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华泽兰根部乙酸乙酯萃取物基于NF-κB及NLR-P3炎症小体信号通路对NIH-3T3小鼠胚胎成纤维细胞功能的影响

中华中医药学刊 2023年第4期41卷 144-150,I0040,I0041页

作者：杜冯邹坤黄文峰天然产物研究与利用湖北省重点实验室三峡大学医学院湖北宜昌443002 三峡大学国家中医药管理局中药药理科研三级实验室湖北宜昌443002

目的探讨华泽兰乙酸乙酯萃取物对小鼠胚胎成纤维细胞(NIH-3T3)功能的影响。方法从炎症因子一氧化氮(NO)及氧化应激重要因素活性氧(ROS)介入,通过核因子κB(NF-κB)及核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLR-P3)炎症小体等信号通路角度... 详细信息

目的探讨华泽兰乙酸乙酯萃取物对小鼠胚胎成纤维细胞(NIH-3T3)功能的影响。方法从炎症因子一氧化氮(NO)及氧化应激重要因素活性氧(ROS)介入,通过核因子κB(NF-κB)及核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLR-P3)炎症小体等信号通路角度阐明其作用机制。体外培养NIH-3T3细胞,分为空白对照组(Control)、不同浓度华泽兰根部乙酸乙酯萃取物组,检测不同浓度下华泽兰根部乙酸乙酯萃取物对NIH-3T3细胞Toll增殖活性(MTT法)、细胞迁移(细胞划痕实验)、分泌NO及胞内ROS生成的影响,Western blot法检测其对Toll样受体4(TLR-4)、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、NLR-P3、NF-κB、髓样分化因子(Myd88)、核因子抑制蛋白α(IκBα)、白细胞介素-18(IL-18)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Caspase-1)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、环氧化酶-2(COX-2)蛋白表达的影响。结果细胞增殖与细胞划痕实验表明,华泽兰根部乙酸乙酯萃取物对于NIH-3T3细胞的增殖与划痕愈合影响具有双向性。与对照组相比在低浓度下(<6.25μg·mL^(-1)),萃取物有促进NIH-3T3细胞增殖与迁移的作用,而高浓度(>25μg·mL^(-1))反而表现出对NIH-3T3细胞的增殖与迁移抑制作用,且不同阶段呈现出相应的剂量依赖性,与对照组相比有统计学意义(P<0.05)。在萃取物浓度为6.25μg·mL^(-1)时,NO生成量相较于低浓度组差异有显著统计学意义(P<0.01),而高浓度组(>12.5μg·mL^(-1))相较对照组差异无统计学意义(P>0.05)。细胞内ROS生成实验表明,经华泽兰根部乙酸乙酯萃取物处理后ROS生成量显著高于对照组(P<0.05,P<0.01)。Western blot实验表明,与对照组相比,萃取物作用浓度为6.25μg·mL^(-1)时,细胞内NF-κB、TLR-4、Myd88、NLR-P3、ASC表达显著升高(P<0.01),IκBα表达升高(P<0.05),IL-18表达显著降低(P<0.01),Caspase-3表达降低(P<0.05)。结论华泽兰乙酸乙酯萃取物对小鼠胚胎成纤维细胞(NIH-3T3)增殖的影响具有双向性,即低浓度促进细胞增殖而高浓度抑制细胞增殖。其作用机制可能与NF-κB及NLR-P3炎症小体信号通路和细胞凋亡有关。

关键词：华泽兰 NIH-3T3细胞细胞功能 NF-κB 炎症小体

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炮天雄多糖硫酸酯衍生物的制备及生物活性研究

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中药新药与临床药理 2022年第3期33卷 349-355页

作者：邱昆成卢仲禹张忠德刘云涛朱伟三峡大学国家中医药管理局中药药理科研三级实验室三峡大学医学院湖北宜昌443002 广州中医药大学第二临床医学院广东广州510120

目的制备岭南炮天雄多糖(PTXP)硫酸酯化衍生物,评价其抗氧化、免疫调节和抗肿瘤活性。方法使用三氧化硫-吡啶法制备炮天雄多糖硫酸酯衍生物,用红外光谱测定炮天雄多糖硫酸酯衍生物的结构,用氯化钡-明胶比浊法测定硫酸基的取代度(DS),通... 详细信息

目的制备岭南炮天雄多糖(PTXP)硫酸酯化衍生物,评价其抗氧化、免疫调节和抗肿瘤活性。方法使用三氧化硫-吡啶法制备炮天雄多糖硫酸酯衍生物,用红外光谱测定炮天雄多糖硫酸酯衍生物的结构,用氯化钡-明胶比浊法测定硫酸基的取代度(DS),通过体外抗氧化实验检测炮天雄多糖硫酸酯衍生物的抗氧化能力,用CCK-8法检测炮天雄多糖硫酸酯衍生物对小鼠脾淋巴细胞增殖活性的影响,以HepG2肝癌细胞增殖实验探究炮天雄多糖硫酸酯衍生物的抗肿瘤活性。结果炮天雄多糖的硫酸基取代度随着三氧化硫吡啶复合物用量增加而增加。红外光谱检测发现1220 cm^(-1)与810 cm^(-1)附近分别出现S=O与C-O-S的吸收峰,说明炮天雄多糖分子上已经成功引入硫酸基团。体外抗氧化实验结果说明炮天雄多糖的硫酸酯衍生物有清除DPPH和ABTS自由基能力(P<0.05)。小鼠脾淋巴细胞增殖实验结果说明炮天雄多糖硫酸酯衍生物的炮天雄多糖-S2(PTXP-S2)能促进小鼠脾淋巴细胞的增殖(P<0.05,P<0.01,P<0.001)。抗肿瘤细胞增殖实验则说明PTXP-S2有一定的抗肿瘤活性(P<0.05,P<0.01,P<0.001)。结论炮天雄多糖经硫酸酯化修饰后有一定的抗氧化与免疫调节活性,但抗肿瘤活性不明显。

关键词：炮天雄多糖硫酸酯化抗氧化免疫调节抗肿瘤活性

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TAM在肿瘤免疫治疗中的研究进展

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肿瘤 2023年第3期43卷 209-220页

作者：程叶蒯晴叶张艳傅静云潘宇陈涛三峡大学健康医学院药学系湖北宜昌433000 国家中医药管理局中药药理(肿瘤)科研三级实验室湖北宜昌433000 三峡大学基础医学院临床医学系湖北宜昌433000 三峡大学健康医学院中医系湖北宜昌433000

肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophage,TAM)是肿瘤微环境中一类免疫细胞,主要存在于肿瘤基质中以介导炎症反应。通常TAM可由不同因素刺激后极化成表型不同的M1型和M2型巨噬细胞。在肿瘤早期,TAM中以M1型巨噬细胞为主发挥促炎... 详细信息

肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophage,TAM)是肿瘤微环境中一类免疫细胞,主要存在于肿瘤基质中以介导炎症反应。通常TAM可由不同因素刺激后极化成表型不同的M1型和M2型巨噬细胞。在肿瘤早期,TAM中以M1型巨噬细胞为主发挥促炎和抗肿瘤的作用,而在肿瘤的后续进展过程中逐渐极化为以M2型巨噬细胞为主发挥抑制炎症和促肿瘤的作用。大量研究表明,TAM与肿瘤的生长、侵袭、转移以及不良预后密切相关,靶向TAM成为当今抗肿瘤免疫治疗的热点。因此,本研究从TAM的起源以及其促肿瘤增殖、血管生成、迁移侵袭和生成免疫抑制环境4个方面,介绍了TAM促肿瘤的具体作用;同时,从抑制单核细胞招募、促使TAM凋亡和重塑TAM表型3个方面,深入探讨了近年来靶向TAM抗肿瘤免疫治疗的相关研究进展。

关键词：多肿瘤微环境肿瘤相关巨噬细胞免疫调控肿瘤靶向药物

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桂枝茯苓丸对子宫腺肌病小鼠肠道菌群和代谢物的调节作用研究

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中华中医药学刊 2025年第4期43卷 155-161,I0031-I0036页

作者：刘士丹陈佩佩付先芸魏绍斌王坤陈敏敏成都中医药大学附属医院代谢性疾病中医药调控四川省重点实验室四川成都610072 三峡大学国家中医药管理局中药药理三级实验室三峡大学健康医学院湖北宜昌443002 成都中医药大学附属医院四川成都610072

目的联合肠道菌群组学和代谢组学技术探索桂枝茯苓丸(Guizhi Fuling Pill,GFW)干预子宫腺肌病(adenomyosis,AM)的潜在机制。方法7周龄雌性ICR小鼠随机分为对照组、模型组和GFW组,采用同种异体垂体移植法造模,3组分别灌胃给药8周后处死... 详细信息

目的联合肠道菌群组学和代谢组学技术探索桂枝茯苓丸(Guizhi Fuling Pill,GFW)干预子宫腺肌病(adenomyosis,AM)的潜在机制。方法7周龄雌性ICR小鼠随机分为对照组、模型组和GFW组,采用同种异体垂体移植法造模,3组分别灌胃给药8周后处死。评价小鼠子宫组织病理学变化并检测离体子宫收缩频率和波幅。采用16S rRNA基因测序技术对比GFW干预前后肠道菌群Alpha及Beta多样性变化,筛选差异肠道菌群。采用液相色谱-质谱(liquid chromatography-mass spectrometry,LC-MS)技术探索GFW干预后肠道代谢产物的变化。对差异菌群及差异代谢物进行相关性分析,寻找GFW调控AM的可能机制,并进行实验验证。结果HE染色结果证实成功形成AM模型。与模型组相比,给予GFW治疗后体外子宫收缩波幅明显降低(P<0.05),收缩频率呈下降趋势。肠道菌群Alpha多样性显示3组样本间的Observed species指数、Ace指数差异均无统计学意义;Beta多样性结果表明,对照组和模型组样本肠道菌群分布有显著差异,GFW治疗后能一定程度回调AM小鼠的肠道菌群组成。进一步研究表明,AM小鼠肠道中拟杆菌门、拟杆菌属丰度显著下调(P<0.01,P<0.01),厚壁菌门、柔壁菌门相对丰度显著升高(P<0.05,P<0.05)。经GFW干预后,柔壁菌门、支原体属以及肠杆菌属丰度显著降低(P<0.05,P<0.05,P<0.01),而副拟杆菌属相对丰度显著升高(P<0.05)。代谢组学筛选结果证实AM模型小鼠具有22种与氧化应激、免疫及子宫平滑肌收缩等相关的肠道差异代谢物,如前列腺素D_(3)、谷氨酸、色氨酸、羟基二十碳四烯酸、粪胆素等。相关性分析显示,部分肠道菌群与代谢物之间存在显著相关性。实验验证结果证实,AM小鼠子宫组织中存在活性氧(reactive oxygen species,ROS)及肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factorα,TNF-α)、白介素-17(interleukin 17,IL-17)表达水平的上调,经GFW治疗后ROS及TNF-α的表达水平回调。结论GFW可改善AM小鼠子宫平滑肌收缩、氧化应激和免疫反应,其作用可能与调控AM小鼠肠道菌群及肠道代谢物有关。其具体调控机制尚待进一步的研究证实。

关键词：子宫腺肌病桂枝茯苓丸肠道菌群组学代谢组学

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肠道干细胞标记物的研究进展

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中国细胞生物学学报 2023年第8期45卷 1265-1272页

作者：李梅童乐黄玲唐小涵张长城郭煜晖三峡大学国家中医药管理局中药药理科研三级实验室三峡大学健康医学院宜昌443002

肠道干细胞(intestinal stem cells,ISCs)除了具有自我更新能力和多能性外,还表现出活跃的增殖、信号活动以及特殊的表观遗传和代谢特征。其主要作用是维护肠道组织的稳态、修复受损的肠道黏膜和调节肠道细胞分化。目前,主要有两种ISCs... 详细信息

肠道干细胞(intestinal stem cells,ISCs)除了具有自我更新能力和多能性外,还表现出活跃的增殖、信号活动以及特殊的表观遗传和代谢特征。其主要作用是维护肠道组织的稳态、修复受损的肠道黏膜和调节肠道细胞分化。目前,主要有两种ISCs,各自拥有不同的特异性标记物且具有广泛不同的生物学功能,但都与肠道疾病的发生和发展关系密切。然而,ISCs标记物的缺乏严重限制了对ISCs生物学特性的研究,阻碍了临床上ISCs及其衍生物用于治疗肠道相关疾病的研究进程。以下就近年来ISCs标记物及肠道诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSCs)的研究进展作一综述,旨在为临床治疗肠道疾病提供有益线索。

关键词：肠道干细胞 Lgr5 Olfm4 Bmi1 Lrig1

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微囊藻毒素亮氨酸精氨酸(MC-LR)损伤睾丸支持细胞免疫反应及细胞生物学行为的机制研究进展

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细胞与分子免疫学杂志 2023年第8期39卷 753-758页

作者：朱凯丽张长城邬小平刘尚雨赵雪怡袁丁赵海霞三峡大学国家中医药管理局中药药理科研三级实验室湖北宜昌443002 三峡大学基础医学院机能学系湖北宜昌443002 三峡大学健康医学院中医学系湖北宜昌443002

微囊藻毒素亮氨酸精氨酸(MC-LR)是水华爆发时微囊藻属、鱼腥藻属等蓝藻产生的一种对人类有致癌性的藻毒素。MC-LR可对雄性动物生殖系统产生毒性,导致不育,主要表现为诱导细胞凋亡、破坏细胞骨架、干扰DNA损伤修复途径或损伤血睾屏障(BTB... 详细信息

微囊藻毒素亮氨酸精氨酸(MC-LR)是水华爆发时微囊藻属、鱼腥藻属等蓝藻产生的一种对人类有致癌性的藻毒素。MC-LR可对雄性动物生殖系统产生毒性,导致不育,主要表现为诱导细胞凋亡、破坏细胞骨架、干扰DNA损伤修复途径或损伤血睾屏障(BTB)功能等。睾丸支持细胞(Sertoli细胞)是生精小管中与生精细胞直接接触的体细胞,可通过分泌多种细胞因子和免疫抑制因子调节免疫反应以维持睾丸免疫稳态,亦可与邻近生殖细胞形成BTB,为各级生精细胞提供营养、支持和保护作用的微环境。MC-LR可引发睾丸Sertoli细胞炎症、诱导细胞凋亡、破坏BTB完整性,进而造成睾丸生精功能障碍。

关键词：微囊藻毒素LR(microcystin-LR) 睾丸支持细胞凋亡血睾屏障综述

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基于对背根神经节中神经生长因子的调控探究华蟾素治疗骨癌痛的机制

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中草药 2022年第17期53卷 5427-5432页

作者：刘亚丽刘丹张文陈涛胡卫三峡大学医学院湖北宜昌443003 黄冈市中医医院湖北黄冈438000 上海中医药大学附属龙华医院上海200032 三峡大学国家中医药管理局中药药理科研三级实验室湖北宜昌443003

目的基于对骨癌痛大鼠背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)中神经生长因子(nerve growth factor,NGF)的调控,探讨中药华蟾素治疗骨癌痛的机制。方法筛选痛阈值满足条件的SD雌性大鼠构建骨癌痛模型,随机分为正常组、假手术组、模型... 详细信息

目的基于对骨癌痛大鼠背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)中神经生长因子(nerve growth factor,NGF)的调控,探讨中药华蟾素治疗骨癌痛的机制。方法筛选痛阈值满足条件的SD雌性大鼠构建骨癌痛模型,随机分为正常组、假手术组、模型组、华蟾素组、华蟾素+NGF组和anti-NGF组。华蟾素组、华蟾素+NGF组在造模第7天开始ip华蟾素,其余各组ip等体积的生理盐水;华蟾素+NGF组、anti-NGF组在造模第12天鞘内插管给药,造模21 d后处理大鼠。检测大鼠造模前后痛阈值变化;采用Western blotting法检测各组大鼠DRG中原肌球蛋白受体激酶A(tropomyosin receptor kinase A,TrkA)、p75神经营养受体(p75 neurotrophy receptor,p75NTR)、μ阿片受体(μopioid receptor,MOR)和神经递质P物质(substance P,SP)蛋白表达;采用免疫组化法检测各组大鼠DRG中MOR的表达;采用免疫荧光双标检测各组大鼠DRG中MOR与TrkA共表达情况。结果与模型组比较,华蟾素明显提高大鼠机械痛阈值与热痛阈值(P<0.01);华蟾素组抑制大鼠DRG中TrkA、p75NTR和SP蛋白表达(P<0.05、0.01),上调MOR蛋白表达(P<0.01)。华蟾素+NGF组激活大鼠DRG中TrkA、p75NTR和SP的表达(P<0.01),抑制MOR的表达(P<0.05)。结论华蟾素可能通过调节内源性NGF抑制TrkA、p75NTR的表达,激活MOR,并能够减少SP的释放,最终参与骨癌痛的镇痛过程。

关键词：华蟾素骨癌痛神经生长因子 μ阿片受体原肌球蛋白受体激酶A p75神经营养受体

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TDP-43在缺血性脑卒中的作用

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中国组织化学与细胞化学杂志 2023年第4期32卷 418-423,441页

作者：李钇朋闫文静章帆舒渝茜何治三峡大学国家中医药管理局中药药理科研三级实验室宜昌443002 三峡大学健康医学院宜昌443002

TDP-43(Transactive response DNA binding protein 43, TDP-43)最初被认为是神经退行性疾病的病理学标记蛋白,研究发现其参与脑缺血损伤的发生发展。在现有研究的基础上,简要介绍TDP-43的结构与功能以及TDP-43在脑缺血后的表达变化及... 详细信息

TDP-43(Transactive response DNA binding protein 43, TDP-43)最初被认为是神经退行性疾病的病理学标记蛋白,研究发现其参与脑缺血损伤的发生发展。在现有研究的基础上,简要介绍TDP-43的结构与功能以及TDP-43在脑缺血后的表达变化及其在脑缺血后调节炎症反应、线粒体功能障碍、自噬等方面的作用。

关键词： TDP-43 脑缺血缺血性脑卒中脑卒中

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内源性大麻素2-AG对海人藻酸诱导损伤的大鼠尾状核神经元A型钾通道电流的调制作用

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中国病理生理杂志 2023年第12期39卷 2113-2122页

作者：朱时钰陆永利李自成杨红卫三峡大学国家中医药管理局中药药理科研三级实验室湖北宜昌443002 肿瘤微环境与免疫治疗湖北省重点实验室(三峡大学) 湖北宜昌443002 三峡大学基础医学院机能学系湖北宜昌443002 宜昌市三峡中心人民医院神经内科湖北宜昌443002

目的:研究内源性大麻素2-花生四烯酰甘油(2-AG)对海人藻酸(KA)损伤的A型钾通道的调制作用及其分子机制。方法:用KA处理原代培养的大鼠尾状核(CN)神经元,建立神经兴奋性毒性细胞模型;通过全细胞膜片钳记录,观察KA介导的兴奋性毒性及2-AG... 详细信息

目的:研究内源性大麻素2-花生四烯酰甘油(2-AG)对海人藻酸(KA)损伤的A型钾通道的调制作用及其分子机制。方法:用KA处理原代培养的大鼠尾状核(CN)神经元,建立神经兴奋性毒性细胞模型;通过全细胞膜片钳记录,观察KA介导的兴奋性毒性及2-AG的神经保护作用过程中CN神经元上A型钾通道电学功能的改变。结果:在培养的大鼠尾状核神经元上,膜片钳实验显示KA明显降低CN神经元A型钾通道电流(I_(A))密度并改变通道电学功能:失活曲线斜率(k)和失活后恢复时间常数(τ)均显著增大。细胞孵育液中直接加入内源性大麻素2-AG或单酰甘油脂肪酶抑制剂URB602使2-AG水解减少而间接升高细胞内2-AG水平,均可通过大麻素受体1(CB1R)抑制KA诱导的I_(A)密度降低,有效拮抗KA所致A型钾通道τ值和k值的增大,加快A型钾通道失活后恢复过程。结论:A型钾通道电学特性的改变可能是KA造成CN神经元兴奋性毒性损伤的机制之一。2-AG可通过CB1R途径调节A型钾通道功能,从而起到神经保护作用。

关键词： 2-花生四烯酰甘油海人藻酸 A型钾通道尾状核大麻素受体1

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乙醇雄性生殖损伤及中药保护的研究进展

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中药材 2022年第2期45卷 496-500页

作者：邬小平赵海霞朱凯丽赵雪怡刘尚雨张长城三峡大学医学院湖北宜昌443002 三峡大学国家中医药管理局中药药理(肿瘤)科研三级实验室湖北宜昌443002

酗酒是造成男性不育的原因之一,其机制可能与抑制精原细胞增殖,诱导生精细胞凋亡,增加精子畸形率,影响支持细胞自噬,干扰激素水平等有关。而中药提取物和中药活性成分可通过减轻氧化应激改善乙醇对雄性生殖的损伤作用。该文主要综述了... 详细信息

酗酒是造成男性不育的原因之一,其机制可能与抑制精原细胞增殖,诱导生精细胞凋亡,增加精子畸形率,影响支持细胞自噬,干扰激素水平等有关。而中药提取物和中药活性成分可通过减轻氧化应激改善乙醇对雄性生殖的损伤作用。该文主要综述了乙醇在体内的代谢过程,诱导雄性生殖损伤的作用机制,以及中药对乙醇所致雄性生殖损伤作用的预防和治疗作用,以期为防治长期饮酒男性生精功能障碍提供新思路。

关键词：乙醇雄性生殖损伤凋亡自噬氧化应激

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