检索结果-内蒙古大学图书馆

中国组织工程研究 2015年第51期19卷 8234-8240页

作者：毕晓娟张传山李亮吕国栋林仁勇新疆医科大学第一附属医院/临床医学研究院新疆重大疾病医学重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地新疆包虫病基础医学重点实验室新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市830011 新疆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市830011

背景:肝星状细胞是肝内分泌细胞外基质的关键细胞类型,因此在肝纤维化研究中很重要。目的:实验改良了肝星状细胞原代培养方法,获得充足的细胞量,用转化生长因子β1刺激活化,研究致纤维化的相关因子表达情况。方法:氯胺酮麻醉小鼠后采用... 详细信息

背景:肝星状细胞是肝内分泌细胞外基质的关键细胞类型,因此在肝纤维化研究中很重要。目的:实验改良了肝星状细胞原代培养方法,获得充足的细胞量,用转化生长因子β1刺激活化,研究致纤维化的相关因子表达情况。方法:氯胺酮麻醉小鼠后采用门静脉穿刺原位灌注肝脏的方法分离肝脏,采用密度梯度离心获得肝星状细胞,利用形态学、免疫荧光染色等方法对原代肝星状细胞进行鉴定;将培养24 h肝星状细胞用质量浓度10μg/L转化生长因子β1刺激48 h,同时设PBS组进行对比。结果与结论:通过原位灌注肝脏并且酶消化的方法可以成功获得小鼠原代肝星状细胞,并且锥虫蓝染色活率为(97.2±0.8)%,免疫荧光染色纯度为(90.4±1.2)%,细胞计数总量约2.5×106/只。实时荧光定量聚合酶链式反应检测显示,与PBS组比较,转化生长因子β1刺激组的肝星状细胞平滑肌肌动蛋白α、Ⅰ型胶原蛋白、转化生长因子β受体1、转化生长因子β受体2 mR NA表达水平明显升高(P<0.05)。结果证实,实验采用的改良的培养方法可更高效高质量的获得原代肝星状细胞,转化生长因子β1刺激可导致肝星状细胞活化,分泌致纤维化因子。

关键词：组织工程肝细胞转化生长因子β1 组织构建肝星状细胞肝纤维化原代培养分离鉴定胶原蛋白平滑肌肌动蛋白α 国家自然科学基金

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细粒棘球蚴14-3-3与MKK2酵母双杂交载体的构建及自激活鉴定

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中国病原生物学杂志 2011年第12期6卷 894-897,F0002页

作者：范金亮邵英梅李静李朝旺张传山吕国栋李亮王俊华温浩林仁勇新疆医科大学第一附属医院新疆重大疾病医学重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地新疆包虫病基础医学重点实验室新疆乌鲁木齐830054

目的构建细粒棘球幼(Eg)14-3-3与MKK2酵母双杂交系统,并对诱饵质粒进行自激活活性及毒性检测。方法从Eg cDNA中扩增Eg14-3-3基因和EgMKK2编码序列,将其克隆入酵母双杂交载体pGADT7和pGBKT7中,经PCR、限制性酶切鉴定及序列测定正确后,PEG... 详细信息

目的构建细粒棘球幼(Eg)14-3-3与MKK2酵母双杂交系统,并对诱饵质粒进行自激活活性及毒性检测。方法从Eg cDNA中扩增Eg14-3-3基因和EgMKK2编码序列,将其克隆入酵母双杂交载体pGADT7和pGBKT7中,经PCR、限制性酶切鉴定及序列测定正确后,PEG/LiAc法转化酵母菌株,检测融合蛋白对酵母菌生长的影响和自激活活性。结果扩增Eg14-3-3和EgMKK2基因编码区全长分别为749bp和1 572bp。构建的pGBKT7-Eg14-3-3及pGADT7-EgMKK2重组质粒转化到酵母细胞Y2HGold中,检测表达蛋白对Y2HGold无毒性及自激活作用。结论 Eg14-3-3基因和EgMKK2编码序列表达的蛋白对酵母菌Y2HGold无毒性和自激活作用,为进一步运用酵母双杂交技术筛选与之相互作用的蛋白奠定了基础。

关键词： Eg14-3-3基因 EgMKK2基因酵母双杂交自激活

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Tim-3及其配体Galectin-9与病毒感染的关系

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基础医学与临床 2012年第9期32卷 1095-1098页

作者：赵慧王亮马秀敏丁剑冰新疆医科大学第一附属医院省部共建国家重点实验室培育基地新疆重大疾病医学重点实验室新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学第一附属医院检验科新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院新疆乌鲁木齐830011

T细胞免疫球蛋白黏蛋白3(Tim-3)基因是Tim家族成员,与其配体半乳凝素-9(Galectin-9)结合可显著抑制T细胞的活化和增殖,并调节细胞因子的表达和分泌。Tim-3/Galectin-9参与免疫反应的调节及抗病毒免疫反应,阻断此通路可促进CD8+T细胞应... 详细信息

T细胞免疫球蛋白黏蛋白3(Tim-3)基因是Tim家族成员,与其配体半乳凝素-9(Galectin-9)结合可显著抑制T细胞的活化和增殖,并调节细胞因子的表达和分泌。Tim-3/Galectin-9参与免疫反应的调节及抗病毒免疫反应,阻断此通路可促进CD8+T细胞应答和对病毒的控制。因此,Tim-3/Galectin-9通路可能与病毒感染慢性化有关。本文对Tim-3及其配体的生物学特性、功能及在病毒感染中的研究近况进行综述。

关键词： Tim-3 Galectin-9 病毒感染

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多房棘球绦虫原头蚴对体外培养宿主肝细胞MAPK信号通路影响的初步研究

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中国病原生物学杂志 2011年第8期6卷 574-577,608页

作者：张传山李朝旺范金亮李静吕国栋王俊华卢晓梅温浩林仁勇新疆医科大学第一附属医院省部共建新疆重大疾病医学国家重点实验室培育基地新疆包虫病基础医学重点实验室新疆乌鲁木齐830054

目的探讨多房棘球绦虫原头蚴对体外培养宿主肝细胞丝裂素活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinase,MAPK)信号通路的影响。方法采用宿主大鼠肝细胞BRL3A和人源肝癌细胞系HepG2,分别与多房棘球绦虫原头蚴体外无血清共培养。实验组... 详细信息

目的探讨多房棘球绦虫原头蚴对体外培养宿主肝细胞丝裂素活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinase,MAPK)信号通路的影响。方法采用宿主大鼠肝细胞BRL3A和人源肝癌细胞系HepG2,分别与多房棘球绦虫原头蚴体外无血清共培养。实验组(与多房棘球绦虫原头蚴共培养)每瓶细胞接种约3×103个原头蚴;处理组(U0126)每瓶细胞先用20μmol/L U0126处理3 h,再接种约3×103个原头蚴,继续共培养,分别在12、24、48、72、96和120 h收集细胞,同时收集对照组(无血清培养基)细胞。利用免疫印迹技术(Western blot)检测p-ERK1/2、p-p38和p-JNK的变化。结果在48 h,肝细胞BRL3A共培养组p-ERK1/2表达活性与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),在12、24和48 h,p-JNK和p-p38表达活性分别有微弱升高;在72和96 h肝细胞HepG2共培养组p-ERK1/2表达活性与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),p-JNK和p-p38表达活性无明显变化;U0126处理组p-ERK1/2活性受抑制。结论多房棘球绦虫原头蚴可能自身分泌细胞因子EmIns、EmBMP1/2、EmAct或egfd,通过与宿主表面受体结合激活宿主肝细胞MAPK信号通路。

关键词：多房棘球绦虫原头蚴肝细胞 MAPK

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肝囊型包虫病小鼠动物模型的优化

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疾病预防控制通报 2012年第5期27卷 1-4,7页

作者：叶建蔚吕国栋刘辉陈凯陈伟王云海新疆医科大学第一附属医院/新疆重大疾病医学重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地及新疆包虫病基础医学重点实验室乌鲁木齐830054

目的通过接种方式及小鼠品系的优化,建立细粒棘球蚴小鼠模型。方法 10周龄的昆明白小鼠和C57BL/6J小鼠各32只,分为4组,每组8只,分别给予人源细粒棘球蚴原头节悬液(2 000个/ml)0.1 ml直视下注射肝脏,腹腔接种人源细粒棘球蚴囊泡,腹腔注... 详细信息

目的通过接种方式及小鼠品系的优化,建立细粒棘球蚴小鼠模型。方法 10周龄的昆明白小鼠和C57BL/6J小鼠各32只,分为4组,每组8只,分别给予人源细粒棘球蚴原头节悬液(2 000个/ml)0.1 ml直视下注射肝脏,腹腔接种人源细粒棘球蚴囊泡,腹腔注射无菌PBS溶液,并同时采用注射肝脏和腹腔接种囊泡等4种方式感染各组小鼠,通过腹部观察和病理检查分析肝脏包囊的生长情况、直径及其数量。结果双重感染180 d后,C57BL/6J小鼠的肝脏感染率达到37.50%,而对照组昆明白小鼠未见腹腔包囊和肝脏病灶,两组之间差异具有统计学意义(t=6.67,P<0.05)。结论利用双重感染方式(原头节直视下注射肝脏和囊泡腹腔接种)感染C57BL/6J小鼠,可用于建立肝囊型包虫病动物模型,为研究肝囊型包虫病的致病机制奠定基础。

关键词：囊型包虫病 C57BL 6J小鼠双重感染模型

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泡球蚴感染中期小鼠肝脏中miR-100/125b/126/122的表达变化

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中国病原生物学杂志 2013年第5期8卷 417-422页

作者：叶建蔚苗娜刘辉吕国栋刘莲王云海新疆医科大学临床医学研究院新疆重大疾病省部共建国家重点实验室培育基地新疆乌鲁木齐830054 新疆医科大学第一附属医院新疆包虫病基础医学重点实验室新疆乌鲁木齐830054 乌鲁木齐市第一人民医院心胸外科新疆乌鲁木齐830011

目的观察小鼠泡球蚴感染中期(3月)肝内miR-100、miR-125b、miR-126和miR-122的表达并探讨其意义。方法肉眼直视下穿刺小鼠肝脏,注射0.1ml泡球蚴组织匀浆液,建立泡球蚴感染小鼠模型。3个月后处死小鼠,采集肝脏标本,提取肝脏总RNA,采用RT-... 详细信息

目的观察小鼠泡球蚴感染中期(3月)肝内miR-100、miR-125b、miR-126和miR-122的表达并探讨其意义。方法肉眼直视下穿刺小鼠肝脏,注射0.1ml泡球蚴组织匀浆液,建立泡球蚴感染小鼠模型。3个月后处死小鼠,采集肝脏标本,提取肝脏总RNA,采用RT-qPCR法检测miR-100、miR-125b、miR-126和miR-122的相对表达量,预测并初步分析差异表达miRNA的靶基因。结果实验组小鼠在感染3月肝内miR-122相对表达量为6.335±1.815,是对照组的2.41倍(P<0.05);miR-100、miR-125b和miR-126相对表达量实验组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。预测hfe是miR-122的直接靶基因,参与肝脏铁离子代谢的调节。结论小鼠泡球蚴感染中期肝脏miR-122表达上调,推测其通过下调hfe等基因的表达影响肝脏铁离子和脂类代谢,造成肝损伤。

关键词： microRNA 泡球蚴肝损伤 RT-qPCR

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细粒棘球绦虫新疆株胆汁酸钠协同转运蛋白基因的克隆及序列分析

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科技导报 2016年第2期34卷 215-220页

作者：杨梅梁小弟李军李亮张富春张文宝新疆大学生命科学与技术学院新疆生物资源基因工程重点实验室乌鲁木齐830046 新疆医科大学基础医学院乌鲁木齐830011 新疆医科大学第一附属医院新疆重大疾病医学重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地乌鲁木齐830011

从新疆株细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus,Eg)原头蚴中克隆胆汁酸钠协同转运蛋白(sodium-bile acid cotransporter,Eg SBACT)基因,进行序列测定和生物信息学分析。首先设计Eg SBACT基因特异性引物,用RT及PCR方法从新疆株细粒棘球... 详细信息

从新疆株细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus,Eg)原头蚴中克隆胆汁酸钠协同转运蛋白(sodium-bile acid cotransporter,Eg SBACT)基因,进行序列测定和生物信息学分析。首先设计Eg SBACT基因特异性引物,用RT及PCR方法从新疆株细粒棘球绦虫原头蚴提取总RNA,将其反转录成c DNA后扩增Eg SBACT基因并将其克隆至原核表达载体p ET30a中,测序鉴定序列并进行生物信息学分析。结果显示,RT-PCR扩增出一长度约650 bp的基因,测序显示其长度为654 bp,序列与Genbank公布的EUB59978.1完全一致,其编码217个氨基酸,预测其等电点为9.28。同源性分析发现,Eg SBACT蛋白序列与中华枝睾吸虫SBACT(Gen Bank:GAA57409.1)同源性最高,达到43%。进化树分析表明,细粒棘球绦虫的SBACT蛋白与吸虫纲的SBACT相聚集,在进化树上处于一枝,而与其他物种亲缘性较远。由此表明,本研究成功克隆出细粒棘球绦虫Eg SBACT基因。

关键词：细粒棘球绦虫 Eg SBACT 序列分析

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细粒棘球蚴抗原诱导树突状细胞表达吲哚胺2,3-双加氧酶的动态观察

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中国病原生物学杂志 2012年第9期7卷 688-692页

作者：单骄宇李海涛吐尔洪江·吐逊肖晋李亮林仁勇温浩新疆医科大学第一附属医院新疆重大疾病医学重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地新疆乌鲁木齐830054 新疆医科大学基础医学院人体寄生虫学教研室新疆医科大学第一附属医院肝胆包虫病外科

目的动态检测细粒棘球蚴不同抗原体外诱导树突状细胞表达吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)。方法在体外实验的条件下,获得C57BL/6小鼠骨髓来源的树突状细胞(BMDCs),分别应用15μg/ml重组抗原B(rAgB)、5mg/ml小鼠囊型包虫囊液(MHF)、1 000U/ml I... 详细信息

目的动态检测细粒棘球蚴不同抗原体外诱导树突状细胞表达吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)。方法在体外实验的条件下,获得C57BL/6小鼠骨髓来源的树突状细胞(BMDCs),分别应用15μg/ml重组抗原B(rAgB)、5mg/ml小鼠囊型包虫囊液(MHF)、1 000U/ml IFN-γ(阳性对照)刺激BMDCs,在6、18、24、48、60h采用实时荧光定量RT-PCR动态监测IDO、IL-10mRNA相对表达情况;在不同时间点收集各组DCs,应用Western blot检测IDO蛋白的表达。结果 FQ-RT-PCR显示,rAgB处理组IDO mRNA在24h时上调26.8倍,IL-10mRNA在48h时上调65.1倍,MHF处理组干预24h时IDO mRNA、IL-10mRNA表达分别上调12.6倍和3.9倍。Western blot显示IDO的表达可被rAgB、MHF上调,rAgB处理组在24h时出现IDO条带,MHF处理组于48h出现MHF条带。结论 rAgB、MHF均可上调DCs表面IDO的表达,并在一定时间内rAgB上调IDO表达的能力强于MHF。推测在CE的慢性感染过程中,IDO作为调节宿主反应的分子开关可能在Th2型反应中发挥着主导作用,棘球蚴致机体免疫逃避中可能参与抑制炎症反应。

关键词：细粒棘球蚴抗原树突状细胞吲哚胺2,3-双加氧酶动态观察

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泡球蚴感染小鼠Tregs与Th17细胞相关细胞因子的平衡变化

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中国病原生物学杂志 2012年第2期7卷 129-131,160页

作者：赵慧庞楠楠马海梅李玉娇张丽娜刘晓霞李艳华马秀敏丁剑冰新疆医科大学国家中医临床研究基地新疆乌鲁木齐830000 新疆医科大学第一附属医院省部共建国家重点实验室培育基地新疆重大疾病医学重点实验室新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院新疆乌鲁木齐830011

目的通过检测泡球蚴感染小鼠血清中Tregs相关细胞因子IL-10与Th17细胞相关细胞因子IL-17的浓度变化,探讨其在泡球蚴感染过程中的平衡变化关系。方法 60只雌性BALB/c小鼠随机分为实验组和对照组,实验组小鼠腹腔接种泡球蚴,对照组小鼠腹... 详细信息

目的通过检测泡球蚴感染小鼠血清中Tregs相关细胞因子IL-10与Th17细胞相关细胞因子IL-17的浓度变化,探讨其在泡球蚴感染过程中的平衡变化关系。方法 60只雌性BALB/c小鼠随机分为实验组和对照组,实验组小鼠腹腔接种泡球蚴,对照组小鼠腹腔接种等量生理盐水,分别在接种后2、8、30、90、180和360d实验组与对照组各取5只小鼠,采血,收集血清,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测IL-10和IL-17的表达水平。结果与对照组相比,小鼠血清IL-10水平在感染中晚期显著升高(P<0.01);IL-17水平在整个感染期均显著性升高(P<0.05),且晚期高于早期(P<0.01);IL-10与IL-17水平成正相关(r=0.655,P<0.01)。结论通过相关细胞因子的作用,Tregs与Th17细胞可能共同促进泡球蚴慢性感染的形成。

关键词：泡球蚴小鼠白介素-10 白介素-17

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胆汁酸及FXR在细胞增生和分化中的作用研究进展

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科技导报 2017年第4期35卷 79-83页

作者：杨梅张富春张文宝新疆大学生命科学与技术学院新疆生物资源基因工程重点实验室乌鲁木齐830046 新疆医科大学基础医学院乌鲁木齐830011 新疆医科大学第一附属医院新疆重大疾病医学重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地乌鲁木齐830011

胆汁酸具有多种重要的生理功能,不仅与脂类物质的消化吸收密切相关,还可作为激素样信号分子在胆汁酸、脂类与糖类物质代谢及能量代谢等方面发挥重要作用。近年研究发现,胆汁酸及其核受体法尼酯X受体(FXR)在细胞增生、分化、凋亡和肝再... 详细信息

胆汁酸具有多种重要的生理功能,不仅与脂类物质的消化吸收密切相关,还可作为激素样信号分子在胆汁酸、脂类与糖类物质代谢及能量代谢等方面发挥重要作用。近年研究发现,胆汁酸及其核受体法尼酯X受体(FXR)在细胞增生、分化、凋亡和肝再生的调控中也发挥重要作用。本文综述了胆汁酸及其核受体FXR在细胞增生、分化、凋亡和肝再生的作用及机制,以及在寄生虫-细粒棘球绦虫成虫发育分化中作用的研究进展。

关键词：胆汁酸法尼酯X受体细胞增生肝再生细胞分化

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