检索结果-内蒙古大学图书馆

中国兽药杂志 2008年第12期42卷 16-19页

作者：陈义锋赵亚荣赵建增金扩世金宁一福州大北农动物医学研究中心北京100097 军事医学科学院全军基因工程重点实验室长春130062

制备猪瘟荧光抗体并用于猪只活体扁桃体组织抹/涂片检测。将制备的猪瘟高免血清采用硫酸铵分级沉淀法纯化免疫球蛋白,反向透析法标记荧光素,过葡聚糖凝胶柱(Sephadex G-50)去除游离荧光素,通过扁桃体组织匀浆吸附去除异嗜性或交叉反应... 详细信息

制备猪瘟荧光抗体并用于猪只活体扁桃体组织抹/涂片检测。将制备的猪瘟高免血清采用硫酸铵分级沉淀法纯化免疫球蛋白,反向透析法标记荧光素,过葡聚糖凝胶柱(Sephadex G-50)去除游离荧光素,通过扁桃体组织匀浆吸附去除异嗜性或交叉反应抗体。以5%FCS做稀释液,以RT-PCR检测阳性样本的冰冻切片确定其最大稀释度为1/60,最佳工作浓度为1/30,阻抑试验证明荧光为特异荧光。用标记的荧光抗体检测活体扁桃体样本39份,检出阳性11份,与IDEXX猪瘟抗原检测试剂盒复核结果完全吻合。结果表明,本实验所制备的猪瘟荧光抗体具有很高的灵敏性和特异性,可用于猪瘟净化中扁桃体组织抹/涂片检测。

关键词：猪瘟荧光抗体制备应用评价

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猪细小病毒抗体IPMA检测方法的建立及应用

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中国兽医科学 2011年第4期41卷 387-391页

作者：刘杉杉赵亚荣张超范吕超超胡泉博崔尚金中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001 大北农动物医学研究中心北京100097

建立了一种检测猪细小病毒(PPV)血清抗体的免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA),对该方法的反应条件、特异性、敏感性和重复性进行了系统试验,并与HI和ELISA的检测结果进行了比较。结果显示,PPV种毒按照1∶100的剂量接种后第48小时固定效... 详细信息

建立了一种检测猪细小病毒(PPV)血清抗体的免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA),对该方法的反应条件、特异性、敏感性和重复性进行了系统试验,并与HI和ELISA的检测结果进行了比较。结果显示,PPV种毒按照1∶100的剂量接种后第48小时固定效果最佳,辣根过氧化物酶-葡萄球菌A蛋白标记物的最适稀释度为1∶1 000,待检血清最适稀释度为1∶100。该IPMA方法与PCV2、PRV、PRRSV和CSFV的参考血清无交叉反应;PPV阳性血清稀释至1∶1 600时仍能检出;批内和批间重复性试验表明,该方法具有良好的重复性。符合性试验结果表明,该IPMA方法与HI和ELISA的符合率分别为96.0%与98.0%。用建立的IPMA方法检测PPV灭活疫苗免疫猪,结果免疫后第2周开始阳转,5周后全部阳转。对现地送检的400份猪血清样本进行检测,结果平均检出阳性率为86.5%。该IPMA方法的建立使PPV的血清学快速检测成为可能,可以用此方法开展PPV的抗体流行病学普查。

关键词：猪细小病毒免疫过氧化物酶单层细胞试验抗体检测

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猪捷申病毒、猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒的多重RT-PCR检测方法的建立及应用

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中国预防兽医学报 2011年第9期33卷 704-708页

作者：刘杉杉赵亚荣胡峰吕超超胡泉博王贵华崔尚金中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001 大北农动物医学研究中心北京100097

为建立同时检测猪捷申病毒(PTV)、猪瘟病毒(CSFV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的多重RT-PCR(mRT-PCR)检测方法,本研究以PRRSV ORF6基因、CSFV Erns基因和PTV 5'-UTR基因为对象,建立检测3种病毒的mRT-PCR方法。特异性试验表明,... 详细信息

为建立同时检测猪捷申病毒(PTV)、猪瘟病毒(CSFV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的多重RT-PCR(mRT-PCR)检测方法,本研究以PRRSV ORF6基因、CSFV Erns基因和PTV 5'-UTR基因为对象,建立检测3种病毒的mRT-PCR方法。特异性试验表明,该方法可以特异扩增3种病毒的基因,对大肠杆菌、猪圆环病毒Ⅱ型、猪细小病毒、猪伪狂犬病毒和猪流感病毒呈阴性反应;敏感性试验表明,PRRSV、CSFV和PTV的最低核酸检出量分别为7.11×102拷贝、7.81×103拷贝和8.43×102拷贝,略低于单一RT-PCR敏感性;应用该方法对69份送检样品进行检测,其中PRRSV、CSFV和PTV单纯感染检出率分别为28.99%、27.54%和56.52%,PRRSV和CSFV混合感染检出率为4.35%,PRRSV和PTV的混合感染检出率为11.59%,CSFV和PTV的混合感染检出率为13.04%,3种病毒的混合感染检出率为8.70%,与单一RT-PCR检测结果符合率为98.6%。本研究建立的检测方法快速简便,可以用于疾病的初步筛选,对临床早期诊断和流行病学调查具有重要意义。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒猪瘟病毒猪捷申病毒 mRT-PCR

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猪博卡病毒1型/2型PCR检测方法的建立

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中国预防兽医学报 2016年第7期38卷 572-575页

作者：付朋飞李梦奇乔涵杨兴武张宇徐朋丽韩昊莹张鸿鑫陈红英河南农业大学郑州市猪重大疫病防控重点实验室河南郑州450002 北京大北农动物医学研究中心北京100195 华南农业大学兽医学院广东广州510642

猪博卡病毒(PBo V)是2009年新发现的一种DNA病毒,常于腹泻仔猪体内检测到该病毒。为建立该病毒的检测方法,本研究根据Gen Bank中登录的PBo V 1/2型的高度同源保守序列设计一对特异性引物,经PCR扩增条件优化,建立了PBo V 1/2型的PCR检测... 详细信息

猪博卡病毒(PBo V)是2009年新发现的一种DNA病毒,常于腹泻仔猪体内检测到该病毒。为建立该病毒的检测方法,本研究根据Gen Bank中登录的PBo V 1/2型的高度同源保守序列设计一对特异性引物,经PCR扩增条件优化,建立了PBo V 1/2型的PCR检测方法。特异性试验结果显示,该PCR方法仅从PBo V 1或2型的阳性病料样品中特异性的扩增出751 bp的目的片段,而对猪伪狂犬病毒、圆环病毒、大肠杆菌、沙门氏菌的核酸样品的扩增结果均为阴性。敏感性试验显示,该PCR方法对PBo V 1/2重组质粒标准品的最低检测量为34.8拷贝/μL。对来自河南中牟、开封、兰考、濮阳、洛阳等地猪场发生腹泻疫情的70份猪病料样品,采用该方法进行检测,其中10份样品呈PBo V 1/2型阳性,阳性率为14.29%。该PCR检测方法的建立为PBo V1/2型的诊断和监测提供技术支持。

关键词：猪博卡病毒 PCR检测方法腹泻

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猪瘟荧光抗体的制备及应用评价

猪瘟荧光抗体的制备及应用评价

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第三届猪病防控学术研讨会

作者：陈义锋赵亚荣赵建增金扩世金宁一福州大北农动物医学研究中心军事医学科学院11所全军基因工程实验室

制备猪瘟荧光抗体并用于猪只活体扁桃体组织抹/涂片检测。将制备的猪瘟高免血清采用硫酸铵分级沉淀法纯化免疫球蛋白,反向透析法标记荧光素,过葡聚糖凝胶柱(Sephadex G-50)去除游离荧光素,通过扁桃体组织匀浆吸附去除异嗜性或交叉反应抗体。以5%FCS做稀释液,以RT-PCR检测阳性样本的冰冻切片确定其最大稀释度为1/60,最佳工作浓度为1/30,阻抑试验证明荧光为特异荧光。用标记的荧光抗体检测活体扁桃体样本38份,检出阳性12份,经阻抑试验证明为特异性荧光。与猪三价(HCV、PPV、BVDV)荧光抗体附合率为100%。结果表明,本实验所制备的猪瘟荧光抗体具有很高的灵敏性和特异性,可用于猪瘟净化中扁桃体组织抹/涂片检测。

关键词：猪瘟荧光抗体制备应用评价

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规模化猪场常见疾病流行病学调查

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猪业科学 2008年第3期25卷 94-96页

作者：倪娇赵建增焦连国许秀梅周绪斌赵亚荣北京大北农集团动物医学研究中心北京100085 西班牙海博莱生物大药厂北京代表处北京100086

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)、伪狂犬病(PR)、猪瘟(CSF)和猪圆环病毒病(PCVD)是4种威胁我国养猪业的重大传染病,但到目前为止还缺乏完善的防治手段。为了掌握这4种疾病的流行特点,本研究采用ELISA、免疫荧光等方法对2006年1月至2007年4月... 详细信息

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)、伪狂犬病(PR)、猪瘟(CSF)和猪圆环病毒病(PCVD)是4种威胁我国养猪业的重大传染病,但到目前为止还缺乏完善的防治手段。为了掌握这4种疾病的流行特点,本研究采用ELISA、免疫荧光等方法对2006年1月至2007年4月期间8个省市向本中心送检的6918份病料及血清进行检测。此外,所有结果均用PCR/RT-PCR法进行验证,以保证结果的客观性和准确性。这4种病毒在所调查的养殖场均有很高的感染率。其中,PRRS、PR、CSF、PCVD的感染率分别43%、31%、7%和29%。在所检测的78个养猪场中,有53%的养猪场发生上述2种或多种病毒的合并感染。其中,CSF与PRRS、PR和PCVD双重感染的发生率分别为7.69%、7.69%和1.28%;PR与PRRS和PCVD双重感染发生率分别为19.23%和2.56%;PRRS和PCVD双重感染发生率为3.84%;PCVD-PRRS-PR、PCVD-CSF-PRRS及PR-PRRS-CSF三重混合感染率分别为5.13%、1.28%和2.56%;PR-PRRS-CSF-PCVD四重感染发生率为1.28%。无论是按季节还是按区域比较,PRRS的发病率最高,CSF的发病率最低。以上数据说明这4种疾病确实是当前养猪业丞待解决的问题,需要定期监测以便采取相应防治措施。

关键词： PRRS PR CSF PCVD 流行病学

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副结核分枝杆菌map0862基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

副结核分枝杆菌map0862基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

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中关村全球农业生物技术创新论坛

作者：牟巍蒋菲何宇丁家波彭小兵蒋玉文福州大北农动物医学研究中心，北京100097 中国农业大学动物医学院北京 100193 中国兽医药品监察所北京 100081

为观察重组蛋白MAP0862的免疫活性，揭示该蛋白在副结核病诊断防治中的作用，构建原核表达载体map0862-pET32a(+)。以副结核分枝杆菌P10基因组DNA为模板，经PCR方法扩增副结核分枝杆菌map0862基因片段，将其克隆到原核表达载体pET32a(+... 详细信息

为观察重组蛋白MAP0862的免疫活性，揭示该蛋白在副结核病诊断防治中的作用，构建原核表达载体map0862-pET32a(+)。以副结核分枝杆菌P10基因组DNA为模板，经PCR方法扩增副结核分枝杆菌map0862基因片段，将其克隆到原核表达载体pET32a(+)中。将重组子转化到大肠杆菌BL2l(DE3)，在***中诱导表达带组氨酸标签的map0862-pET32a(+)的融合蛋白。经IPTG诱导表达出约55KD融合蛋白，用副结核阳性血清进行Western blot检测。证明MAP0862重组蛋白具有良好的免疫原性。

关键词：副结核分枝杆菌抗原基因免疫原性原核表达

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猪繁殖与呼吸综合征病毒实验室检测技术研究进展

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中国畜牧兽医 2009年第5期36卷 138-141页

作者：仝利剑张社民高英杰赵建增慕泽鑫罗胜军温涛吉林大学畜牧兽医学院长春130062 山西省芮城县家畜家禽疫病防治站芮城044600 大北农动物医学研究中心北京100080 广东省农业科学院兽医研究所广州510640

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)的临床症状表现为母猪繁殖性能下降、不孕、流产等。感染猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)后病理及组织学变化往往不太典型,而且易与其它病原感染所引起的病理变化相混淆,给该病的诊断带来一定困难,因此,对于PRRS... 详细信息

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)的临床症状表现为母猪繁殖性能下降、不孕、流产等。感染猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)后病理及组织学变化往往不太典型,而且易与其它病原感染所引起的病理变化相混淆,给该病的诊断带来一定困难,因此,对于PRRSV的确诊有赖于实验室诊断,不同的诊断方法敏感性、特异性及成本方面存在差异,而现有的血清学方法无法区分疫苗抗体和野毒抗体。作者就PRRSV抗原或抗体的检测技术(如病毒分离、RT-PCR、免疫过氧化物酶技术、酶联免疫吸附试验等)的研究现状作一简单的概述。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒实验室检测技术

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我国市场上猪支原体肺炎疫苗现状及应用效果

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中国兽药杂志 2014年第12期48卷 61-65页

作者：车艳杰王勇鶼柳舒航王贵华北京大北农科技集团股份有限公司动物医学研究中心北京100195

根据我国产品注册情况,从疫苗的制备技术、免疫程序及免疫效果三个方面对国内报批、销售的猪支原体肺炎疫苗进行了比较研究,并简要分析了各疫苗产品的特点,以期为我国猪支原体肺炎疫苗的发展提供参考。

关键词：猪支原体肺炎疫苗比较

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低致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒、疫苗及其应用

低致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒、疫苗及其应用

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作者：张家龙张国庆刘淑清徐冉王贵华赵亚荣 100098 北京市海淀区杏石口路西杉创意园四区(益园文创基地C区)8号楼

本发明涉及一株猪繁殖与呼吸综合征病毒（Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome virus,PRRSV），疫苗及其应用。本发明从猪临床肺脏组织中用Marc-145细胞分离到一株PRRSV，该分离株能在Marc-145细胞上增殖并能致其产生典型的... 详细信息

标准号: CN105779396A

本发明涉及一株猪繁殖与呼吸综合征病毒（Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome virus,PRRSV），疫苗及其应用。本发明从猪临床肺脏组织中用Marc-145细胞分离到一株PRRSV，该分离株能在Marc-145细胞上增殖并能致其产生典型的细胞病变，用Marc-145测得分离株效价为10^7.0 TCID50/mL，于2014年10月22日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.9819；本发明新毒株人工接种断奶仔猪以后，仔猪仅有微弱体温反应，无明显临床症状，对生长情况也没有不良影响。本发明新毒株人工接种猪以后，能诱导猪产生良好的免疫反应，产生高水平的PRRSV抗体。

关键词：保藏人工接种分离株毒株猪繁殖与呼吸综合征病毒中国微生物菌种微生物中心断奶仔猪肺脏组织临床症状细胞病变仔猪抗体效价体温增殖诱导疫苗生长应用管理

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