检索结果-内蒙古大学图书馆

安徽中医药大学学报 2019年第1期38卷 58-62页

作者：程卉李庆林侯梅苏婧婧安徽中医药大学科研实验中心新安医学教育部重点实验室安徽合肥230038

目的研究新藤黄酸对卵巢癌细胞增殖的抑制作用及其可能的机制。方法采用MTT检测新藤黄酸对卵巢癌A2780细胞存活率的影响,采用fluo-3AM染色荧光显微镜观察新藤黄酸对A2780细胞钙离子水平的影响,采用Hoechst 33342染色荧光显微镜观察细胞... 详细信息

目的研究新藤黄酸对卵巢癌细胞增殖的抑制作用及其可能的机制。方法采用MTT检测新藤黄酸对卵巢癌A2780细胞存活率的影响,采用fluo-3AM染色荧光显微镜观察新藤黄酸对A2780细胞钙离子水平的影响,采用Hoechst 33342染色荧光显微镜观察细胞的凋亡率,采用PI染色流式细胞仪检测新藤黄酸对细胞周期的影响,采用AnnexinⅤ-FITC/PI染色流式细胞仪检测新藤黄酸对细胞凋亡率的影响,采用Western blot检测凋亡相关蛋白表达的影响。结果 MTT检测结果表明,新藤黄酸对卵巢癌细胞A2780的增殖具有抑制作用,且抑制作用具有明显的剂量依赖性;fluo-3AM染色荧光显微镜下观察,可见各浓度新藤黄酸均能升高A2780细胞内钙离子水平,且呈现浓度依赖关系;PI染色流式细胞仪检测结果表明,新藤黄酸能阻滞A2780细胞于G0/G1期;Hoechst 33342染色和AnnexinⅤ-FITC/PI染色流式细胞仪检测结果表明,随着新藤黄酸浓度的增加,A2780细胞凋亡率呈现增高的趋势;Western blot检测结果表明,新藤黄酸可以促进凋亡相关蛋白p53、细胞色素C以及Caspase-9表达水平升高。结论新藤黄酸具有抑制卵巢癌A2780细胞增殖和诱导肿瘤细胞发生线粒体凋亡的作用。

关键词：新藤黄酸卵巢癌细胞A2780 线粒体凋亡

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重楼皂苷Ⅱ诱导人胃癌MGC-803细胞凋亡的体外研究

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中南药学 2019年第5期17卷 647-651页

作者：侯梅陈贺骏涛苏婧婧李庆林安徽中医药大学科研实验中心新安医学教育部重点实验室合肥230038

目的初步探讨重楼皂苷Ⅱ抑制人胃癌MGC-803细胞增殖并诱导其凋亡的作用及机制。方法体外培养人胃癌MGC-803细胞,CCK-8法检测不同浓度的重楼皂苷Ⅱ作用于细胞后其存活率;DAPI染色观察细胞凋亡;AV/PI双染检测细胞凋亡率;比色法检测天冬氨... 详细信息

目的初步探讨重楼皂苷Ⅱ抑制人胃癌MGC-803细胞增殖并诱导其凋亡的作用及机制。方法体外培养人胃癌MGC-803细胞,CCK-8法检测不同浓度的重楼皂苷Ⅱ作用于细胞后其存活率;DAPI染色观察细胞凋亡;AV/PI双染检测细胞凋亡率;比色法检测天冬氨酸蛋白水解酶caspase-3的活性;Western blot法检测Cyt-c的蛋白表达水平。结果与正常对照组相比,重楼皂苷Ⅱ可降低MGC-803细胞的存活率,且呈剂量与时间依赖性;镜下可见细胞核破碎,具有明显凋亡特征,凋亡率随着浓度的增大而增加(P <0.01);细胞内caspase-3的活性增加(P <0.01),Cyt-c蛋白的表达量明显增加(P<0.01)。结论重楼皂苷Ⅱ可明显抑制人胃癌MGC-803细胞的增殖,并诱导细胞发生凋亡。

关键词：胃癌重楼皂苷Ⅱ 细胞凋亡

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人参灵芝胶囊缓解体力疲劳小鼠的试验

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安徽农业科学 2019年第5期47卷 176-177,198页

作者：苏婧婧李庆林安徽中医药大学科研实验中心新安医学教育部重点实验室安徽合肥230038

[目的]考察人参灵芝胶囊缓解实验性小鼠体力疲劳的作用。[方法]小鼠连续灌胃给予不同剂量(0.9、0.6、0.3 g/kg)的人参灵芝胶囊,阴性对照组给予等量蒸馏水。连续灌胃30 d后,测定小鼠负重游泳时间、运动后血清尿素含量、血乳酸含量、肝糖... 详细信息

[目的]考察人参灵芝胶囊缓解实验性小鼠体力疲劳的作用。[方法]小鼠连续灌胃给予不同剂量(0.9、0.6、0.3 g/kg)的人参灵芝胶囊,阴性对照组给予等量蒸馏水。连续灌胃30 d后,测定小鼠负重游泳时间、运动后血清尿素含量、血乳酸含量、肝糖原含量。[结果]与阴性对照组比较,高、中剂量组小鼠负重游泳时间显著延长,各给药组血清尿素含量明显降低,各给药组肝糖原含量明显升高,中剂量组小鼠游泳后20 min血乳酸值和血乳酸曲线下面积显著降低。[结论]人参灵芝胶囊具有缓解体力疲劳的作用。

关键词：人参灵芝胶囊缓解体力疲劳负重游泳时间血清尿素血乳酸肝糖原

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新藤黄酸对人脐静脉内皮细胞凋亡的影响

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安徽中医药大学学报 2019年第3期38卷 68-71页

作者：鲍金平陈贺骏涛侯梅程卉苏婧婧李庆林安徽中医药大学科研实验中心安徽合肥230038 省部共建新安医学教育部重点实验室安徽合肥230038

目的探讨新藤黄酸对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)增殖和凋亡的影响。方法用不同浓度的新藤黄酸培养细胞24、48 h后,采用MTT法观察新藤黄酸对细胞生长的抑制作用;倒置显微镜下观察HUVECs细胞形态变... 详细信息

目的探讨新藤黄酸对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)增殖和凋亡的影响。方法用不同浓度的新藤黄酸培养细胞24、48 h后,采用MTT法观察新藤黄酸对细胞生长的抑制作用;倒置显微镜下观察HUVECs细胞形态变化;通过DAPI染色后倒置荧光显微镜观察新藤黄酸对细胞形态学的影响;通过Annexin V-FITC/PI双染及流式细胞术检测新藤黄酸对HUVECs细胞凋亡率的影响;Western blot检测新藤黄酸对HUVECs中凋亡相关蛋白Caspase-3的表达变化。结果 MTT检测结果显示新藤黄酸能够明显抑制HUVECs的增殖,并呈时效及量效关系;荧光显微镜观察结果显示,新藤黄酸作用HUVECs后出现大量凋亡细胞;流式细胞术结果显示,与空白对照组相比,随着新藤黄酸浓度的增加,细胞凋亡率明显增加;Western blot检测结果表明Caspase-3蛋白表达水平显著增加。结论新藤黄酸对HUVECs有明显的抑制作用,其作用机制可能是通过诱导细胞凋亡实现的。

关键词：新藤黄酸人脐静脉内皮细胞细胞凋亡

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异叶天南星苯丙氨酸解氨酶基因的克隆与蛋白结构分析

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植物科学学报 2019年第2期37卷 221-229页

作者：施圆圆张声祥赵德蕊王晨凯马克龙吴家文安徽中医药大学研究生院合肥230012 安徽中医药大学科研实验中心新安医学教育部重点实验室合肥230038 安徽中医药大学中西医结合临床学院合肥230012 安徽省中医药科学院合肥230012 安徽道地中药材品质提升协同创新中心合肥230012

以异叶天南星(Arisaema heterophyllum Blume)为材料,采用逆转录PCR(RT-PCR)法扩增其苯丙氨酸解氨酶(Phenylalanine ammonia-lyase,PAL)基因Ah PAL,获得该基因的开放读码框(ORF),并通过系统的生物信息学软件分析Ah PAL的结构和理化性质。结果显示,Ah PAL的ORF全长为2184 bp,编码727个氨基酸;Ah PAL与郁金香(Tulipa fosteriana W. Irving) PAL的亲缘关系最近,序列相似性达88%。空间结构模型分析结果显示,Ah PAL为同型四聚体,每个单体由3个结构域组成,其中MIO结构域含有PAL酶家族的保守序列和Ala-Ser-Gly三肽活性中心,是Ah PAL酶活性的决定性结构域。利用荧光定量PCR方法检测3个Ah PAL Unigene在根、块茎和叶中的表达情况,发现它们在根中表达量均最高,而在叶和块茎中表达较低。

关键词：异叶天南星苯丙氨酸解氨酶基因克隆生物信息学分析

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异叶天南星凝集素基因的克隆及蛋白的结构性质分析

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生物学杂志 2019年第6期36卷 36-41页

作者：李晟赵德蕊张声祥施圆圆杨青山王晨凯单春苗吴家文安徽中医药大学药学院合肥230012 安徽中医药大学研究生院合肥230012 安徽中医药大学科研实验中心新安医学教育部重点实验室合肥230038 安徽道地中药材品质提升协同创新中心合肥230012 安徽省中医药科学院合肥230012

克隆了中药材异叶天南星(Arisaema heterophyllum Blume)叶中凝集素(lectin)基因(Ahltn)的开放阅读框(ORF),并对其编码蛋白AhLTN的性质和结构进行了分析。首先从植物异叶天南星的新鲜叶片中提取总RNA,通过逆转录获取cDNA,经PCR扩增Ahlt... 详细信息

克隆了中药材异叶天南星(Arisaema heterophyllum Blume)叶中凝集素(lectin)基因(Ahltn)的开放阅读框(ORF),并对其编码蛋白AhLTN的性质和结构进行了分析。首先从植物异叶天南星的新鲜叶片中提取总RNA,通过逆转录获取cDNA,经PCR扩增Ahltn后与pMD19-T载体连接构成重组质粒,然后转化到大肠杆菌感受态细胞中培养,经菌液PCR鉴定后再进行测序验证,确定目的基因被成功克隆,进一步运用各种生物信息学软件对AhLTN的理化性质、进化关系和空间结构进行分析。结果显示,克隆获得了Ahltn的ORF,此基因片段长度为561 bp,编码186个氨基酸的蛋白质,经生物信息学分析AhLTN属于稳定蛋白,AhLTN与铁皮石斛的凝集素亲缘关系最近,四级结构显示其为二聚体,且两个单体的C末端发生了交换,每个单体中含有11个β折叠,呈“三棱镜”型,3个面均有保守的甘露糖结合区域。为天南星植物凝集素基因和蛋白功能的进一步研究和开发利用奠定了基础。

关键词：异叶天南星凝集素基因克隆生物信息学分析

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独活药材香豆素类成分的高效液相色谱指纹图谱研究

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安徽中医药大学学报 2019年第1期38卷 87-92页

作者：王斌周安杨沫刘先华韩燕全安徽中医药大学科研实验中心安徽合肥230038 安徽中医药大学新安医学教育部重点实验室安徽合肥230038 安徽中医药大学第一附属医院安徽合肥230031

目的建立独活中香豆素类成分的高效液相色谱指纹图谱分析方法,为独活药材的质量控制提供依据。方法采用C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),以水-甲醇为流动相进行梯度洗脱,流速1.2mL/min,柱温25℃,检测波长330nm。结果建立了独活药材香... 详细信息

目的建立独活中香豆素类成分的高效液相色谱指纹图谱分析方法,为独活药材的质量控制提供依据。方法采用C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),以水-甲醇为流动相进行梯度洗脱,流速1.2mL/min,柱温25℃,检测波长330nm。结果建立了独活药材香豆素类成分的高效液相色谱特征指纹图,标定了15个共有色谱峰,采用相似度评价、聚类分析、主成分分析对所收集的15批样品进行指纹图谱模式识别研究,对6个共有峰借助对照品进行了指认,采用高效液相色谱-电喷雾离子源-质谱技术并结合文献报道对其余9个共有峰进行了初步归属。15批独活药材的相似度结果为0.797～0.979。运用聚类分析,15批独活药材可大致聚成5类。结论该法所建立的独活药材香豆素类成分指纹图谱特征性强,为该药材的质量控制提供了实验依据。

关键词：独活香豆素高效液相色谱指纹图谱主成分分析聚类分析

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槐糖脂通过线粒体途径诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡的机制

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山西医科大学学报 2019年第4期50卷 427-432页

作者：成利娟杨莉蒋磊侯梅马晓静安徽省第二人民医院药剂科合肥230041 安徽中医药大学科研实验中心新安医学教育部重点实验室合肥工业大学生物与医学工程学院

目的探讨槐糖脂抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖的作用,并阐明其诱导SGC-7901细胞线粒体凋亡的机制。方法不同浓度(40,80,160,320μg/ml)槐糖脂作用于人胃癌SGC-7901细胞,与未加槐糖脂处理的空白对照组进行比较,观察各浓度槐糖脂作用组中人... 详细信息

目的探讨槐糖脂抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖的作用,并阐明其诱导SGC-7901细胞线粒体凋亡的机制。方法不同浓度(40,80,160,320μg/ml)槐糖脂作用于人胃癌SGC-7901细胞,与未加槐糖脂处理的空白对照组进行比较,观察各浓度槐糖脂作用组中人胃癌SGC-7901细胞的变化。倒置显微镜观察槐糖脂作用后细胞活力变化,并采用CCK-8法检测各浓度槐糖脂作用后细胞的存活率; DAPI染色,荧光显微镜观察槐糖脂作用后细胞形态变化;罗丹明123(Rhodamine 123)染色,流式细胞术检测槐糖脂作用组及未加槐糖脂处理的空白对照组细胞内线粒体膜电位水平;采用Western blot检测各组Bcl-2、Bax、Cyt-C、Caspase 3及Caspase 9蛋白表达水平。结果与空白对照组比较,槐糖脂作用组人胃癌SGC-7901细胞活力下降,细胞存活率显著降低(P <0. 05),且降低程度与槐糖脂剂量成正相关,细胞形态呈现明显的凋亡样改变;与空白对照组比较,槐糖脂作用组人胃癌SGC-7901细胞线粒体膜电位显著降低(P <0. 05),Bax蛋白的表达量明显增加(P <0. 05),Bcl-2蛋白表达显著降低(P <0. 05),Cyt-C、Caspase 3及Caspase 9蛋白水平显著升高(P <0. 05)。结论槐糖脂能够抑制人胃癌SGC-7901细胞的增殖,其机制可能是通过线粒体凋亡途径诱导细胞发生凋亡。

关键词：胃癌槐糖脂线粒体途径细胞凋亡

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酸枣仁皂苷A对脂多糖诱导星形胶质细胞C6氧化损伤的保护作用

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安徽中医药大学学报 2018年第2期37卷 71-76页

作者：李冰洁张睿李庆林安徽中医药大学科研实验中心新安医学教育部重点实验室安徽合肥230038

目的采用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导星形胶质细胞C6的氧化应激模型,以研究酸枣仁皂苷A(Jujuboside A,JuA)的抗氧化活性。方法体外培养大鼠星形胶质细胞C6。采用MTT法检测各组细胞的存活率,采用Western blot法检测星形胶质细胞... 详细信息

目的采用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导星形胶质细胞C6的氧化应激模型,以研究酸枣仁皂苷A(Jujuboside A,JuA)的抗氧化活性。方法体外培养大鼠星形胶质细胞C6。采用MTT法检测各组细胞的存活率,采用Western blot法检测星形胶质细胞标记蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)的活化情况,采用Griess还原法测定细胞上清液中一氧化氮(nitric oxide,NO)水平,采用流式细胞术检测各组细胞中活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,采用ELISA测定各组细胞内丙二醛(malondialdehyde,MDA)和谷胱甘肽(L-glutathione,GSH)水平以及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性。结果 0.125~50μmol/L JuA对C6细胞存活率无明显影响(P>0.05);1μg/mL LPS可以明显升高C6细胞GFAP蛋白表达水平,显著升高细胞上清液中NO和细胞内ROS、MDA水平,降低细胞内GSH水平和SOD活性,差异均有统计学意义(P<0.05)。与LPS组比较,12.5、25、50μmol/L JuA可以明显抑制LPS诱导的GFAP表达,降低细胞上清液中NO水平,降低细胞内ROS、MDA水平,升高细胞内GSH水平和SOD活性,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 JuA对LPS诱导的星形胶质细胞氧化损伤具有一定的保护作用。

关键词：脂多糖酸枣仁皂苷A 氧化应激 C6细胞

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酸枣仁皂苷A对脂多糖诱导小胶质细胞活化的影响及神经保护作用

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中国临床药理学与治疗学 2018年第2期23卷 126-131页

作者：张睿李冰洁李庆林安徽中医药大学科研实验中心安徽中医药大学新安医学教育部重点实验室安徽合肥230038

目的:研究酸枣仁皂苷A(Ju A)对脂多糖(LPS)诱导BV-2小胶质细胞神经炎症发生的影响及神经炎症导致的神经元细胞损伤的保护作用。方法:以LPS(1μg/mL)刺激BV-2小胶质细胞24 h建立神经炎症模型,采用不同浓度的Ju A(2.5、5、10μmol/L)进行... 详细信息

目的:研究酸枣仁皂苷A(Ju A)对脂多糖(LPS)诱导BV-2小胶质细胞神经炎症发生的影响及神经炎症导致的神经元细胞损伤的保护作用。方法:以LPS(1μg/mL)刺激BV-2小胶质细胞24 h建立神经炎症模型,采用不同浓度的Ju A(2.5、5、10μmol/L)进行干预。MTT法检测Ju A单独及联合LPS对BV-2细胞存活率的影响;Griess法检测Ju A对激活的BV-2细胞NO释放的影响;ELISA法检测BV-2细胞上清液中TNF-α、IL-1β分泌水平;DCFH-DA探针法检测BV-2细胞内ROS水平;MTT法检测Ju A干预后的BV-2条件培养基对正常小鼠海马神经元细胞(HT-22)存活率的影响。结果:MTT结果显示,Ju A在浓度范围内对BV-2的存活率无明显影响。Griess和ELISA实验结果表明,Ju A可抑制激活的BV-2细胞NO、TNF-α、IL-1β释放水平,同时Ju A还可抑制细胞内ROS水平。此外,Ju A干预的BV-2条件培养基可抑制神经炎症对HT-22海马神经元细胞的损伤。结论:Ju A可在体外抑制LPS诱导的BV-2细胞的炎症发生并保护HT-22细胞因神经炎症受到的损伤。

关键词：酸枣仁皂苷A 小胶质细胞海马神经元细胞神经炎症神经保护

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