检索结果-内蒙古大学图书馆

中国病原生物学杂志 2021年第1期16卷 32-37页

作者：吴智明陈少文周发友章宏祥唐晓磊海南医学院第二附属医院检验科海南海口570311 皖南医学院第二附属医院基础实验室皖南医学院第二附属医院血管性疾病研究中心

目的验证美洲鲎来源的G因子α亚基(G Factorαsubunit,GFαSub)用于侵袭性真菌感染(invasive fungal infection,IFI)检测的应用价值。方法原核表达并纯化美洲鲎G因子α亚基活性结合区域(葡聚糖天然配基),以该活性结构域包被96孔板作为... 详细信息

目的验证美洲鲎来源的G因子α亚基(G Factorαsubunit,GFαSub)用于侵袭性真菌感染(invasive fungal infection,IFI)检测的应用价值。方法原核表达并纯化美洲鲎G因子α亚基活性结合区域(葡聚糖天然配基),以该活性结构域包被96孔板作为捕捉元件,以辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)标记的G因子α亚基作为检测显色元件,正交法构建G因子α亚基夹心法,检测36例肺部IFI患者、52例肺部细菌感染患者和40例健康人血清中(1,3)-β-D-葡聚糖,评估夹心法的检测效能及其与G试验对阳性病例测得值的相关性进行分析。结果根据NCBI提供的数据库,合成pET30a-GFαSub252-668表达质粒,并通过IPTG诱导表达、Ni-NAT柱纯化GFαSub252-668蛋白,并使用商品化HRP标记试剂盒对其进行标记。通过正交法确定包被GFαSub252-668蛋白浓度和检测HRP标记的GFαSub252-668蛋白浓度分别为8 ng/ml和16 ng/ml。运用此夹心法检测128例临床血清标本(1,3)-β-D-葡聚糖含量,肺部IFI患者组(175.2±65.8)ng/ml,与细菌感染组(46.3±17.7)ng/ml和健康组(39.4±14.9)ng/ml差异有统计学意义(F=160.1,P<0.001);根据ROC曲线计算其灵敏度和特异度分别为91.67%(95%CI:77.53%-98.25%)和82.61%(95%CI:73.3%-89.72%);其与G试验36例IFI患者血清中检测(1,3)-β-D-葡聚糖水平具有良好相关性(R2=0.7592)。结论建立的双GFαSub252-668蛋白夹心法检测(1,3)-β-D-葡聚糖具有较高的灵敏度和特异度,有望成为一种新型的IFI检测手段。

关键词：侵袭性真菌感染 G因子α亚基夹心法诊断

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ManLAM结合TLR2激活肥大细胞释放外泌体诱导巨噬细胞向M2型极化

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细胞与分子免疫学杂志 2021年第6期37卷 481-486页

作者：唐晓磊胡锋夏先如章宏祥周发友黄友明吴艳红皖南医学院第二附属医院基础实验室及血管性疾病研究中心安徽芜湖241000 皖南医学院附属弋矶山医院输血科安徽芜湖241000 湖北医药学院附属太和医院检验科湖北十堰442700 皖南医学院第二附属医院呼吸科安徽芜湖241000 皖南医学院微生物与免疫教研室安徽芜湖241000

目的研究结核分枝杆菌(MTB)甘露糖冠化的脂阿拉伯甘露聚糖(ManLAM)脂糖诱导肥大细胞产生的外泌体招募并影响巨噬细胞极化从而逃避机体免疫的机制。方法培养H37Rv MTB并提取鉴定ManLAM。将提取的ManLAM处理肥大细胞,并收集其分泌的外泌体... 详细信息

目的研究结核分枝杆菌(MTB)甘露糖冠化的脂阿拉伯甘露聚糖(ManLAM)脂糖诱导肥大细胞产生的外泌体招募并影响巨噬细胞极化从而逃避机体免疫的机制。方法培养H37Rv MTB并提取鉴定ManLAM。将提取的ManLAM处理肥大细胞,并收集其分泌的外泌体,通过蛋白质组学和Western blot法分析鉴定外泌体中蛋白质组分。将收集的外泌体与THP-1细胞诱导分化的巨噬细胞共培养,通过Transwell^(TM)实验检测肥大细胞释放的外泌体对巨噬细胞的趋化作用,流式细胞术和实时定量PCR检测ManLAM诱导的巨噬细胞极化。结果成功提取并纯化了ManLAM,并通过气相色谱鉴定其甘露糖和阿拉伯糖的比例约为12.6∶9.4;ManLAM通过与肥大细胞的Toll样受体2(TLR2)结合,产生的外泌体中CC趋化因子配体2(CCL2)、白细胞介素4(IL-4)和IL-13水平较高;ManLAM诱导产生的外泌体能够招募巨噬细胞并且促进其高表达M2型标志分子精氨酸酶1(arginase-1)、IL-10和发现于炎症区分子1(FIZZ-1)。结论 ManLAM刺激肥大细胞分泌外泌体间接诱导巨噬细胞向M2型极化使MTB逃避免疫清除。

关键词：结核分枝杆菌(MTB) 甘露糖冠化的脂阿拉伯甘露聚糖(ManLAM) 肥大细胞外泌体巨噬细胞极化

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TWEAK诱导巨噬细胞源性外泌体miRNA抑制膀胱癌转移的研究

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蚌埠医学院学报 2022年第2期47卷 146-151页

作者：郑祖萍夏先如周发友唐晓磊湖北省十堰市太和医院武当山院区检验科 442700 湖北省十堰市太和医院检验科 442000 皖南医学院第二附属医院泌尿外科安徽芜湖241000 皖南医学院第二附属医院基础实验室&血管性疾病研究中心安徽芜湖241000

目的:研究肿瘤坏死因子样弱凋亡诱导因子(tumor necrosis factor-like weak inducer of apoptosis,TWEAK)诱导的肿瘤相关巨噬细胞(TMs)源性的外泌体对膀胱癌细胞的转移影响。方法:使用TWEAK刺激THP-1诱导分化的TMs,检测其外泌体的特征... 详细信息

目的:研究肿瘤坏死因子样弱凋亡诱导因子(tumor necrosis factor-like weak inducer of apoptosis,TWEAK)诱导的肿瘤相关巨噬细胞(TMs)源性的外泌体对膀胱癌细胞的转移影响。方法:使用TWEAK刺激THP-1诱导分化的TMs,检测其外泌体的特征。并使用miRNAs芯片检测TWEAK诱导的TMs中miRNAs的水平变化;随后通过激光共聚焦显微镜观察外泌体被膀胱癌ATCC 5637细胞系内化以及内化后ATCC 5637细胞中miRNAs的水平;同时检测外泌体处理对细胞的侵袭功能的影响以及活化的信号通路。结果:TWEAK不仅增加巨噬细胞及其分泌的外泌体中miRNA-17-3p的水平,而且还导致受体ATCC 5637细胞中miRNA-17-3p的水平升高,这最终降低了表皮生长因子受体(epidermal growth factor recepto,EGFR)/苏氨酸激酶(threonine kinase,AKT)/细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinase,ERK1)1/2途径的活性。在TMs中预先转染antagomiR-17-3p显著性降低了巨噬细胞、巨噬细胞分泌的外泌体和受体ATCC 5637细胞中miR-17-3p的水平,并伴随着ATCC 5637的转移增强,表明TMs源性的外泌体miR-17-3p参与了ATCC 5637细胞转移的调节,且通过抑制EGFR/AKT/ERK1/2途径得以实现。结论:TWEAK通过TMs将外泌体miRNAs转移到膀胱癌细胞中来抑制EGFR/AKT/ERK1/2途径,从而导致膀胱癌细胞的转移受到抑制。

关键词：膀胱肿瘤肿瘤坏死因子样弱凋亡诱导因子巨噬细胞外泌体微小RNA-17-3p 转移

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五种临床常规方法应用于骨髓增生异常综合征诊断效能的比较

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热带医学杂志 2022年第12期22卷 1652-1655页

作者：翟小燕赵敏唐晓磊芜湖市第二人民医院检验科安徽芜湖241000 芜湖市第二人民医院血液内科安徽芜湖241000 皖南医学院第二附属医院基础实验室&血管性疾病研究中心安徽芜湖241000

目的分析血常规、骨髓细胞涂片、活检、骨髓流式免疫分型(FCM)及分子遗传学检查对初诊骨髓增生异常综合征诊断的应用价值。方法回顾性分析芜湖市第二人民医院2014年8月-2020年11月收治的75例初诊骨髓增生异常综合征患者的血常规,比较骨... 详细信息

目的分析血常规、骨髓细胞涂片、活检、骨髓流式免疫分型(FCM)及分子遗传学检查对初诊骨髓增生异常综合征诊断的应用价值。方法回顾性分析芜湖市第二人民医院2014年8月-2020年11月收治的75例初诊骨髓增生异常综合征患者的血常规,比较骨髓涂片、活检及FCM对粒、红、巨各系病态造血及原始细胞的检出率,分析分子遗传异常与病态造血的关系,评估各项检查在初诊骨髓增生异常综合征诊断中的应用价值。结果75例初诊骨髓增生异常综合征患者中,骨髓涂片对红系、粒系病态造血检出率高于活检(红系:76.0%vs.45.3%,粒系:48.0%vs.24.0%),差异有统计学意义(P=0.002、0.010),而对巨核系病态造血的检出率低于活检(32.0%vs.40.0%),差异有统计学意义(P=0.048);且对骨髓增生程度及纤维组织增生判断,活检有明显优势。FCM对粒系发育异常(52.7%)及原始细胞检出率(36.3%)高于活检和涂片。分子遗传异常组的初诊骨髓增生异常综合征患者中细胞发生病态造血的概率(90.0%)高于正常组(82.4%)。涂片、活检及FCM联合检测对红系、粒系、巨核系病态造血检出率(80.0%、58.6%、50.7%)和原始细胞检出率(40.0%)均高于涂片、活检及FCM单一检查手段。结论骨髓涂片、活检、FCM及分子遗传学检查在初诊骨髓增生异常综合征诊断中各有优势,联合项检测可提高诊断阳性率。

关键词：骨髓增生异常综合征骨髓涂片活检流式免疫分型分子遗传学

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血清中CysC、RBP、Hcy、CRP水平与糖尿病肾病分期相关性研究

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国际泌尿系统杂志 2020年第3期40卷 385-388页

作者：代俊伟唐晓磊安徽省阜阳市人民医院检验科 236000 皖南医学院第二附属医院基础实验室芜湖241000 皖南医学院第二附属医院心血管性疾病研究中心芜湖241000

目的探讨血清中胱抑素C(CysC)、视黄醇结合蛋白(RBP)、同型半胱氨酸(Hcy)、C反应蛋白(CRP)水平与糖尿病肾病分期的相关性。方法选取2016年7月至2018年8月阜阳市人民医院468例糖尿病肾病患者作为研究对象,使用简化的MDRD公式计算肾小球... 详细信息

目的探讨血清中胱抑素C(CysC)、视黄醇结合蛋白(RBP)、同型半胱氨酸(Hcy)、C反应蛋白(CRP)水平与糖尿病肾病分期的相关性。方法选取2016年7月至2018年8月阜阳市人民医院468例糖尿病肾病患者作为研究对象,使用简化的MDRD公式计算肾小球滤过率(GFR),根据K/DOQI慢性肾脏病临床实践指南将患者分为Ⅰ~Ⅴ期,利用西门子2400全自动生化仪测定患者血清中CysC、RBP、Hcy、CRP水平,利用Graphpad 5.0统计学软件进行数据处理并作回顾性分析比较。结果对468例糖尿病肾病患者根据血肌酐估算肾小球滤过率并利用其进行肾损伤分期,其中I期233例,II期70例,III期95例,IV期37例,V期33例。随后分别对肾损伤分期与CysC、RBP、Hcy、CRP相关性进行分析,结果显示,糖尿病肾病患者肾损伤程度与四个指标均具有相关性。其中肾损伤程度与CysC相关系数为0.5264(P<0.001);其与RBP和Hcy的相关系数分别为0.3355和0.2877(P<0.001);而肾损伤程度与CRP相关系数为0.0122(P=0.0168)。结论联合检测患者血清中CysC、RBP、Hcy、CRP水平与糖尿病肾病分期均有一定的临床价值,而CysC更能贴切的反应糖尿病肾损伤程度。

关键词：糖尿病肾病胱抑素C 视黄醇结合蛋白质类 C反应蛋白质

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精索静脉曲张的不育病人精子线粒体DNA片段缺失的调查

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蚌埠医学院学报 2020年第6期45卷 809-811页

作者：呼明闯章宏祥周发友高攀唐晓磊安徽省血吸虫病防治研究所安徽合肥230061 皖南医学院第二附属医院基础实验室安徽芜湖241000 皖南医学院第二附属医院血管性疾病研究中心安徽芜湖241000

目的:分析精索静脉曲张导致的不育病人的精子线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)中一个长为4977 bp的片段缺失的情况。方法:收集60例精索静脉曲张的不育病人和90名健康男性的精液标本,并抽提精子的总DNA,用Gap-PCR技术检测DNA 4977 bp... 详细信息

目的:分析精索静脉曲张导致的不育病人的精子线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)中一个长为4977 bp的片段缺失的情况。方法:收集60例精索静脉曲张的不育病人和90名健康男性的精液标本,并抽提精子的总DNA,用Gap-PCR技术检测DNA 4977 bp片段的缺失情况。结果:在81.66%的患有精索静脉曲张的不育病人和4.44%的健康人对照中存在DNA 4977 bp片段的缺失。患有精索静脉曲张的不育病人中DNA缺失频率更高(OR=139.80,95%CI=40.08~487.30,P<0.01)。结论:精索静脉曲张可能会导致一些男性精子DNA缺失,并导致不育。且精子线粒体DNA 4977 bp片段缺失与精索静脉曲张所致不育症存在一定的相关性。

关键词：精索静脉曲张不育线粒体脱氧核糖核酸缺失

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北京地区孕晚期妇女B族链球菌氟喹诺酮类耐药机制研究

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微生物学免疫学进展 2020年第6期48卷 35-40页

作者：梁朋朋侯玉涛白静车辑唐晓磊首都医科大学附属北京地坛医院儿科北京100015 首都医科大学附属北京安贞医院输血科北京100029 皖南医学院第二附属医院基础实验室及血管性疾病研究中心安徽芜湖241000

目的调查北京地区孕晚期(late pregnancy)妇女B族链球菌(group B Streptococcus,GBS)定植菌对氟喹诺酮类抗生素的耐药机制,为GBS的防控提供依据。方法常规采集来自首都医科大学附属北京地坛医院产科门诊产检的孕晚期妇女肛直肠与阴道下... 详细信息

目的调查北京地区孕晚期(late pregnancy)妇女B族链球菌(group B Streptococcus,GBS)定植菌对氟喹诺酮类抗生素的耐药机制,为GBS的防控提供依据。方法常规采集来自首都医科大学附属北京地坛医院产科门诊产检的孕晚期妇女肛直肠与阴道下1/3分泌物进行GBS培养;氟喹诺酮类耐药以左氧氟沙星作为判定标准,调查本地区孕晚期妇女GBS对氟喹诺酮类耐药率;并研究氟喹诺酮耐药决定区(quinolone resistance-determining regions,QRDRs)gyrA与parC基因突变位点,探讨其与血清型的关系。结果共收集孕晚期妇女定植GBS菌株674株,经培养鉴定GBS阳性菌株66株,其中左氧氟沙星耐药21株(31.8%)。血清分型主要为III型,占57.1%(12/21);其次为Ib型,占42.9%(9/21)。QRDRs gyrA基因为Ser-81-Leu突变(100.0%,21/21)。parC基因主要为Ser-79-Phe或Tyr的单位点突变(47.6%,10/21);其次为Ile-218-Thr与Ile-219-Phe双位点突变(19.0%,4/21),且均为血清III型。结论北京地区孕晚期妇女GBS定植菌株对氟喹诺酮类抗生素耐药形势较为严峻,其耐药机制既有共同特征,亦呈现一定的地区分布特征。

关键词：孕晚期氟喹诺酮 B族链球菌耐药机制

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