检索结果-内蒙古大学图书馆

细胞与分子免疫学杂志 2012年第5期28卷 554-556页

作者：李微张万江石河子大学医学院病理生理学教研室、新疆地方与民族高发病教育部重点实验室新疆石河子832002

巨噬细胞的铁代谢与结核分枝杆菌的生长繁殖有密切的关系。结核分枝杆菌感染宿主后,主要在宿主巨噬细胞内生长繁殖,巨噬细胞为其生长提供所需要的铁元素,而未被机体免疫系统清除的结核分枝杆菌必须依靠巨噬细胞提供铁元素才能维持其活... 详细信息

巨噬细胞的铁代谢与结核分枝杆菌的生长繁殖有密切的关系。结核分枝杆菌感染宿主后,主要在宿主巨噬细胞内生长繁殖,巨噬细胞为其生长提供所需要的铁元素,而未被机体免疫系统清除的结核分枝杆菌必须依靠巨噬细胞提供铁元素才能维持其活性和生存。巨噬细胞内转铁蛋白受体1(TfR1)不仅维持巨噬细胞内铁元素的动态平衡,影响胞内结核分枝杆菌生存,而且诱导巨噬细胞自身凋亡,最终杀伤结核分枝杆菌。近年来,有研究表明铁元素与结核分枝杆菌耐药相关。研究铁元素在结核病的发生、发展机制以及结核病耐药机制中的作用,对进一步明确结核病的发病机制,开创治疗结核病的新方法有重要意义。

关键词：铁代谢巨噬细胞结核分枝杆菌耐药

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程序性死亡分子1及其配体在急性感染性疾病中的作用

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细胞与分子免疫学杂志 2012年第6期28卷 663-665页

作者：庹清章张万江石河子大学医学院病理生理学教研室、新疆地方与民族高发病教育部重点实验室新疆石河子832002

程序性死亡分子1(PD-1)及其配体在慢性感染性疾病中抑制免疫力的作用已得到证实,但它在急性感染性疾病中的具体作用却不是十分明确。最近研究结果提示:PD-1途径在一些急性感染性疾病中能够抑制CD8+T细胞应答,并能通过失助的记忆CD8+T细... 详细信息

程序性死亡分子1(PD-1)及其配体在慢性感染性疾病中抑制免疫力的作用已得到证实,但它在急性感染性疾病中的具体作用却不是十分明确。最近研究结果提示:PD-1途径在一些急性感染性疾病中能够抑制CD8+T细胞应答,并能通过失助的记忆CD8+T细胞抑制应答。PD-1除了能限制T细胞和B细胞非依赖性适应性免疫反应之外,还能限制树突状细胞(DC)和巨噬细胞的功能,这是最近研究发现的PD-1在固有免疫中的一种新的作用。因此,PD-1在急性感染性疾病中能够影响免疫反应,但对这种影响作用发生机制的研究则刚刚起步,现就PD-1及其配体在急性感染性疾病中对效应记忆性T细胞应答的调节作用的研究进展进行综述。

关键词： PD-1 PD-1配体急性感染性疾病作用

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豚鼠耳蜗螺旋动脉平滑肌细胞的原代培养及鉴定

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西安交通大学学报（医学版） 2018年第6期39卷 917-921页

作者：肖靖杰张治平王洋司超张亮张伟李丽李新芝马克涛石河子大学医学院新疆地方与民族高发病教育部重点实验室新疆石河子832000 石河子大学医学院生理学教研室新疆石河子832000 石河子大学医学院第一附属医院耳鼻喉科新疆石河子832000 石河子大学医学院第一附属医院老干二科新疆石河子832000 石河子大学医学院病理生理学教研室新疆石河子832000

目的联合2种常用的细胞培养方法从豚鼠耳蜗螺旋动脉中提取平滑肌细胞,为相关实验研究提供材料。方法从豚鼠耳蜗中分离出螺旋动脉,应用1.25g/L的胰蛋白酶进行消化并将组织块贴壁,运用自然纯化法及根据不同细胞贴壁能力的差异性对细胞进... 详细信息

目的联合2种常用的细胞培养方法从豚鼠耳蜗螺旋动脉中提取平滑肌细胞,为相关实验研究提供材料。方法从豚鼠耳蜗中分离出螺旋动脉,应用1.25g/L的胰蛋白酶进行消化并将组织块贴壁,运用自然纯化法及根据不同细胞贴壁能力的差异性对细胞进行纯化,通过形态学观察及免疫荧光、免疫组化和Western blot对细胞进行鉴定。结果 85%的组织块存活,第4代平滑肌细胞纯度达95%。镜下可见细胞呈典型的"峰-谷"样生长,免疫荧光、免疫组化及Western blot结果显示平滑肌细胞特异性的肌动蛋白呈阳性表达。结论通过本研究方法,可以得到大量高纯度的豚鼠耳蜗螺旋动脉平滑肌细胞,有望为内耳循环系统紊乱导致的病理生理变化的体外研究及血管平滑肌药物评价提供一个理想的研究材料。

关键词：豚鼠耳蜗螺旋动脉细胞培养肌动蛋白

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新型结核病疫苗菌株(B/R菌株)对T细胞免疫记忆的建立及保护效应的研究

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中国人兽共患病学报 2020年第8期36卷 611-617页

作者：邵萌吴芳张杰董江涛吴江东柳小玲章乐赵海军张万江石河子大学医学院病理生理学教研室/新疆地方与民族高发病教育部重点实验室石河子832002 石河子大学医学院第一附属医院石河子832002

目的探讨研究新型结核病疫苗菌株(B/R菌株)对T细胞免疫记忆的建立及保护效应的影响。方法C57BL/6小鼠分别皮下接种PBS、BCG、H37Ra和B/R菌株,各组小鼠于免疫后不同时间点,利用ELISA方法检测血清中IL-2、IFN-γ的水平;用流式细胞技术检... 详细信息

目的探讨研究新型结核病疫苗菌株(B/R菌株)对T细胞免疫记忆的建立及保护效应的影响。方法C57BL/6小鼠分别皮下接种PBS、BCG、H37Ra和B/R菌株,各组小鼠于免疫后不同时间点,利用ELISA方法检测血清中IL-2、IFN-γ的水平;用流式细胞技术检测小鼠脾脏中央型记忆性淋巴细胞(TCM)及效应型记忆性淋巴细胞(TEM)的数量;检测各组小鼠脾脏和肺脏组织中的菌落数(CFU),以及根据肺脏病理损伤程度评价B/R菌株的保护效果。结果免疫小鼠8周,B/R菌株组小鼠血清中,产生了高于BCG组的IL-2(q=4.709,P<0.05)和IFN-γ(q=5.477,P<0.05),与H37Ra组无统计学差异。免疫小鼠12周,B/R菌株组小鼠血清中IL-2、IFN-γ水平与BCG组和H37Ra组均无统计学差异。免疫小鼠16周,B/R菌株组小鼠血清IFN-γ水平高于BCG组(q=4.243,P<0.05),与H37Ra组无统计学差异;B/R菌株组小鼠血清IL-2水平与BCG组和H37Ra组均无统计学差异。免疫小鼠8、12、16周,与PBS组相比较,除12周时B/R菌株组的CD8^+TCM水平有所降低外,B/R菌株组均可诱导产生较高水平的CD4^+TCM(F=5.178,P<0.05)、CD4^+TEM(F=72.04,P<0.05)以及CD8^+TCM(F=16.86,P<0.05)、CD8^+TEM(F=27.93,P<0.05)。随免疫时间延长,即16周时,与BCG组相比较,B/R菌株组可维持更高水平的CD4^+TEM(q=31.55,P<0.05)和CD8^+TEM(q=16.08,P<0.05),TCM无统计学差异。BCG、H37Ra和B/R菌株免疫小鼠后,各组小鼠脏器病理损伤程度及菌落数,无统计学差异。结论B/R菌株免疫小鼠后,可建立较高水平的T细胞免疫记忆,以TEM为主,其免疫记忆水平可维持近4月,并且与BCG免疫保护效果相当。

关键词：结核病疫苗免疫记忆记忆T细胞免疫保护效应

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结核分枝杆菌国际标准无毒株H37Ra菌株基因组DNA抗结核免疫效应的初步研究

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中国病理生理杂志 2008年第8期24卷 1534-1537页

作者：张万江吴芳王萍吴江东李蕾杜燕石河子大学医学院病理生理学教研室石河子大学新疆地方与民族高发病省部共建教育部重点实验室新疆石河子832002

目的:探讨小鼠皮内注射结核分枝杆菌国际标准无毒株H37Ra菌株基因组DNA后,小鼠腹腔巨噬细胞是否被激活以及激活后氮氧化物的产生、抗结核细胞因子的表达,比较研究结核分枝杆菌国际标准无毒株H37Ra菌株基因组DNA和卡介苗菌激活小鼠腹腔... 详细信息

目的:探讨小鼠皮内注射结核分枝杆菌国际标准无毒株H37Ra菌株基因组DNA后,小鼠腹腔巨噬细胞是否被激活以及激活后氮氧化物的产生、抗结核细胞因子的表达,比较研究结核分枝杆菌国际标准无毒株H37Ra菌株基因组DNA和卡介苗菌激活小鼠腹腔巨噬细胞的抗结核免疫应答过程及免疫效应。方法:用结核分枝杆菌国际标准无毒株H37Ra菌株基因组DNA、卡介苗菌和生理盐水分别皮内注射小鼠第30d、60d后,分别采用Griess法、化学法、ELISA法检测小鼠腹腔巨噬细胞产生的NO、H2O2以及IL-12、TNF-α的表达。结果:结核分枝杆菌国际标准无毒株H37Ra菌株基因组DNA皮内接种小鼠后能显著诱导小鼠腹腔巨噬细胞分泌表达IL-12和TNF-α,与卡介苗菌组相比较无明显差异;与生理盐水组比较差异显著(P<0.05)。结核分枝杆菌国际标准无毒株H37Ra菌株基因组DNA皮内接种小鼠后也能诱导小鼠腹腔巨噬细胞产生NO、H2O2,与卡介苗菌组相比较无明显差异,与未免疫组比较差异显著(P<0.05)。结论:结核分枝杆菌国际标准无毒株H37Ra菌株基因组DNA小鼠皮内接种后,能诱导小鼠腹腔巨噬细胞活化并产生较强的抗结核免疫效应,且该效应与卡介苗菌无明显差异。

关键词：分枝杆菌结核 H37Ra菌株基因组DNA 抗结核

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As_2O_3联合重组canstatin蛋白对体外肿瘤血管内皮细胞的影响

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基础医学与临床 2012年第12期32卷 1389-1394页

作者：王雪雯唐岚傅文达张建华史文荣新疆石河子大学医学院病理生理学教研室新疆地方与民族高发病教育部重点实验室石河子大学附属第一医院妇产科新疆石河子832002

目的探讨As2O3联合canstatin蛋白对肿瘤血管内皮细胞(Td-EC)增殖、迁移、血管形成的影响及其凋亡的机制。方法用肝癌HepG2细胞上清诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)成为Td-EC。As2O3联合canstatin干预Td-EC,通过细胞迁移,流式细胞术,观察血... 详细信息

目的探讨As2O3联合canstatin蛋白对肿瘤血管内皮细胞(Td-EC)增殖、迁移、血管形成的影响及其凋亡的机制。方法用肝癌HepG2细胞上清诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)成为Td-EC。As2O3联合canstatin干预Td-EC,通过细胞迁移,流式细胞术,观察血管形成。结果 As2O3、canstatin及联合影响Td-EC迁移细胞数分别为32.60±1.51、26.60±1.14、21.00±1.87,显著低于对照组50.60±2.30(P<0.01),并促进凋亡、抑制管腔形成,以联合应用更显著。结论 As2O3联合canstatin在体外可特异地抑制Td-EC增殖、迁移、血管形成及其凋亡。

关键词： As2O3 canstatin 凋亡迁移血管形成

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结核分枝杆菌MprA蛋白的生物信息学分析

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中国病原生物学杂志 2020年第10期15卷 1171-1176页

作者：韩玲王小芳张暑军王英姿郑志红张万江章乐王新敏石河子大学医学院病理生理学教研室新疆石河子832002 石河子大学医学院新疆地方与民族高发病教育部重点实验室石河子大学医学院第一附属医院泌尿外科

目的应用生物信息学软件预测结核分枝杆菌MprA(Rv0981)基因编码蛋白的结构和功能。方法从NCBI数据库中获得MprA的基因信息及其编码的氨基酸序列,通过Expasy提供的在线工具ProtParam和Protscale对蛋白的理化性质、亲疏水性质进行分析;利... 详细信息

目的应用生物信息学软件预测结核分枝杆菌MprA(Rv0981)基因编码蛋白的结构和功能。方法从NCBI数据库中获得MprA的基因信息及其编码的氨基酸序列,通过Expasy提供的在线工具ProtParam和Protscale对蛋白的理化性质、亲疏水性质进行分析;利用SignalIP4.0和TMpred分析该蛋白的信号肽和跨膜蛋白结构域;利用在线分析工具NetNGlyc1.0 Server和NetPhos3.1 Server预测蛋白质磷酸化位点和糖基化位点;采用在线软件SOPMA分析蛋白的二级结构,并用蛋白质分析系统EXPASYP三级结构模型组装软件SWISS MODEL建立蛋白的三级结构模型;利用ABCpred和SYFPEITHI HLA-A*02:01预测蛋白的B细胞抗原表位和T细胞抗原表位;使用STRING在线软件及NCBI中的BLAST工具对互作蛋白和同源性进行分析。结果MprA基因编码含228个氨基酸的MprA蛋白,其理论等电点为5.29,分子式为C1122H1838N332O340S9,原子总数3641,半衰期为30 h,蛋白不稳定指数为41.72%,亲水性平均系数为-0.235,定义MprA为不稳定性亲水性蛋白;该蛋白含有跨膜结构域但无信号肽;含有9个丝氨酸磷酸化预测位点、8个苏氨酸磷酸化预测位点和2个酪氨酸磷酸化位点;蛋白二级结构中α-螺旋占42.11%,β-转角占7.89%,β-折叠占18.42%,无规则卷曲占31.58%;MprA含有25个B细胞抗原表位和17个T细胞抗原表位,其相互作用蛋白为MprB、MtrB和SenX3等。结论MprA蛋白为亲水性蛋白,具有潜在的T、B细胞抗原表位,可作为研发结核病诊断和治疗的候选蛋白。

关键词：结核分枝杆菌 MprA 结构功能生物信息学

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连接子蛋白43(Cx43)抑制氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的大鼠胸主动脉平滑肌细胞自噬

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细胞与分子免疫学杂志 2022年第6期38卷 501-506页

作者：秦叙青张爱梅刘鲁倩何文君杨瑞单莉娅李新芝马克涛石河子大学医学院新疆地方与民族高发病教育部重点实验室新疆石河子832000 石河子大学医学院生理学教研室新疆石河子832000 石河子大学第一附属医院心内科新疆石河子832000 石河子大学病理生理学教研室新疆石河子832000

目的探讨连接子蛋白43(Cx43)在氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞(VSMC)自噬中的作用。方法采用α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)免疫荧光细胞化学染色鉴定原代VSMC,ox-LDL处理后,采用油红O染色鉴定泡沫细胞;Western blo... 详细信息

目的探讨连接子蛋白43(Cx43)在氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞(VSMC)自噬中的作用。方法采用α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)免疫荧光细胞化学染色鉴定原代VSMC,ox-LDL处理后,采用油红O染色鉴定泡沫细胞;Western blot法检测(0、40、80、160)μg/mL ox-LDL处理0、6、12、24 h,VSMC中微管相关蛋白1轻链3(LC3)蛋白的表达以及80μg/mLox-LDL干预24 h,Cx43蛋白的表达;将VSMC随机分为对照组、ox-LDL组和ox-LDL联合Cx43特异性阻断剂Gap26组,Western blot法检测各组细胞LC3、beclin 1的表达。结果分离的细胞α-SMA阳性率达95%以上,与对照组相比,ox-LDL处理的细胞油红O阳性细胞明显增加,ox-LDL呈浓度依赖及时间依赖地降低LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的比值及beclin 1蛋白表达,Cx43蛋白的表达明显升高;给予Gap26后,可上调LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的比值及beclin 1蛋白表达。结论Cx43抑制ox-LDL引起的自噬。

关键词：动脉粥样硬化连接子蛋白43(Cx43) 氧化低密度脂蛋白(ox-LDL) 自噬

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耳蜗螺旋动脉上连接蛋白43与老年性耳聋的关系研究

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中国全科医学 2019年第27期22卷 3339-3346页

作者：司超张治平范志茹张亮李丽司军强李新芝马克涛石河子大学医学院新疆地方与民族高发病教育部重点实验室新疆石河子市832000 石河子大学医学院生理学教研室新疆石河子市832000 石河子大学医学院第一附属医院耳鼻喉科新疆石河子市832000 石河子大学医学院病理生理学教研室新疆石河子市832000

背景老年性耳聋是指随着年龄的增长而缓慢出现听力阈值增加的疾病,耳蜗螺旋动脉(SMA)在维持耳蜗血供和听力方面发挥重要的作用。连接蛋白43(Cx43)在血管壁上广泛表达,对血管的舒缩功能有着重要的影响,但Cx43在SMA上的表达与老年性耳聋... 详细信息

背景老年性耳聋是指随着年龄的增长而缓慢出现听力阈值增加的疾病,耳蜗螺旋动脉(SMA)在维持耳蜗血供和听力方面发挥重要的作用。连接蛋白43(Cx43)在血管壁上广泛表达,对血管的舒缩功能有着重要的影响,但Cx43在SMA上的表达与老年性耳聋的关系尚不清楚。目的以D-半乳糖(D-gal)诱导的老年性耳聋豚鼠为研究对象,研究SMA上Cx43与老年性耳聋的关系。方法2018年5月,将无耳疾3月龄SPF级豚鼠36只随机分为Control组、NS组、D-gal组,各12只。D-gal组在正常饲养的基础上,颈背部皮下注射D-gal500mg·kg^-1·d^-1;NS组在正常饲养的基础上,颈背部皮下注射0.9%氯化钠溶液(体积等同D-gal组);对照组正常饲养,不做任何处理;共6周。取Control组豚鼠交配产下的3只新生豚鼠,处死分离SMA,贴壁法培养原代SMA血管平滑肌细胞(VSMCs),鉴定后取第3代SMAVSMCs制备细胞衰老模型:对照组为正常培养48h;衰老组为在正常培养基础上加入30g/LD-gal培养48h;AAP10组为在正常培养的基础上加入100nmol/LAAP10预处理,而后加入30g/LD-gal培养48h。采用Morris水迷宫测试实验检测Control组、NS组、D-gal组豚鼠测试第1、2、3、4、5天逃避潜伏期及第6天穿越平台的次数;比较Control组、NS组、D-gal组豚鼠听性脑干反应(ABR)阈值,肝组织、脑组织、血清超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)水平,SMA上Cx43mRNA及Cx43表达水平。比较对照组、衰老组、AAP10组VSMCs内SOD活性、MDA水平,VSMCs中Cx43表达水平。结果组别与时间在豚鼠逃避潜伏期中存在交互作用(F交互=6.99,P交互<0.05);组别与时间在豚鼠逃避潜伏期中主效应显著(F组间=53.43,F时间=38.15;P组间<0.05,P时间<0.05)。D-gal组豚鼠测试第3、4、5天逃避潜伏期长于Control组和NS组(P<0.05);D-gal组豚鼠测试第6天穿越平台次数少于Control组和NS组(P<0.05)。D-gal组豚鼠ABR阈值高于Control组和NS组,肝组织、脑组织、血清SOD活性低于Control组和NS组,肝组织、脑组织、血清MDA水平高于Control组和NS组(P<0.01)。衰老组VSMCs内SOD活性低于对照组和AAP10组,MDA水平高于对照组和AAP10组(P<0.01);AAP10组VSMCs内SOD活性低于对照组,MDA水平高于对照组(P<0.01)。D-gal组豚鼠SMA上Cx43mRNA及Cx43表达水平低于Control组和NS组(P<0.01)。衰老组VSMCs中Cx43表达水平低于对照组和AAP10组(P<0.05);AAP10组VSMCs中Cx43表达水平低于对照组(P<0.05)。结论 D-gal致衰老情况下豚鼠SMA上Cx43表达水平的变化可能与老年性耳聋有关,为临床后续的研究方向奠定了基础。

关键词：听觉丧失,传导性连接蛋白43 耳蜗螺旋动脉 D-半乳糖

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靶向沉默巨噬细胞中 Mcl-1基因 shRNA表达质粒的构建与鉴定

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西安交通大学学报（医学版） 2015年第4期36卷 558-564页

作者：王婵王新敏王飞雨张雨晴曹旭东吴江东吴芳张万江章乐石河子大学医学院病原生物学与免疫学教研室新疆石河子832002 石河子大学新疆地方与民族高发病教育部重点实验室新疆石河子832002 石河子大学医学院第一附属医院泌尿外科新疆石河子832002 石河子大学医学院病理生理学教研室新疆石河子832002

目的研究髓样细胞白血病-1(myeloid cell leukemia-1,Mcl-1)基因在小鼠巨噬细胞Raw264.7和人巨噬细胞THP-1中的表达情况,筛选出表达含量高的细胞株作为实验用细胞,根据筛选的结果构建靶向小鼠Mcl-1基因的短发夹RNA(shRNA)真核表达质粒... 详细信息

目的研究髓样细胞白血病-1(myeloid cell leukemia-1,Mcl-1)基因在小鼠巨噬细胞Raw264.7和人巨噬细胞THP-1中的表达情况,筛选出表达含量高的细胞株作为实验用细胞,根据筛选的结果构建靶向小鼠Mcl-1基因的短发夹RNA(shRNA)真核表达质粒进行转染,最后筛选出沉默Mcl-1基因效果最明显的shRNA表达质粒。方法利用半定量RT-PCR和蛋白质免疫印迹(Western blotting)分别检测两种巨噬细胞中Mcl-1mRNA和蛋白表达情况。采用小分子干扰RNA(siRNA)软件设计3个针对Mcl-1基因不同位点的shRNA片段,由公司构建携带此shRNA片段的真核表达质粒(Mcl-1shRNA1-3),然后通过脂质体将真核表达质粒载体转染到小鼠巨噬细胞株Raw264.7中,24、48h后通过倒置荧光显微镜观察转染效果,并分别采用实时定量PCR和Western blot检测Mcl-1mRNA和蛋白表达情况。结果小鼠巨噬细胞Raw264.7中Mcl-1的mRNA及蛋白质的表达显著高于人巨噬细胞,差异有统计学意义(P<0.05);构建的shRNA表达载体在24、48h均能降低Raw264.7细胞内mcl-1mRNA和蛋白水平,尤其在48h沉默效果最为明显;转染48h后与正常组、脂质体组和阴性对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05);与Mcl-1shRNA1和Mcl-1shRNA2相比,Mcl-1shRNA3对Mcl-1mRNA和蛋白的沉默作用最强。结论成功筛选出了实验所用细胞Raw264.7及对小鼠巨噬细胞Raw264.7内Mcl-1具有明显沉默效果的靶向Mcl-1shRNA3真核表达质粒。

关键词：髓细胞白血病-1基因 Raw264.7细胞 THP-1细胞结核分枝杆菌短发夹RNA

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