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蓝舌病毒湖北株致人肝癌Hep-3B细胞和人肺腺癌A549细胞死亡机制的研究

中华肿瘤杂志 2007年第7期29卷 505-509页

作者：陈杰胡俊董长垣梁科戴莹高靖武汉大学基础医学院病毒学国家重点实验室

目的探讨蓝舌病毒湖北株(BTV-HbC3)致人肝癌Hep-3B和人肺腺癌A549细胞死亡的方式及其作用机制。方法观察细胞感染BTV-HbC3的病变效应;原位末端标记(TUNEL)法检测细胞感染BTV-HbC3是否出现凋亡;激光打描共聚焦显微镜检测荧光标记的细胞... 详细信息

目的探讨蓝舌病毒湖北株(BTV-HbC3)致人肝癌Hep-3B和人肺腺癌A549细胞死亡的方式及其作用机制。方法观察细胞感染BTV-HbC3的病变效应;原位末端标记(TUNEL)法检测细胞感染BTV-HbC3是否出现凋亡;激光打描共聚焦显微镜检测荧光标记的细胞核及内质网变化;萤光照度仪检测病毒诱导细胞caspase-3/7、caspase-8和caspase-9的活性变化。结果BTV-HbC3感染Hep-3B细胞后有明显的病变效应,大量细胞凋亡,细胞核染色质边聚,内质网大量空泡形成,caspase- 3/7活性升高,caspase-8和caspase-9未升高;BTV-HbC3感染A549细胞后有明显病变效应,仅见零星凋亡细胞,内质网有空泡形成,细胞核未见染色质边聚,caspase-3/7和caspase-9活性升高,caspase-8未升高。结论BTV-HbC3主要通过细胞内内质网途径诱导Hep-3B细胞凋亡而发挥其抑瘤作用,而对人肺腺癌的抑瘤作用则是通过诱导A549细胞的非凋亡性程序性死亡来实现的。

关键词：蓝舌病毒凋亡非凋亡性程序性死亡 Hep-3B细胞 A549细胞

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乙型肝炎抗病毒药物研究进展

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科学通报 2019年第30期64卷 3123-3141页

作者：徐在超赵凯涛江应安夏宇尘武汉大学基础医学院医学病毒学研究所病毒学国家重点实验室湖北省过敏及免疫相关疾病重点实验室武汉430071 武汉大学人民医院感染科武汉430071

乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)在世界范围内流行,能够引起急、慢性肝炎,其中长期慢性感染可增加肝硬化及肝癌的发病风险.抗病毒药物治疗是控制HBV慢性感染的有效方法.目前应用于临床的抗HBV药物主要有两类:α干扰素和核苷(酸)类... 详细信息

乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)在世界范围内流行,能够引起急、慢性肝炎,其中长期慢性感染可增加肝硬化及肝癌的发病风险.抗病毒药物治疗是控制HBV慢性感染的有效方法.目前应用于临床的抗HBV药物主要有两类:α干扰素和核苷(酸)类似物.这两种药物虽然可以抑制病毒复制,减轻或消除肝脏病理损害并有效阻止病情向肝硬化和肝癌发展,但并不能有效地达到HBV表面抗原(HBV surface antigen,HBsAg)使其转阴并清除病毒共价闭合环状DNA(covalently closed circular DNA,cccDNA),所以HBV慢性感染很难治愈.近年来,随着人们对HBV研究的深入,针对其复杂的感染机制及病毒与宿主免疫系统之间相互作用的不同靶点药物被相继开发出来.本文对近年来在病毒直接靶向和宿主靶向药物(一些目前正处于临床试验阶段),以及免疫治疗药物研发方面所取得的进展进行综述.此外,还对高通量筛选技术(unbiased high-throughput screens)寻找新的抗病毒化合物,以及老药新用的策略用于抑制HBV进行了探讨.

关键词：乙型肝炎病毒药物直接抗病毒药物免疫疗法药物筛选

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人CD59基因克隆、原核表达及其多克隆抗体的制备

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细胞与分子免疫学杂志 2009年第10期25卷 924-926页

作者：唐洁孙平章晓联武汉大学基础医学院免疫系病毒学国家重点实验室湖北武汉430071

目的:构建人CD59真核及原核表达质粒,并制备抗人CD59多克隆抗体,以用于研究糖蛋白CD59生物学功能。方法:用RT-PCR技术从人PBMCs中获取hCD59全长及其胞外区hsCD59cDNA序列,分别克隆至pVAX-1真核表达载体及pGEX-KG原核表达载体。重组融合... 详细信息

目的:构建人CD59真核及原核表达质粒,并制备抗人CD59多克隆抗体,以用于研究糖蛋白CD59生物学功能。方法:用RT-PCR技术从人PBMCs中获取hCD59全长及其胞外区hsCD59cDNA序列,分别克隆至pVAX-1真核表达载体及pGEX-KG原核表达载体。重组融合蛋白GST-hsCD59由经IPTG诱导的大肠杆菌BL21表达后纯化并鉴定。用pVAX-1-hCD59质粒免疫家兔并用纯化的GST-hsCD59融合蛋白加强免疫制备兔抗人CD59多克隆抗体并测定其效价。结果:成功构建人CD59真核表达质粒pVAX-1-hCD59和原核表达质粒pGEX-KG-hsCD59。融合蛋白GST-hsCD59在大肠杆菌中高效表达,表达产物的相对分子质量(Mr)同预期值一致。制备的兔抗人CD59多克隆抗体效价为1∶3200。结论:成功地构建了重组真核表达质粒pVAX-1-hCD59及原核表达质粒pGEX-KG-hsCD59,获得了兔抗人CD59多克隆抗体,这将有助于我们深入研究CD59在人类疾病中的生物学功能。

关键词：人CD59 克隆多克隆抗体

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病毒与宿主细胞的糖基化修饰及相关功能

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生物化学与生物物理进展 2017年第10期44卷 898-907页

作者：向田章晓联武汉大学病毒学国家重点实验室湖北省过敏及免疫相关疾病重点实验室武汉大学医学研究院武汉大学基础医学院免疫学系武汉430071

病毒的复制和对宿主的入侵与自身结构蛋白的糖基化修饰密切相关.对于宿主而言,在病毒感染宿主和宿主抗病毒的过程中,宿主的糖基化过程一方面可抑制病毒的复制和入侵,另一方面可促进病毒对宿主的感染,抑制宿主糖苷酶可抑制病毒的复制.从... 详细信息

病毒的复制和对宿主的入侵与自身结构蛋白的糖基化修饰密切相关.对于宿主而言,在病毒感染宿主和宿主抗病毒的过程中,宿主的糖基化过程一方面可抑制病毒的复制和入侵,另一方面可促进病毒对宿主的感染,抑制宿主糖苷酶可抑制病毒的复制.从病毒方面来看,由于病毒自身缺乏糖基化修饰系统,病毒的糖基化过程是借宿主细胞内的合成系统对自身进行糖基化修饰.病毒的糖基化过程对病毒蛋白的折叠与稳定、病毒的感染和入侵、参与识别宿主细胞受体和参与病毒的免疫逃逸等过程起着重要的作用.随着糖基化研究技术的发展,以糖基化为基础的功能应用也越来越深入:如新型病毒疫苗和新型抗病毒药物的研制,以糖蛋白质组学研究为基础的质谱技术和生物信息学方法的发展,以及利用糖基化对病毒性疾病的诊断和治疗等,这些均为糖基化深入研究发展奠定了基础.本文就病毒与宿主细胞糖基化过程、相关功能以及研究应用等进展作一综述.

关键词：糖基化修饰病毒宿主

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丙型肝炎病毒和肝细胞抗病毒机制相互作用的研究进展

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中华疾病控制杂志 2018年第3期22卷 302-307页

作者：张标霍文哲武汉大学基础医学院病毒学国家重点实验室湖北武汉430071

丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)是引起慢性肝炎和肝癌的主要病因之一。HCV感染可刺激靶细胞(肝细胞)产生干扰素和干扰素刺激因子,后者能在HCV感染复制周期的不同阶段抑制病毒。因此,肝细胞自身的天然免疫对识别和阻断HCV感染复制... 详细信息

丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)是引起慢性肝炎和肝癌的主要病因之一。HCV感染可刺激靶细胞(肝细胞)产生干扰素和干扰素刺激因子,后者能在HCV感染复制周期的不同阶段抑制病毒。因此,肝细胞自身的天然免疫对识别和阻断HCV感染复制至关重要,是机体抗HCV感染的重要防御机制之一。然而,HCV可通过多种机制逃逸肝细胞的天然免疫反应。本文主要描述肝细胞的抗病毒机制对HCV的识别、抑制以及HCV逃逸和拮抗肝细胞天然免疫机制的研究进展。

关键词：肝炎,丙型肝细胞免疫,天然

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空心莲子草类盐抗汉坦病毒作用研究

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中国药学杂志 2006年第22期41卷 1713-1715页

作者：侯炜杨占秋毛琳李晶晶肖红程丽文利周俊武汉大学医学院病毒学研究所病毒学国家重点实验室武汉430071

目的明确空心莲子草类盐抗汉坦病毒（HV）的作用机制。方法采用噻唑兰（MTT）比色法检测细胞活性、免疫荧光法（IFA）和逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测病毒滴度和病毒核酸，以确定空心莲子草类盐细胞内抗HV作用。结果空心莲子草... 详细信息

目的明确空心莲子草类盐抗汉坦病毒（HV）的作用机制。方法采用噻唑兰（MTT）比色法检测细胞活性、免疫荧光法（IFA）和逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测病毒滴度和病毒核酸，以确定空心莲子草类盐细胞内抗HV作用。结果空心莲子草类盐对HV无直接灭活作用，也不能阻止HV的吸附，这表现在各药物浓度组病毒滴度均在5．7以上；空心莲子草类盐有抑制HV生物合成作用，在质量浓度为40-320mg·L^-1内，随着药物质量浓度的增加，病毒滴度、细胞培养液中病毒核酸的阳性稀释度逐渐降低，抗病毒指数逐渐增加，并表现出量效关系，药物治疗组的病毒滴度明显低于病毒对照组（P〈0.05）。结论空心莲子草类盐在体外通过抑制病毒生物合成而发挥抗HV作用。

关键词：汉坦病毒空心莲子草体外抗病毒实验

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湖北地区HFRS患者血清与欧洲汉坦病毒重组核抗原的反应性研究

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中华流行病学杂志 2008年第6期29卷 577-580页

作者：李晴陈文杨占秋厦门大学医学院基础医学部 361005 武汉大学医学病毒学研究所病毒学国家重点实验室

目的用欧洲汉坦病毒流行株制备重组核抗原，检测湖北地区HFRS患者血清中汉坦病毒特异性抗体，观察流行于不同地区汉坦病毒的相关性。方法收集湖北地区34例HFRS患者急性／恢复期血清，以ELISA法检测血清标本对欧洲汉坦病毒重组核抗原（... 详细信息

目的用欧洲汉坦病毒流行株制备重组核抗原，检测湖北地区HFRS患者血清中汉坦病毒特异性抗体，观察流行于不同地区汉坦病毒的相关性。方法收集湖北地区34例HFRS患者急性／恢复期血清，以ELISA法检测血清标本对欧洲汉坦病毒重组核抗原（rNP）的反应性。结果多不拉伐病毒（DOBV）-rNP对IgA抗体检出率最高，汉滩病毒（HTNV）-rNP对IgG抗体检出率最高，两者对IgM抗体检出率的差异无统计学意义；普马拉病毒（PUUV）-rNP对各种抗体检出率均低，但有3例患者急性期和恢复期标本对3种PUUV-rNP均有很强反应性。定量分析结果发现，IgM抗体水平急性期较高，IgA抗体水平急性期、恢复期均较高；IgA、IgG抗体水平恢复期均显著升高。结论 DOBV-rNP对湖北地区HFRS患者血清检出率高，IgA抗体水平在急性期和恢复期均较高，对疾病的监测具有重要意义；湖北地区可能存在PUU型和DOB型汉坦病毒流行。

关键词：肾综合征出血热汉坦病毒抗体水平

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猴痘的流行病学、临床特征、诊断与防控

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武汉大学学报（医学版） 2023年第2期44卷 127-131,168页

作者：牟晓丽侯炜陈述亮病毒学国家重点实验室/武汉大学基础医学院医学病毒学研究所湖北武汉430071

猴痘(MPX)是由猴痘病毒(MPXV)引起的一种人兽共患病,猴痘病毒因分离于1958年丹麦哥本哈根实验室发热和痘疹的猕猴体内而得名。猴痘早期散发于中、西非洲人烟稀少的雨林地带,后多发生于刚果民主共和国,近年来,西非和中非人类感染猴痘病... 详细信息

猴痘(MPX)是由猴痘病毒(MPXV)引起的一种人兽共患病,猴痘病毒因分离于1958年丹麦哥本哈根实验室发热和痘疹的猕猴体内而得名。猴痘早期散发于中、西非洲人烟稀少的雨林地带,后多发生于刚果民主共和国,近年来,西非和中非人类感染猴痘病例的频率和地理分布有所增加。其主要临床表现为起病突然、发热和全身不适,伴以皮肤出疹,但不易与天花、轻型水痘鉴别。除猴子外,其他灵长类动物和啮齿动物都可感染猴痘病毒。本综述旨在对猴痘病毒的病原学、流行病学以及病毒感染后的诊断、治疗和防治措施进行详细介绍,为积极防范和应对猴痘病毒的流行提供帮助。

关键词：正痘病毒猴痘猴痘病毒新发传染病人畜共患病

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精液源性多肽促HIV感染及相关拮抗物的研究进展

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中国艾滋病性病 2016年第7期22卷 582-584,F0003,F0004页

作者：周润宏霍文哲武汉大学基础医学院病毒学国家重点实验室武汉430071

性行为是目前艾滋病病毒(HIV)传播的主要途径,超过80%的新发HIV感染是通过性传播。精液不仅是HIV的载体,而且含有能增强HIV感染的多肽。体外实验证明,精液中的前列腺磷酸酶多肽成分(PAP248-286、PAP85-120)能和精囊蛋白(SEM1、SEM2)的... 详细信息

性行为是目前艾滋病病毒(HIV)传播的主要途径,超过80%的新发HIV感染是通过性传播。精液不仅是HIV的载体,而且含有能增强HIV感染的多肽。体外实验证明,精液中的前列腺磷酸酶多肽成分(PAP248-286、PAP85-120)能和精囊蛋白(SEM1、SEM2)的多肽片段形成淀粉样原纤维,显著促进HIV感染。这些精液源性多肽利用其独特的cross-β淀粉样原纤维结构和富含阳离子的表面电荷,在病毒和靶细胞间形成阳离子桥(cationic bridge),促进病毒结合靶细胞,从而增强HIV感染。因此,研究人员目前正在研发多种以精液源性多肽为靶点的药物,用于预防HIV性传播。这些药物包括阴离子聚合物、绿茶提取物(EGCG)、苯并噻唑苯胺(BTA)等。体外实验证明,这些药物能抵消精液源性多肽介导的促HIV感染的作用。文章描述了有关精液源性多肽促进HIV感染的研究,以及相关拮抗物的研发工作。

关键词：艾滋病病毒精液源性病毒感染增强因子淀粉样原纤维 PAP85-120 精囊蛋白杀微生物剂

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拉沙热的流行病学、临床特征、诊断与防控

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武汉大学学报（医学版） 2024年第5期45卷 619-624页

作者：熊朝瑞侯炜病毒学国家重点实验室/武汉大学泰康医学院(基础医学院) 湖北武汉430071

拉沙热(LF)是由拉沙病毒(LASV)引起的一种急性人畜共患病。拉沙病毒分离于1970年耶鲁医学院中一位来自尼日利亚东北部博尔诺州拉沙镇感染不明原因发热疾病的护士而得名,是一种高致病性病毒,被归类为生物安全4级病原体。拉沙热主要流行... 详细信息

拉沙热(LF)是由拉沙病毒(LASV)引起的一种急性人畜共患病。拉沙病毒分离于1970年耶鲁医学院中一位来自尼日利亚东北部博尔诺州拉沙镇感染不明原因发热疾病的护士而得名,是一种高致病性病毒,被归类为生物安全4级病原体。拉沙热主要流行在几内亚、利比里亚、尼日利亚和塞拉利昂等西非国家。最近几年,拉沙病毒的流行范围在逐渐增加,美国、加拿大、英国、瑞典和德国等也报道了拉沙热病例,引起了人们的广泛关注。拉沙热主要临床表现为弥漫性血管内凝血、广泛的黏膜出血、多器官衰竭和休克,但发病早期症状与其他病毒性出血热相似,给患者的及时诊断与治疗带来巨大挑战。本综述旨在对拉沙病毒的病原学、流行病学以及病毒的诊断和防控措施进行介绍,为积极应对国内可能出现拉沙病毒的流行提供帮助。

关键词：拉沙热拉沙病毒沙粒病毒人畜共患病

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