设计了一种集成微流控芯片,基于适配体亲和毛细管电泳技术分析了痕量蛋白质。此集成芯片包含两个功能性单元,即用于样品富集的纳米孔薄膜单元和用于样品分离的凝胶筛分介质单元,前者可以提高检测灵敏度,后者可实现复合物有效分离。利用空间可控光图案化技术,在玻璃芯片的特定区域制备聚N-异丙基丙烯酰胺纳米孔薄膜微结构,并在分离通道与薄膜相邻处无缝灌注甲基纤维素凝胶,完成零死体积功能性单元集成。以凝血酶适配体亲和体系为模型,评估集成芯片的性能,以一种不含富集单元的简单双“T”微流控芯片为对照,采用共聚焦激光诱导荧光系统对其进行检测,经过30 s 富集和120 s 分离,集成芯片检测范围为1～40 nmol/L,检出限为1 nmol/L(S/N =3),比对照芯片的检出限(100 nmol/L)低100 倍,显示出明显的信号增强能力和较好的分离度。此集成芯片有望用于其它亲和电泳体系,以提高生化分析检测灵敏度。
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