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Zoological Research 2010年第1期31卷 27-34页

作者：王义鹏赖仞中国科学院昆明动物研究所动物模型与人类疾病机理重点实验室云南昆明650223 中国科学院研究生院北京100049

昆虫抗菌肽是昆虫先天免疫系统中非常重要的一类效应分子。昆虫抗菌肽带正电荷,分子量小,大多数少于100个氨基酸残基。根据结构可以将昆虫抗菌肽分为一些不同的家族。昆虫抗菌肽不同的抗菌谱表明,它具有不同的作用机制。以果蝇为模式生... 详细信息

昆虫抗菌肽是昆虫先天免疫系统中非常重要的一类效应分子。昆虫抗菌肽带正电荷,分子量小,大多数少于100个氨基酸残基。根据结构可以将昆虫抗菌肽分为一些不同的家族。昆虫抗菌肽不同的抗菌谱表明,它具有不同的作用机制。以果蝇为模式生物研究表明,昆虫抗菌肽的基因调控涉及到多个信号通路及大量的信号分子。

关键词：昆虫抗菌肽先天免疫分类结构性质基因调控

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动物模型在HIV-1杀微生物剂有效性和安全性评价中的应用

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Zoological Research 2010年第1期31卷 66-76页

作者：朱林张高红郑永唐中国科学院昆明动物研究所中国科学院和云南省动物模型与人类疾病机理重点实验室云南昆明650223 中国科学院研究生院北京100049

HIV/AIDS的流行趋势没有减弱的迹象,人们迫切需要新的预防HIV传播的手段。杀微生物剂旨在通过局部用药于阴道或直肠,从而阻止HIV的传播。鉴于目前有大量的杀微生物剂候选物,亟待能够有效评价其有效性及安全性的动物模型。通过比较非灵... 详细信息

HIV/AIDS的流行趋势没有减弱的迹象,人们迫切需要新的预防HIV传播的手段。杀微生物剂旨在通过局部用药于阴道或直肠,从而阻止HIV的传播。鉴于目前有大量的杀微生物剂候选物,亟待能够有效评价其有效性及安全性的动物模型。通过比较非灵长类小型动物模型与非人灵长类动物模型在评价HIV杀微生物剂的有效性及安全性上的重要作用,该文总结了评价杀微生物剂有效性及安全性的动物模型的优缺点,同时指出了杀微生物剂研究与发展的方向和建议,希望能够对杀微生物剂的研发有所帮助。

关键词： HIV-1 性传播杀微生物剂有效性及安全性动物模型

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大动物生物安全三级实验室的生物安全隐患与对策

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环境与健康杂志 2010年第10期27卷 918-919页

作者：韩建保张高红郑永唐中国科学院昆明动物研究所中国科学院和云南省动物模型与人类疾病机理重点实验室云南昆明650223

生物安全即避免危险生物因子所造成的实验室人员暴露、向实验室外扩散并导致危害的综合措施川。随着近些年科学技术的迅速发展及新发传染病（如SARS、禽流感、甲型H1N1流感等）的不断暴发和流行，各国对生物安全实验室安全重要性的认识... 详细信息

生物安全即避免危险生物因子所造成的实验室人员暴露、向实验室外扩散并导致危害的综合措施川。随着近些年科学技术的迅速发展及新发传染病（如SARS、禽流感、甲型H1N1流感等）的不断暴发和流行，各国对生物安全实验室安全重要性的认识不断提高。虽然目前已经出台针对实验动物生物安全管理、实验操作规范等系统性、专业性指导文件，

关键词：动物生物安全三级实验室生物安全隐患对策

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我国中药来源的抗HIV天然化合物研究进展

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药学学报 2010年第2期45卷 141-153页

作者：张旋黄宁郑永唐中国科学院昆明动物研究所中国科学院和云南省动物模型与人类疾病机理重点实验室云南昆明650223 中国科学院研究生院北京100039 昆明医学院药学院暨云南省天然药物药理重点实验室云南昆明650031

由于迄今仍无艾滋病(acquired immunodeficiency syndrome,AIDS)疫苗问世,抗人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)药物仍然是艾滋病治疗的主要手段。传统中药和药用植物来源的天然化合物具有结构多样性、毒性较低、来源... 详细信息

由于迄今仍无艾滋病(acquired immunodeficiency syndrome,AIDS)疫苗问世,抗人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)药物仍然是艾滋病治疗的主要手段。传统中药和药用植物来源的天然化合物具有结构多样性、毒性较低、来源广泛等特点,因而在防治艾滋病方面有着独特的优势和巨大的潜力。研究者已经对天然化合物抗HIV作用进行了大量研究,并取得了可喜的成绩,发现了一些生物碱、香豆素、木脂素、黄酮类、萜类、鞣质类、多糖类、蛋白质和多肽类等天然化合物具有抗HIV的活性。然而,多数研究都是在体外试验完成的,大多数天然化合物体外抗HIV活性偏低,而且抗HIV的靶点仍不十分清楚。本文结合笔者实验室研究工作,重点介绍近年来我国传统中药来源的抗HIV活性较强的天然化合物研究进展。

关键词：艾滋病人类免疫缺陷病毒天然化合物中药抗HIV活性

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Bm-TFF2在毕赤酵母中的表达及鉴定

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Zoological Research 2010年第6期31卷 565-569页

作者：余果宇张红芸张勇江萍李文辉张云中国科学院昆明动物研究所动物模型与人类疾病机理重点实验室云南昆明650223 昆明医学院生物化学教研室云南昆明650500 昆明医学院第一附属医院妇产科云南昆明650032

Bm-TFF2,一种从大蹼铃蟾皮肤分泌物中分离得到的两栖类三叶因子,具有比人三叶因子更强的生物学活性。该研究以Bm-TFF2的cDNA为模板,利用PCR方法扩增Bm-TFF2基因,然后插到含有AOX1启动子和α-因子信号肽序列的表达载体pPIC9K中,采用毕赤... 详细信息

Bm-TFF2,一种从大蹼铃蟾皮肤分泌物中分离得到的两栖类三叶因子,具有比人三叶因子更强的生物学活性。该研究以Bm-TFF2的cDNA为模板,利用PCR方法扩增Bm-TFF2基因,然后插到含有AOX1启动子和α-因子信号肽序列的表达载体pPIC9K中,采用毕赤酵母表达系统进行分泌表达,并用G418筛选高拷贝整合转化子。SDS-PAGE和Western blotting都检测到Bm-TFF2被分泌性表达于酵母上清。在1%的甲醇诱导表达不同时间后,重组蛋白在72h的表达量最大,可达50mg/L;而不同浓度的饱和硫酸铵沉淀菌液上清时,80%的饱和硫酸铵沉淀量最大。这些结果表明,重组质粒Bm-TFF2-pPIC9K成功构建并在真核细胞中高效表达,这为进一步研究Bm-TFF2的生物学活性及其结构与功能关系奠定了基础。

关键词： Bm-TFF2 毕赤酵母表达鉴定

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三叶因子:从实验室研究到临床医学

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Zoological Research 2010年第1期31卷 17-26页

作者：杜廷义张勇张云中国科学院和云南省动物模型与人类疾病机理重点实验室中国科学院昆明动物研究所云南昆明650223 云南省第一人民医院检验科云南昆明650032 中国科学院研究生院北京100049

三叶因子(trefoil factor,TFF)家族是具有一个或多个三叶因子结构域的蛋白质多肽,在进化上具有高度的保守性,具有耐热、耐酶消化的理化特性。哺乳动物的TFF有三个成员(TFF1、TFF2和TFF3)。黏膜组织,如胃肠道和呼吸道黏膜等是TFF的主要... 详细信息

三叶因子(trefoil factor,TFF)家族是具有一个或多个三叶因子结构域的蛋白质多肽,在进化上具有高度的保守性,具有耐热、耐酶消化的理化特性。哺乳动物的TFF有三个成员(TFF1、TFF2和TFF3)。黏膜组织,如胃肠道和呼吸道黏膜等是TFF的主要合成场所。生理条件下,TFF的分布具有组织专一性,具有黏膜保护和创伤修复作用。TFF在肿瘤组织中广泛表达,在肿瘤的发生、发展、侵袭、转移过程中发挥着重要作用,可能是癌基因在对不同刺激做出反应时的共有递质。TFF生物学功能存在一个复杂的调控过程,单链TFF可通过膜受体而激活相关信号通路,TFF也可以通过与其它蛋白质的结合而协同发挥作用。TFF在临床医学领域主要运用在黏膜保护、黏膜损伤相关疾病的预防和治疗及肿瘤病理的诊断与干预等方面。TFF的作用机制和功能行使相关信号通路仍然是目前研究的重点,TFF与βγ-晶状体蛋白天然复合物的发现有助于对TFF的进一步认识和深入研究。

关键词：三叶因子生理功能病理功能黏膜保护创伤修复肿瘤

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中药复方凉茶提取物体外抗HIV活性研究

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中药材 2010年第9期33卷 1433-1438页

作者：刘武青李磊珂王睿睿杨柳萌彭涛郑永唐中国科学院昆明动物研究所/云南省动物模型与人类疾病机理重点实验室云南昆明650223 中国科学院研究生院北京100039 中国科学院广州生物医药与健康研究院广东广州510663 中国科学技术大学生命科学学院安徽合肥230027

目的:筛选和评价中药复方凉茶提取物体外对HIV的抑制活性,并初步探讨其作用机制。方法:通过观察病毒致细胞病变和HIV-1 p24抗原表达抑制性实验,采用多株HIV病毒株(实验株、临床分离株、耐药株)对中药复方凉茶水提醇沉物体外抗HIV活性进... 详细信息

目的:筛选和评价中药复方凉茶提取物体外对HIV的抑制活性,并初步探讨其作用机制。方法:通过观察病毒致细胞病变和HIV-1 p24抗原表达抑制性实验,采用多株HIV病毒株(实验株、临床分离株、耐药株)对中药复方凉茶水提醇沉物体外抗HIV活性进行评价;通过融合阻断实验、HIV-1慢性感染细胞病毒复制抑制实验和重组HIV-1 RT酶活性抑制实验,初步探讨其抑制HIV复制作用机理。结果:中药复方凉茶提取物对不同HIV-1病毒株均有很好的抑制作用,其EC50值介于12.74～116.87μg/mL,对HIV-2毒株也有一定的抑制活性。中药复方凉茶提取物显示出低细胞毒性,对不同来源的细胞系的CC50值介于564.79～1699.22μg/mL。中药复方凉茶提取物能显著抑制重组HIV-1 RT酶活性,在提取物浓度5.3μg/mL时的抑制率(50%,对正常细胞与慢性感染细胞融合也有一定的抑制作用,EC50为101.94μg/mL。结论:中药复方凉茶提取物体外具有较好的抑制HIV-1复制活性,其作用机制可能是抑制HIV-1逆转录酶活性和病毒进入细胞。

关键词：凉茶艾滋病抗HIV 火炭母棉茵陈木棉花

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Syncytin蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备和鉴定

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免疫学杂志 2010年第2期26卷 124-127,131页

作者：孙鹥庞伟欧阳东云郑永唐中国科学院昆明动物研究所中国科学院和云南省动物模型与人类疾病机理重点实验室 650223 中国科学院研究生院 100049 云南省第一人民医院检验科 650011

目的克隆人syncytin基因并在大肠杆菌中表达,并用表达后的融合蛋白制备syncytin蛋白多克隆抗体。方法 PCR扩增人syncytin基因编码区的DNA片段,将其克隆入原核表达质粒pET30a(+),转化大肠杆菌BL21,诱导产生syncytin-His融合蛋白。采用割... 详细信息

目的克隆人syncytin基因并在大肠杆菌中表达,并用表达后的融合蛋白制备syncytin蛋白多克隆抗体。方法 PCR扩增人syncytin基因编码区的DNA片段,将其克隆入原核表达质粒pET30a(+),转化大肠杆菌BL21,诱导产生syncytin-His融合蛋白。采用割胶回收的方法纯化目的蛋白,免疫新西兰白兔,制备多克隆抗体。通过ELISA、Western-Blot和免疫组织化学等方法来检测抗体的灵敏度和特异性。结果成功表达并纯化了syncytin-His融合蛋白,SDS-PAGE分析表明融合蛋白主要以包涵体形式存在;ELISA法测定抗体效价为1:10 000;Western-Blot和免疫组织化学结果显示所制备的抗体能特异性识别syncytin蛋白。结论成功制备和鉴定了人syncytin多克隆抗体,多克隆抗体特异性强和效价高,为下一步研究Syncytin的生物学功能奠定了基础。

关键词： Syncytin 原核表达多克隆抗体

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中国HIV-1临床株分离培养及其生物学特性的研究进展

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皮肤病与性病 2010年第4期32卷 17-22页

作者：姚志红周衍衡郑永唐中国科学院昆明动物研究所中国科学院和云南省动物模型与人类疾病机理重点实验室昆明650223 中国科学院研究生院北京100049

分离培养我国不同地区的人免疫缺陷病毒(HIV-1)并对其进行生物学特性研究,对于掌握我国艾滋病流行特征、传播来源及变异趋势,了解我国HIV的致病特点和规律,研制适合我国HIV-1流行特点的疫苗和诊断试剂具有重要的意义。本文简要介绍我国H... 详细信息

分离培养我国不同地区的人免疫缺陷病毒(HIV-1)并对其进行生物学特性研究,对于掌握我国艾滋病流行特征、传播来源及变异趋势,了解我国HIV的致病特点和规律,研制适合我国HIV-1流行特点的疫苗和诊断试剂具有重要的意义。本文简要介绍我国HIV-1临床株的分离培养及其生物学特性的研究进展。

关键词：中国 HIV-1 临床株分离生物学特性

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HIV-1慢性感染Jurkat细胞系的建立及其特性研究

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中国艾滋病性病 2010年第3期16卷 218-221页

作者：王媛媛王睿睿杨柳萌王云华郑永唐中国科学院昆明动物研究所中国科学院和云南省动物模型与人类疾病机理重点实验室云南昆明650223 中国科学院研究生院北京100039

目的建立艾滋病病毒Ⅰ型(HIV-1)慢性感染Jurkat细胞系,研究其生物学特性。方法参照文献方法改良,建立HIV-1ⅢB慢性感染Jurkat细胞系。其细胞系特性采用以下方法检测:光学显微镜观察细胞形态;流式细胞仪检测HIV-1ⅢB感染细胞的阳性率;噻... 详细信息

目的建立艾滋病病毒Ⅰ型(HIV-1)慢性感染Jurkat细胞系,研究其生物学特性。方法参照文献方法改良,建立HIV-1ⅢB慢性感染Jurkat细胞系。其细胞系特性采用以下方法检测:光学显微镜观察细胞形态;流式细胞仪检测HIV-1ⅢB感染细胞的阳性率;噻唑蓝(MTT)法检测抗病毒药物对慢性感染细胞的毒性作用;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测药物对慢性感染细胞中病毒复制的影响;合胞体形成方法检测药物对HIV-1ⅢB慢性感染细胞与正常细胞融合的阻断作用。结果成功建立了HIV-1慢性感染Jurkat细胞系(Jurkat/HIV-1ⅢB),感染细胞阳性率>90%。检测影响病毒复制各周期的抗病毒药物对Jurkat/HIV-1ⅢB细胞的作用,发现Jurkat/HIV-1ⅢB细胞具有HIV-1慢性感染细胞的生物学特征。结论成功建立Jurkat/HIV-1ⅢB细胞系,为抗HIV-1药物的研发和病毒感染机制研究提供了新的工具。

关键词：艾滋病病毒慢性感染 Jurkat细胞

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