检索结果-内蒙古大学图书馆

中国中西医结合杂志 2025年

作者：廖强冯丹丹黎青青程修平李国豪李艳左坚皖南医学院第一附属医院(弋矶山医院)中医科皖南医学院第一附属医院(弋矶山医院)新安医学研究中心皖南医学院中西医结合研究中心皖南医学院第一附属医院(弋矶山医院)风湿免疫科皖南医学院信息学院合肥综合性国家科学中心卫生与医学研究所新安医学与中医药现代化中心

目的基于“寒热三期”治痹理论，对活动期类风湿关节炎（RA）进行寒热亚型区分，分析其代谢、免疫差异性，并使用机器学习方法纳入多维度指标，探索建立活动期RA寒热痹证判别模型。方法 453例为2022年7月—2023年6月于皖南医学院弋矶... 详细信息

目的基于“寒热三期”治痹理论，对活动期类风湿关节炎（RA）进行寒热亚型区分，分析其代谢、免疫差异性，并使用机器学习方法纳入多维度指标，探索建立活动期RA寒热痹证判别模型。方法 453例为2022年7月—2023年6月于皖南医学院弋矶山医院就诊的RA患者，符合纳入标准60例，中医辨证属湿热痹阻证（简称热痹，26例）或寒湿痹阻证（简称寒痹，34例），同时选取健康志愿者作为对照组（20名），检测RA患者及对照组血常规、血生化指标、风湿3项、免疫球蛋白等数据，检测血清乳酸、酮体、游离脂肪酸、糖脂代谢及白色脂肪组织（WAT）相关炎症免疫指标，对比分析各组差异。基于逻辑回归算法（LR）、线性判别分析（LDA）等10种机器学习方法，筛选特征指标建立预测模型，行十折交叉验证，以F1值及受试者工作特征曲线下面积（AUC）等指标进行模型评价。结果与对照组比较，RA患者糖脂代谢指标中甘油三酯（TG）显著降低（P<0.01），而空腹血糖（GLU）呈现上升态势（P<0.01），脂肪酸氧化关键酶肉碱棕榈酰转移酶-1(CPT-1)水平上升（P<0.05），并有酮体蓄积；热痹患者脂肪酸结合蛋白1(FABP1)浓度上调（P<0.01）;RA患者血液中棕榈酸、亚油酸、硬脂酸游离脂肪酸显著降低（P<0.05），以热痹更为典型。寒、热痹患者免疫指标比较，差异无统计学意义（P>0.05）。10个常用机器学习模型利用白介素-17A(IL-17A)、瘦素（LEP）、3-磷酸甘油酸异构酶（3-PGI）、基质金属蛋白酶3 (MMP3)等22个参数能较好预测寒热亚型，其中LDA表现优异，经十折交叉验证，受试者AUC平均值为0.74。结论免疫和代谢表型差异产生寒、热痹证的基础，联合多指标可以提升有关参数的亚型区分能力。

关键词：类风湿关节炎免疫代谢疾病分型机器学习诊断模型

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利用CRISPR/Cas9系统构建稳定敲除TrxR1基因的HCT-116细胞株

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生物工程学报 2022年第3期38卷 1074-1085页

作者：周知音吕晓梅朱丽周吉黄慧丹张超刘晓平皖南医学院药物筛选与评价研究所安徽芜湖241000 皖南医学院附属弋矶山医院生殖医学中心安徽芜湖241000

为更好地研究靶向硫氧还蛋白还原酶1的小分子化合物的细胞内靶点选择性,利用CRISPR/Cas9系统构建稳定敲除TrxR1基因(编码硫氧还蛋白还原酶1)的HCT-116细胞株。首先根据TrxR1基因序列和CRISPR/Cas9靶点设计原则,设计并选择合适的敲除位点... 详细信息

为更好地研究靶向硫氧还蛋白还原酶1的小分子化合物的细胞内靶点选择性,利用CRISPR/Cas9系统构建稳定敲除TrxR1基因(编码硫氧还蛋白还原酶1)的HCT-116细胞株。首先根据TrxR1基因序列和CRISPR/Cas9靶点设计原则,设计并选择合适的敲除位点,再根据敲除位点序列设计敲除TrxR1基因的sgRNA干扰序列,以pCasCMV-Puro-U6空质粒载体为骨架构建能表达该sgRNA干扰序列的重组质粒。质粒共转染至HCT-116细胞后,利用嘌呤霉素筛选TrxR1敲除的HCT-116细胞,通过DNA测序、免疫蛋白印迹、TRFS-green荧光探针和细胞内TrxR1酶活力检测等方法鉴定和验证HCT-116细胞的TrxR1基因敲除效果。进一步通过CCK-8实验初步研究靶向TrxR1小分子化合物对细胞内TrxR1酶活力和细胞增殖力抑制的相关性。结果显示,表达sgRNA干扰序列的重组质粒可以敲除HCT-116细胞中TrxR1基因,筛选获得的稳定敲除细胞HCT116-TrxR1-KO中无TrxR1蛋白表达,而靶向TrxR1小分子抑制剂对该细胞无TrxR1酶活力和细胞增殖力抑制效果。本研究利用CRISPR/Cas9系统成功构建了HCT-116的TrxR1基因敲除的稳定细胞株,为进一步研究TrxR1在相关疾病的发生机制和治疗中的作用奠定了基础。

关键词： CRISPR/Cas9 TrxR1 基因敲除稳定细胞株

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以CXCL1为关键靶点的糖尿病肾病差异基因分析及潜在药物预测

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中华内分泌代谢杂志 2023年第12期39卷 1056-1066页

作者：胡鑫王李卓章尧裴文俊程锦瀚熊超群钱悦张秋恒吴旭杨莹高家林皖南医学院弋矶山医院内分泌科芜湖241000 皖南医学院基础医学院生化教研室芜湖241000 活性生物大分子研究安徽省重点实验室芜湖241000 皖南医学院研究生学院芜湖241000 皖南医学院药学院芜湖241000 皖南医学院临床医学院芜湖241000 弋矶山医院内分泌糖尿病研究所芜湖241000

目的通过蛋白微阵列筛选糖尿病肾病模型中高表达的炎症因子,利用生物信息学分析差异性基因及其调控网络,并预测可能具有治疗作用的小分子化合物。方法利用炎症因子芯片筛选糖尿病肾病细胞模型和动物模型中具有相同趋势的炎症因子。通过... 详细信息

目的通过蛋白微阵列筛选糖尿病肾病模型中高表达的炎症因子,利用生物信息学分析差异性基因及其调控网络,并预测可能具有治疗作用的小分子化合物。方法利用炎症因子芯片筛选糖尿病肾病细胞模型和动物模型中具有相同趋势的炎症因子。通过基因本体论(Gene Ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)富集分析R语言所筛选的差异性基因。STRING在线构建蛋白互作网络,Cytoscape软件解析核心子网络,Connectivity Map寻找预测小分子化合物。结果16周db/db小鼠和高糖刺激的系膜细胞被确定为糖尿病肾病的模型,其中趋化因子(C-X-C基序)配体1(C-X-C motif chemokine ligand 1,CXCL1)的表达在两模型中均有升高。多个GEO数据芯片均显示CXCL1的高表达与糖尿病肾病有明显关联。其中GSE30122包括30个基因的上调和23个的下调。GO富集分析集中在体液免疫和脂多糖反应等生物过程;而KEGG富集主要在百日咳和凝血级联通路。CytoHubba识别了10个中枢基因,例如ALB、LUM和CXCL1等。此外,使用Connectivity Map预测了10种小分子化合物作为潜在的治疗药物。结论CXCL1可能是糖尿病肾病发生发展的关键基因,ALB、LUM、CXCL1、MMP7、TGFBI、CCL2、S100A4、SOX9、VCAN和CLU可能参与以CXCL1为中心的调控网络,有10种小分子化合物可能作为潜在的治疗药物。

关键词：糖尿病肾病微蛋白阵列蛋白互作网络药物筛选 CXCL1 GO富集分析 KEGG富集分析

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过表达TrxR1重组HEK293细胞株的构建和鉴定

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南方医科大学学报 2022年第4期42卷 554-560页

作者：吕晓梅周知音朱丽周吉黄慧丹张超刘晓平皖南医学院药物筛选与评价研究所附属弋矶山医院生殖医学中心安徽芜湖241000

目的构建稳定过表达硫氧还蛋白还原酶1(TrxR1)的HEK293细胞株,为TrxR1的功能研究以及靶向TrxR1药物筛选提供细胞模型。方法通过PCR扩增,连接转化以及Sanger双脱氧测序构建并筛选出TrxR1的重组慢病毒表达载体pLVX-Puro-TXNRD1,转染HEK29... 详细信息

目的构建稳定过表达硫氧还蛋白还原酶1(TrxR1)的HEK293细胞株,为TrxR1的功能研究以及靶向TrxR1药物筛选提供细胞模型。方法通过PCR扩增,连接转化以及Sanger双脱氧测序构建并筛选出TrxR1的重组慢病毒表达载体pLVX-Puro-TXNRD1,转染HEK293细胞,经嘌呤霉素筛选获得稳定转染细胞株。后续研究分为3组进行:①TrxR1过表达HEK293细胞:pLVX-Puro-TXNRD1载体稳定转染细胞;②对照HEK293细胞:pLVX-Puro空载病毒载体稳定转染细胞;③正常HEK293细胞;通过RT-qPCR、Western blot实验检测上述3组细胞中TrxR1的mRNA以及蛋白表达情况;通过胰岛素终点法以及TRFS-green探针成像检测上述3种细胞内TrxR1的酶活力;通过CCK8实验检测上述3种细胞对TrxR1特异性抑制剂auranofin的敏感性。结果构建载体经DNA测序,成功获得插入TrxR1的重组慢病毒表达载体pLVX-Puro-TXNRD1。与HEK293以及HEK293-NC细胞相比,HEK293-TrxR1-OE细胞中TrxR1的mRNA和蛋白高表达,且酶活力也同样显著上升(P<0.005);而与HEK293以及HEK293-NC细胞相比,auranofin对HEK293-TrxR1-OE细胞中TrxR1酶活力以及细胞增殖的抑制效率均显著下降(P<0.005)。结论通过构建pLVX-Puro-TXNRD1慢病毒载体,成功获得过表达TrxR1酶的HEK293细胞株,该细胞对特异性靶向TrxR1的抑制剂的抗增殖作用具有抵抗,因而可用于靶向TrxR1药物的筛选。

关键词：硫氧还蛋白还原酶1 慢病毒包装过表达细胞模型

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一保双抗:保肾护肾、抗炎抗纤维化,糖尿病肾脏病防治新思路

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中华糖尿病杂志 2025年第2期17卷 199-205页

作者：张思文金雨洁邢春燕王李卓高家林皖南医学院弋矶山医院内分泌科芜湖241000 皖南医学院内分泌糖尿病研究所芜湖241000 安徽省衰老相关疾病基础研究与转化重点实验室代谢病研究室芜湖241000 皖南医学院基础医学院生化教研室芜湖241000

糖尿病肾脏病(DKD)是造成慢性肾脏病和终末期肾病的主要原因,如何对其进行更有效的预防和治疗至关重要。近年来,随着对炎症和纤维化在DKD发病及进展机制中的作用认识的加深,如何围绕炎症、纤维化这个肾脏病变进展的关键环节,深化DKD的... 详细信息

糖尿病肾脏病(DKD)是造成慢性肾脏病和终末期肾病的主要原因,如何对其进行更有效的预防和治疗至关重要。近年来,随着对炎症和纤维化在DKD发病及进展机制中的作用认识的加深,如何围绕炎症、纤维化这个肾脏病变进展的关键环节,深化DKD的防控理论显得尤为重要。一保双抗是针对DKD的发病研究进展提出的防治思路,其中"一保"指保肾护肾,去除或减少肾脏损伤的内外危险因素,包括血糖、血压及血脂等内在肾损伤病因代谢指标的控制,以及避免肾毒性药物等外在促损伤因素的二次打击;"双抗"指抗炎和抗纤维化,针对DKD炎症和纤维化靶标,旨在阻断肾脏恶化的病理生理过程,延缓甚至逆转肾脏疾病进展,减少终末期肾病的发生。该文从DKD的相关危险因素和发病机制、相关循证学依据等多个维度,充分阐述"一保双抗"在DKD防治上的重要性及未来应用前景,以期推动DKD防治理论体系的建设,指导未来的临床治疗革新。

关键词：糖尿病肾脏病保护肾功能抗炎抗纤维化

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溶酶体膜蛋白sidt2介导肝脏细胞的凋亡:不通过抑制自噬溶酶体途径

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南方医科大学学报 2023年第4期43卷 637-643页

作者：许家豪耿梦雅刘海军裴文俊顾静漆梦湘章尧吕坤宋迎迎刘苗苗胡鑫余翠何春玲王李卓高家林皖南医学院弋矶山医院内分泌科安徽芜湖241002 皖南医学院弋矶山医院内分泌糖尿病研究所安徽芜湖241002 皖南医学院临床医学院安徽芜湖241002 皖南医学院安徽省活性生物大分子研究安徽省重点实验室安徽芜湖241002 皖南医学院基础医学院生化教研室安徽芜湖241002 皖南医学院中心实验室安徽芜湖241002 皖南医学院重大疾病非编码RNA转化研究安徽普通高校重点实验室皖南医学院安徽芜湖241002 皖南医学院第二附属医院内分泌科安徽芜湖241002

目的研究溶酶体膜蛋白Sidt2敲除后在肝脏细胞中调控凋亡的途径。方法利用Crispr-Cas9技术构建Sidt2敲除的人肝脏(HL7702)细胞模型,检测Sidt2和自噬关键蛋白LC3-Ⅱ/Ⅰ、P62蛋白水平,MDC染色观察自噬体形成情况,通过EdU和流式细胞实验观察... 详细信息

目的研究溶酶体膜蛋白Sidt2敲除后在肝脏细胞中调控凋亡的途径。方法利用Crispr-Cas9技术构建Sidt2敲除的人肝脏(HL7702)细胞模型,检测Sidt2和自噬关键蛋白LC3-Ⅱ/Ⅰ、P62蛋白水平,MDC染色观察自噬体形成情况,通过EdU和流式细胞实验观察Sidt2对肝脏细胞增殖活性和凋亡的影响,并且使用0、10、25、50、100、200μmol/L的氯喹(CQ)摸索肝脏细胞CQ饱和浓度,检测对其自噬流的影响,以及使用CQ进一步探索影响肝脏细胞的增殖活性其凋亡水平的机制。结果成功构建HL7702细胞Sidt2+/+组及Sidt2-/-组。Sidt2基因缺失可导致肝脏细胞增殖被抑制和凋亡水平的增加,自噬关键蛋白LC3-Ⅱ/Ⅰ和P62在蛋白水平上的表达均增加且自噬体含量增加(P<0.05)。结果显示50μmol/LCQ作用下肝脏细胞自噬达到饱和状态,50μmol/L CQ使Sidt2基因缺失时LC3B和P62的表达均增加(P<0.05),且CQ进一步降低肝脏细胞活性,并促进其凋亡水平(P<0.05)。结论在离体水平上,Sidt2基因剔除后,HL7702细胞可表现自噬通路的异常,并且不通过抑制自噬溶酶体途径介导和调控凋亡。

关键词： Sidt2 人肝脏细胞凋亡自噬增殖

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基于案例引导和研讨教学融合的多模态教学在新药研究与开发课程中的应用

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皖南医学院学报 2024年第2期43卷 184-186页

作者：张超周玉燕章圣朋倪海宁周吉皖南医学院药学院安徽芜湖241002 皖南医学院研究生学院安徽芜湖241002 皖南医学院第一附属医院弋矶山医院生殖医学中心安徽芜湖241001

目的:分析多模态教学在新药研究与开发课程教学中的应用效果。方法:选取皖南医学院2018、2019级临床药学的学生作为研究对象,比较传统教学和多模态教学模式在新药研究与开发课程中的教学效果。2018级学生(n=61)采用传统教学模式教学,201... 详细信息

目的:分析多模态教学在新药研究与开发课程教学中的应用效果。方法:选取皖南医学院2018、2019级临床药学的学生作为研究对象,比较传统教学和多模态教学模式在新药研究与开发课程中的教学效果。2018级学生(n=61)采用传统教学模式教学,2019级学生(n=57)采用多模态教学。从平时成绩、期末考试成绩和问卷调查3个方面对教学效果进行评价。结果:研究组学生的平时成绩、期末考试成绩和成绩优良率[(84.00±8.27)分、(82.74±5.32)分、82.45%]均高于对照组[(74.90±2.31)分、(72.72±11.68)分、24.59%](P<0.05),且问卷调查结果显示研究组学生对教学方式的满意度及教学效果认可度也高于对照组(P<0.05)。结论:多模态教学模式可以有效激发学生的学习兴趣,提高学生成绩,总体教学效果优于传统教学模式。

关键词：多模态教学教学改革新药研究与开发

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辐射合成的温敏材料上兔角膜基质细胞的培养

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国际眼科杂志 2024年第5期24卷 686-690页

作者：王伟张鹏飞陈春霞钱莉陈建苏中国安徽省铜陵市人民医院眼科 244000 皖南医学院第一附属医院弋矶山医院安徽省芜湖市241000 暨南大学基础医学与公共卫生学院眼科研究所广东省广州市510632

目的:探索以电子加速器合成具有温度敏感特性的聚异丙基丙烯酰胺凝胶(PNIPAAm)及接枝有PNIPAAm水凝胶的培养皿的方法,及兔角膜基质细胞在温敏材料PNIPAAm水凝胶上的生长条件及特性,以及利用PNIPAAm水凝胶获得的细胞片。方法:55%N-异丙... 详细信息

目的:探索以电子加速器合成具有温度敏感特性的聚异丙基丙烯酰胺凝胶(PNIPAAm)及接枝有PNIPAAm水凝胶的培养皿的方法,及兔角膜基质细胞在温敏材料PNIPAAm水凝胶上的生长条件及特性,以及利用PNIPAAm水凝胶获得的细胞片。方法:55%N-异丙基丙烯酰胺(NIPAAm)单体和0.5%的N,N’-亚甲基双丙烯酰胺的异丙醇溶液70μL,加入到35 mm培养皿上,电子加速器下辐射合成温敏材料(PNIPAAm),后续处理后,接种兔角膜基质细胞体外培养。结果:按本实验中的单体配方以及辐射合成方案,能够在培养皿表面合成PNIPAAm,角膜基质细胞能在部分接枝了PNIPAAm的培养皿上生长,并能成片脱离。结论:使用辐射合成温敏培养皿能够获得单层及多层无载体的角膜基质细胞片。

关键词：聚异丙基丙烯酰胺凝胶(PNIPAAm) 温敏材料细胞片角膜基质细胞培养

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可注射型磷酸镁自固化骨水泥修复大鼠股骨髁骨缺损的实验研究

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解放军医学院学报 2023年第6期44卷 655-661,684页

作者：熊英杰叶健廷王鹏孙小涵孟昊业林万程单验博卢雨征刘修志关聪聪武艳斌王鑫许文静彭江杨民皖南医学院弋矶山医院创伤骨科安徽芜湖241001 解放军总医院第四医学中心骨科医学部研究所北京100853 首都医科大学附属北京世纪坛医院北京100038

背景在过去几十年中,各种合成骨支架已被开发并应用于骨缺损。然而由于较差的降解性能或骨诱导能力,无法被广泛应用。磷酸镁骨水泥(magnesium phosphate cement,MPC)由于其出色的性能近年来备受人们关注。目的探究可注射型磷酸镁骨水泥... 详细信息

背景在过去几十年中,各种合成骨支架已被开发并应用于骨缺损。然而由于较差的降解性能或骨诱导能力,无法被广泛应用。磷酸镁骨水泥(magnesium phosphate cement,MPC)由于其出色的性能近年来备受人们关注。目的探究可注射型磷酸镁骨水泥的生物相容性及其修复股骨髁骨缺损的效果。方法使用酸碱反应制备磷酸镁骨水泥;采用万能试验机和称重法检测MPC的力学强度和可注射性,通过维卡仪测定MPC的凝固时间,采用扫描电镜对材料进行表征。采用CCK-8法和活死染色检测MPC的细胞相容性;MPC修复大鼠股骨髁直径2.5 mm骨缺损。实验分组按植入物的不同分为空白组、磷酸钙骨水泥(calcium phosphate cement,CPC)组、硫酸钙骨水泥(calcium sulfate cement,CS)组、磷酸镁骨水泥组,每组6只8周龄SD大鼠。术后4周、8周取材,对大鼠股骨髁标本进行微型计算机断层扫描(micro computed tomography,Micro-CT)分析,评估缺损区骨再生情况;标本切片后行HE染色、Masson三色染色,观察各组缺损区骨再生情况。结果成功制备出可注射型磷酸镁自固化骨水泥。MPC抗压强度为(36.25±0.72)MPa,可注射性为98.87%±0.29%,凝固时间为(15.16±0.32)min。扫描电镜结果显示,水化产物MgKPO_(4)·6H_(2)O表现为层片状,堆积紧密。CCK-8和死活染色结果显示,与空白组相比,MC3T3-E1细胞在MPC组高浓度浸提液中的活力略有下降;Micro-CT扫描结果显示,MPC、CS和CPC均未引起明显的感染现象,三者表现出明显不同的降解速度。组织学分析结果显示,各组支架植入大鼠股骨髁后,均无明显的炎症反应,骨组织未出现坏死。结论MPC具有良好的可注射性、力学强度和生物相容性,在骨修复过程中表现出更为合适的可降解性能,可用于修复SD大鼠股骨髁骨缺损。

关键词：磷酸镁骨缺损修复骨水泥骨组织工程大鼠

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溶酶体膜蛋白Sidt2缺失导致肝脏细胞自噬受损

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南方医科大学学报 2021年第8期41卷 1207-1213页

作者：耿梦雅王李卓章尧裴文俊漆梦湘杨梦许家豪梁洋洋吕坤何春玲高家林皖南医学院弋矶山医院内分泌科安徽芜湖241002 皖南医学院弋矶山医院内分泌糖尿病研究所安徽芜湖241002 皖南医学院临床医学院安徽芜湖241002 皖南医学院安徽省活性生物大分子研究安徽省重点实验室安徽芜湖241002 皖南医学院基础医学院生化教研室安徽芜湖241002 皖南医学院中心实验室安徽芜湖241002 皖南医学院重大疾病非编码RNA转化研究安徽普通高校重点实验室安徽芜湖241002

目的研究溶酶体膜蛋白Sidt2缺失后对肝脏自噬的影响。方法利用Crispr-Cas9技术构建Sidt2敲除的人肝脏(HL7702)细胞模型,对自噬关键蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ、P62及自噬相关蛋白Atg5、Atg7、Atg12进行蛋白水平检测,同时使用免疫荧光方法对LC3B及P62... 详细信息

目的研究溶酶体膜蛋白Sidt2缺失后对肝脏自噬的影响。方法利用Crispr-Cas9技术构建Sidt2敲除的人肝脏(HL7702)细胞模型,对自噬关键蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ、P62及自噬相关蛋白Atg5、Atg7、Atg12进行蛋白水平检测,同时使用免疫荧光方法对LC3B及P62进行共定位,检测自噬小体对P62货物蛋白的识别与封存以及自噬溶酶体的降解。对LC3B及LAMP1进行免疫荧光共定位,检测自噬小体与溶酶体融合过程。使用LysoTracker对酸性溶酶体进行示踪。结果成功构建HL7702细胞Sidt2^(+/+)组及Sidt2^(-/-)组,HL7702细胞Sidt2^(-/-)组较Sidt2^(+/+)组相比,自噬关键蛋白LC3-Ⅱ/Ⅰ及P62表达均增多(P<0.01),免疫荧光结果显示LC3B及P62亦明显增多(P<0.001),同时自噬相关蛋白Atg5、Atg7、Atg12表达减少(P<0.05)。LC3B与P62共定位降低,LC3B与LAMP1共定位降低,酸性溶酶体数量减少(P<0.05)。结论Sidt2基因的缺失导致人肝脏细胞自噬小体对P62货物蛋白的识别和封存障碍,同时酸性溶酶体数量减少、自噬小体与溶酶体融合障碍导致自噬溶酶体途径受阻,最终导致LC3B与P62发生堆积,肝脏细胞自噬受损。

关键词： Sidt2 自噬小体溶酶体融合货物蛋白

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