检索结果-内蒙古大学图书馆

植物生理学报 2010年第12期46卷 1251-1252页

作者：黄碧兰徐立李志英中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所农业部热带作物种质资源利用重点开放实验室海南省热带作物种质资源遗传改良与创新重点实验室海南儋州571737

1植物名称密花胡颓子（Elaeagnus conferta Roxb.）,又名羊奶果。2材料类别茎段。3培养条件（1）种子萌发培养基：MS;（2）不定芽诱导培养基：MS＋BA 3.0 mg·L^（-1）（单位下同）＋NAA 0.1;（3）增殖培养基：MS＋BA 2.0＋NAA 0.1;... 详细信息

1植物名称密花胡颓子（Elaeagnus conferta Roxb.）,又名羊奶果。2材料类别茎段。3培养条件（1）种子萌发培养基：MS;（2）不定芽诱导培养基：MS＋BA 3.0 mg·L^（-1）（单位下同）＋NAA 0.1;（3）增殖培养基：MS＋BA 2.0＋NAA 0.1;（4）壮苗培养基：MS＋BA 0.5＋NAA 0.1;（5）生根培养基：1/2MS＋IBA 2.0＋NAA 0.1。上述培养基中均添加30 g·L^（-1）蔗糖和6.5 mg·L^（-1）卡拉胶,pH 5.8。培养温度为（25±2）℃,光照强度为40μmo1·m^（-2）·s^（-1）。

关键词：胡颓子植株再生诱导培养基离体增殖培养基生根培养基植物名称种子萌发

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山椒子离体植株再生

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植物生理学通讯 2010年第5期46卷 479-480页

作者：李志英徐立中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所农业部热带作物种质资源利用重点开放实验室海南省热带作物种质资源遗传改良与创新重点实验室海南儋州571737

1植物名称山椒子（Uvaria grandiflora Roxb.）。2材料类别下胚轴、茎段。3培养条件（1）种子萌发培养基：1/2MS;（2）不定芽诱导培养基：MS＋BA2.0mg·L-1（单位下同）＋NAA0.1;（3）增殖培养基：MS＋BA1.0＋NAA0.1;

1植物名称山椒子（Uvaria grandiflora Roxb.）。 2材料类别下胚轴、茎段。 3培养条件（1）种子萌发培养基：1/2MS;（2）不定芽诱导培养基：MS＋BA2.0mg·L-1（单位下同）＋NAA0.1;（3）增殖培养基：MS＋BA1.0＋NAA0.1;

关键词：植株再生山椒诱导培养基离体增殖培养基植物名称培养条件种子萌发

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基于PCR方法的基因序列全长获取策略

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中国生物工程杂志 2012年第11期32卷 115-123页

作者：李昆鹏朱化彬郝海生赵学明冯荣秦彤张林波王栋吉林农业大学动物科技学院长春130118 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业部畜禽遗传资源与利用重点开放实验室北京100193 乌兰察布职业学院集宁012000

基因全长序列是研究新基因功能的前提基础,基于PCR(polymerase chain reaction)建立了反向PCR、外源接头介导PCR和随机引物PCR三类基因序列全长扩增方法。虽然早期建立的反向PCR连接效率较低,易产生较高的非特异性扩增,但简单快捷的特... 详细信息

基因全长序列是研究新基因功能的前提基础,基于PCR(polymerase chain reaction)建立了反向PCR、外源接头介导PCR和随机引物PCR三类基因序列全长扩增方法。虽然早期建立的反向PCR连接效率较低,易产生较高的非特异性扩增,但简单快捷的特点使其在鉴定T-DNA插入位点、基因融合位点等方面应用较多;外源接头介导PCR则因特异性的提高而备受欢迎,并衍生出单特异引物PCR、捕获PCR和步降PCR等多种技术,取得了较理想的扩增效果;而在大量样品分析中,自动化程度较高的随机引物PCR则更具优势。随着功能强大的聚合酶、连接酶、反转录酶的发现,推动了各种基于PCR的基因序列全长获取策略的发展,很多策略也因此而得以改进和整合,并获取更理想的实验结果,为研究基因结构、功能及其表达产物特性的研究提供了更完整的信息。

关键词：全长序列染色体步移RACE技术

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假鹰爪离体植株再生

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植物生理学报 2010年第11期46卷 1181-1182页

1植物名称假鹰爪（Desmos chinensis Lour.）。2材料类别下胚轴、茎段。3培养条件种子萌发培养基：（1）1/2MS。不定芽诱导与增殖培养基：（2）MS＋6-BA4.0mg·L-1（单位下同）＋NAA0.1。增殖培养基：（3）MS＋6-BA2.0＋NAA0.1。壮... 详细信息

1植物名称假鹰爪（Desmos chinensis Lour.）。2材料类别下胚轴、茎段。3培养条件种子萌发培养基：（1）1/2MS。不定芽诱导与增殖培养基：（2）MS＋6-BA4.0mg·L-1（单位下同）＋NAA0.1。增殖培养基：（3）MS＋6-BA2.0＋NAA0.1。壮苗培养基：（4）MS＋6-BA0.2＋NAA0.1。

关键词：假鹰爪植株再生增殖培养基离体不定芽诱导植物名称种子萌发培养条件

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孕酮受体基因多态性及其与小尾寒羊产羔数的关系

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华中农业大学学报 2011年第2期30卷 148-153页

作者：查丽莎储明星狄冉陈宏权方丽张宝云马月辉李奎安徽农业大学动物科技学院合肥230036 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所/农业部畜禽遗传资源与利用重点开放实验室北京100193 重庆大学生物工程学院重庆400030

设计15对引物,采用PCR-SSCP技术检测孕酮受体(progesterone receptor,PGR)基因全部9个外显子在小尾寒羊、湖羊、特克塞尔和多赛特中的单核苷酸多态性,同时研究该基因对小尾寒羊产羔数的影响。只有引物P9扩增片段具有多态性。对于P9扩增... 详细信息

设计15对引物,采用PCR-SSCP技术检测孕酮受体(progesterone receptor,PGR)基因全部9个外显子在小尾寒羊、湖羊、特克塞尔和多赛特中的单核苷酸多态性,同时研究该基因对小尾寒羊产羔数的影响。只有引物P9扩增片段具有多态性。对于P9扩增片段,在小尾寒羊、湖羊和多赛特中均检测到AA、AG和GG型,在特克塞尔中只检测到AA和AG型。测序表明GG型与AA型相比在217 bp处有一单碱基突变(A→G),但未引起氨基酸变化。GG型和AG型小尾寒羊产羔数均值分别比AA型的多0.97只(P<0.05)和0.64只(P<0.05),GG型和AG型小尾寒羊产羔数差异不显著(P>0.05)。结果初步表明PGR基因的G等位基因是提高绵羊产羔数的一个潜在有效的DNA标记。

关键词：绵羊多羔性孕酮受体基因聚合酶链式反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)

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基因差异转录表达验证方法研究进展

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中国生物工程杂志 2015年第5期35卷 96-102页

作者：左海洋陈晓丽蔡勇郝海生秦彤赵学明路永强王栋吉林农业大学动物科学技术学院长春130118 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业部畜禽遗传资源与利用重点开放实验室北京100193 北京畜牧总站北京100107

基因的差异表达与组织、细胞的生物学性状和功能密切相关,随着对组织、器官分化及细胞、生物个体生长发育等的深入研究,大量差异转录基因的验证分析变得越来越重要。为此,该领域基于核酸互补配对和PCR原理建立了Northern blot和荧光定量... 详细信息

基因的差异表达与组织、细胞的生物学性状和功能密切相关,随着对组织、器官分化及细胞、生物个体生长发育等的深入研究,大量差异转录基因的验证分析变得越来越重要。为此,该领域基于核酸互补配对和PCR原理建立了Northern blot和荧光定量PCR等一系列基因差异转录分析技术,利用这些方法对不同处理、不同组织器官、不同发育时段的基因差异转录进行了验证分析,为后续的基因功能分析奠定了坚实基础,并且通过检测分析,使基因差异表达分析方法由定性到定量、由繁琐复杂到简单快速、由以大量RNA为前提到对少量RNA样品的检测,甚至建立了单细胞荧光定量PCR方法,基因差异转录验证方法正在向更高效、精准方向发展,并使成本逐步降低。但是,到目前为止,生殖细胞等样品取样较为困难、精子等RNA含量较少样品的基因差异表达验证挑战性还仍然很大。从验证方法发展历程的角度,对基因差异转录验证方法进行了总结,希望为取样难度较大、RNA含量较低样品的基因差异表达分析提供有价值的参考。

关键词：基因差异表达荧光定量PCR 核酸杂交核酸探针

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体内A型精原细胞介导转MxA基因小鼠的制备

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畜牧兽医学报 2010年第9期41卷 1102-1108页

作者：鞠辉明白立景王怡彭大新张伟胡艳欣刘宗平李奎扬州大学兽医学院扬州225009 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业部畜禽遗传资源与利用重点开放实验室北京100193 中国农业大学动物医学院北京100193

本研究旨在探讨内源性A型精原干细胞介导法制备转抗黏液病毒基因A(Myxovirus resistance gene,MxA)基因小鼠的可行性。将pcDNA-MxA质粒和新型转染试剂ExGen500混悬后分5点注射至7日龄的ICR公鼠两侧睾丸组织内,睾丸内基因注射(testis gen... 详细信息

本研究旨在探讨内源性A型精原干细胞介导法制备转抗黏液病毒基因A(Myxovirus resistance gene,MxA)基因小鼠的可行性。将pcDNA-MxA质粒和新型转染试剂ExGen500混悬后分5点注射至7日龄的ICR公鼠两侧睾丸组织内,睾丸内基因注射(testis gene transfer,TGT)鼠在性成熟后的不同阶段(6、12及24周龄)与正常母鼠交配,检测后代外源基因整合及表达情况,选取表达MxA基因的小鼠进行H5N1亚型禽流感病毒攻毒试验,观察小鼠的健康状况并观察肺及气管的组织病变情况。结果表明,TGT鼠和正常母鼠交配后能稳定产生转基因后代小鼠,2只TGT鼠在6、12及24周龄交配后代整合率分别为11.11%(2/18)、11.76%(2/17)、11.54%(3/26)及13.64%(3/22)、13.33%(2/15)、11.76%(2/17)。2只TGT鼠后代外源基因平均整合率分别为11.47%及12.91%,之间差异不显著(P>0.05)。RT-PCR检测表明,MxA基因整合小鼠中有21.43%(3/22)测到MxA的表达;所制备的MxA表达鼠H5N1亚型禽流感病毒攻毒后全身症状、肺及气管病变程度明显比正常鼠轻。试验结果表明体内精原干细胞介导的转基因方法是一种可行的、具有很大应用前景的转基因方法,制备的转MxA基因小鼠对H5N1亚型禽流感病毒具有一定的抵抗力。

关键词： A型精原干细胞转基因 MxA

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线虫fat-1基因密码子优化设计

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中国畜牧兽医 2010年第10期37卷 68-72页

作者：杜新华赵志辉于浩李俊雅高雪许尚忠中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业部畜禽遗传资源与利用重点开放实验室北京100193 吉林大学畜牧兽医学院长春130062

本研究旨在优化线虫fat-1基因,使其在牛肌肉组织中高效表达,为进一步生产fat-1转基因肉牛提供目的基因。试验在不改变fat-1基因编码氨基酸序列的基础上,参考了11个牛肌肉蛋白相关基因的密码子使用频率,对fat-1基因进行了密码子优化。结... 详细信息

本研究旨在优化线虫fat-1基因,使其在牛肌肉组织中高效表达,为进一步生产fat-1转基因肉牛提供目的基因。试验在不改变fat-1基因编码氨基酸序列的基础上,参考了11个牛肌肉蛋白相关基因的密码子使用频率,对fat-1基因进行了密码子优化。结果发现,共改变了65个碱基,涉及65个密码子、7个氨基酸,约占fat-1基因总碱基数的5.38%,G+C含量从45.08%上升到50.04%,且分布均匀利于基因的表达。结构预测结果显示,该优化后的基因能够在牛肌肉中高效表达。

关键词： fat-1基因密码子优化牛肌肉蛋白

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酵母双杂交系统筛选新橡胶延长因子HbREF3互作蛋白

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基因组学与应用生物学 2016年第2期35卷 358-365页

作者：孙丽娜康桂娟黎瑜曾日中海南大学农学院海口570228 中国热带农业科学院橡胶研究所农业部橡胶树生物学与遗传资源利用重点开放实验室省部共建国家重点实验室培育基地儋州571737

橡胶延长因子(rubber elongation factor,REF)等橡胶粒子蛋白可能通过相互作用形成蛋白复合体在橡胶生物合成发挥作用。为鉴定REF家族中一新成员Hb REF3的互作蛋白,以橡胶树Hb REF3基因的c DNA序列为基础,分别构建了筛选Hb REF3相互作... 详细信息

橡胶延长因子(rubber elongation factor,REF)等橡胶粒子蛋白可能通过相互作用形成蛋白复合体在橡胶生物合成发挥作用。为鉴定REF家族中一新成员Hb REF3的互作蛋白,以橡胶树Hb REF3基因的c DNA序列为基础,分别构建了筛选Hb REF3相互作用蛋白的3种诱饵载体p GBKT7-Hb REF3-F(含全长ORF序列)及p GBKT7-Hb REF3-N(含N端序列)和p GBKT7-Hb REF3-C(含C端序列),并分别转化到Y2H Gold酵母菌株中,进行诱饵表达载体的自激活性与毒性检测。实验证明,3种诱饵载体转化的酵母菌能在SD/-Trp平板上正常生长,而在SD/-Trp/-His/-Ade平板上不能生长,因此,诱饵载体本身没有自激活性,它们的表达产物也没有毒性,不影响转化酵母菌Y2H的生长,满足作为诱饵质粒的条件,并用于橡胶树胶乳c DNA酵母表达文库的筛选。结果表明,用Hb REF3基因的全长ORF编码产物作诱饵,没有筛选到任何候选互作蛋白,而用Hb REF3的N端和C端区域分别作诱饵,均筛选到了可能与Hb REF3具有相互作用的候选蛋白,其中包括REF家族的其他成员和膜联蛋白D4等。

关键词：橡胶树橡胶延伸因子酵母双杂交诱饵载体互作蛋白

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鲁西牛和秦川牛体尺性状与胴体性状间典型相关分析

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河北农业大学学报 2010年第4期33卷 99-103页

作者：张猛李姣袁峥嵘贺建宁高雪高会江陈金宝李俊雅许尚忠中国农业科学院北京畜牧兽医研究所中国农业科学院肉牛研究中心农业部畜禽遗传资源与利用重点开放实验室北京100193

为揭示肉牛体尺性状与胴体性状两组变量之间相关本质,对鲁西牛和秦川牛的4个体尺性状和7个胴体性状分别进行典型相关分析,结果表明:鲁西牛和秦川牛的体尺性状和胴体性状间都存在较强的相关,其第1典型相关系数均达到极显著相关水平(P<... 详细信息

为揭示肉牛体尺性状与胴体性状两组变量之间相关本质,对鲁西牛和秦川牛的4个体尺性状和7个胴体性状分别进行典型相关分析,结果表明:鲁西牛和秦川牛的体尺性状和胴体性状间都存在较强的相关,其第1典型相关系数均达到极显著相关水平(P<0.01),典型相关系数分别是0.886和0.985,占到总相关信息的66.00%和92.92%,第2典型相关系数分别是0.738和0.802,累积占到总相关信息的87.73%和98.16%。鲁西牛体尺性状和胴体性状间第1对典型相关主要由胸围(A4)与胴体重(B1)引起,第2对典型相关主要由体高(A1)与后腿长(B5)引起,而秦川牛体尺性状和胴体性状间第1对典型相关主要由管围(A3)、胸围(A4)与胴体重(B1)、后腿长(B5)、胴体长(B7)引起,对2个品种牛两组性状的选育应侧重于这几个性状的表现,可以达到较理想的效果。

关键词：鲁西牛秦川牛体尺性状胴体性状典型相关分析

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