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2006年度学术研讨会

作者：胡俊陈杰梁科戴莹董长垣武汉大学基础医学院病毒学国家重点实验室分子病毒与癌研究室武汉大学基础医学院病毒学国家重点实验室分子病毒与癌研究室武汉大学基础医学院病毒学国家重点实验室分子病毒与癌研究室武汉大学基础医学院病毒学国家重点实验室分子病毒与癌研究室武汉大学基础医学院病毒学国家重点实验室分子病毒与癌研究室

本研究室在对蓝舌病毒中国湖北株3(BTV-HbC3)长期的研究过程中,已初步明确BTV-HbC3具备成为一种溶癌病毒的潜能。但该病毒抗肿瘤及体外诱导多种肿瘤细胞死亡的效应有所不同,其抗肿瘤的确切分子机制也不十分清楚,针对此问题,本研究选取... 详细信息

本研究室在对蓝舌病毒中国湖北株3(BTV-HbC3)长期的研究过程中,已初步明确BTV-HbC3具备成为一种溶癌病毒的潜能。但该病毒抗肿瘤及体外诱导多种肿瘤细胞死亡的效应有所不同,其抗肿瘤的确切分子机制也不十分清楚,针对此问题,本研究选取对蓝舌病毒较为敏感的人肝癌Hep-3B细胞和人肺腺癌A549细胞,以多种手段探讨了蓝舌病毒湖北株致肿瘤细胞死亡的方式及其潜在作用机制。

关键词：溶癌病毒蓝舌病毒湖北株3(BTV-HbC3) 凋亡非凋亡性程序性死亡 Hep-3B细胞 A549细胞

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蓝舌病毒及其dsRNA分子诱导不同性质细胞产生干扰素和进入凋亡后果的比较研究

蓝舌病毒及其dsRNA分子诱导不同性质细胞产生干扰素和进入凋亡后...

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2006年度学术研讨会

作者：戴莹胡俊陈晓王璐璐董长垣武汉大学基础医学院病毒学国家重点实验室分子病毒与癌研究室武汉大学基础医学院病毒学国家重点实验室分子病毒与癌研究室武汉大学基础医学院病毒学国家重点实验室分子病毒与癌研究室武汉大学基础医学院病毒学国家重点实验室分子病毒与癌研究室武汉大学基础医学院病毒学国家重点实验室分子病毒与癌研究室

本研究是为了探讨蓝舌病毒(Bluetongue Virus,BTV)及其dsRNA分子诱导人宫颈癌Hela细胞、人胚肺HEL正常细胞产生干扰素(Interferon,IFN)量和引起细胞凋亡的差异的生物医学意义。

关键词：病毒dsRNA 干扰素诱导细胞凋亡

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季德胜蛇药片体外抗疱疹病毒的药效学研究

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山东中医药大学学报 2006年第3期30卷 258-259页

作者：何静杨占秋刘媛媛肖红梁桃圣武汉大学医学院病毒学研究所病毒学国家重点实验室湖北武汉430071 江苏南通精华制药有限公司江苏南通226005

季德胜蛇药片是一种传统的中成药,由重楼、地锦草、蟾酥皮等10多味中草药组成,具有清热解毒、活血化瘀、消肿止痛等功效,主治毒蛇、毒虫咬伤。近年来临床研究发现,该药还具有治疗带状疱疹等疾病的功效…1,提示该药具有抗疱疹病毒的作用... 详细信息

季德胜蛇药片是一种传统的中成药,由重楼、地锦草、蟾酥皮等10多味中草药组成,具有清热解毒、活血化瘀、消肿止痛等功效,主治毒蛇、毒虫咬伤。近年来临床研究发现,该药还具有治疗带状疱疹等疾病的功效…1,提示该药具有抗疱疹病毒的作用。我们选择临床上常见、人群中多发的单纯疱疹病毒(herpes simplexvirus,HSV)和水痘带状疱疹病毒(varicella-zoster virus,VZV)作为研究对象,通过细胞内抗病毒实验,研究该药在体外抗HSV和VZV的作用,为这两种病毒感染的治疗提供新的实验依据。[第一段]

关键词：季德胜蛇药片单纯疱疹病毒Ⅰ型水痘带状疱疹病毒抗病毒作用

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糖基化与HCVE2诱导的体液免疫应答相关性的研究

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微生物学杂志 2006年第5期26卷 19-22页

作者：李平飞李艳梅赵兰娟刘敏万崎陈新文章晓联武汉大学病毒学国家重点实验室基础医学院免疫学系和过敏及其免疫相关疾病湖北省重点实验室湖北武汉430071 清华大学生命有机磷化学及化学生物学教育部重点实验室第二军医大学微生物学教研室中国科学院武汉病毒研究所湖北武汉430071

检测丙型肝炎病毒(Hepatitis C Virus,HCV)包膜蛋白E2糖基化位点对体液免疫功能的影响。野生型E2基因和糖基化突变体型E2基因的真核表达质粒DNA分别肌肉注射BALB/C小鼠,免疫3次,末次免疫后第10 d,眼眶摘眼球取血清,断椎处死小鼠,同时设... 详细信息

检测丙型肝炎病毒(Hepatitis C Virus,HCV)包膜蛋白E2糖基化位点对体液免疫功能的影响。野生型E2基因和糖基化突变体型E2基因的真核表达质粒DNA分别肌肉注射BALB/C小鼠,免疫3次,末次免疫后第10 d,眼眶摘眼球取血清,断椎处死小鼠,同时设阴性对照和空载质粒对照。血清标本用ELISA检测特异性IgG及其亚类IgG1I、gG2α表达水平,观测特异性体液免疫反应和脾细胞分泌细胞因子水平。与阴性对照和空载组对比,E2和N-糖基化突变体质粒DNA免疫小鼠都能诱导产生强烈的特异性免疫反应(P<0.01),并且N-糖基化突变体(560、576位糖基化突变体)质粒DNA与野生型E2相比,其特异性IgG效价明显降低(P<0.05),IL-4分泌水平明显降低(P<0.05)。E2糖蛋白的560、576位N-糖基化位点是诱导体液免疫反应所需要的,除去560、576位N-糖基化会降低E2诱导的体液免疫应答。

关键词： HCV 包膜蛋白糖基化体液免疫

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糖基化与HCVE2诱导的体液免疫应答相关性的研究

糖基化与HCVE2诱导的体液免疫应答相关性的研究

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第五届全国感染与免疫及生物制品学术研讨会

作者：李平飞李艳梅赵兰娟刘敏万崎陈新文章晓联武汉大学病毒学国家重点实验室基础医学院免疫学系和过敏及其免疫相关疾病湖北省重点实验室湖北武汉430071 中国科学院武汉病毒研究所湖北武汉430071 清华大学生命有机磷化学及化学生物学教育部重点实验室第二军医大学微生物学教研室

丙型肝炎病毒(Hepatitis C Virus,HCV)包膜蛋白E2糖基化位点对体液免疫功能的影响.野生型E2基因和糖基化突变体型E2基因的真核表达质粒DNA分别肌肉注射BALB/C小鼠,免疫 3 次,末次免疫后第 10 d,眼眶摘眼球取血清,断椎处死小鼠,同时设阴... 详细信息

丙型肝炎病毒(Hepatitis C Virus,HCV)包膜蛋白E2糖基化位点对体液免疫功能的影响.野生型E2基因和糖基化突变体型E2基因的真核表达质粒DNA分别肌肉注射BALB/C小鼠,免疫 3 次,末次免疫后第 10 d,眼眶摘眼球取血清,断椎处死小鼠,同时设阴性对照和空载质粒对照.血清标本用ELISA检测特异性IgG及其亚类IgG1、IgG2α表达水平,观测特异性体液免疫反应和脾细胞分泌细胞因子水平.与阴性对照和空载组对比,E2和N-糖基化突变体质粒DNA免疫小鼠都能诱导产生强烈的特异性免疫反应(P＜0.01),并且N-糖基化突变体(560、576 位糖基化突变体)质粒DNA与野生型E2相比,其特异性IgG效价明显降低(P＜0.05),IL-4分泌水平明显降低(P＜0.05).E2糖蛋白的 560、576 位N-糖基化位点是诱导体液免疫反应所需要的,除去 560、576 位N-糖基化会降低E2诱导的体液免疫应答.

关键词： HCV 包膜蛋白糖基化体液免疫

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中国湖北地区汉坦病毒M片断基因变异的研究

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武汉大学学报（医学版） 2005年第6期26卷 683-688页

作者：梁雨丁晓华杨占秋毛琳武汉大学医学院病毒学研究所病毒学国家重点实验室武汉430071

目的:了解中国湖北地区汉坦病毒的遗传学特征.方法:采集2000～2001年肾综合征出血热(HFRS)患者的血液标本,通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增汉坦病毒M片断基因.22例IgM阳性患者中,从 5例患者的血凝块中扩增得到特异性PCR产物.结果:对... 详细信息

目的:了解中国湖北地区汉坦病毒的遗传学特征.方法:采集2000～2001年肾综合征出血热(HFRS)患者的血液标本,通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增汉坦病毒M片断基因.22例IgM阳性患者中,从 5例患者的血凝块中扩增得到特异性PCR产物.结果:对550bp和403bp扩增产物进行的系统进化分析揭示汉坦病毒至少存在3个不同分支.W613株和W1141株与原型株HTN76-118,CUMC-B11(韩国),cl-l和cl-2(日本)同一分支;W1219株和H8205同一分支;另外两株与A9和HV114同一分支.结论:首次发现湖北地区人类汉坦病毒株与韩国和日本的HTN型具有高度序列同源性.

关键词：肾综合征出血热汉坦病毒系统进化分析分子流行病学

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实验性SARS-CoV灭活疫苗对恒河猴的免疫原性与安全性研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2005年第4期25卷 302-306页

作者：钟琼杨占秋周俊王薇侯炜朱润庆唐志娇王勇鲜巧阳武汉大学医学院病毒学研究所病毒学国家重点实验室 430071 武汉大学医学院病理学教研室武汉大学实验动物中心

目的　利用恒河猴评价实验性SARS冠状病毒灭活疫苗免疫原性与安全性。方法　动物免疫分3组,分别为肌肉注射0.5μg、5μg、50μg疫苗组及磷酸盐缓冲液(PBS)对照组,同时设超大剂量(5000μg)观察疫苗安全性,并于初次免疫后7 d再次免疫,监... 详细信息

目的　利用恒河猴评价实验性SARS冠状病毒灭活疫苗免疫原性与安全性。方法　动物免疫分3组,分别为肌肉注射0.5μg、5μg、50μg疫苗组及磷酸盐缓冲液(PBS)对照组,同时设超大剂量(5000μg)观察疫苗安全性,并于初次免疫后7 d再次免疫,监测免疫前后动物体液免疫、黏膜免疫及血清细胞因子变化,观察临床症状及生化指标。结果　0.5μg和5μg剂量组可诱导部分免疫应答,50μg剂量组则能诱导针对SARS CoV的特异性免疫应答,且各免疫组动物均未出现不良反应。结论SARS CoV灭活疫苗在恒河猴体内能有效诱导针对SARS CoV感染的体液和黏膜免疫应答并且安全性较好。

关键词：灭活疫苗恒河猴实验性安全性研究 SARS-CoV感染特异性免疫应答疫苗免疫原性磷酸盐缓冲液细胞因子变化黏膜免疫应答疫苗安全性 5μg 病毒灭活动物免疫肌肉注射超大剂量体液免疫免疫前后生化指标临床症状

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空心莲子草微乳体外抗柯萨奇病毒B3的实验研究

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武汉大学学报（医学版） 2005年第6期26卷 700-703页

作者：王薇陈寒梅杨占秋邱国福胡先明武汉大学医学院病毒学研究所病毒学国家重点实验室武汉430071 武汉大学药学院武汉430072

目的:观察空心莲子草微乳在体外抗柯萨奇病毒B3(CVB3)的作用,为将纳米技术应用于该药的研发提供理论依据。方法:提取空心莲子草抗病毒活性成分并制备成微乳制剂,以高效液相法测定微乳中空心莲子草浓度,测定微乳的粒径及其分布,考察微乳... 详细信息

目的:观察空心莲子草微乳在体外抗柯萨奇病毒B3(CVB3)的作用,为将纳米技术应用于该药的研发提供理论依据。方法:提取空心莲子草抗病毒活性成分并制备成微乳制剂,以高效液相法测定微乳中空心莲子草浓度,测定微乳的粒径及其分布,考察微乳的稳定性,通过细胞实验评价药物的抗病毒作用。结果:微乳的平均粒径为32 nm,具有很好的稳定性,有明显抑制CVB3的作用,治疗指数27.31。结论:空心莲子草微乳有显著的抗CVB3的作用,微乳化的空心莲子草安全性比未经微乳化的高。

关键词：微乳空心莲子草柯萨奇病毒B3 抗病毒作用

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新的核苷类化合物β-L-D4A的化学合成及体外抗HBV作用

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药学学报 2005年第9期40卷 825-829页

作者：吴金明林菊生谢娜邱国福胡先明温州医学院附属第一医院消化内科浙江温州325000 华中科技大学同济医学院附属同济医院肝病研究所湖北武汉430030 武汉大学药学院病毒学国家重点实验室湖北武汉430072

目的以D型谷氨酸为原料,通过一系列化学转化,合成了新的核苷类化合物βLD4A,并初步探索其体外抗HBV作用。方法合成βLD4A,用红外光谱、核磁共振氢谱和质谱确证目标化合物的结构,以2.2.15细胞(HepG2细胞进行HBV基因组转染后所得)培养为基... 详细信息

目的以D型谷氨酸为原料,通过一系列化学转化,合成了新的核苷类化合物βLD4A,并初步探索其体外抗HBV作用。方法合成βLD4A,用红外光谱、核磁共振氢谱和质谱确证目标化合物的结构,以2.2.15细胞(HepG2细胞进行HBV基因组转染后所得)培养为基础,Southern印迹法检测不同浓度化合物体外抑制HNVDNA复制作用,并求出50%抑制的药物浓度,即EC50。以四噻唑蓝(MTT)比色分析法检测不同浓度药物的细胞毒性,求出IC50。结果化合物βLD4A经红外光谱、核磁共振氢谱和质谱确证;2.2.15细胞培养上清液病毒DNA的Southern印迹、自显影结果显示病毒的抑制呈明显的浓度依赖性,计算出EC50为0.2μmol·L-1,胞内DNA的Southern印迹、自显影显示类似的结果;细胞毒性实验显示IC50为200μmol·L-1。结论体外实验显示βLD4A具有明显的抑制病毒DNA复制作用,且无明显的细胞毒性,TI值为1000,高于临床用Lamivudine(750),有望开发为临床抗HBV用药。

关键词：核苷类化合物 β-L-D4A 化学合成乙肝病毒

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反显性突变Tat蛋白抑制人免疫缺陷病毒1型的复制

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自然科学进展（国家重点实验室通讯） 1999年第7期9卷 602-605页

作者：白龙川胡松年赵全壁邵一鸣强伯勤中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005 中国预防医学科学院病毒学研究所北京100052

Tat(Transactivator)蛋白是人免疫缺陷病毒HIV基因组编码的反式激活因子。为了进一步研究M5 Tat和M6 Tat蛋白对HIV病毒复制的抑制作用,将可被Tat调控的启动子YL158替换基因治疗中常用的逆转录病毒载体LNCX中的CMV启动子,构建了表达上述... 详细信息

Tat(Transactivator)蛋白是人免疫缺陷病毒HIV基因组编码的反式激活因子。为了进一步研究M5 Tat和M6 Tat蛋白对HIV病毒复制的抑制作用,将可被Tat调控的启动子YL158替换基因治疗中常用的逆转录病毒载体LNCX中的CMV启动子,构建了表达上述反显性Tat蛋白的逆转录病毒载体,随后导入双向性包装细胞PA317细胞中,用产生出的复制缺陷病毒感染MT4 T淋巴细胞.用HIV-1病毒攻击稳定表达有M5和M6 Tat蛋白的MT4细胞;结果显示,M5和M6 Tat蛋白均能抑制低剂量的HIV-1病毒的复制。

关键词：人免疫缺陷病毒 1型反显性 Tat蛋白

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