检索结果-内蒙古大学图书馆

Survivin-siRNA真核重组质粒的构建和鉴定及其对前列腺癌DU145细胞的影响

中国老年学杂志 2010年第5期30卷 642-645页

作者：刘艳波葛贺卢丽莉赵雪俭吉林大学前列腺疾病防治研究中心北华大学基础医学院病理生理学教研室吉林吉林132013

目的应用RNA干扰(RNAi)技术,构建针对凋亡抑制因子survivin的siRNA,并检测其对DU145细胞株内源性survivin基因和蛋白表达的影响。方法构建重组质粒shRNA-sur1和-sur2并分别转染DU145细胞株,通过半定量RT-PCR和Western印迹检测survivinm... 详细信息

目的应用RNA干扰(RNAi)技术,构建针对凋亡抑制因子survivin的siRNA,并检测其对DU145细胞株内源性survivin基因和蛋白表达的影响。方法构建重组质粒shRNA-sur1和-sur2并分别转染DU145细胞株,通过半定量RT-PCR和Western印迹检测survivinmRNA转录水平和蛋白表达的变化。结果成功构建针对survivin干扰的两种真核表达质粒;两种重组质粒shRNA-sur1和-sur2均能明显抑制内源性survivin基因表达,其抑制率分别为72%±8%和77%±5%;两种质粒均能明显抑制survivin蛋白的表达,其抑制率分别为75%±8%和80%±6%。结论重组质粒shRNA-sur1和-sur2均可明显抑制DU145细胞内源survivin蛋白表达和mRNA转录,为survivin介导的肿瘤基因沉默提供良好的基础。

关键词： siRNA DU145细胞株 survivin基因质粒

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DNA聚合酶β在食管癌组织中的修复功能

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世界华人消化杂志 2010年第23期18卷 2460-2463页

作者：赵四敏陈旭东张成娟赵国强董子明漯河医学高等专科学校病理生理学教研室河南省漯河市462002 漯河医学高等专科学校组织学与胚胎学教研室河南省漯河市462002 河南省肿瘤医院病理科河南省郑州市450001 郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室河南省郑州市450001 郑州大学基础医学院病理生理学教研室河南省郑州市450001

目的:观察突变型DNA聚合酶β(DNA polymerase β,polβ)的碱基切除修复(base excision repair,BER)功能的改变.方法:将polβ真核表达载体pcDNA4-C-polβ1,pcDNA4-C-polβ2以脂质体介导方式转染polβ基因敲除的EC9706细胞,G418筛选得到稳定转染pcDNA4-C-polβ1,pcDNA4-C-polβ2的细胞克隆;通过镍柱亲和层析法纯化蛋白;退火合成含有单碱基缺失的DNA底物,与纯化的野生型和突变型polβ蛋白进行BER修复实验.结果:G418筛选得到稳定转染pcDNA4-C-polβ1,pcDNA4-C-polβ2的EC9706细胞;提取并纯化出polβ1、polβ2蛋白与退火合成单碱基缺口的DNA底物进行BER实验.在BER实验中,野生型polβ能够在DNA底物的酶切位点处将其完全切开,而突变型polβ仅将其部分切开.结论:野生型的polβ能够修复单碱基缺失的DNA底物,而突变型的polβ碱基切除修复功能明显减弱.

关键词： DNA聚合酶β 镍柱亲和层析碱基切除修复

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大鼠孤束核微量注射γ-氨基丁酸对电针抗应激性胃黏膜损伤的影响

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中国中西医结合消化杂志 2010年第6期18卷 381-384页

作者：黄碧兰余良主刘寿仙湖北省咸宁学院基础医学院生理学教研室湖北咸宁437100

[目的]探讨孤束核内γ-氨基丁酸(GABA)对电针(EA)抗应激性胃黏膜损伤的影响及机制。[方法]70只健康SD大鼠随机分为5组:单纯应激组、EA+应激组、0.85%氯化钠+EA+应激组、GABA+EA+应激组、荷苞牡丹碱+EA+应激组,每组14只。采用冷束缚法制... 详细信息

[目的]探讨孤束核内γ-氨基丁酸(GABA)对电针(EA)抗应激性胃黏膜损伤的影响及机制。[方法]70只健康SD大鼠随机分为5组:单纯应激组、EA+应激组、0.85%氯化钠+EA+应激组、GABA+EA+应激组、荷苞牡丹碱+EA+应激组,每组14只。采用冷束缚法制备大鼠应激性胃溃疡模型,通过脑立体定位仪进行孤束核微量注射GABA和荷苞牡丹碱,测定各组大鼠胃黏膜溃疡指数(UI)、胃黏膜血流量(GMBF)、胃液酸度的变化。[结果]EA+应激组大鼠胃黏膜UI、胃液酸度降低,GMBF增加,与单纯应激组比较差异有统计学意义(P<0.01)。预先孤束核给予GABA处理,可减弱EA抗胃黏膜损伤的作用,胃黏膜UI、胃液酸度增高,GMBF减少,与NS+EA+应激组比较差异有统计学意义(P<0.01)。荷苞牡丹碱则明显加强EA对胃黏膜损伤的保护作用,胃黏膜UI、胃液酸度降低,GMBF增加,与NS+EA+应激组比较差异有统计学意义(P<0.05)。[结论]GABA能削弱EA抗应激性胃黏膜损伤作用,其作用部分是通过孤束核内GABAA受体介导的。

关键词： γ-氨基丁酸荷苞牡丹碱孤束核胃溃疡,应激性

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Tiam1和Rac1在食管鳞癌组织中蛋白表达的相关性及临床病理意义

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世界华人消化杂志 2010年第36期18卷 3869-3873页

作者：刘帅曲蕴慧鄢文海郑州大学第一附属医院检验科河南省郑州市450052 郑州大学基础医学院病理生理教研室河南省郑州市450052

目的:探讨T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1(Tiam1)及Rac GTP酶激活蛋白1(Rac1)的表达与食管鳞癌发生发展、浸润转移的关系.方法:62例食管癌手术切除标本于2006-02-26/03-16取自食管癌高发区河南省安阳市肿瘤医院.应用免疫组织化学SP法检测62... 详细信息

目的:探讨T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1(Tiam1)及Rac GTP酶激活蛋白1(Rac1)的表达与食管鳞癌发生发展、浸润转移的关系.方法:62例食管癌手术切除标本于2006-02-26/03-16取自食管癌高发区河南省安阳市肿瘤医院.应用免疫组织化学SP法检测62例食管鳞癌组织、20例癌旁不典型增生组织及20例正常食管黏膜组织中Tiam1及Rac1蛋白表达.结果:食管鳞癌组织中Tiam1蛋白表达与癌的组织学分级、浸润深度、淋巴结转移及TNM分期均密切相关(χ2=8.779,7.680,4.502,4.987;均P<0.05);在食管鳞癌癌变过程中Tiam1蛋白表达在正常黏膜组织、癌旁不典型增生组织及癌组织中的表达率依次增高,分别为5.0%(3/20)、55.0%(11/20)、72.6%(45/62),组间比较有明显差异(χ2=20.643,P<0.05);Rac1蛋白表达也与癌的组织学分级、浸润深度、淋巴结转移及TNM分期均密切相关(χ2=8.652,6.884,8.276,6.371;均P<0.05);Rac1蛋白在正常黏膜组织、癌旁不典型增生组织及癌组织中的表达率依次增高,分别为25.0%(5/20)、70.0%(14/20)、70.0%(44/62),组间比较有明显差异(χ2=14.245,P<0.05).Tiam1及Rac1的表达呈正相关关系(γp=0.642,P<0.05).结论:Tiam1及Rac1可作为食管鳞癌早期诊断和判断预后的辅助指标.

关键词： T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1 Rac GTP酶激活蛋白1 食管鳞状细胞癌免疫组织化学浸润转移

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Bcl-2在H2O2诱导神经胶质瘤自噬中的作用

Bcl-2在H2O2诱导神经胶质瘤自噬中的作用

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中国病理生理学会第九届全国代表大会及学术会议

作者：孔晓霞张宏宇康劲松温州医学院基础医学院机能实验学教研室吉林大学白求恩医学院病理生理学教研室

目的:探讨抗凋亡蛋白Bcl-2在HO诱导神经胶质瘤U251细胞自噬中的作用。方法:基因重组技术构建pEGFP-C1-Bcl-2质粒,并转染于人神经胶质瘤U251细胞株。通过透射电镜检测U251细胞形态学变化;免疫荧光检测自噬标志物MDC的积聚;Western blott... 详细信息

目的:探讨抗凋亡蛋白Bcl-2在HO诱导神经胶质瘤U251细胞自噬中的作用。方法:基因重组技术构建pEGFP-C1-Bcl-2质粒,并转染于人神经胶质瘤U251细胞株。通过透射电镜检测U251细胞形态学变化;免疫荧光检测自噬标志物MDC的积聚;Western blotting检测自噬相关蛋白Beclin 1及自噬上游调控信号Akt、mTOR蛋白的表达。结果:与对照组相比:

关键词：神经胶质瘤 H2O2 Bcl-2

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胃黏膜特异表达JC病毒T抗原质粒构建及表达鉴定

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中国医科大学学报 2010年第1期39卷 18-21页

作者：夏蒲徐小燕贾宝萍王薇关一夫高野康雄郑华川中国医科大学基础医学院生物化学研究室沈阳110001 中国医科大学基础医学院病理生理学教研室中国医科大学档案馆沈阳110001 日本富山大学医学部病理诊断教室

目的利用鼠胃黏膜上皮细胞中高活性的角蛋白19(K19)启动子构建K19-JCVT抗原表达质粒并进行鉴定。方法利用PCR方法突变JC病毒T抗原中的NdeⅠ位点,并在两端插入BclⅠ位点,通过BamHⅠ位点将DNA片段与K19启动子连接,构建K19-JCVT抗原质粒。... 详细信息

目的利用鼠胃黏膜上皮细胞中高活性的角蛋白19(K19)启动子构建K19-JCVT抗原表达质粒并进行鉴定。方法利用PCR方法突变JC病毒T抗原中的NdeⅠ位点,并在两端插入BclⅠ位点,通过BamHⅠ位点将DNA片段与K19启动子连接,构建K19-JCVT抗原质粒。利用酶切和DNA测序确认其DNA序列。免疫组化筛选细胞角蛋白19阳性胃癌细胞,对细胞角蛋白19表达阳性的胃癌细胞系AGS进行K19-JCVT抗原质粒转染,用Western blot方法检测JCVT抗原的表达情况。结果K19-JCVT抗原表达质粒成功构建,AGS胃癌细胞系高表达细胞角蛋白19并用于K19-JCVT抗原表达质粒转染,转染K19-T抗原质粒的AGS细胞系有T抗原表达。结论同义突变和相似连接在质粒构建中起到关键作用,酶切位点的甲基化也是值得注意的问题。

关键词： JC病毒 T抗原真核表达载体构建

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1,6-二磷酸果糖预处理对家兔急性肾缺血再灌注损伤的保护作用

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四川生理科学杂志 2010年第1期32卷 18-20页

作者：刘行海买文丽刘红郑倩敬华娥易志刚川北医学院基础医学院生理学教研室川北医学院附属医院儿科四川南充637000

目的:观察1,6-二磷酸果糖(FDP)预处理对急性肾缺血-再灌注损伤的保护作用。方法:新西兰大白兔27只,随机均分为假手术组(S组)、缺血再灌注组(Ⅰ组)、1,6-二磷酸果糖预处理组(F组)。采用左肾切除右肾动静脉夹闭60 min再灌注180 min致肾损... 详细信息

目的:观察1,6-二磷酸果糖(FDP)预处理对急性肾缺血-再灌注损伤的保护作用。方法:新西兰大白兔27只,随机均分为假手术组(S组)、缺血再灌注组(Ⅰ组)、1,6-二磷酸果糖预处理组(F组)。采用左肾切除右肾动静脉夹闭60 min再灌注180 min致肾损伤的模型,术前连续4d给予FDP。缺血-再灌注180 min后分别检测血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、肾组织丙二醛(MDA)水平及超氧化物岐化酶(SOD)活性,观察肾组织的病理变化及肾小管计分,并对3组进行比较。结果:与S组比较,I组的Scr、BUN、MDA水平明显升高(P<0.05),SOD活性明显降低(P<0.01)。F组的Scr、BUN、MDA水平均较Ⅰ组明显降低(P<0.01或P<0.05),而SOD活性明显增强(P<0.01)。F组肾组织病理变化轻于Ⅰ组。结论:FDP预处理对兔急性肾缺血-再灌注损伤具有保护作用,该保护作用的机制可能与增强SOD活性,清除过多的氧自由基,减少MDA的生成有关。

关键词： 1,6-二磷酸果糖预处理肾脏缺血-再灌注损伤

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黄芩苷对脂多糖诱导巨噬细胞一氧化氮和一氧化氮合酶表达的影响

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广东医学 2010年第6期31卷 675-677页

作者：李岩邝枣园李明王宏敏陈伟强广州中医药大学基础医学院微生物学与寄生虫学教研室广州510006 广东药学院病理生理学教研室广州510006

目的研究黄芩苷对小鼠巨噬细胞一氧化氮(NO)生成和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响。方法体外培养小鼠巨噬细胞RAW264.7,取生长良好的细胞分别加入LPS(终浓度1μg/mL)和不同浓度黄芩苷(终浓度10、50、100μmol/L)进行干预,并设空白... 详细信息

目的研究黄芩苷对小鼠巨噬细胞一氧化氮(NO)生成和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响。方法体外培养小鼠巨噬细胞RAW264.7,取生长良好的细胞分别加入LPS(终浓度1μg/mL)和不同浓度黄芩苷(终浓度10、50、100μmol/L)进行干预,并设空白对照组。取培养24 h细胞上清,用Griess法检测NO生成量;取培养8 h和24 h细胞,分别提取细胞总RNA和蛋白,用RT-PCR法和Western Blot法检测iNOS基因和蛋白水平表达情况。结果与空白对照组相比,LPS明显促进了RAW 264.7细胞iNOS表达和NO的生成;加入黄芩苷可抑制LPS诱导的RAW264.7细胞iNOS mRNA和蛋白表达,减少NO的生成,与LPS组差异有统计学意义。结论黄芩苷可明显降低LPS诱导的巨噬细胞iNOS表达和NO生成,这可能是其抗动脉粥样硬化斑块形成的作用机制之一。

关键词：黄芩苷巨噬细胞一氧化氮诱导型一氧化氮合酶内毒素

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CT诊断黑斑息肉病一例

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临床放射学杂志 2010年第6期29卷 845-846页

作者：张磊王景宇阮洋冬冬于金海陈羽佳王淑清吉林大学第一医院放射科长春130021 吉林大学基础医学院病理生理教研室 130021 吉林大学第一医院胃肠外科长春130021

患者女,30岁。因“间断腹痛8年,发现腹部包块4个月”入院。体检:口唇及指(趾)头掌面褐色色素沉着(图1)。左侧腹部可见大小约5.0cm×10cm的包块,质软,轻压痛,无反跳痛及紧张,包块时隐时现。无家族病史。[第一段]

关键词：黑斑息肉病 CT诊断腹部包块色素沉着家族病史侧腹部反跳痛

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维药爱维心口服液对心肌缺血再灌大鼠髓过氧化物酶和丙二醛的影响

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新疆医科大学学报 2010年第1期33卷 33-35页

作者：袁一木王鹿王蕊新疆医科大学基础医学院生理教研室新疆乌鲁木齐830011

目的探讨维药爱维心口服液对心肌缺血再灌大鼠髓过氧化物酶(MPO)和丙二醛(MDA)的影响。方法40只雄性Wistar大鼠,随机分为4组:假手术组、缺血再灌(I/R)组、爱维心预处理组及爱维心缺血期给药组,每组10只。建立大鼠心肌缺血再灌注损伤(MI... 详细信息

目的探讨维药爱维心口服液对心肌缺血再灌大鼠髓过氧化物酶(MPO)和丙二醛(MDA)的影响。方法40只雄性Wistar大鼠,随机分为4组:假手术组、缺血再灌(I/R)组、爱维心预处理组及爱维心缺血期给药组,每组10只。建立大鼠心肌缺血再灌注损伤(MIRI)模型。采用BL-420生物信号采集系统全程记录心电图;检测血浆和心肌MPO、MDA的变化。结果(1)与I/R组比较,爱维心预处理组与爱维心缺血期给药组血浆MDA的含量、MPO活性均降低,差异有统计学意义(P<0.05～0.01);与I/R组比较,爱维心预处理组与爱维心缺血期给药组心肌MDA的含量和MPO活性均降低,差异有统计学意义(P<0.01)。(2)爱维心缺血期给药组与爱维心预处理组比较,血浆和心肌MDA、MPO差异无统计学意义(P>0.05)。结论维药爱维心口服液能降低MIRI大鼠的MPO和MDA,对大鼠MIRI的保护作用可能与抑制白细胞的聚集和抗膜脂质过氧化有关。

关键词：爱维心口服液心肌缺血再灌注损伤丙二醛髓过氧化物酶

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