室肌细胞ICa-L以及[Ca2+]i的变化。结果喂高胆固醇饲料4wk后,血清总胆固醇较正常对照组明显增高(P<0·01),甘油三脂无明显变化。膜片钳显示:高胆固醇血症大鼠各实验电压L-型钙电流电流密度均减少。在实验电压为0mV时,大鼠心室肌细胞L-型钙电流密度从正常对照组(-8·56±1·29)pA/pF减少到高胆固醇血症组(-5·24±0·90)pA/pF。激光共聚焦显示:在静息状态下,[Ca2+]i升高,峰值荧光强度由211·88±9·08增加至458·63±23·50(P<0·01)。结论高胆固醇血症可导致细胞内钙超载,使L-型钙通道电流失衡,可能是诱导心律失常的原因之一。

关键词：高胆固醇血症心律失常细胞浆内钙浓度 L-型钙电流膜片钳技术

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应用表达载体介导siRNA抑制乳腺癌细胞MCF-7血管内皮生长因子-C基因的表达

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解剖学报 2008年第6期39卷 867-871页

作者：孙平刘艳丽赵毅玲李丽刘执玉牡丹江医学院解剖教研室黑龙江牡丹江157011 山东大学医学院解剖学教研室济南250012 牡丹江医学院红旗医院超声室黑龙江牡丹江157011 牡丹江医学院生理教研室黑龙江牡丹江157011

目的探讨表达载体介导小干扰RNA(siRNA)对人乳腺癌细胞系MCF-7血管内皮生长因子-C(VEGF-C)表达的抑制作用。方法设计合成一对编码后可形成小发夹结构针对VEGF-C基因的siRNA的DNA序列,将其连入pRNAT-U6.1/Neo质粒中,构建VEGF-CsiRNA表达... 详细信息

目的探讨表达载体介导小干扰RNA(siRNA)对人乳腺癌细胞系MCF-7血管内皮生长因子-C(VEGF-C)表达的抑制作用。方法设计合成一对编码后可形成小发夹结构针对VEGF-C基因的siRNA的DNA序列,将其连入pRNAT-U6.1/Neo质粒中,构建VEGF-CsiRNA表达载体。表达载体进行PCR及测序鉴定,并分别转染MCF-7细胞,半定量RT-PCR和免疫组织化学技术检测转染前后MCF-7细胞VEGF-C基因表达的变化。结果PCR和DNA测序证实,携带VEGF-CsiRNA表达载体构建成功,VEGF-C基因的mRNA和蛋白表达量与空质粒转染相比均明显下降(P<0.05),在mRNA水平其表达抑制率为61.8;在蛋白表达水平其表达抑制率为78.3。结论本研究构建的VEGF-CsiRNA表达载体可有效抑制MCF-7细胞VEGF-C的mRNA和蛋白表达,为进一步以VEGF-C为靶点的乳腺癌治疗实验研究奠定了基础。

关键词：小干扰RNA 血管内皮生长因子-C MCF-7 反转录聚合酶链式反应

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酚妥拉明阻断去甲肾上腺素对吗啡成瘾大鼠束旁核痛反应神经元电活动的影响

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南方医科大学学报 2008年第2期28卷 266-268页

作者：金秀东关艳中张书捷徐满英岳文杰牡丹江医学院生理学教研室黑龙江牡丹江157011 哈尔滨医科大学生理学教研室黑龙江哈尔滨150086

目的研究酚妥拉明阻断去甲肾上腺素对吗啡成瘾大鼠束旁核痛反应神经元电活动的影响。方法以串刺激右侧坐骨神经为伤害性刺激,用玻璃微电极细胞外记录大鼠束旁核痛反应神经元电活动。结果脑室去甲肾上腺素抑制束旁核痛兴奋神经元放电,促... 详细信息

目的研究酚妥拉明阻断去甲肾上腺素对吗啡成瘾大鼠束旁核痛反应神经元电活动的影响。方法以串刺激右侧坐骨神经为伤害性刺激,用玻璃微电极细胞外记录大鼠束旁核痛反应神经元电活动。结果脑室去甲肾上腺素抑制束旁核痛兴奋神经元放电,促进痛抑制神经元放电,此作用可被酚妥拉明阻断。结论酚妥拉明阻断去甲肾上腺素对吗啡成瘾大鼠束旁核痛反应神经元电活动的抑制作用,提示去甲肾上腺素的镇痛作用与α肾上腺素能受体关系密切。

关键词：酚妥拉明去甲肾上腺素吗啡成瘾束旁核痛反应神经元

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