检索结果-内蒙古大学图书馆

免疫学杂志 2013年第5期29卷 369-375页

作者：卞成蓉刘娜邢丽段跃强王希良周娅杨鹏辉宁夏医科大学基础医学院病原生物学和免疫学教研室银川750004 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 解放军第302医院临床检验中心北京100039

目的构建和拯救重组嵌合表达G蛋白表位的流感病毒载体RSV疫苗株,并通过动物实验评价其免疫原性及免疫保护性。方法利用流感病毒反向遗传学技术,以流感病毒为载体,将RSV保护性抗原G蛋白表位的基因插入到流感病毒非结构蛋白NS1基因,拯救... 详细信息

目的构建和拯救重组嵌合表达G蛋白表位的流感病毒载体RSV疫苗株,并通过动物实验评价其免疫原性及免疫保护性。方法利用流感病毒反向遗传学技术,以流感病毒为载体,将RSV保护性抗原G蛋白表位的基因插入到流感病毒非结构蛋白NS1基因,拯救重组嵌合表达G蛋白中和表位的流感病毒载体RSV疫苗株rFLU/RSV/G,进而对rFLU/RSV/G的特性进行全面鉴定。rFLU/RSV/G滴鼻免疫Balb/c小鼠,通过检测中和抗体效价、血清抗体(IgG、IgG1、IgG2a)和黏膜抗体sIgA效价以及细胞因子(IL-2、IL-4、IL-5、IFN-γ和TNF-α)的分泌量来评价机体产生的体液、细胞和黏膜免疫反应。攻毒实验评价rFLU/RSV/G的免疫保护性,观测小鼠的体质量变化、病毒载量、存活情况以及肺病理变化。结果成功拯救出重组嵌合表达G蛋白表位的流感病毒载体RSV疫苗株rFLU/RSV/G。重组病毒rFLU/RSV/G与流感病毒颗粒形态和大小分布相符,并且表达针对RSV的特异性蛋白NS1-G。动物实验表明rFLU/RSV/G诱导小鼠机体产生较高的中和抗体、RSV特异性的Th1型细胞免疫反应以及黏膜免疫反应。攻毒实验显示rFLU/RSV/G对RSV A2株和PR8流感病毒野毒株具有一定免疫保护效果,能够有效降低肺鼻的病毒载量,肺组织病变情况明显减轻,且无小鼠死亡。结论重组嵌合表达G蛋白表位的流感病毒载体RSV疫苗株rFLU/RSV/G是一个有前景的RSV候选疫苗株,具有较高的免疫原性和免疫保护性,值得在棉鼠和猴子进行进一步研究。

关键词：流感病毒 RSV G蛋白表位病毒载体

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鼠疫菌Fur蛋白对waaA的转录调控研究

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军事医学 2013年第7期37卷 498-501页

作者：刘磊张义全倪斌王丽杨瑞馥周冬生军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 江苏大学基础医学与医学技术学院江苏镇江212013 重庆医科大学公共卫生与管理学院重庆400016

目的从转录水平上研究鼠疫耶尔森菌Fur蛋白对waaA的转录调控机制。方法提取鼠疫菌野生株(WT)和fur突变株(Δfur)的总RNA,采用引物延伸实验研究waaA的转录起始位点,并根据产物的丰度判断Fur蛋白对waaA的调控关系。构建克隆有waaA上游启... 详细信息

目的从转录水平上研究鼠疫耶尔森菌Fur蛋白对waaA的转录调控机制。方法提取鼠疫菌野生株(WT)和fur突变株(Δfur)的总RNA,采用引物延伸实验研究waaA的转录起始位点,并根据产物的丰度判断Fur蛋白对waaA的调控关系。构建克隆有waaA上游启动子区的LacZ重组质粒,将重组质粒转入WT和Δfur中,通过测定β-半乳糖苷酶活性来比较两株重组菌中的waaA启动子活性,进一步验证Fur蛋白对waaA的调控关系。PCR扩增waaA启动子区DNA序列全长,并纯化鼠疫菌His-Fur蛋白,通过体外的凝胶阻滞实验,即电泳迁移率变动实验(EMSA)和DNaseⅠ足迹实验验证His-Fur蛋白对waaA启动子区是否具有直接的结合作用。结果与结论 DNaseⅠ足迹实验表明,Fur蛋白对waaA启动子区的结合位置为-204至-150之间的碱基(翻译起始位点为+1);引物延伸实验显示waaA有一个转录起始位点T(-26),且该位点的转录活性直接被Fur蛋白激活。

关键词：鼠疫耶尔森菌转录调控 Fur waaA

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微生物全基因组测序组装中的gap填补方法

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生物技术通讯 2013年第6期24卷 819-821页

作者：黄勇范航张志毅童贻刚周育森军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的:研究和开发高通量测序全基因组组装过程中的填补gap的方法。方法:研究组装软件的算法,使用Perl语言编写自动填补gap的程序,并建立全基因组组装的流程。结果:提出了填补gap的末端延伸法,并使用Perl语言进行了编程;在对立克次体高通... 详细信息

目的:研究和开发高通量测序全基因组组装过程中的填补gap的方法。方法:研究组装软件的算法,使用Perl语言编写自动填补gap的程序,并建立全基因组组装的流程。结果:提出了填补gap的末端延伸法,并使用Perl语言进行了编程;在对立克次体高通量测序的组装过程中,这些方法能大大减少gap的数量。结论:本研究提出的末端延伸法能够高效填补全序列组装过程中出现的gap,具有很强的实用性。

关键词：测序组装 gap填补

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KPC-2型碳青霉烯酶的表达纯化及其催化抗生素水解的动力学

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生物技术通讯 2013年第5期24卷 650-654页

作者：刘雄张凤娇李享陈芳红房华丽王琴李涛王慧军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的:表达纯化KPC-2型碳青霉烯酶,并研究其催化抗生素水解的酶动力学活性。方法:将KPC-2基因与pET-22b(+)原核表达载体连接后转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,表达产物经FF镍柱纯化后,SDS-PAGE检测蛋白的纯度;用BioTek酶联仪进一步... 详细信息

目的:表达纯化KPC-2型碳青霉烯酶,并研究其催化抗生素水解的酶动力学活性。方法:将KPC-2基因与pET-22b(+)原核表达载体连接后转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,表达产物经FF镍柱纯化后,SDS-PAGE检测蛋白的纯度;用BioTek酶联仪进一步检测其抗生素水解范围及动力学特性。结果:构建了高效表达KPC-2的工程菌,得到了纯度在90%以上的KPC-2蛋白,该蛋白能水解几乎所有β内酰胺类抗生素,其水解美罗培南等碳青霉烯类抗生素的能力较强,最适温度约为40℃,最适pH值约为6.5。结论:为进一步了解最常见的KPC功能与活性提供了重要信息。

关键词：细菌耐药 KPC-2型碳青霉烯酶 β内酰胺类抗生素酶催化动力学

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超广谱β-内酰胺酶SHV-18的表达纯化及活性验证

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现代生物医学进展 2013年第33期13卷 6401-6404页

作者：郭通刘雄刘传杰钱敏王琴李涛王慧军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的:产超广谱β-内酰胺酶是肠杆菌科细菌和肺炎克雷伯菌对β-内酰胺酶类抗生素耐药的重要机制,该类酶主要水解青霉素类、头孢菌素类以及单环酰胺类抗生素。自从1983年第一次有关β内酰胺酶的报道开始,至今已经发现超广谱β-内酰胺酶(ES... 详细信息

目的:产超广谱β-内酰胺酶是肠杆菌科细菌和肺炎克雷伯菌对β-内酰胺酶类抗生素耐药的重要机制,该类酶主要水解青霉素类、头孢菌素类以及单环酰胺类抗生素。自从1983年第一次有关β内酰胺酶的报道开始,至今已经发现超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的种类超过400种,其中SHV型是最常见的ESBLs类型之一。本研究主要探讨了超广谱β-内酰胺酶SHV-18的原核表达载体的构建、酶的纯化和活性验证。方法:利用肺炎克雷伯菌ATCC700603全基因组为模板,应用分子生物学技术钓取SHV-18基因,构建pET22b(+)-SHV-18表达质粒,经测序鉴定后,转化大肠杆菌Transetta(DE3),IPTG诱导表达并亲和纯化,进一步通过抗生素水解实验,检测其水解活性,测定其酶动力学参数。结果:成功构建了可以以裂解上清形式高效表达SHV-18的工程菌。通过亲和纯化最终获得纯度达到90%以上的β-内酰胺酶SHV-18。获得的SHV-18蛋白能够水解青霉素G、头孢拉定、头孢唑肟、头孢他啶、头孢吡肟等多个抗生素。结论:获得了对青霉素和头孢菌素类具有水解活性的超广谱β-内酰胺酶SHV-18,并对其酶动力学参数进行了检测。在实验室研究了β-内酰胺酶SHV-18对不同抗生素的水解特性,更加有利与指导临床抗生素的合理使用。

关键词： SHV—18 超广谱β-内酰胺酶(ESBLs) 表达纯化酶动力学

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骚扰库蚊内蒙古新记录及其感染Wolbachia的检测

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寄生虫与医学昆虫学报 2013年第4期20卷 251-254页

作者：邢丹赵彤言军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

本研究对内蒙古满洲里地区采集到的尖音库蚊复合组蚊虫进行自育性实验和雄蚊阳茎鉴定，证实内蒙古满洲里地区发现的尖音库蚊复合组蚊虫是骚扰库蚊新记录，其自育率为72．5％，雄蚊阳茎DV／D的比值在-0．0648与0．0577之间。随后应用Wolb... 详细信息

本研究对内蒙古满洲里地区采集到的尖音库蚊复合组蚊虫进行自育性实验和雄蚊阳茎鉴定，证实内蒙古满洲里地区发现的尖音库蚊复合组蚊虫是骚扰库蚊新记录，其自育率为72．5％，雄蚊阳茎DV／D的比值在-0．0648与0．0577之间。随后应用Wolbachia的wsp基因特异引物，通过PCR方法对其进行检测。实验结果表明，内蒙古满洲里地区骚扰库蚊的雌蚊和雄蚊体内均检测到Wolbachia感染，感染率为79．71％。

关键词：满洲里骚扰库蚊新记录雄蚊尾器自育率 Wolbachia

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利用小RNA高通量测序筛查媒介昆虫携带的病原体

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寄生虫与医学昆虫学报 2013年第4期20卷 239-243页

作者：张志毅安小平庄璐马麦卷米志强黄勇范航刘玮童贻刚军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

高通量测序方法筛查媒介昆虫携带病原体是一种新的重要方法。研究表明小RNA高通量测序可用于昆虫携带病毒的检测。本工作尝试用小RNA高通量测序法筛查昆虫携带的病毒，发现该方法不仅可用于媒介昆虫携带病毒的检测，也可以用于原核和真... 详细信息

高通量测序方法筛查媒介昆虫携带病原体是一种新的重要方法。研究表明小RNA高通量测序可用于昆虫携带病毒的检测。本工作尝试用小RNA高通量测序法筛查昆虫携带的病毒，发现该方法不仅可用于媒介昆虫携带病毒的检测，也可以用于原核和真核病原体的筛查。用该方法对野外采集的3种蚊虫和3种蜱进行分析，用blast程序对NCBI核酸序列库（nt）进行比对搜索，从测序结果中查找到多种病毒、原核及真核的病原体。上述结果表明，小RNA高通量测序可以用于各种病原体的发现，有望发展成为一种通用的病原体筛查技术。

关键词：小RNA 高通量测序媒介昆虫病原体

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路侧树荫绿化带的蠓类及一新种描述

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中华卫生杀虫药械 2013年第1期19卷 59-61页

作者：虞以新严格军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

2011年8-10月在位于北京丰台一院区内路侧绿化树荫带,以挥网法和灯诱法进行了蠓类调查采集,共采获蠓类500余只,其中有毛蠓3种、铗蠓5种,并发现和描述了安氏毛蠓新种。

关键词：蠓科毛蠓铗蠓新种

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虫媒传染病:不容忽视的公共卫生问题

虫媒传染病:不容忽视的公共卫生问题

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中华预防医学会第四届学术年会

作者：曹务春军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室

虫媒传染病是由病媒生物传播的传染病.病媒生物也称媒介生物,一般是指传播疾病的节肢动物,包括昆虫纲中的蚊、蝇、虱、蚤、白蛉等及蛛形纲中的蜱、螨等.广义上,病媒生物也可包括一切可以作为病原体终宿主和中间宿主的节肢动物、软体动...

虫媒传染病是由病媒生物传播的传染病.病媒生物也称媒介生物,一般是指传播疾病的节肢动物,包括昆虫纲中的蚊、蝇、虱、蚤、白蛉等及蛛形纲中的蜱、螨等.广义上,病媒生物也可包括一切可以作为病原体终宿主和中间宿主的节肢动物、软体动物和啮齿动物等.这里主要介绍媒介生物传播的人类传染病和由媒介生物起主要传播作用的人畜共患病的基本概念、全球流行概况、危害性、传播流行的影响因素、我国流行现状.同时,介绍不断出现的新发虫媒传染病及其公共卫生学意义.

关键词：

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鼠疫菌致病与传播的多基因调控机制研究

鼠疫菌致病与传播的多基因调控机制研究

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2013年中国微生物学会学术年会

作者：周冬生杨瑞馥军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室

鼠疫菌在1500-20000年前由0:1b血清型假结核耶尔森氏菌(以下简称假结核菌)进化而来的.假结核菌仅引起肠道疾病,经污染的食物或水传播.

关键词：

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