检索结果-内蒙古大学图书馆

中国修复重建外科杂志 2006年第12期20卷 1240-1243页

作者：任永信杨志明解慧琪秦廷武李秀群四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室.干细胞与组织工程研究室成都610041

目的制作兔桡骨缺损模型，通过局部和全身用药了解WO-1对兔桡骨缺损修复的影响，并对其作用机制进行探讨。方法将新西兰大白兔36只，体重1．6～2．0kg；手术制作双侧桡骨缺损模型，并随机分为3组，A组：局部用药组，骨缺损处一次注射W... 详细信息

目的制作兔桡骨缺损模型，通过局部和全身用药了解WO-1对兔桡骨缺损修复的影响，并对其作用机制进行探讨。方法将新西兰大白兔36只，体重1．6～2．0kg；手术制作双侧桡骨缺损模型，并随机分为3组，A组：局部用药组，骨缺损处一次注射WO-1 50mg／ml，0．1ml；B组：口服给药组，每天WO-1 5mg灌胃至处死；C组：空白对照组，不予任何处理。分别于20、30和60d每组随机处死动物4只，行血清学、X线片和组织学检查。结果 A、B组碱性磷酸酶在20d分别为159．0±4．7U和174．3±13．2U，30d分别为130．0±8．0U和113．5±9．0U，均显著高于C组20d为95．8±23．1U，30d为88．3±21．1U；60dA组为65．3±6．2U、B组为42．0±7．0U，均显著低于C组116．0±3．9U，差异有统计学意义（P〈O．01）。A、B组血清骨钙素水平20d分别为11.4±3．8、14．3±2．7ng／ml和30d分别为7．3±0．3、10．4±3．2ng／ml均明显高于C组20d为6．1±0．8ng／ml，30d为5．8±0．2ng／ml；60d A组为4．2±1．2ng／ml，B组为4．4±0．9ng／ml，均显著低于C组13．9±1．3ng／ml，差异有统计学意义（P〈0．01）。20、30和60dX线片和组织学均显示，A、B组骨性愈合早于C组，而A组骨痂塑形早于B组。结论 WO-1可促进兔桡骨缺损的修复，其量效关系和给药时间、方式仍有待进一步研究。

关键词：组织工程 WO-1 桡骨缺损兔

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羊膜的基础和临床应用研究进展

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中国修复重建外科杂志 2006年第1期20卷 65-68页

作者：范伟杰杨志明邓力罗静聪四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室.干细胞与组织工程研究室成都610041

目的总结近年来羊膜的基础及临床应用研究进展。方法广泛查阅国内外有关羊膜的基础和临床应用研究文献,总结其研究成果。结果羊膜来源广泛、价格便宜、对细胞相容性好、抗原性低,羊膜上皮层含有羊膜上皮细胞及多种生长因子,基底膜含有... 详细信息

目的总结近年来羊膜的基础及临床应用研究进展。方法广泛查阅国内外有关羊膜的基础和临床应用研究文献,总结其研究成果。结果羊膜来源广泛、价格便宜、对细胞相容性好、抗原性低,羊膜上皮层含有羊膜上皮细胞及多种生长因子,基底膜含有、、、、型胶原,纤维连接蛋白及糖蛋白,这些独特的结构使其对多种细胞生长有促进作用,羊膜已在眼科临床中得到广泛应用。结论使用羊膜不违背伦理,随着对羊膜的进一步深入研究,以及组织工程、生物工程对材料需求的进一步加大,其应用会更加广泛。

关键词：羊膜应用进展

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干细胞、组织工程与再生医学

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中国修复重建外科杂志 2006年第2期20卷 95-97页

作者：杨志明四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室干细胞与组织工程研究室

在上世纪80年代提出的组织工程概念、90年代发现成体干细胞的可塑性之后,在研究中逐渐认识到细胞、支架材料、生物活性因子、干细胞在促进组织、器官愈合与再生治疗中的重要作用。因此,Suh等认为组织修复、组织工程与再生医学有不可分... 详细信息

在上世纪80年代提出的组织工程概念、90年代发现成体干细胞的可塑性之后,在研究中逐渐认识到细胞、支架材料、生物活性因子、干细胞在促进组织、器官愈合与再生治疗中的重要作用。因此,Suh等认为组织修复、组织工程与再生医学有不可分割的相关性。Goldfarb认为组织工程、干细胞和克隆技术是再生医学发展的良机;Hipp等提出组织工程、干细胞、克隆技术和单性生殖是一种新的治疗模式。本期集中刊出了22篇干细胞和组织工程相关研究的论文,以一个侧面反映了我国干细胞、组织工程研究在发展再生医学中所作出的贡献。[第一段]

关键词：组织工程研究成体干细胞再生医学生物活性因子克隆技术支架材料再生治疗组织修复医学发展治疗模式

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成骨细胞Cbfa1和Osterix基因在体外构建组织工程骨膜中的表达

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中国修复重建外科杂志 2006年第6期20卷 666-669页

作者：祁洁杨志明罗静聪四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室.干细胞与组织工程研究室

目的体外构建组织工程骨膜,研究生物衍生羊膜(humanacellularamnioticmembrane,HAAM)对成骨细胞分化的影响。方法采用人胚骨膜来源的成骨细胞与HAAM体外复合培养构建组织工程骨膜(n=60)。于培养后2、4、6、8和10d,分别提取总RNA,经过逆... 详细信息

目的体外构建组织工程骨膜,研究生物衍生羊膜(humanacellularamnioticmembrane,HAAM)对成骨细胞分化的影响。方法采用人胚骨膜来源的成骨细胞与HAAM体外复合培养构建组织工程骨膜(n=60)。于培养后2、4、6、8和10d,分别提取总RNA,经过逆转录成cDNA,行实时定量PCR,分别扩增成骨细胞特异转录因子(Cbfa1)和成骨细胞特异基因(Osterix),读取扩增循环数(cyclethreshold,Ct)。以单纯培养的成骨细胞作为对照组(n=20)。结果实验组Cbfa1表达以培养后2d和10d最高,且培养后2d与4、6、8d比较,以及培养后10d与4、8d比较,差异均有统计学意义(P<0.05);实验组Osterix表达随培养时间延长逐渐升高,培养后8d达最高,与其余各时间点比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。对照组Cbfa1和Osterix表达均随培养时间延长逐渐降低。组间各时间点两基因表达差异均无统计学意义(P>0.05)。结论成骨细胞与HAAM结合后,Cbfa1和Osterix可持续正常表达。HAAM作为支架材料,可诱导并促进成骨细胞分化。成骨细胞与HAAM构建的组织工程骨膜在分子水平已具有产生骨组织的基础。

关键词：组织工程骨膜成骨细胞生物衍生羊膜基因表达

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快速培养纯化猪角朊细胞及复合羊膜体外培养实验研究

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中国修复重建外科杂志 2006年第3期20卷 282-286页

作者：范伟杰杨志明李秀群王珍智伟邱琳四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室.干细胞与组织工程研究室成都610041

目的研究快速培养和纯化猪角朊细胞的方法及观察角朊细胞在脱细胞羊膜上的生长状况,为组织工程皮肤研究提供实验依据。方法采用加10%胎牛血清的人无血清角朊细胞培养基(definedkeratinocyte-SFM,DKSFM)培养原代猪角朊细胞,分别用DKSFM(A... 详细信息

目的研究快速培养和纯化猪角朊细胞的方法及观察角朊细胞在脱细胞羊膜上的生长状况,为组织工程皮肤研究提供实验依据。方法采用加10%胎牛血清的人无血清角朊细胞培养基(definedkeratinocyte-SFM,DKSFM)培养原代猪角朊细胞,分别用DKSFM(A组)、加5%胎牛血清的DKSFM(B组)、加10%胎牛血清的DKSFM(C组)培养传代猪角朊细胞,于接种后1、3、5和7d观察猪角朊细胞的形态及生长曲线。利用猪角朊细胞与培养瓶黏附牢固的特点,用0.02%乙二胺四乙酸(ethylenediaminetetraaceticacid,EDTA)和0.05%胰蛋白酶分步消化,纯化细胞。将第2代猪角朊细胞接种在冻干脱细胞羊膜上,直接苏木素染色、石蜡切片、免疫组织化学染色等方法观察猪角朊细胞在脱细胞羊膜上的生长状况。结果采用加10%胎牛血清的DKSFM培养原代猪角朊细胞,细胞生长速度快,形态好,培养5d铺满培养瓶底60%～70%。B组培养的传代猪角朊细胞生长速度较C组培养猪角朊细胞生长速度快。A组培养传代的角朊细胞,细胞生长缓慢。用0.02%EDTA和0.05%胰蛋白酶分步消化的方法纯化猪角朊细胞,可获得纯度为95%以上的猪角朊细胞。将第2代猪角朊细胞接种在脱细胞羊膜后12d,可形成单层细胞,呈多角形、铺路石样排列;14d和16d细胞进一步密集,16d细胞出现老化。结论10%胎牛血清的DKSFM培养原代猪角朊细胞,5%胎牛血清的DKSFM培养传代猪角朊细胞,细胞生长速度快。用0.02%EDTA和0.05%胰蛋白酶分步消化的方法纯化猪角朊细胞,可以获得高纯度猪角朊细胞。脱细胞羊膜为猪角朊细胞提供良好的支架,接种培养后12d,细胞形态最好。

关键词：猪角朊细胞培养脱细胞羊膜复合

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猪创伤皮肤缺损修复实验中的麻醉研究

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四川动物 2006年第1期25卷 168-170,175页

作者：范伟杰杨志明四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室.干细胞与组织工程研究室成都610041

目的探索一种适合猪创伤皮肤缺损修复实验的麻醉方法。方法实验分两部分,一是创伤皮肤缺损和修复动物模型制作手术中的麻醉,将14只仔猪随机分为3组,分别采用气管插管呼吸机辅助呼吸氯胺酮、安定、芬太尼复合麻醉、氯胺酮肌注加水合氯醛... 详细信息

目的探索一种适合猪创伤皮肤缺损修复实验的麻醉方法。方法实验分两部分,一是创伤皮肤缺损和修复动物模型制作手术中的麻醉,将14只仔猪随机分为3组,分别采用气管插管呼吸机辅助呼吸氯胺酮、安定、芬太尼复合麻醉、氯胺酮肌注加水合氯醛静滴麻醉、氯胺酮加戊巴比妥钠腹腔注射麻醉。二是换药中的麻醉,将64次麻醉分为3组,分别采用单纯氯胺酮麻醉、单纯戊巴比妥钠腹腔、氯胺酮加戊巴比妥组肌注。观察显效时间、维持时间、呼吸频率、心跳频率、麻醉效果。结果皮肤创伤缺损和修复动物模型制作手术中,3组麻醉比较结果显示气管插管呼吸机辅助呼吸氯胺酮、安定、芬太尼复合麻醉显效时间快,维持时间可以控制,麻醉效果最好,安全可靠。在换药的麻醉中,氯胺酮加戊巴比妥组肌注显效时间比较快,麻醉时间较短,效果好,动物容易苏醒。结论创伤皮肤缺损和修复动物模型制作手术中,采用气管插管呼吸机辅助呼吸氯胺酮、安定、芬太尼复合麻醉是有效安全的麻醉方法;在换药的麻醉中,氯胺酮加戊巴比妥组肌注是较好的麻醉方法。

关键词：猪皮肤缺损麻醉实验研究

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透明质酸钠对大鼠成肌细胞增殖和分化的影响

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中国修复重建外科杂志 2006年第7期20卷 747-750页

作者：张斌黄富国解慧琪杨志明李秀群四川省人民医院骨科成都610071 四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室干细胞组织工程研究室

目的研究透明质酸钠对成肌细胞增殖和分化的影响。方法采用酶消化法将新生SD大鼠骨骼肌组织分离、纯化、原代培养及传代培养；取第3代成肌细胞，分别加入浓度为0．05%、0．1％及0．2％的透明质酸钠溶液作为生长培养基行体外培养为实验... 详细信息

目的研究透明质酸钠对成肌细胞增殖和分化的影响。方法采用酶消化法将新生SD大鼠骨骼肌组织分离、纯化、原代培养及传代培养；取第3代成肌细胞，分别加入浓度为0．05%、0．1％及0．2％的透明质酸钠溶液作为生长培养基行体外培养为实验A、B及C组，加入常规生长培养基为对照D组，观察各组成肌细胞增殖情况，并采用细胞计数及MTT法绘制生长曲线。另选择0．1%透明质酸钠融合培养基行体外成肌细胞培养，常规融合培养基作对照，观察透明质酸钠对成肌细胞分化功能的影响。结果A、B及C组成肌细胞增殖表现相似，2d时进入对数生长期，4d时均达顶峰；D组成肌细胞于3d时进入对数生长期，5d时细胞数倍增，6d时达顶峰。MTT法所测吸光度（A）值的变化反映成肌细胞的增殖情况，与细胞计数的结果一致，以B组细胞增殖作用最明显，B组A值在2～8d时均高于C、D组（P〈0．05），8d时高于A组（P〈0．05）。0．1％透明质酸钠融合培养基中的成肌细胞融合率较低且上升缓慢，7d时融合率最高，为11．7％；常规融合培养基成肌细胞融合率于6d时达到峰值，约为35．0%。结论透明质酸钠与成肌细胞的细胞相容性较好，可以作为良好的成肌细胞培养基。

关键词：透明质酸钠成肌细胞相容性增殖分化

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组织工程化血管相关生长因子的研究

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中国临床康复 2006年第1期10卷 130-134页

作者：王珍罗静聪杨志明四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室干细胞与组织工程研究室四川省成都市610041

目的:综述促血管生成的生长因子作用机制及其在组织工程中的应用。资料来源:检索Pubmed数据库1990-01/2005-06有关血管生长因子在组织工程中应用的的文章,检索词“growth factor,tissue engineering,vascularization”,限定文章语言种类... 详细信息

目的:综述促血管生成的生长因子作用机制及其在组织工程中的应用。资料来源:检索Pubmed数据库1990-01/2005-06有关血管生长因子在组织工程中应用的的文章,检索词“growth factor,tissue engineering,vascularization”,限定文章语言种类为English。同时检索万方数据1994-01/2005-04期间的相关文章,检索词″血管化,生长因子,组织工程″定文章语言种类为中文。,限资料选择:纳入标准:①随机对照实验,采用单盲,双盲或非盲法。②实验包含平行对照组。排除标准:重复性实验研究.资料提炼:共有86篇相关文章,排除重复或类似研究,39篇符合要求。资料综合:①促血管生长因子促进血管形成,可以加速血供,促进组织工程组织的存活。②通过生长因子控释系统及基因转染技术,促血管生长因子可用于促进组织工程组织血管化。结论:多种生长因子通过不同机制促进工程化组织血管化的发生,通过促血管生长因子重组蛋白的控释技术和基因转染技术将其应用于工程化组织,可有效促进工程化组织的血管化。

关键词：组织工程,受体,生长因子新生血管化,生理性综述文献促血管生成

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建立黑山羊陈旧性心肌梗死模型的新方法

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中国修复重建外科杂志 2006年第11期20卷 1124-1129页

作者：廖斌邓力王峰项舟泸州医学院附属医院心胸外科四川泸州646000 四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室.干细胞与组织工程研究室

目的建立能长期存活的山羊心肌梗死实验模型。方法 16只黑山羊，体重15～24kg，3～6月龄，雌雄不拘。均行剑突下切口，倒V字形切开胸骨下段，于左冠状动脉前降支中下1／3用5-0prolene线8字缝合包绕伴行静脉，阻断5min，再间歇3min，重... 详细信息

目的建立能长期存活的山羊心肌梗死实验模型。方法 16只黑山羊，体重15～24kg，3～6月龄，雌雄不拘。均行剑突下切口，倒V字形切开胸骨下段，于左冠状动脉前降支中下1／3用5-0prolene线8字缝合包绕伴行静脉，阻断5min，再间歇3min，重复两次进行缺血预适应，然后结扎左冠状动脉及伴行静脉，建立羊心肌梗死模型。描记心电图，于建模前及建模后1、3、6、12、24、48h抽血检测血清肌酸激酶同工酶（creatine kinase—MB，CK—MB）及脂肪酸结合蛋白；并于模型建立后6周行心电图、超声心动图、选择性左冠状动脉造影、透射电镜及心肌梗死面积测定。结果造模过程中无实验动物死亡，造模成功率为100％。CK—MB于建模后3h开始升高，12h达高峰；脂肪酸结合蛋白于建模后1h开始升高，12h达高峰。建模后结扎点下方心肌逐渐出现片状紫红色区域，心电监测仪提示Ⅱ、Ⅲ、V3导联明显ST段上抬及T波改变，建模后6周，相应导联均出现明显病理性Q波；心脏超声检查显示左心室腔明显扩大并见室壁瘤形成；选择性左冠状动脉造影检查见心尖区血管纤细，外形呈瘤样扩张。透射电镜见梗死区肌丝溶解、断裂，排列混乱，细胞器崩解聚集。心肌梗死面积为4．74±0．78cm^2。结论黑山羊是建立心肌梗死模型较好的实验动物；经剑突下切口，倒V字形切开胸骨下端入路，结扎左冠状动脉前降支中下1／3，是建立能长期存活的陈旧性心肌梗死模型简便、安全可靠的方法。

关键词：陈旧性心肌梗死动物模型黑山羊

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显微剥离酶消化法体外培养人胚胎食管鳞状上皮细胞的方法研究

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中国修复重建外科杂志 2006年第4期20卷 459-462页

作者：李万里岑石强黄富国杨志明解慧琪四川大学华西医院骨科成都610041 四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室.干细胞与组织工程研究室成都610041

目的探讨利用显微剥离酶消化法行人胚胎食管鳞状上皮细胞原代培养的可行性,并对所得细胞进行纯化及传代培养。方法选择意外流产20周龄胎儿食管标本,通过显微剥离法获得菲薄食管黏膜上皮,经短时酶消化分离所得细胞,在10%胎牛血清混合培... 详细信息

目的探讨利用显微剥离酶消化法行人胚胎食管鳞状上皮细胞原代培养的可行性,并对所得细胞进行纯化及传代培养。方法选择意外流产20周龄胎儿食管标本,通过显微剥离法获得菲薄食管黏膜上皮,经短时酶消化分离所得细胞,在10%胎牛血清混合培养基中培养,通过倒置显微镜、透射电镜及免疫组织化学方法鉴定所得细胞,并测定其生长曲线。结果倒置显微镜下见细胞呈不规则圆形或多边形,透射电镜可见其具有鳞状上皮细胞特征性的张力微丝,细胞表面微突起,细胞角蛋白免疫组织化学染色胞浆呈棕黄色阳性表现,MTT法测定第2代细胞在传代培养3~4d达生长高峰。3、4d吸光度(A)值与1、2、5及6d比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论通过显微剥离酶消化法可获得足量、较纯食管鳞状上皮细胞,混合培养基中细胞能快速传代、扩增,适宜作为种子细胞构建组织工程食管。

关键词：组织工程食管鳞状上皮细胞显微剥离细胞培养

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