检索结果-内蒙古大学图书馆

四川大学学报（医学版） 2009年第1期40卷 33-36页

作者：刘蓉杨莉莉罗必蓉唐玲蒋宏刘继芬李明远成都中医药大学医学技术学院微生物学教研室成都610041 成都市第三人民医院检验科四川大学华西基础医学与法医学院微生物学教研室

目的检测铜绿假单胞菌Ⅰ类整合酶基因(intⅠ1基因)在生物膜状态和浮游状态表达水平的差异,探讨整合子的作用机制。方法对3株Ⅰ类整合酶阳性的铜绿假单胞菌分别进行液相培养和生物膜细菌培养,常规方法提取3株细菌两种生长状态的总RNA。... 详细信息

目的检测铜绿假单胞菌Ⅰ类整合酶基因(intⅠ1基因)在生物膜状态和浮游状态表达水平的差异,探讨整合子的作用机制。方法对3株Ⅰ类整合酶阳性的铜绿假单胞菌分别进行液相培养和生物膜细菌培养,常规方法提取3株细菌两种生长状态的总RNA。采用荧光定量PCR(FQ-PCR)法,以细菌的16srRNA为内参照,分别测定菌株SW07、R07和TH12的浮游细菌和生物膜细菌intⅠ1mRNA的相对表达量,比较3株菌在两种状态下intⅠ1mRNA的表达水平。结果3株铜绿假单菌的生物膜细菌和浮游细菌都检测到intⅠ1基因的表达。3株菌在两种状态下intⅠ1mRNA的表达量不同,生物膜细菌intⅠ1基因的表达水平较高,其中菌株R07、SW07和TH12的生物膜细菌intⅠ1mRNA的表达量分别较浮游细菌高1.4、5.7和128倍。结论在生物膜状态下,铜绿假单胞菌intⅠ1基因的表达上调,本实验结果提示整合子在生物膜细菌中可进行更加活跃的基因盒捕获和积累,整合子和细菌生物膜的形成是导致细菌对抗生素耐药的重要机制。

关键词：铜绿假单胞菌生物膜 intⅠ 1基因荧光定量PCR

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主动脉夹层动脉瘤合并肺动脉夹层动脉瘤猝死病例报道及文献回顾

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临床与病理杂志 2015年第5期35卷 895-898页

作者：王勇张敏杨雅丽王晶李海龙楚惠媛陈彻甘肃中医药大学医学技术学院法医学教研室兰州730000 甘肃省人民医院科研处兰州730000

目的:对罕见的主动脉及肺动脉同时发生的夹层动脉瘤进行报道并讨论其死亡原因。方法:分析1例因主动脉夹层动脉瘤合并肺动脉夹层动脉瘤猝死病例的解剖所见、组织学特征,结合文献分析讨论。结果:死者男性,76岁,因外力打击后猝死于家中。... 详细信息

目的:对罕见的主动脉及肺动脉同时发生的夹层动脉瘤进行报道并讨论其死亡原因。方法:分析1例因主动脉夹层动脉瘤合并肺动脉夹层动脉瘤猝死病例的解剖所见、组织学特征,结合文献分析讨论。结果:死者男性,76岁,因外力打击后猝死于家中。解剖所见主动脉、肺动脉夹层动脉瘤形成,肺动脉各级分支夹层动脉瘤形成伴动脉管腔狭窄。组织学证实大动脉动脉粥样硬化。结论:主动脉合并肺动脉夹层动脉瘤非常罕见,病情凶险,易引起猝死。

关键词：法医病理学夹层动脉瘤猝死

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细菌溶血素毒性和致病机制研究进展

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中国人兽共患病学报 2018年第2期34卷 175-181页

作者：马碧书马丽娜林旭瑷严杰昆明医科大学海源学院微生物学和免疫学教研室昆明650106 甘肃中医药大学医学技术学院兰州743000 浙江大学医学院病原生物学系杭州310058

许多病原菌能产生溶血素溶解红细胞,但近年发现细菌溶血素还能损伤或致死多种有核细胞和血小板。根据分子结构、结合细胞方式、膜孔道形成机制等不同,可将大多数细菌溶血素分类为重复子毒素家族(repeats in toxin family,RTX)和胆固醇... 详细信息

许多病原菌能产生溶血素溶解红细胞,但近年发现细菌溶血素还能损伤或致死多种有核细胞和血小板。根据分子结构、结合细胞方式、膜孔道形成机制等不同,可将大多数细菌溶血素分类为重复子毒素家族(repeats in toxin family,RTX)和胆固醇依赖细胞溶素家族(cholesterol-dependent cytolysin family,CDC)毒素。细菌溶血素可通过膜损伤、细胞溶解或裂解、离子失衡相关病变、细胞凋亡或坏死性凋亡以及TLR2/4介导的NF-κB、p38MAPK、JNK信号传导通路和NLRs介导的NLRP3炎症小体引发强烈的炎症反应并导致炎症性组织损伤,从而在细菌感染过程中发挥重要致病作用。

关键词：细菌溶血素膜损伤细胞裂解细胞凋亡炎症反应

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重组MBD2体内抗不可分型流感嗜血杆菌机制的初步研究

重组MBD2体内抗不可分型流感嗜血杆菌机制的初步研究

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首届中国临床微生物学大会（宁波会议）暨《医学参考报》微生物学与免疫学论坛

作者：丰锋姚锋李燕张强李明远邵京京李婉宜四川大学华西基础医学与法医学院微生物教研室成都中医药大学医学技术学院

目的观察实验小鼠体内注射重组鼠β防御素2(MBD2)后细胞因子的变化,评价重组MBD2对不可分型流感嗜血杆菌(NTHi)感染小鼠的治疗效果并对其抗感染机制进行初步探讨。方法重组MBD2蛋白注射实验小鼠,利用PCR半定量检测小鼠肺组织中TLR2、IL-... 详细信息

目的观察实验小鼠体内注射重组鼠β防御素2(MBD2)后细胞因子的变化,评价重组MBD2对不可分型流感嗜血杆菌(NTHi)感染小鼠的治疗效果并对其抗感染机制进行初步探讨。方法重组MBD2蛋白注射实验小鼠,利用PCR半定量检测小鼠肺组织中TLR2、IL-1β、TNF-α、MBD2和β-Actine mRNA的表达;重组MBD2治疗NTHi肺部感染小鼠,通过肺指数、肺组织病理切片及肺部荷菌数检测,对其治疗效果进行评价。结果体内注射重组MBD2可显著提高实验小鼠肺组织TLR2、IL-1β、TNF-α及MBD2等细胞因子的表达量;重组MBD2的应用能显著降低NTHi肺部感染小鼠的肺指数及肺组织内的NTHi荷菌数,并能减轻感染小鼠肺组织的炎性浸润程度,明显改善其肺部病变。结论重组MBD2在体内对NTHi感染有较好的治疗效果,其作用机制可能与重组MBD2对机体特异性免疫应答的诱导密切相关,为防御素抗感染机制的进一步完善奠定了良好的实验基础。

关键词：不可分型流感嗜血杆菌肺部感染肺指数肺组织实验小鼠初步研究

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淫羊藿苷对SGC-7901细胞内CaSR及Survivin、Runx3基因表达的影响

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中国继续医学教育 2016年第11期8卷 227-229页

作者：李姝许晓义孙健董琦陈彻甘肃中医药大学医学技术学院生化教研室甘肃兰州730000 牡丹江医学院基础医学院机能学教研室黑龙江牡丹江157011

目的观察淫羊藿苷(ICA)联合钙敏感受体(Ca SR)活性改变对胃癌SGC-7901细胞增殖的影响,及其细胞内Ca SR及Survivin、Runx3基因表达的影响。方法 MTT法与Hoechst染色法测定细胞的增殖与凋亡情况。Western blot和RT-PCR技术检测Ca SR、Surv... 详细信息

目的观察淫羊藿苷(ICA)联合钙敏感受体(Ca SR)活性改变对胃癌SGC-7901细胞增殖的影响,及其细胞内Ca SR及Survivin、Runx3基因表达的影响。方法 MTT法与Hoechst染色法测定细胞的增殖与凋亡情况。Western blot和RT-PCR技术检测Ca SR、Survivin及Runx3蛋白和m RNA的表达情况。结果 ICA联合Calindol(Ca SR激动剂)抑制SGC-7901细胞增殖,细胞生长抑制率与对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.05),呈时间依赖性;并诱导细胞凋亡。ICA联合Calindol促进SGC-7901细胞内Ca SR和Runx3蛋白和m RNA表达上调,Survivin蛋白和m RNA表达下调。结论 ICA联合Calindol能够抑制胃癌SGC-7901细胞增殖并诱导凋亡,其作用与下调Survivin和上调Runx3的表达有关。

关键词：淫羊藿苷胃癌SGC-7901细胞 CaSR Runx3 Survivin

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甲型流感病毒核蛋白的表达与鉴定及其B细胞表位的预测

甲型流感病毒核蛋白的表达与鉴定及其B细胞表位的预测

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第二届中国临床微生物学大会暨微生物学与免疫学三江论坛

作者：刘冯欢张菁王欢左斌李婉宜王保宁李明远李燕四川大学华西基础医学与法医学院微生物学教研室成都中医药大学医学技术学院

目的:构建甲型流感病毒核蛋白(nucleoprotein,NP)的原核表达表达载体,诱导NP融合蛋白在大肠杆菌中的表达与鉴定;预测人NP蛋白的B细胞抗原表位。方法:以pcDNA3.1(+)/NP为模板,利用PCR方法扩增目的片段NP,再将此片段插入原核表达载体pET32... 详细信息

目的:构建甲型流感病毒核蛋白(nucleoprotein,NP)的原核表达表达载体,诱导NP融合蛋白在大肠杆菌中的表达与鉴定;预测人NP蛋白的B细胞抗原表位。方法:以pcDNA3.1(+)/NP为模板,利用PCR方法扩增目的片段NP,再将此片段插入原核表达载体pET32a(+),并进行PCR鉴定、酶切鉴定和测序鉴定,将鉴定正确的质粒转入表达菌Rosetta-gami(2)中,用异丙基-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导融合蛋白的表达,用SDS-PAGE和Western Blot检测表达产物。按Chou-Fasman和Gami er-Robson方法预测其编码蛋白的二级结构,采用Karplns-Schulz方法预测蛋白骨架区的柔韧性;用KyteDoolittle方法预测其亲水性、Emini方法预测蛋白质表面可能性及Jameson-Wolf方法预测抗原性指数。结果:成功构建了流感病毒核蛋白(NP)的原核表达载体,经SDSPAGE检测NP蛋白得到了表达,Western Blot证明表达的重组蛋白具有免疫活性。在蛋白质第6-11、79-91、241-248和319-326区段附近很可能为B细胞表位优势区域。结论:流感病毒核蛋白的表达及B细胞表位的预测为流感病毒的快速诊断试剂的研发工作提供了基础。

关键词：甲型流感病毒核蛋白细胞表位流感病毒

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FB1诱导肝癌细胞凋亡FasL表达的变化

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四川省卫生管理干部学院学报 2009年第1期28卷 16-18页

作者：章亚倞罗萍陈建平成都中医药大学医学技术学院形态教研室四川成都610041 四川大学基础医学院与法医学院寄生虫学教研室四川成都610041

目的：了解不同浓度富马毒素（FB1）诱导肝癌细胞产生凋亡时FasLmRNA表达的变化方法：采用流式细胞术检测细胞的凋亡；荧光定量RT-PCR测定细胞FasLmRNA表达的水平。结果：5—40μmol／LFB1实验组均诱导肝癌细胞出现凋亡，经流式细胞仪... 详细信息

目的：了解不同浓度富马毒素（FB1）诱导肝癌细胞产生凋亡时FasLmRNA表达的变化方法：采用流式细胞术检测细胞的凋亡；荧光定量RT-PCR测定细胞FasLmRNA表达的水平。结果：5—40μmol／LFB1实验组均诱导肝癌细胞出现凋亡，经流式细胞仪检测凋亡率与对照组相比差异有显著性（P〈0．05）。荧光定量PCR检测结果显示，各实验组FasLmRNA与对照组相比表达均有一定程度降低，差异有显著性（P〈0．05）。结论：一定浓度的FB1可诱导肝癌细胞凋亡；各实验组FasLmRNA均无表达的增加并且降低。

关键词：富马毒素肝癌细胞细胞凋亡 FasL

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重组MBD2体内抗不可分型流感嗜血杆菌机制的初步研究

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西部医学 2011年第5期23卷 807-810页

作者：丰锋姚锋李婉宜李燕张强李明远邵京京四川大学华西基础医学与法医学院微生物教研室四川成都610041 成都中医药大学医学技术学院四川成都610041

目的观察实验小鼠体内注射重组鼠β防御素2(MBD2)后细胞因子的变化,评价重组MBD2对不可分型流感嗜血杆菌(NTHi)感染小鼠的治疗效果,并对其抗感染机制进行初步探讨。方法重组MBD2蛋白注射实验小鼠,利用PCR半定量检测小鼠肺组织中TLR2、I... 详细信息

目的观察实验小鼠体内注射重组鼠β防御素2(MBD2)后细胞因子的变化,评价重组MBD2对不可分型流感嗜血杆菌(NTHi)感染小鼠的治疗效果,并对其抗感染机制进行初步探讨。方法重组MBD2蛋白注射实验小鼠,利用PCR半定量检测小鼠肺组织中TLR2、IL-1β、TNF-α、MBD2和β-Actine mRNA的表达;重组MBD2治疗NTHi肺部感染小鼠,通过肺指数、肺组织病理切片及肺部荷菌数检测,对其治疗效果进行评价。结果体内注射重组MBD2可显著提高实验小鼠肺组织TLR2、IL-1β、TNF-α及MBD2等细胞因子的表达量;重组MBD2的应用能显著降低NTHi肺部感染小鼠的肺指数及肺组织内的NTHi荷菌数,并能减轻感染小鼠肺组织的炎性浸润程度,明显改善其肺部病变。结论重组MBD2在体内对NTHi感染有较好的治疗效果,其作用机制可能与重组MBD2对机体特异性免疫应答的诱导密切相关,为防御素抗感染机制的进一步完善奠定了良好的实验基础。

关键词：重组鼠β防御素-2 不可分型流感嗜血杆菌细胞因子

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杜氏利什曼原虫rAST1蛋白的制备及用于黑热病诊断的初步研究

杜氏利什曼原虫rAST1蛋白的制备及用于黑热病诊断的初步研究

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四川省动物学会第九次会员代表大会暨第十届学术研讨会

作者：陈建平杨斌斌徐佳楠陈达丽陈宪孙柯常凯朱达峰赖彩虹龚雨四川大学华西基础医学与法医学院寄生虫学教研室四川大学华西基础医学与法医学院成都中医药大学大学医学技术学院

1.方法以杜氏利什曼原虫***的基因组DNA为模板,通过PCR扩增获得amastni基因扩增产物。将amastin基因定向克隆到pcDNA3.1（+）中,构建重组质粒pcDNA3.1（+）-GS-amastin。amastin基因经测序,同源性分析,并对其跨膜区结构进行分析。用PCR... 详细信息

1.方法以杜氏利什曼原虫***的基因组DNA为模板,通过PCR扩增获得amastni基因扩增产物。将amastin基因定向克隆到pcDNA3.1（+）中,构建重组质粒pcDNA3.1（+）-GS-amastin。amastin基因经测序,同源性分析,并对其跨膜区结构进行分析。用PCR方法扩增得到amastin基因N端第一个胞外区序列（命名为ast1）,并将其定向克隆到质粒pET32a（+）上,成功构建了原核重组表达质粒pET32a（+）-ast1。重组蛋白rAST1在大肠杆菌中高效表达,并用固定化金属离子亲和层析（IMAC）法进行纯化。以重组蛋白rAST1作为包被抗原,用间接ELISA的方法检测内脏利什曼病人血清。2.结果所得amastin基因经测序,同源性分析表明与***10H2的同源性最高,核苷酸序列同源性为99.6%,氨基酸为98.8%;而与来自***和***的无鞭毛体蛋白基因序列的同源性最低核苷酸序列同源性仅为7.8%6.6%,氨基酸序列为19.4～23.4。跨膜区预测结果显示所得到的无鞭毛体蛋白有四个跨膜区域,依次位于N端的第1（2）0aa,72（74）4（95）aa,101（102）21（124）aa,161（165）82（183）aa。N端胞外区有一个11个aa的高度保守序列amastin signature（-CVTVWGLKNDC-）。两端的2个半胱氨酸,中间的1个甘氨酸、1个色氨酸和1个苏氨酸的保守位点与其它无鞭毛体蛋白家族成员完全一致。用PCR方法扩增得到amastin基因N端第一个胞外区序列（命名为ast1）,并将其定向克隆到质粒pET32a（+）上,成功构建了原核重组表达质粒pET32a（+）-ast1。重组蛋白rAST1在大肠杆菌中高效表达,并用固定化金属离子亲和层析（IMAC）法进行纯化。以重组蛋白rAST1作为包被抗原,用间接ELISA的方法检测内脏利什曼病人血清30份,血吸虫病人血清10份,肺吸虫病人血清5份。结果发现rAST1-间接ELISA法检测内脏利什曼病人血清的阳性率为90%（27、30）;检测血吸虫病人血清10份,肺吸虫病人血清5份均为阴性。而用杜氏利什曼原虫前鞭毛体可溶性抗原（SLA）做包被抗原检测,阳性率为100%。3.结论rAST1可作为诊断内脏利什曼病的候选多肽抗原。

关键词：黑热病杜氏利什曼原虫 amastin基因 ast1基因 rAST1 间接ELISA 诊断

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我国黑热病流行现状

我国黑热病流行现状

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四川省动物学会第九次会员代表大会暨第十届学术研讨会

内脏利什曼病又称黑热病,广泛流行于62个国家,约2亿人受到本病的威胁,每年估计新增病例约50万人。黑热病曾广泛分布于我国长江以北16个省、市、自治区,自1950年代经大规模的有效防治,多数地区已基本消灭了黑热病,近年来在新疆、甘肃、... 详细信息

内脏利什曼病又称黑热病,广泛流行于62个国家,约2亿人受到本病的威胁,每年估计新增病例约50万人。黑热病曾广泛分布于我国长江以北16个省、市、自治区,自1950年代经大规模的有效防治,多数地区已基本消灭了黑热病,近年来在新疆、甘肃、四川、陕西、山西和内蒙古等6省(区)仍有62个县(市)出现当地感染的黑热病,另有50个县有输入性病例报告。其中以川北、陇南和新疆的病人最多。四川省黑热病散发于川北的汶川、九寨沟、茂县、理县、北川和黑水等6县(市)。在甘肃以陇南市的文县、武都和舟曲的病人为多。上述地区犬的感染率都很高,其中四川省犬的感染率达8.29%,犬是我国山区疫区黑热病的主要传染源。新疆自1996年以来有33个县(市)仍陆续出现新发病人,主要分布在喀什三角洲及其周围的农场,涉及喀什、疏附、疏勒、巴楚、伽师和阿图什等县(市),其余27县呈散发,但动物保虫宿主尚不清楚。目前我国每年新发病人数在250～350例左右。黑热病确诊依赖于在淋巴结、骨髓或脾等穿刺物涂片上查见利什曼原虫无鞭毛体,这种方法不仅会给病人造成痛苦,而且由于原虫的检出率较低,临床易产生漏诊。发展高效、快速、敏感的诊断方法依然是黑热病防治研究的重点之一。

关键词：黑热病流行诊断

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